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1.归纳语言规律,形成知识结构。
许多英语的语音和语法是有规律的,如字母和字母组合的读音,各种词性的用法和句子结构等都有一定的规律可循,教师应引导学生观察语言材料中的共同点,鼓励他们尝试自己总结一些语言规律,教师再对这些语言规律进行系统的归纳,帮助学生把这些语言知识内化为自己的知识。
2.以练为主,培养四会技能
在复习课中应压缩讲解与机械操练的时间,否则,学生会觉得教师在“炒冷饭”,学起来感到枯燥无味。在练习设计过程中,尽量考虑在一节课当中有听、说、读、写的练习。听的练习可以包括听句子并选出句子中含有的信息、听句子写出单词或句子,看图听三个句子并选出符合图意的句子,听小对话选出问题的最佳答案,听短文判断句子是否与短文意思一致等;读的练习有:看图阅读句子并判断句子是否与图的意思相符,阅读短文并判断句子是否与短文意思一致,选择正确答案,回答问题或完形填空;写的练习有:看图完成句子、补全对话、看图或根据实际情况回答问题、按要求写一段对话。
3.创设情境,突出功能用语。
复习时可以以功能话题为主线,辅以句型、语法的复习。在使用时不要把复习课上成纯句型和语法课,因为,语言只有在情境中才有意义,脱离了情境,它只是一堆加重学生记忆负担的符号,根本不能体现语言的功能。在创设情境时,要把有关的用语贯穿起来,培养学生听、说、读、写的技能。在模拟真实的情境中完成一些实际的任务,从而提高综合语言运用的能力。情境创设的手段主要有:图片实物的运用、氛围的营造、语言上的解释、文字的说明、角色的扮演等。
4.认真备课,精心设计教法。
不但要备学生,而且要备教材、备教法。根据教学内容和学生的实际情况,设计课的类型,拟定采用的教学方法,并对教学过程的程序及时间安排都做详细的记录,认真写好教案。每一课都做到“有备而来”,每堂课都在课前做好充分的准备,课后及时对该课做出总结。
5.增强上课技能,提高教学质量。
在课堂上特别注意调动学生的积极性,加强师生交流,使学生学得容易,学得轻松,觉得愉快,培养学生多动口动手动脑的能力。
6.认真批改作业,布置作业有针对性,有层次性。
对学生的作业批改及时,认真分析并记录作业情况,将他们在作业过程中出现的问题做出分类总结,进行透彻的讲评,并针对有关情况及时改进教学方法,做到有的放矢。
7.做好课后辅导工作,注意分层教学。
课后,为不同层次的学生进行相应的辅导,以满足不同层次的学生的需求,同时加大对学困生的辅导力度。对学困生的辅导,并不限于知识性的辅导,更重要的是思想的辅导,要提高学困生的成绩,首先要解开他们的心结,让他们意识到学习的重要性和必要性,使之对学习产生兴趣。
8.注重语篇,发展运用能力。
连贯理解和表达是语言运用能力的一个很重要的指标,这主要是通过对语篇的听、读(理解)和说、写(表达)实现的。所以,在设计练习时,可以多设计些让学生连贯运用英语的任务,如听一段对话或短文,获得相关信息;短文或对话的阅读理解、连贯的口头对话或描述、据某一主题或图片写一段话等。
9.形象生动,提高学习兴趣。
不少教师认为,六年级的学生的学习能力及毅力都比较强,再加上要复习的内容多时间紧,所以就不用考虑教学的趣味性。假如是这样,学生很容易就会对英语学习失去兴趣,感到疲倦,必然会影响复习的效果。所以,如何调动学生的英语学习动机及提高英语学习的兴趣是我们不容忽视的一个问题。在课堂上,教师要适时地安排一些寓语言练习于其中的游戏、小诗、歌曲、小话剧等学生感兴趣的活动。
10.文化渗透,拓宽学生视野。
让复习课吸引学生的一个很重要的因素是:让他们学到一些新的知识,觉得学有所得。在语言知识方面,不可能再增加很多内容,否则会加大难度,加大学生的负担,所以,我们可以考虑通过文化知识的渗透拓宽学生的视野。学生往往会对不同地域的文化喜闻乐道,而且这对他们来说,也没有多大的学习压力,故此,能较好地激发其学习的兴趣。
11.利用周考,随时洞察学情。
学校每两个星期进行一次六年级的英语周考。出卷由专人负责,事先了解六年级目前的教学内容,有针对性地出题。有四、五年级单词的专项复习,选择题的专项复习,等等。考后,将平均分、及格率、优秀率等进行全年级排名,并与前次考试比较,及时发现每个学生的进步或退步,并根据反馈情况,调整教学内容。
12.词不离句,句不离词,单词和句子的复习同步进行。
关键词:小学英语;复习方法;复习计划
小学毕业班英语复习是对学生在小学阶段所学英语知识的总结、归纳、整理和提升,它既能帮助学生再次夯实小学阶段所学英语知识的基础,又能起到过渡的作用,帮助学生尽快地适应初中的学习。由此可见,小学毕业班英语复习是学生在小学阶段至关重要的一个环节。
根据当前外语教学相关理论,复习课的目标是:(1)语言知识:总结归纳阶段内所学语音、词汇、语法、话题等相关内容。(2)语言技能:在掌握语言知识的基础上,进一步发展听、说、读、写等方面的能力。(3)情感态度:培养学生学习英语的兴趣和自信心。积极参与课堂活动。(4)文化意识:了解中西方文化的不同。
要想达到复习课的目标,应做到以下几点:
第一,制定好复习计划。要想制定出高效的复习计划就必须考虑两个因素,首先要了解自己的学生。教师要分析所教班级的学生实际情况,比如他们分成了几个层次,每个层次的学生有什么特点,他们的薄弱环节是什么等。其次教师还应了解教材。教师不仅要对教材里所有的知识点了如指掌,更要了解它们之间的联系,形成知识系统。只有做到上述两点,教师才能在拖肮程中做到因材施教,有的放矢,不会遗漏相关知识点。
第二,有了符合实际情况的复习计划,还应有好的复习方法,这是复习阶段的关键因素。1.总原则:由浅入深,由易到难,循序渐进。在复习的过程中,首先要给学生提供大量的感性材料,比如音频、视频、创设的情景等,使学生在听、说、读、写中练习语音、词汇及句型等。只有这样,学生的理解及记忆才能深刻,才能由感性认识逐步过渡到理性认识。2.分阶段,分类别复习。复习课与新授课最大的不同是复习课的内容都是“旧”的,这就需要教师在复习之前将知识进行分类、总结、归纳等,做到有的放矢,目标明确。(1)记忆单词。单词是学生学习英语的基础,我们应从不同的角度帮助学生记忆单词。A.加强单词的听写 B.分类记忆单词。比如,我们可以按照词性来记忆单词,也可以将所学单词分类,例如关于天气、颜色、文具等。(2)全面回顾课本内容。冀教版小学英语三年级起,共八册,我们可以根据目录来查看每单元及每课的重点内容,做到对课本内容了如指掌。(3)主题复习。在记忆单词及全面复习课本的基础上,教师还要带领学生进行主题复习,建立知识之间的内在联系。这就需要教师对教材进行梳理,找出相关知识点进行总结归纳。比如,教师可以将关于天气的知识点进行一个主题复习,如关于天气的词汇、句型等。除此之外,教师还可以让学生练一练关于天气主题的写作。(4)句型复习。小学阶段所学句型相对比较简单,大致有一般疑问句、特殊疑问句、陈述句、祈使句等。教师可以分门别类地带领学生进行复习。复习每一种句型时,教师都应首先给学生举大量的例子,让学生根据例子对概念进行归纳。比如,特殊疑问句,掌握特殊疑问句的关键是掌握特殊疑问词,How old ...? 你有多大?How?怎么样How many ... ?多少?How much ... ?多少钱?How long / big / heavy / tall ... ?有多长/大/重/高?... ?Which 表示哪一个,Whose表示谁的,Where表示地点,When表示时间,Who 表示谁,Why表示原因。(4)精讲多练。在前三轮复习的基础上,教师应该给学生找有代表性的题来进行相应的练习,教会学生在实际中运用知识。教师所选题目应有典型性,要紧扣课本,力求有较高的知识覆盖面,要经常变换题型,选用一些综合性较强,有利于提高运用语言能力的题型,宜精不宜多,不要搞题海战术。在一节课的复习中,应涉及听、说、读、写等方面的能力。
