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1 引言
中药鉴定学是技校中药学专业的一门中心学科,技校学生的就业去向主要是药厂、药店、医药公司等,这些单位的大部分岗位都要求学生具备一定的中药鉴定学知识。而技校毕业生的知识和技能与社会的需求有较大的差距,技校现有的中药鉴定学教学模式应根据社会需要进行必要的改革,教师在中药鉴定学课程的教学方法上要多下工夫。
2 合理设计教学目标,激发学生学习的兴趣
教学目标的定位要体现以学生为主体的原则,着眼于激发学生主动参与学习的积极性,使学生在学习知识、技能的过程中,不断提高各方面的能力,尤其是创新能力。目前技校学生大多数入学分数较低,自我约束能力差;另外,加上家长的压力、社会的偏见和自己认识上的偏差,使得他们内心产生一种自卑感和厌学情绪。因此,教育者要用高度的责任心和科学的管理方法把工作落到实处。 “要给人以阳光,你心中必须拥有太阳。”老师是教育者、领路人,只要老师心中拥有太阳,洞悉学生的心理,对学生教育动之以情,晓之以理,持之以恒,和风细雨,定然润物无声,教学工作才会做得更好,实现著名教育家叶圣陶说的“教是为了不需要教”,学生才会自尊、自立、自律、自强。
3 两阶段教学:理论教学与实践教学相结合
中药鉴定学课程可分为两阶段教学:第一阶段理论教学,主要由教师讲授,穿插提问式,让学生掌握中药鉴定学理论知识体系。通过制作多媒体教学课件、印制内部讲义,使学生在课堂上进行思考交流互动,而不是忙于抄笔记。第二阶段实践教学,在教师的指导下,学生首先进行综合实验设计,自拟题目,最后以小论文形式提交实验报告。另外,适当组织同学到校外参观药材市场。这样,学生在本门课程结束后就具备了一定实际工作经验和创新基础。
3.1 教学手段多元化,教会学生学习方法
3.1.1 启发式教学法
即教师在教学过程中根据教学任务和学习的客观规律,从学生的实际出发,采用多种方式,以启发学生的思维为核心,调动学生的学习主动性和积极性,促使他们生动活泼地学习的一种教学指导思想。在教学工作中要不断向学生提出带有启发性、探索性的问题。尽量利用训练的可操作性,让学生在理解和应用上得到最大程度的提高。例如,在制作粉末制片时,为什么常加水合氯醛液透化?为什么透化后滴加稀甘油少许,再加盖玻片观察?
3.1.2 讨论式教学法
这种教学方法更能培养学生的思维能力,提高学生学习的主动性和积极性,解决教学中学生的思维定势和思维障碍,充分发挥群体优势,从而取得更大的收获。比如在学习基本操作时,提出问题:①你会使用显微镜吗?②怎样能规范、准确地量制片呢?③有哪位同学能演示操作吗?
3.1.3 案例教学法
在教学过程中,教师以组织课堂为主,首先向学生布置题目,学生在辩论和教师指导中学到知识。上课时由教师随机点名,让学生陈述案件事实并回答问题,被点到名的学生若没有准备好,可以“PASS”,但学习成绩就要降一个档次。同时教师要不拘一格,随时发现问题,提出问题,再让学生讨论,最后进行总结。案例教学中,也要讲授必要的理论知识,为了使学生对问题的讨论更加深入,故意出些难题,让学生辩论,使课堂气氛活跃,只要学生讲得有道理,能将自己的观点阐述清楚,就能得高分。单一的传统的系统讲授模式,已与现代的教育观念发生冲突,已不能完全适应现代教育和培养人才的需要,应予以调整和改变。因而,引入案例教学法模式来弥补传统讲授模式的不足就显得越来越迫切了。
3.2 实践教学多样化,提高学生的技能水平
3.2.1 合理调整实验内容
中药鉴定学在实验内容的选择上,要充分体现“以就业为导向、以能力为本位、以发展技能为核心”的职教理念。教师要结合教材的理论知识和技校学生的特点,认真设计好每一次实践教学内容,由浅入深、由易变难,坚持循序渐进的原则安排实践课内容。
3.2.2改革实践教学形式
对于技校学生中药材的鉴定技术的培养,仍然以性状鉴定和显微鉴定为主,充分利用中药标本和饮品,全天开放中药标本室以供学生识别训练;用多媒体课件将整体图像与局部放大图像有机结合的方式帮助显微结构的观察和鉴定。另外,学校应根据现有实验条件开设一些比较前沿的中药鉴定技术和方法,如气相色谱(GC)、红外色谱(IR)、高效液相色谱(HPLC)等,以开阔学生的视野,同时这也是未来中药鉴定专业人才的必备素质。
关键词:中药鉴定学;项目化课改;高职
中图分类号:G712 文献标志码:A 文章编号:1674-9324(2013)51-0042-02
近年来,高职教育改革正如火如荼地进行着,教改的核心基本都围绕从原来传统的传授知识向着提高学生技能的方向展开,其中本院正在实施的“以能力为本位的项目化课改”就是其中很重要的一种方法。项目化课改的具体实施就是以项目为载体,以学生从完成项目的过程中学习知识和技能,项目化课程的设置一般以培养学生的实际应用能力为主要目标,围绕与专业相应的职业岗位中的具体工作任务(或项目),组织课程教学内容,并以完成具体的工作任务为主要教学方法和学习方式的课程模式。在项目化课改实施的不同课程中所遇到的问题各不相同,本文主要围绕《中药鉴定学》的课改谈几点思路。
一、《中药鉴定学》的学科地位和重要性
《中药鉴定学》是药学专业的一门专业基础课程。是研究中药的来源、生产、采收加工、化学成分、真伪鉴别、品质评价、资源开发、药效、药理及临床应用等方面的综合性应用学科。本专业的毕业学生就业岗位主要是药厂、连锁药店、医院、药房药库和药材公司的生产、质检、调剂等岗位,岗位的性质决定他们将成为医药行业的一线工作人员,在工作中会直接用到中药鉴定的知识[1],因此学好中药鉴定知识和技能就尤其重要了。
二、高职高专类药学专业的人才培养目标
高等高专类的学校主要是培养技术性应用型人才,而高职类药学专业主要是培养应用型医药人才,而不需要培养研究性人才[1]。因此是重技能而非重知识。而近些年由于各方面的原因,生源质量略有下降,在这种情况下,要完成这个教学目标,如果沿用原有的方法,势必很困难。
三、《中药鉴定学》课改的必要性
近些年,高校毕业生就业压力逐年增大,而高职高专类的学生如何在这样高度的竞争环境中取胜成为当前高职教育需要思考的问题。为了使学生能符合用人单位要求,具备适应岗位需求的技能,这就要求我们的学校必须进行人才培养模式的变革,课程改革已经势在必行了。事实上,通过熊英[2]等人的分析可以看出《中药鉴定学》的教学方法近年来开始已经多样化,主要从传统的“填鸭式”教学转变为实践性教学,学生由被动的吸收知识变为主动的获取知识,由以前的“学完做”到现在“做中学”。我院结合目前学生的社会就业压力大、就业单位对学生对技能要求高等实际情况,对原有的传统教学方法进行“项目化课改”。而《中药鉴定学》作为药学的专业主干课程之一,它的项目化课改也关系到整个专业的教学目标能否顺利实现的问题。