另外,教师在复习过程中,除了关注知识本身外,还应注意学生的情绪变化,应多给予学生鼓励,耐心疏导,营造宽松的复习氛围。复习阶段,学生压力较大,内容多,所复习内容也是之前学过的,相对比较枯燥,学生此时情绪波动比较大,易产生厌学情绪,此时教师应尊重、理解学生,耐心了解学生复习中产生的问题,多给予他们鼓励和关爱,帮助他们树立信心,激发学习的动力。
总之,复习是学习的延伸和升华。作为教师,我们应当充当学生复习的指路人。我们要在复习的过程中引导学生灵活地运用所学的知识,在运用原有知识的过程中掌握技巧,真正把知识内化成能力,以达到复习的理想效果。
参考文献:
关键词:复习方法;实际出发;循序渐进
中图分类号:G632 文献标识码:B 文章编号:1002-7661(2013)36-250-01
一提起小学英语复习课,人们会下意识地想到教师上课滔滔不绝,讲得口干舌燥,学生则根据教师的要求,背记单词,词语,背诵对话和课文,强记一些语法规则。这样的复习课,由于内容无新意,学生对重复机械记忆感到索然无趣,参与意识不强,下课后又不得不重复听写和做练习。这种做法不但会使学生感到疲惫乏味,失去兴趣,厌烦学习,甚至放弃这门功课。而且老师不辞辛苦的出题,判题,把自己投入到题海里。也使得老师讲得百无趣味,疲惫不堪,效果却还是不尽人意。于是就抱怨学生不够投入,不够聪明。课堂气氛也沉闷,课堂效益低下。
因此,我们要转变传统的教育观念,这就要求教师充分认识到,在复习课上,我们应把充分的时间和空间留给学生,培养学生归纳、整理、分析的能力,形成一定的技能、技巧,最终提高学生在实践中运用语言的能力,进一步培养学生学习英语的兴趣。可以从几个方面来进行总复习:
一、首先要把握教材,系统地了解教材,明确各大知识和话题板块内容及要求,区分出重点和非重点,制定详细的复习计划,做到心中有数
先根据要复习的内容和复习课时制订出切实可行的复习计划,详细地写出复习课教案,并注意复习内容的系统性,把已学的知识系统进行归类。例如,所学课文中题材相近或相同的放在一起进行整体复习;语音音标在教学过程是分散在各单元中的,我在复习时就将它们聚零为整,把它们整理出来,作总回顾。最忌漫无边际,想到哪讲到哪。要精讲多练,让学生通过听讲理解知识,通过练习掌握知识。根据各知识点的前后联系进行整体归纳、小结,帮助学生构建紧密联系的“知识串”。例如,我们复习形容词比较级的时候可以连串地回顾规则变化和不规则变化(变和不变),复习几种动词时态时放在一起复习比较,表示相近意义的结构放在一起进行识别。通过这种复习方法可以复习许多相似的知识,让学生从中学到知识。让学生通过听讲进一步加强理性认识,通过练习在实践中掌握。
二、要了解我们的学生,因材施教
根据学生实际情况,针对他们在学习上的薄弱环节制定切实可行的复习计划,合理安排复习时间,然后依照计划精心设计好每一节复习课,进行有效的复习。了解一个班的学生的英语基础,对于英语不太好的学生,可采用对他们的作业放宽,一堂课的重点也给他们降低难度。把一般复习和重点复习结合起来。通过一般复习重复已学的内容,帮助学生记忆。而重点复习则针对学生容易混淆或感到困难的项目进行重点讲解并着重进行复习性练习,如不规则单词单复形式的变化、比较级的变化、动词变成人的职业单词的变化等。一般现在时与现在进行时、一般过去时的区别等等,都是学生比较头疼的问题,就应当着重进行讲解、比较和练习。例如:我连续两年担任六年级的英语老师,每年英语毕业考都在改革,变化考试内容,因此,我每年的复习计划都是不一样的,但我会把每年积攒下来的知识要点进行总结和归纳,做到心中有数,我关注每年的考试大纲,这样就可以有序地进行总复习了。
三、恰当转变复习形式,采用任务型教学模式激活英语复习课堂
关键词:中小学;英语教学;衔接;策略
中小学英语教学衔接问题,一直是困扰中小学英语教学的一大难题。为了搞好中小学英语教学衔接,使初中新生顺利完成学习过渡,为以后的英语学习奠定良好的基础,笔者在对初一新生学习英语情况调查基础上,提出如下几条中小学英语衔接策略。
一、师生情感的衔接策略
一是教师要认真上好一堂导言课,让学生尽量多地了解教师,排除师生情感沟通道路上的障碍。二是教师要特别重视学生的年龄特点和心理需要,在教学活动中有意识地和学生真诚平等交流,主动地走进学生的内心世界,在情感上关爱学生,与他们建立起融洽的师生关系,使学生发自内心地喜欢自己,从而喜欢教师所任教的学科。三是教师要通过高质量的英语教学,树立良好的教师形象,获得学生的敬佩和信赖,做到言传身教。
二、英语学习兴趣的衔接策略
爱恩斯坦说过:“兴趣是最好的老师”。在小学英语教学中注意培养儿童学习英语的兴趣,根据年龄特点给予学生恰如其分的积极评价,能让孩子们感受到教师对他们的重视,并体验到成功的喜悦,从而产生积极有效的学习效果。在初中阶段,特别是初一年级的学生,巩固并进一步激发他们学习英语的兴趣是提高教学质量的关键。这就需要英语教师在初中英语教学过程中认真把握好教材内容的趣味性,利用各种直观教具营造生动的语言交流情景,使学生在真实的情景中学习英语,享受英语学习的乐趣。
三、英语学习习惯的衔接策略
在我的教育实习过程中我发现,初一新生普遍缺乏学习主动性,也没有形成良好的学习习惯。针对这种情况,教师在教学过程中要从培养学生良好英语学习习惯方面寻找衔接点,要求学生养成自觉学习的习惯。小学阶段就要培养学生初步养成良好的听、说、读、写习惯。在初中阶段,部分好的小学英语学习的习惯应予以保留,例如,积极举手发言的习惯;学唱英语歌的习惯;做英语游戏的习惯等。英语教师还应对学生进行科学的、适当的引导,有意识地培养学生课前预习,找出问题;课上认真听课、做笔记,积极思考,积极提问的习惯;课后整理笔记,完成作业,及时复习,巩固提高的习惯等。
四、教学方法的衔接策略
在衔接教学中,有效的教学方法能让学生感觉学习英语是成功并快乐着的。一方面,小学六年级教师要在教学方法上逐步向初一阶段靠近,如适当地在课堂教学前几分钟安排“值日生汇报”或“Free talk”这样的话题,在每节课上都可适当安排一些听写、布置适当的抄写作业,以加强听写和书面表达能力,解决初一阶段学生英语单词拼写和书面表达能力不足的问题。另一方面,初一教师要充分了解新生的心理特点及其认知规律,保留小学英语课的活泼气氛,尽量挖掘教材的趣味性和交际性,利用游戏、歌曲等形式进行教学,寓教于趣;充分利用直观形象教学手段,创设真实情景,学以致用;再慢慢加快课堂节奏,完成小学英语到初中英语教学的平稳过渡。
五、英语学习技能的衔接策略
“授人以鱼,不如授人以渔”,当代社会越来越青睐具有自主学习能力和创新精神的人才。在实际操作中,教师应该改变小学被动的技能培养模式,把学习的主动权交给学生:首先,要提倡教学民主,提倡师生平等。其次,课堂上应积极诱导学生提出疑问,鼓励学生思考问题,最大限度地挖掘潜能。再者,语言教学是一门实践性较强的学科,英语教师应根据学生的实际学习情况,在进一步帮助他们提高读写能力的同时强化他们的听说能力。学生只有不断地实践,才能学会应用所学的语言,也只有通过不断的实践,才能强化学生主动求知的意识。
六、教学内容的衔接策略
中小学英语教学衔接的重点在小学高段(五、六年级)和初中一年级。这两个学段的中小学英语教师要融会贯通,熟悉彼此的教材和课程标准,找准衔接点,包括词汇、语法项目和语言功能等,达到新旧知识的自然过渡。初中教师不再从字母、音标开始教学,而是经过整合两个阶段的内容,有效地开展教学活动,如:制定初一新课前的复习计划,在开学第一周系统复习和检测小学知识点,对学生在口语、听力等方面的发展情况做全面的了解和掌握。前一阶段的学习要为后一阶段打基础,后一阶段的学习是对前一阶段的深化与提高,学生学习英语的积极性得到了很好的保护,同时也避免造成小学阶段英语学习的浪费。
七、教学评价的衔接策略
小学英语教学实践中发现,词汇教学的效果不尽如人意,由此给学生造成了英语学习的极大障碍,甚至有许多学生因词汇不过关而丧失学习英语的兴趣和信心。小学阶段是学生接触英语的第一步,如果此时教师不能及时调整教学策略,将会给学生的后期学习造成极大的负面影响。
如何提高词汇教学的成效,让学生学得快、记得牢、用得好呢?对于小学英语教学来说,课堂是教学的主阵地,教师应努力在课堂上实现教学效率的最大化。为此,教师要合理巧妙地运用教学策略,优化词汇的导入环节;优化感知、体验、实践、参与和合作等方式的词汇学习过程;优化词汇的巩固和反馈环节;力求教法灵活、避免教师简单地教,学生机械地记;不断激发其学习兴趣,使其获得学习的主动性。
一、词汇教学的导入策略
小学英语词汇教学要特别重视学生的第一次感知,充分发挥第一次感知在识记词汇过程中的重要作用。好的词汇呈现方式可以有效地吸引学生的注意力,缩短教学时间,强化教学效果,从而收到事半功倍的效果。
1.恰当地运用直观教学法
运用直观教学法不能简单地理解为使用图片和实物。“直观教学是采用如图片、实物、玩具和幻灯片等一系列辅助教具以及手势、动作和表情开展新词教学的手段”。比如,教学表示食物的名词时,教师可以使用图片或实物,甚至可以让学生品尝这些食物。教授动词时,教师可以边说,边配上动作,如run, jump, swim, play basketball等。教学形容词时,教师可以通过夸张的动作或表情来呈现单词的意义,并要求学生在学说单词时模仿教师的动作和表情。例如,在教学形容词hot 和cold时,教师可以做擦汗或扇扇子等动作让学生猜测hot的意义,用表示自己冷得打哆嗦的夸张动作让学生猜测cold的意义,教师可以让学生边练习说单词边做动作来表达单词的意义。此外,教师还可以鼓励学生在读单词时加上一些感彩。小学生以形象思维为主,教师夸张的动作和表情能吸引他们的注意力,激发他们学习英语单词的兴趣,提高其词汇学习的效果。
2.创造性地运用情景教学法
对任何语言信息,接受“言传”都不如在其语境中能够“意会”来的便捷、准确。小学生记忆力强,善于模仿和表演,容易接受直观、具体和形象的事物,而对于抽象的知识则较难理解。因此,教师应利用小学生的这些特点,在教学中创设各种情境……表演场景、音乐场景、图片场景、绘画场景和实地场景等,让学生在一定的语言情境中感知、思考和表演,从而激发学生的学习积极性,使教学更有成效。例如,在教学teacher、doctor、policeman、driver等表示职业的词汇时,笔者课前找了几位学习成绩好的学生,让他们根据这些词汇表演一个小品;而其他学生在观看小品表演时不知不觉地接触并学习了这些表示职业的词汇。
二、词汇教学的过程策略
1.词汇认读策略
认读单词是课堂上进行词汇教学的必要环节。教师可以通过改变朗读时的升降调和高低音来提高小学生认读单词的热情;或者让学生做开小火车游戏(Little Train)认读单词, 教师可以通过手势语来确定认读顺序(从左到右或从前到后)。教师也可以让学生利用单词卡片,采用小组合作或者自己确定伙伴开展认读单词的活动,以进一步巩固认读效果。教师应尽量为学生提供自主学习和相互交流的机会以及自我发展的空间。
教学实践证明,如果认读单词的教学形式富于变化,不仅能消除学生认读单词的枯燥感,还能提高学生认读单词的效率。
2.词汇识记策略
⑴活动识记法
兴趣是人对事物积极而持久的认识倾向,可增强记忆。儿童生性好动,如果让他们死记硬背单词,不仅会挫伤学生的积极性,而且收效甚微。教师应根据小学生的生理和心理特征,积极为他们创设形式多样、生动活泼的活动,让他们在乐中学,学中乐。将游戏引入小学英语课堂教学,既能激发和保持学生学习英语的兴趣,又能提高语言教学的效率。此外,深爱学生喜爱的教学活动还有歌曲、谚语、谜语、绕口令和诗歌等。
⑵分类识记法
分类、选择和建立信息之间的相互联系,是大脑记忆活动的主要特征。在小学英语词汇教学中,教师应努力尝试语音渗透,将音标与单词的拼读很好地结合起来,为学生打下良好的语音基础。以旧引新、音形义结合是有效的学习方法。经过一段时间的训练后,学生对词形相同的单词一般能触类旁通,并能脱口而出。当教师在黑板上写出一个新单词时,学生也能够大胆试读。再如,步步为营,对于多音节单词,利用音节记忆、背诵或听写单词可以分步进行。在教学单词hamburger时,教师可将其分解为ham+bur+ger, 然后写出nurse和purse, 让学生回忆字母组合ur的发音,最后板书bur-hambur-hamburger。
⑶联系识记法
教师不仅要研究教学策略,也要研究学生的学习策略,从学生发展的角度出发,引导学生学会学习,在教学词汇的同时渗透联系识记的好方法。例如,通过构词法学习单词,在教学worker,teacher时,教师可以引导学生归纳在work和teach的词末加-er,表示从事这一行业的人。同音词(there与their),反义词(hot与cold),近义词(love与like)的归类都可以帮助学生记忆,以达到熟练掌握单词的目的。以句为单位,注意词不离句。从使用词汇的角度看,词语只有组成句子或连成话语,才能实现交际功能。在课堂教学中我坚持词汇教学与句型教学相结合,坚持以句为单位,由旧句型引出新单词,旧单词引出新句型。