四、《中药鉴定学》项目化的课程设计
1.课程目标设计。以职业能力为主线,立足于本专业。以能力目标、知识目标和素质目标三种同时互补与共进。其中能力目标为重点,以学生能完成具体任务为终结,知识目标是基础,一般不单独灌输给学生,而是融入到做中讲解,做中学,素质目标是一个综合和提升目标,主要以在做项目的同时,培养学生的团队综合能力、职业道德修养等。
2.课程内容设计。《中药鉴定学》的课程内容设计是在对原有课程内容整合的基础上,按工作实际、工作过程的序化和拓展,设置出有挑战性、趣味性和创新性的具体项目。综合目前学生的工作实际需要课程设置如下项目:
3.项目实施和分组讨论。每个项目在具体实施时分组进行,每个小组5~6人,在项目实施前,学生需要对即将要完成的项目进行准备,包括资料的查询、整理,这当中包括文字、课件甚至是视频,还有实地考察,这些工作都在课外进行。在上课时先小组分组汇报及讨论,再开始进行具体项目实施,实施完毕以后,小组提问讨论和教师点评,完成相关表格。
4.对项目结果进行考核和对设计的教学目标进行反思。在项目实施过程中及项目完成之后,完善的考核方案是对成果的直接准确的反馈。尽可能将能力、知识和素质考核融于项目完成过程中及项目完成之后。在具体实施《中药鉴定学》上述项目时,将考核分成三个部分:学生自评、小组互评和教师评价,分值比例分别占20%、20%和60%,项目考核的成绩作为学生期末最后成绩的重要组成部分。这样可以实现学生的成绩不仅限于期末理论考试,更注重实际实践学生的表现和成绩。
参考文献:
[1]李飞艳.高职高专院校中药鉴定学实验教学与操作技能考核机制探讨[J].卫生职业教育,2009,11(27):113-114.
中图分类号:G42
文献标识码:A
文章编号:1673-7717(2007)04-0806-01
中药历史悠久,并且具有疗效好、毒副作用小的特点,因此很受广大患者欢迎,有很大的市场,这就导致了一些不法药贩制假贩假,以假冒伪劣的药材冒充正品,来追求经济利益;同时由于中药人员素质低下,真伪不辨等原因导致品种混乱,引起中药质量下降,影响了临床用药。由此可见,提高中药人员的综合素质,对把握中药质量,保证临床用药安全、有效是十分重要的。
中药人才的培养是长期理论教育和实践经验相结合的结果,而目前中药人才主要依靠学校的培养,实践中的锻炼,因此学生在学校期间如何结合实际进行教育是十分重要的。要达到这个目的,就要求教师在教学过程中,既要教授学生们理论知识,又要与中药市场相结合教授鉴别方法和技能,才能培养出能很快适应市场需要的综合性人才。为了达到此目的,笔者在《中药鉴定学》教学过程中采取了如下的教学手段和方法。
1教学方法
1.1课堂讲授由于《中药鉴定学》总论部分主要介绍了概念、任务、鉴定方法和当前新技术、新方法等内容,因此这部分主要采取教师讲授为主,在讲授基本理论的同时,也接受一些当前中药鉴定的新技术和新方法,为以后更进一步的学习打下基础。如生物效应法、中药指纹图谱法、电泳分析法、分光光度法及基因鉴定法等。
以基因鉴定法为例,主要讲授的内容有DNA(去氧核糖核酸)遗传标记鉴定法。DNA分子是有G、A、C、T 4种碱基构成,物种遗传上的差异主要表现在四种碱基排列顺序的不同,比较物种间DNA分子的遗传多样性的差异来鉴别物种就是DNA(去氧核糖核酸)遗传标记鉴定法。特点:遗传的稳定性;遗传的多样性;化学的稳定性。方法①聚合酶链式反应(PCR)。②限制性内切酶酶切片段长度多态性(RFLP)。③随机扩增多态性DNA(DNA,RAPD)和任意引物两种技术。④DNA测序方法。应用:野生和栽培。道地和普通药材。