三、词汇教学的巩固策略
1.词汇适时复习策略
记忆包括识记、保持、再认和回忆四个过程。小学生的记忆特点是“学得快,忘得快”。教师应根据小学生的记忆规律,在课堂教学中适时复习学过的词汇。例如,一节课的开始要有对上节课所学单词的复习环节;在课堂教学中,教师可以在造句和编对话等环节中鼓励学生运用已学词汇;英语家庭作业也要包括对当天所学词汇的听、说、读、写的练习。教师在平时的教学过程中要培养学生及时复习的习惯,帮助他们制订预习和复习计划,并鼓励家长一起来督促他们不懈地执行所定计划。
2.词汇运用巩固策略
关键词:游戏 英语 寓教于乐
课 题:本文系济南大学科研基金项目“生态批评视阈下诺曼・梅勒研究”(项目编号X1120)的阶段研究成果。
2012版PEP三年级英语教材已经正式投入使用了。为此,笔者探讨家长应该如何配合学校的课堂英语教学,在辅导孩子时寓教于乐,使孩子享受英语学习。
在我国,英语作为一门外语,本来就缺乏相应的语言环境,七八岁的孩子初学英语难免会有陌生感。因此,家长决不能按成年人学习英语的方式和习惯来要求初学英语的孩子。我们首先要做的是激发孩子学习英语的热情和兴趣。爱因斯坦说过:“兴趣是最好的老师”。如果孩子对学习有着浓厚的兴趣和强烈的好奇心与求知欲,在学习的过程中就能主动克服各种困难,充满热情、全力以赴地获取各种知识,寻找各种机会锻炼自己。其次要帮助孩子建立起学好英语的自信心。孩子一旦在学习上丧失了自信心,认为自己这也不行,那也不行,处处不如别人,再要想取得好成绩就十分困难了。而自信心从何而来呢?它是从一次次成功的体验中、他人和自己对自身的肯定中逐步建立起来的。因此,家长在孩子的学习过程中,应以表扬鼓励为主,要善于发现孩子的闪光点,并及时给予肯定。
一、游戏教学
皮亚杰根据儿童游戏的心理发展阶段, 提出了练习性游戏、象征性游戏和规则性游戏这三种相对应的游戏。游戏是儿童的天性,规则性游戏有益于学龄儿童逻辑思维能力的培养和个体社会化的形成,可以促进儿童在生理、心理、智力以及品行等各方面的提高。在英语学习中,游戏教学可以使一个个抽象的英语单词、句子变得形象、生动、有趣。家庭本来就是孩子休闲娱乐的港湾,在家庭英语学习辅导中运用游戏,父母与孩子互动,充分运用肢体语言和面部表情,可以消除孩子的胆怯心理,鼓励孩子大胆说英语,用英语来表达自己,让孩子在轻松愉快的氛围中巩固所学内容,还有利于亲子关系的培养。
二、教材介绍
2012新版PEP三年级英语教材由Let’s talk, Let’s play, Let’s learn, Let’s chant, Let’s sing, Let’s do, Story time等版块组成,配有卡通动物、人物形象,形式活泼,内容有趣,彩色印刷,图文并茂,还有语言生动有趣、发音标准流畅的录音磁带和MP3格式听力材料等教学资源,方便家长进行情境设计,开展游戏互动。
三、实例分析
下面以Unit Three Look at me! 为例,分别从预习、提高课堂效率、重视课后复习、认真完成作业、错题分析整理等环节进行说明。
1.预习
预习可以分为学期预习、阶段预习和课前预习三类。寒暑假期间可以让孩子自由浏览教材,了解下学期要学习的内容。阶段预习主要是认真阅读单元内容,了解这一单元的知识结构及其相互关系。课前预习要了解下一节课的内容,找出自己不懂不会的部分,带着疑问上课,力争上课时听懂学会。小学低年级的英语课程比较简单,没有必要进行过于充分的预习,否则孩子会产生“我都会了”或“我都学过了”的感觉,这样不利于孩子养成在课堂上认真听讲的习惯,会影响将来的英语学习。因此,在课前预习阶段,家长可以陪着孩子一边看教材,一边听几遍录音,录音中读得较快的部分或孩子感到比较陌生听不清楚的地方,给予提示和解释即可,不必要求孩子全部掌握。而要让孩子在上英语课时,认真听讲,努力提高课堂效率,争取在课堂上学会老师所讲的内容。尤其要提醒孩子,英语句子中的单词与句子的汉语意思,不一定是按顺序一一对应的,例如:Good morning,当初学英语的孩子听老师讲这句话的意思是早上好时,就有可能把good和morning的意思弄颠倒了。因此,家长应提醒孩子在上课时一定要弄明白句子中每个单词的意思,不要出现整句话的意思很明白,但单独指出某一个词时,不知道该单词的意思,或该词在其他句子中出现时,不理解其词义的情况。
2.复习
在课下复习时,家长可以运用游戏,与孩子亲密互动,一起巩固所学内容。在Let’s talk 版块中,家长先与孩子一起听录音,然后分角色进行对话,可以先按照教材内容分角色朗读,熟悉内容后,脱离教材进行自由对话,可以自行设计场景,进行对话内容的增减,这样有助于加深孩子对对话内容的理解,整合所学知识,并活学活用。在Let’s learn版块中,听完录音后,家长说单词如nose、eye、ear、leg、arm等,让孩子指出相应的身体部位,逐渐加快速度,缩短孩子的反应时间,以提高听力熟练程度。然后,家长跟孩子交换角色,孩子说单词,家长指出相应的身体部位,这样便于鼓励孩子大胆说英语,并能加深孩子对单词和单词所指内容对应关系的理解。Let’s do版块也可以采用上述方法。Let’s sing和Let’s chant版块中,在一起听完录音后,家长应该把新单词先给孩子讲一下,在理解歌谣内容的前提下,一起学唱,这样能使孩子在轻松愉快的氛围中巩固所学内容。还应注意,要制订合理的复习计划,及时复习当天学过的内容,一个单元学完后,及时复习巩固这一单元的内容。可以根据孩子的具体情况,制订周计划、月计划和期中、期末复习计划,不要考前突击。在复习中,我们可以采用和孩子游戏比赛的方式,比如比一比谁说出的单词多,谁读句子又快又准确等。也可以在几个孩子一起玩时,让他们采用游戏的方式,进行角色扮演,用英语对话,或进行单词大王比赛,让孩子在游戏中不知不觉巩固并应用了所学的英语知识,同时锻炼了英语听和说的能力。
3.作业考试及错题分析
在初学英语的阶段,孩子在完成作业时,家长应在一旁注意孩子书写字母是否符合规范,对写得好的地方可以用粘贴画、五角星等奖励,让孩子从一开始就养成良好的书写习惯。三年级英语考试主要是对词汇和对话内容进行考查。对作业中以及考卷中出现的错题,要及时分析,找出孩子在知识上没掌握好的地方,审题方面有没有问题等。典型的错题要整理在专门的错题本上,及时回顾复习。
以上各环节中,我们要善于发现孩子的点滴进步,并及时提出鼓励表扬,可以采用物质和精神的多重奖励,激发孩子学习英语的兴趣,并把这种兴趣发展成学习的内在动机,养成良好的学习习惯,初步建立起学好英语的信心。
在今天全球化、国际化的大背景下,英语作为交流工具和工作技能的地位已经受到了广泛认可。家长应该配合学校课堂英语教学,在辅导孩子时寓教于乐,使孩子享受英语学习的过程,在快乐中前行。
参考文献:
[1]清华编著.优等生必备的N个学习方法[M].吉林:延边大学出版社,2007.
[2]吕馨.小学英语游戏教学策略的研究[D].东北师范大学硕士研究生论文,2006.
自始至终以认真、严谨的治学态度,一学年来。勤恳、坚持不懈的精神从事教学研究工作、馔写论文、辅导英语。三个代表”重要思想指导下,认真学习党的路线、方针、政策,特别是教育教学工作政策,能够在教育理论指导下从事英语教学。能够认真制定教学计划,研究教学理论,新课程标准,理念。有针对性地应用于教学活动当中。同时在教学过程中,能够根据学生的特点采取不同的教学方法,取得了一些的成绩。下面就以下几个方面进行总结,请予以批评指正,使我今后的教育教学工作中取得更大的进步。
根据我所任教班级的实际情况,首先。优生几乎没有,中差生却俯视皆是有人曾说:如果孩子天生就是优生,那教育还有什么功能?又谈什么基础的素质教育呢?因而对占相对多数的中差生,更应变嫌弃为喜爱,变忽视为重视,变冷漠为关注,变薄待为厚待。注意帮助他找到优、缺点,以发扬优点,克服缺点。其次是以平常的心态对待:差生也是孩子,厌恶、责骂只能适得其反,应享有同其它学生同样的平等和民主,也应享受到优秀学生在老师那儿得到爱。厚爱差生,真正做到以情动人:首先做到"真诚"二字,即我学生面前不敢有丝毫虚伪与欺哄,做到言出必行;其次做到"接受"即能感受差生在学习过程中的各种心理表现和看法,如对学习的畏惧、犹豫、满足、冷漠,错误的想法和指责等,信任中差生,鼓励他自由讨论;最后做到"理解"二字,即通过学生的眼睛看事物。由于我能善意理解他高兴地接受他因此促进了中差生不同程度的进步和发展。其次,认真制定教学计划,注重研究教学理论,认真备课和教学,积极参加科组活动和备课组活动,上好辅导课,并能经常听各老师的课,从中吸取教学经验,取长补短,提高自己的教学的业务水平。每节课都以最佳的精神状态站在教坛,以轻松、认真的形象去面对学生。按照小学英语教学大纲进行施教,让学生掌握好学科知识。还注意以德为本,结合现实生活中的现象层层善诱,多方面、多角度去培养学生良好的品德和高尚的人格。
为培养高素质的下一代,教育是爱心事业。本人时刻从学生身心健康出发,根据学生的个性特点去点拔引导。对于个别差生,利用课间多次倾谈,鼓励其确立正确的学习态度,积极面对人生;而对优生,教育其戒骄戒躁努力向上,再接再厉,再创佳绩。通过现实生活中的典范,让学生树立自觉地从德、智、体、美、劳全方面去发展自己的观念,树立崇高远大的理想。课堂把握上,课前做到认真备课、制作课件,多方面去搜集相关资料。为提高每节课的教学质量,本人除注重研究教材,把握好基础、重点难点外,还采用多媒体教学,如:投影、幻灯、漫画、录音等多样形式。通过培养学生学习英语的兴趣,调动学生学习的积极性、主动性,提高课堂的教学质量,按时完成教学任务。
能制定好复习计划,最后。并能认真备好复习课,制定复习计划并付诸于教学过程中。同时能够认真布置和批改课后作业,争取不让作业成为学生的一种负担。经过全体师生的共同努力,班级学生取得了很大的进步。
关键词:中小学;英语;教学衔接;对策
中图分类号:G427 文献标识码:A 文章编号:1992-7711(2012)21-026-2
20世纪90年代以来,随着外语教学的进一步发展,越来越多的小学开始开设英语课,泰州市海陵区也是如此。但是随着小学英语教学的不断深入,中小学英语教学的衔接问题越来越突出,而且有相当一部分学生在初中英语学习之初就表现出了对英语学习的反感和倦怠,这令我感到十分困惑。
而顺利渡过这个衔接阶段,对后面学生的英语学习起着至关重要的作用。如何才能解决好这个问题呢?在个别访谈、课堂观察的基础上,笔者运用问卷的方式调查了海陵区的部分学校中小学英语教学的现状。经分析发现,这个问题主要由中小学英语课程地位不同;中小学英语课程标准不同;中小学英语教材衔接不紧;中小学师资素质参差不齐;中小学英语教学方法不同;中小学生的心理状态不稳;中小学英语评价体系不同等原因造成的。笔者结合自身教学实践,提出七条解决对策。
一、提高家长对英语的重视度
由于刚升入初一的学生对课外学习时间的分配多数依赖于家长的安排,教师可以在家长身上下工夫:可以定期举行家长学习班或与家长个别交流,一来让家长了解“语言学习对学生发展的价值”,从他们自身的角度重视起外语课堂教学,二来解决一些家长心有余而力不足的困难——对外语知识的陌生感。我们也可以通过短信联系的方式将每天的学习要求告之家长,请他们配合督促,从而为保证学生在家里学习外语的时间,形成外语教学的良性循环。
二、对比中小学教材找出差异
为了实现中小学英语教育的衔接,教师可以对小学阶段已经学过的语言知识、语言技能进行梳理、小结,避免过多的机械重复,浪费时间和精力。同时也应防止学生由于有些知识已经学过而产生懈怠、放松的情绪,影响严谨的学风和良好的学习习惯的形成。
具体操作可分为三步进行:
第一步是整理出中小学教材的异同。先整理出小学英语教材中已出现过的词汇、语言现象,在初中阶段进行精练概括,节省时间选学补充教材,以拓展学生的知识视野。
第二步是制定初一新课前的复习计划。小学英语教学内容通常为简单的日常情景功能会话,语法知识不多。所以,学生步入初一之后,我们应当将小学英语的重难点,特别是涉及与新课程英语内容相关的语言项目系统地复习一遍,包括单词拼读、句子朗读、句型转换、会话交际、语法运用等,达到巩固、记忆、活用的目的,为过渡到初一新语言项目作好充分准备。
第三步是在同一班级中实行多层次教学。从学生实际出发,在同一班级中制定多层次的教学内容,根据教学反馈可以适当增减部分内容,以满足不同学生的需求。
三、提高自身的教育教学能力
1.更新教师教学观念
教师要不断加深对课程理念和课程目标的理解与认识,转变旧观念,适应新形势,尝试新的教学方法,不断调整教学对策,以提高教学的效率和效益。教师要时刻用《英语课程标准》指导自己的工作;在日常教学中应时刻体现出“以人为本”的思想,培养学生良好的学习态度,关注学法的指导,创造融洽的师生关系;运用多媒体等教学手段,创设英语学习的良好氛围;将思想品德教育等寓于英语教学中,进行学科间的渗透,全方位提高学生综合素质。
2.完善教师专业知识结构
具体来讲,教师的专业知识包含科学文化知识、专科专业知识和教育专业知识。首先,作为英语教师,教授的是语言。而语言从来就没有离开文化,离开文化的语言教学往往既不深入也没有效率。因此,英语教师应该具备跨文化意识,在教学中时时向学生渗透这种意识。其次,英语师要具备完善的专科专业知识。这就要求处于衔接教学阶段的英语教师不仅要深入研究所教教材,掌握其教材的编排体系、知识层次和结构,而且要研究自己所教的学生在小学阶段或中学阶段所用的教材、教学内容以及学生们对所学内容的掌握程度和他们的需求。除此之外,英语教师还应具备流利的英汉语言表达能力、高超的组织课堂教学的能力、灵活处理教材的能力、精心设计教学方法的能力、熟练使用现代化教学手段的能力等,这样才能成功地组织课堂教学,为学生“传道、授业、解惑”。另外,英语教师还得具备教育学和心理学知识。教学工作的性质决定了是否达成教学目标必须通过学生的学来实现。如何才能让学生爱学、会学?这就要求英语教师得掌握一定的教育学和心理学知识和技能。