通过上述的讲授,使学生在掌握基本理论的同时,了解当前中药鉴定技术的发展情况。
1.2互动式教学《中药鉴定学》是一门实践性很强的应用性学科,它要求学生们要有直观认识,需要大量的中药材真伪品标本的对照学习,因此在教学过程中主要采取了如下的方法:①以学生为主体,就是将学生划分成几个小组,将本堂课要讲授的中药材标本发下去,让学生对照书本学习,归纳出鉴别要点,教师根据学生们的讲述进行归纳总结;②以教师为主体,以学生为辅,先让学生们反复观看真伪品标本,然后教师提问。这样可以加深学生们对中药材鉴别要点的掌握和理解。
1.3讨论式教学为了提高学生们的鉴别能力,使学生们能够了解中药市场的现状,适应社会需求,教师经常到中药市场收集混淆品和伪品,也让学生们利用业余时间到市场去了解市场情况,对于一时难以鉴别的中药,让学生们查资料,作各种鉴别,然后互相讨论,达到鉴别的目的。如有的学生就利用业余时间到中药市场了解情况,然后请老师一起到现场,受到了良好的效果。
1.4开放式教学由于中药鉴定是一个长期而艰巨的任务,其实践性很强,因此必须充分的利用现有的条件,便于学生们的学习。①开放实验室,要想学好中药鉴定学,必须接触实际,而开放实验室能够保证学生接触大量的中药标本,同时补充实验课时间不足的问题,进行显微鉴别和理化鉴别的技能锻炼,提高学生动手的能力,在给2002级讲授该课程时,就进行了40多学时的实验室开放,收到了良好的效果。②开放时间,主要体现在两个方面,一是每周确定2课时的辅导时间,以学生自学为主,老师辅导为辅,二是老师的时间开放,学生可以随时随地向老师请教,包括学生在市场发现一时难以鉴别的中药真伪品,都可以请老师到市场现场鉴别。③利用课余时间,带领学生到大黑山进行野外教学,使学生能够更好地掌握其形态鉴别、生长环境、采集时间、加工方法、资源保护、开发利用等方面的知识。
2教学手段
2.1利用多媒体课件《中药鉴定学》由于实践性很强,而标本又有限,为了使学生能够更好的学习和掌握中药鉴定的基本方法,利用计算机辅助教学,能形象而真实的展现出中药的鉴别要点,提高教学质量。为此我们根据国家“十一五规划教材”《中药鉴定学》制作教学课件,该课件包含了《中药鉴定学》所有的药材,以彩色图片为主,主要内容有来源、性状鉴别要点,显微特征、伪品。在教学中受到了较好的效果。
2.2利用创新和科研为了提高学生们在这方面的科研能力,让学生们加入到创新和科研当中,通过创新和科研提高学生们科研意识以及了解和掌握科研方法,以提高学生们的综合素质。
根据近十年来湖南中医药高等专科学校中药学专业开展校企合作订单班的历程,从签订联合办学协议、制定人才培养方案、共建“双师型”师资队伍、共建中药实训基地、共同参与学生管理、共建班级文化、共同参与教学质量考核等方面总结校企合作订单班办学的实践情况,并结合实际工作经验,对开办校企合作订单班的一些问题进行思考,提出相应的对策和建议。
关键词:
高职高专;校企合作;订单班
《国家中长期教育改革和发展规划纲要(2010-2020年)》中指出:发展职业教育是推动经济发展、促进就业、改善民生、缓解劳动力供求结构矛盾的关键环节。高职高专职业教育要以服务为宗旨,以就业为导向,实行工学结合、校企合作、顶岗实习的人才培养模式[1]。校企“订单班”逐渐成为许多高职高专院校的共同选择。近十年来,湖南中医药高等专科学校药学系中药学专业,根据工学结合、校企合作一体化人才培养的需要,在校企合作订单培养方面开展了一系列工作,为校企合作订单培养深入开展奠定了基础,对开办校企合作订单班的一些现实问题提出了相应的对策和建议。
一、中药学专业校企合作订单班的实践情况
(一)校企签订联合办学协议