3.提高教师教学反思能力
反思,可以提高教学质量、教师的道德感和责任感;反思,可以帮助教师学会教学,促进教师的全面发展;反思,可以以解决教学问题为基本点,促进教师有针对性地提高自己的薄弱环节;反思,可以让教师对教学有自觉的意识,对教学活动的自我评价的习惯和能力不断提高,从而加强教师的监控能力,自如地应对教学过程中的各种问题。
由于处于中小学衔接阶段的教学工作的特殊性,我们应比其他年级教师更注重提升自己的教学反思能力,不断总结得失,修正教学思路,引导学生顺利走过衔接阶段。
四、实施更有效的课堂教学法
针对小学生升入初中后不能适应的现状,我们在教学方法的选择和设计上,就应当考虑对小学英语的教法有选择地继承:保持小学英语“听、说、读、写、唱、玩、演”灵活多变的教学手段;运用直观的教学方式;设置情景,将机械性语言项目置于有意义的情景中去交流等。
另外,由于初一新生在基础、方法、习惯以及能力等方面有很大的层次差异,这就要求我们探索一个行之有效的新思路,既能符合初中目标的要求,又能根据学生的特点,促进所有学生的共同进步。我们可以通过合作学习与分层教学相结合来解决。
这种分层,首先应该潜藏在对合作小组的分配里。把不同层次的学生按比例分配在同一个小组,小组成员在学习过程中,既分工又协作,通过集体协作共同来完成学习的总目标。比起严肃的课堂教学,学生更容易产生愉,从而使不同水平的学生互相帮助、共同发展。
其次,酝酿在对各类学生的课后作业的布置中。我们应该让每一个学生都能够有勇气抬起头来,充满自信和骄傲地接受不同层次的课外学习任务,并且在任务完成的过程中,体会到符合自身能力的成功,在获得自信的同时,产生主动学习的欲望。
最后,暗含在对每一个学生的课外辅导中。在海陵区乃至全国的许多城市,在短期内不可能解决大班额教学所带来的实践量小的弊病。而衔接教学阶段的学生恰恰比任何一个阶段的学生都需要将实践与课本知识相结合。依据不同层次学生的分层次课外辅导对于初一新生来说是十分必要的。有的放矢的课外辅导会加速他们学习的进程,同时也能加快衔接教学的脚步。
五、指导学生进行有效的学习
1.学习方法的指导
小学阶段的学习科目少、内容浅,学生易于掌握所学知识;而中学科目增多、内容加深,初一学生学习难度加大。因此,教师要及时指导他们掌握良好的学习方法。(1)注重预习,学会自学。(2)专心听讲,勤于思考。(3)及时巩固,温故知新。(4)利用现代技术,增加信息输入。让学生知道如何学、学什么,并逐步做到主动学习,在学习过程中找到适合自己的学习方法。
2.学习习惯的培养
许多学生怕学英语或英语学不好的原因就是怕记怕背。实际上,死记硬背绝不是学好英语的关键,而且即使你把所有的单词、短语、课文都背熟了,也不一定就能学好英语。学生只有掌握了学习方法并养成良好的学习习惯,才能获得学习上的成功。只是了解正确的学习方法而不去运用,没有任何意义。只有掌握了正确的学习方法,在运用与实践中,使方法逐渐固定下来,形成习惯,学习之路才可能走得顺利。良好的学习习惯能使科学的学习方法自然而然地得到运用,从而提高学习效率,但要学生掌握新的学习方法,养成良好的学习习惯,还必须注意克服已有的不良学习行为和习。不良的行为和习惯不去除掉,学生对科学学习方法的接受就有困难。
六、关注学生心理与情感沟通
从小学进入中学,学生正处于身心发生巨大变化的时期。这一时期学生从儿童期向青春期过渡,处于半成熟半幼稚状态,情感、自我意识、道德观念都有很大变化。小学高年级的学生与初中一二年级的学生,他们同处在少年期,好奇心强,善于形象思维,乐于表现自己。衔接阶段的教师可以研究学生的心理特征,从多方面入手,让学生喜欢英语、激发动机、引起注意、培养和保持学习兴趣。另外,培养学生的自信心,给学生“成就感”是促使学生学习的内在动力。我们在教学中发现,很多小学生因性格内向、学习基础较差等原因而产生了不同程度的自卑心理和胆怯心理,不敢开口说英语,教师在教学中要精心设计,视不同学生的情况做到难易相宜,各得其所,并能积极发现学生身上的闪光点,多用激励的目光和言辞来调动学生积极的学习情绪。教师对学生这种心灵上的激励及期望,使学生获得了初步的成就感,有效地培养了学生的自信心、自豪感,这对学生将终生有益。
“亲其师,才能信其道”,只有重视师生情感的交流,建立新型的师生关系,才能更好地调动学生学习英语的兴趣。所谓新型的师生关系,也就是:一、合作的师生关系。合作要求教师不以教育者自居,不用强制手段迫使学生服从教师的意志。达到师生人格上的完全平等。二、和谐的师生关系。和谐是师生的情感联系的基础,也就是教师要爱护学生,倾注满腔热情去关心每一个学生。它是学习学习的强劲动力。三、互动的师生关系。鼓励学生积极参与课堂教学活动,提高课堂效率。四、融洽的师生关系。教师应加强和学生的情感交流,做学生的良师益友。教学不仅仅是交与学的活动,同时也是师生思想的交流过程。让我们通过建立良好的师生关系,从而影响和制约学生的情感和意志,对培养和保持学生的学习兴趣起到积极的促进作用。
七、实施多元化的教学评价方式
《英语课程标准》指出,评价体系“要有利于促进学生综合语言运用能力的发展,要通过采用多元化的评价方式,评价学生综合语言运用能力的发展水平,并通过评价激发学生兴趣,促进学生的自主学习能力、思维能力、跨文化意识和健康人格的发展。”
因此,对学生的学习效果,要有持续有效的评估方法。注重形成性评价对学生发展的作用是新课标的一条重要评价原则。比如,在正常的定期测试以外,还可以举办各种各样的小竞赛,鼓励竞争;可以建立学生日常学习档案,把学生平时的各类情况记载入册,定期总结,及时反馈,促其调整;可以利用课堂观察,通过对学生在课堂上听课、交谈、使用教材或运用语言的观察,评价学生的学习情况;可以进行问卷调查,给学生发放问卷,通过问卷,引导学生正确有效地评价自我评价或者相互评价;可以和学生面谈,了解学生对自己学习情况的感受和看法,以评价学生的进展和问题;可以利用家校联系册,了解家长对学习情况的反馈意见。
分别将其置于5 mL新鲜的α-MEM培养液中,分别于37 ℃下静置1、7、14、21、28 d,收集PRF与PRP析出液,检测析出液中转化生长因子-β1(TGF-β1)及血小板源性生长因子-AB(PDGF-AB)的质量浓度。将收集的PRF与PRP析出液配置成条件培养液培养ADSCs,观察其对ADSCs增殖及碱性磷酸酶(ALP)活性的影响。结果 1)生长因子释放情况:不同时间点的PRF析出液中,14 d时TGF-β1的质量浓度达到最高,7 d时PDGF-AB的质量浓度最高;不同时间点的PRP析出液中,1 d时TGF-β1与PDGF-AB的质量浓度即达最高,以后逐渐下降。2)对ADSCs增殖及ALP活性的影响:PRF析出液中,14 d时对其影响最大;PRP析出液中,1 d时对其影响最大。结论 与PRP相比,PRF能够缓慢持久地释放生长因子,更有力地刺激ADSCs的增殖和分化。
[关键词] 富血小板纤维蛋白; 富血小板血浆; 脂肪干细胞; 成骨分化
[中图分类号] R 783 [文献标志码] A [doi] 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.06.019
口腔种植技术已经广泛用于缺失牙及牙列的修复中,种植体与骨之间如何能达到稳定的骨结合一直是研究的热点。从人血液中提取的富血小板血浆
(platelet-rich plasma,PRP)富含多种生长因子,可以促进组织再生[1]。目前有许多学者将其用于口腔
种植研究中,但效果差异较大。富血小板纤维蛋白(platelet-rich fibrin,PRF)是一种区别于传统PRP技术的富含细胞因子和生长因子的新一代血小板浓缩物,于2001年由Choukroun等[2]提取出来,因此又称
为Choukroun’s PRF。PRF的分子结构类似于天然血凝块,可以借助细胞因子的调节作用以及纤维蛋白的支架作用进行组织修复[3]。与PRP比较,PRF制备时无需添加任何生物制剂,同时还具有促进成骨及炎症调节的能力,能够独立应用以修复小范围的骨缺损,也可以与骨移植材料联合应用进行大范围骨缺损的修复。但是目前对PRF和PRP释放细胞因子的情况,以及对靶细胞作用效果的差异的研究还较少,本研究主要对不同时间点提取的PRF和PRP析出液中生长因子的质量浓度进行测定,并探讨二者对脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cell,ADSCs)增殖分化的影响,以便为临床及组织工程研究选择合适的支架材料提供参考。
1 材料和方法
1.1 主要试剂
高糖α-MEM培养液、胎牛血清(fetal bovine se-rum,FBS)、青霉素、链霉素、胰蛋白酶、Ⅰ型胶原酶(Gibco公司,美国),碱性磷酸酶(alkaline phospha-
tase,ALP)试剂盒(南京建成生物工程研究所)、血小板源性生长因子-AB(platelet derived growth factor-
AB,PDGF-AB)酶联免疫吸附试验(enzyme linked
immunosorbent assay,ELISA)试剂盒、转化生长因
子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)ELISA试剂盒(上海希美生物科技有限公司)。
1.2 原代细胞的培养
无菌切除兔腹股沟处的脂肪组织,D-hanks液冲洗3次。在超净工作台上用无菌剪将其剪成乳糜状后收集于离心管中,加入2倍体积的质量浓度为3 g·L-1的Ⅰ型胶原酶,置37 ℃恒温摇床上振荡消化30 min,然后加入等体积的含10%FBS的α-MEM培养液终止消化。200目滤网过滤后1 000 r·min-1离心5 min,倾去上层残余脂肪以及上清液,用含10%FBS的α-MEM培养液重悬细胞,接种在培养瓶中,置于37 ℃含5%CO2的培养箱中静置培养,24 h后细胞贴壁,换液,以后每3天换液1次。每日用倒置相差显微镜观察细胞的生长形态,待细胞长满80%时,0.5 g·L-1胰蛋白酶消化,1∶3传代培养,取第3代细胞用于实验。
1.3 ADSCs的鉴定
采用多向诱导分化(成脂和成骨诱导)的方法鉴
定ADSCs。
成脂诱导方法如下。细胞长满培养瓶底后,常规消化并收集细胞,将细胞以每毫升2.1×104个细胞的密度接种于6孔板中,置于细胞培养箱中培养,常规换液。当细胞完全融合后弃培养液,更换成脂诱导液a(含α-MEM培养液、青霉素、链霉素、1 μmol·L-1地塞米松、0.5 mmol·L-1 3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、200 μmol·L-1吲哚美锌、10 μg·mL-1胰岛素),诱导3 d后,弃去诱导液a,更换为保持液b(含α-MEM培养
液、青霉素、链霉素、10 μg·mL-1胰岛素),1 d后再次换为诱导液a诱导。诱导顺序为:诱导3 d、保持
1 d,如此重复4次,最后诱导5 d。诱导21 d后,进行油红O染色。
成骨诱导方法如下。待培养的ADSCs达到80%融合时,常规消化收集细胞。将细胞接种于6孔板中,每孔的细胞密度为每毫升1×104个,加入2 mL细胞培养液置于细胞培养箱中培养,24 h后弃培养液,每孔加入2 mL成骨诱导液(含α-MEM培养液、0.1 μmol·L-1地塞米松、50 mg·L-1维生素C、10 mmol·L-1 β-甘油磷酸钠)进行诱导,每3 d换液1次,诱导21 d后进行茜素红染色。
1.4 PRF与PRP析出液的制备
PRF制备:无菌抽取兔耳中央动脉血10 mL至真空负压管中,立即于3 000 r·min-1离心15 min,兔血可分为3层,最底层为红细胞层(red blood cells,RBC),表层为贫血小板血浆(platelet-poor plasma,PPP)层,中间层即为PRF。
PRP制备:无菌抽取兔耳中央动脉血10 mL至含枸橼酸钠抗凝剂的负压管中,1 000 r·min-1离心15 min,吸取上清液及交界面下1~2 mm深的红细胞至另一个离心管内,3 000 r·min-1离心8 min,弃去上清液的上3/4,轻轻振荡后即为PRP。将PRP与凝血剂(含10%氯化钙和1 000 U凝血酶)混合后摇匀,PRP即被激活呈凝胶状。
将制备好的PRF与PRP分别置入含5 mL α-MEM培养液的离心管中,37 ℃条件下静置,于1、7、14、21、28 d时收集PRF和PRP析出液,在每个时间点取出析出液后,再于离心管中加入5 mL新鲜的α-MEM培养液,待下一个时间点收集析出液。实验前将收集的析出液-80 ℃保存备用。
1.5 TGF-β1与PDGF-AB质量浓度的测定
使用ELISA试剂盒对PRF和PRP析出液中TGF-β1与PDGF-AB的质量浓度进行检测,按照试剂盒说明书进行操作。
1.6 ADSCs增殖的检测
取生长良好的第3代ADSCs,以每孔1.5×104个细
胞的密度接种于7块48孔板中,24 h后换液,用无血清培养液培养24 h,使细胞状态同步化。细胞分为12组,分别使用不同的培养液进行培养,即阳性对照组、实验组(PRF1、PRF7、PRF14、PRF21、PRF28、PRP1、PRP7、PRP14、PRP21及PRP28)以及阴性对照组。阳性对照组使用含10%FBS的α-MEM培养液培养(含10%FBS、100 U·mL-1链霉素、100 U·mL-1青霉素),阴性对照组使用无血清的α-MEM培养液培养,其余10组分别使用不同时间点PRF和PRP(分别为1、7、14、21、28 d)析出液配制α-MEM培养液
培养(含体积分数10%PRF或PRP析出液、100 U·mL-1
链霉素、100 U·mL-1青霉素),每组分别追加3个复孔,培养1~7 d。
每日选择1个孔板对12组不同培养条件下的细胞进行消化,分别用血球计数板在倒置显微镜下进行计数,取其均数,操作重复3次。以时间(d)为横坐标,细胞计数为纵坐标,绘制细胞的生长曲线。
1.7 ALP活性检测
取生长良好的第3代ADSCs,以每孔1.5×104个细胞的密度接种于48孔板中,24 h后换液,用无血清培养液培养24 h,使细胞状态同步化。细胞分为12组,同1.6。阳性对照组使用含10%FBS的α-MEM成骨诱导液培养(含10%FBS、0.1 μmol·L-1地塞米松、
50 mg·L-1维生素C、10 mmol·L-1β-甘油磷酸钠),阴性对照组使用无血清的α-MEM成骨诱导液培养,其余10组使用不同时间点PRF和PRP析出液配制α-MEM成骨诱导液培养(含体积分数10%PRF或PRP析出液、
0.1 μmol·L-1地塞米松、50 mg·L-1维生素C、10 mmol·L-1 β-甘油磷酸钠)。连续培养7 d,常规换液。
培养7 d后,弃培养液,PBS漂洗细胞,每孔加入150 μL的1%TritonX-100,冰上裂解10 min,显微镜观察细胞破碎情况,收集细胞并离心,用微量移液器吸取上清,按照ALP操作试剂盒进行检测,酶标仪下测定光密度(optical density,OD)值,波长520 nm。按试剂盒提供的公式计算ALP活性,实验重复3次。
1.8 统计分析
使用SPSS 11.0软件进行统计学分析,样本用x±s表示,检验水准为双侧α=0.05。
2 结果
2.1 ADSCs鉴定结果
ADSCs的成脂、成骨诱导结果见图1、2。成脂诱导3 d左右,细胞形态由长梭形变为类圆形,与脂肪细胞相似,部分细胞的细胞质内出现折光性强的小液滴;持续成脂诱导,液滴的数量增多,且融合成大液滴;诱导3周后进行油红O染色,可见细胞质中的液滴被染为红色,即为脂滴(图1)。成骨诱导3~4 d,细胞形态发生改变,由长梭形变为三角形或多边形,类似成骨细胞的形态;诱导7 d左右可见少量细胞外基质沉淀,诱导时间越长,沉淀越明显;诱导3周后进行茜素红染色,可见钙结节形成(图2)。
2.2 TGF-β1与PDGF-AB的质量浓度
不同时间点PRF和PRP中TGF-β1和PDGF-AB的质量浓度见表1。PRF中,TGF-β1的质量浓度随静置时间的增加而逐渐升高,PRF14组达到高峰,其后下降;PDGF-AB的质量浓度亦随静置时间的增加而升高,PRF7组达到高峰,其后下降。PRP中,TGF-β1和PDGF-AB的质量浓度在PRP1组均最高,其后随静置时间增加而下降。经统计学检验,PRP中TGF-β1和PDGF-AB的质量浓度除了PRP1组高于同时间点的PRF1组外,其余时间点均低于相应的PRF组(P
0.05)。
2.3 PRF与PRP对ADSCs增殖作用的影响
12组ADSCs细胞的生长曲线见图3。PRF组中,PRF14组的ADSCs增殖程度高于其余PRF组、阴性对照组和阳性对照组(P
ADSCs增殖程度高于其余PRP组、阴性对照组和阳性
对照组(P
组的ADSCs增殖程度均分别高于PRP7、PRP14组,PRP1组的ADSCs增殖程度高于PRF1组,上述差异均有统计学意义(P
2.4 ALP活性检测结果
培养7 d后,阳性对照组和阴性对照组的ALP活性分别为4.479±0.326和3.363±0.127,PRF和PRP各组的ALP活性检测结果见表2。
PRF14和PRP1组的ALP活性最高,且两者之间无明显差异(P>0.05);PRF14组ALP活性高于其余PRF组、阳性对照组和阴性对照组;PRP1组的ALP活性高于其余PRP组、阳性对照组和阴性对照组(P
3 讨论
PRP中富含多种生长因子,其生长因子来源于血小板,但它在促进组织修复中的作用备受争议。研究[4-5]表明,PRP形成的凝胶块中所含有的血小板以
及生长因子的作用时间仅限于早期阶段,不可能作用于组织修复的全部过程。Choukroun’s PRF技术的操作简单且成本低廉,被称为第2代血小板浓缩物[6]。
PRF具有良好的促进软硬组织再生的作用[7-8],近年
来PRF已经初步应用于口腔种植领域中。与PRP相比,PRF更注重纤维蛋白的作用,其内的纤维蛋白能将血小板和释放的生长因子以化学键结合,通过缓慢释放,延长生长因子的作用时间[6]。本研究检测了PRF与PRP在不同时间点释放的TGF-β1与PDGF-AB的质量浓度,发现PRF中TGF-β1与PDGF-AB的质量浓度随时间的延长而增加,TGF-β1在14 d时最高,PDGF-AB在7 d时最高,其后逐渐减少;相反,PRP中TGF-β1与PDGF-AB均在第1天时质量浓度最高,随后迅速下降。此结果进一步证实了PRF可以缓慢释放生长因子的结论。PRF中的血小板像黏结剂一样浸入到纤维蛋白网内,其中的白细胞具有活性并且可以在密集的纤维蛋白网状结构中产生作用[9]。PRF与PRP促进ADSCs增殖和分化的作用有赖于其中的TGF-β1与PDGF-AB。本实验测定了PRF和PRP对ADSCs增殖分化的作用,结果发现:PRP组中,ADSCs的细胞增殖活性及ALP活性均在早期阶段较高,随时间的延长而降低;PRF组中,ADSCs的细胞增殖活性及ALP活性随时间的延长逐渐增高,14 d达到最高,其后下降。该结果与细胞因子的检测结果类似。由此可以推测,与PRP相比,PRF可以明显延长对组织修复的效果。PRP的作用在早期阶段最强,可能是以往的研究中其成骨效果差异较大的原因之一,因为其成骨作用不能作用于组织修复的全过程。
与PRP相比,PRF制备简单且操作容易,已经作为一种新型的自体材料初步应用于口腔种植临床中[10-11]。本实验进一步表明了PRF能缓慢持久地释放生长因子,可更加有效地促进ADSCs的增殖和分化,为PRF的临床应用及组织工程学研究提供了新思路。
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