订单班的办学宗旨是服务社会和行业,为合作企业输送高质量技能型人才。中药学专业是我校省级特色专业,在开展校企合作订单班办学问题上,专业委员会事先制定校企合作管理制度,在选择合作办学的企业时,根据企业的发展规模、人才需求等情况进行调研和协商。本着校企资源共享,互惠共赢和产学结合、工学结合的原则,校企双方同意并签订联合办学协议,协议内容涵盖培养层次、学制、专业、人数、订单班人才培养方案制定、学生管理、奖助学金管理等,明确校企双方在订单班培养方面的责任、权利和义务。
(二)校企共同制定人才培养方案
人才培养方案是培养学生、组织教学的指导性文件。订单班的人才培养方案则根据企业的岗位技能要求、结合教育部的有关文件规定和学校具体情况,由校企双方共同制定,总体上既体现高职高专教学特色、又体现企业文化、管理模式和企业运营特点,在课程设置、学时、理论和实践教学安排、实习环节等方面充分体现校企合作订单培养目标,而不是在原人才培养方案进行简单地修改。
(三)校企共建“双师型”师资队伍
一流的职业教育,取决于一流的职教师资。通过校企合作,改变目前高职高专院校在教师来源上以高校毕业生居多,缺乏行业工作经历的局面[2]。通过校企合作,加强中药炮制、中药鉴定、中药药剂,药品经营与管理等中药学专业课程的实践比例,提高专业课程对接社会岗位的必需内容,引入企业高工,在校内实训基地指导学生,同时定期和校内专任教师开展专业技能交流;学校安排教学经验丰富的教师对企业兼职教师开展教学能力培训,也为企业人员考取教师资格证提供支持,学校也大力支持专业教师利用寒暑假到不同企业进行每年不低于两个月的实践学习。通过上述措施,建立了一支专兼结合、专业理论扎实、实践能力强的校企“双师型”队伍。
(四)校企共建中药实训基地
专业实训基地是集教学、职业培训、职业技能鉴定和技术服务为一体的多功能职业教育中心[3]。我校中药学专业实训基地是中央财政支持的实训基地,也是校企合作示范基地,通过校企合作共建方式将原校内实训基地进行改造,彻底打破原单一实训内容的实验室格局,建立体现工作环境、岗位能力的综合实训基地[4]。实训基地的校外师资主要来自合作企业的业务骨干、医院专技人员。实训基地按工作环境布置,如千金药业将社会药房模式直接引入到原校内模拟药房,如和附属医院药剂部成立炮制加工车间,承接合作单位的代加工、和部分炮制任务,通过学生在药房实训,在炮制车间实训,学生既能在指导老师带教下学习岗位知识,又能通过自己所学专业知识服务患者,将人才培养方案中的日常教学实训和企业岗位所需知识和技能相融合,实现校企双方、教学与生产、学生与职业岗位“近距离”接触[5]。
(五)校企共同参与学生管理
为了更好地服务于学生,充分体现校企合作管理特色,中药学专业订单班建立了“双班主任制”学生管理队伍。由学校和企业各派一名人员参与学生管理。学校班主任负责班级日常事务和学生生活进行管理,企业班主任负责传授学生专业知识、企业文化和协调企业与学生、学校相关事务,校企班主任通过深入学生群体,实行因材施教,对学生的培养更加具有针对性,更加能够掌握学生的综合表现,为学生进入合适岗位进行前期介入培养。通过“双班主任制”管理,对订单班学生从思想教育、专业教育和职业教育等方面进行培养和塑造,将学生管理由“批量式”培养转变为“个性化”培养[6]。这也充分调动了订单班学生学习的积极性和主动性,进一步培养了学生的专业和职业认同感,有利于学生在进入企业前具备中药学专业各岗位基本技能和创新能力。
(六)校企共同建设班级文化
班级文化建设是学生培养环节中非常重要的一部分。订单班是校企双方联合办学,班级文化建设上有其自身发展特点[7]。首先体现在班级的名称上,通过企业冠名班级名称,如老百姓大药房班、九芝堂班、千金湘江班等,将企业名称融入班级中,体现与普通专业班级的不同。其次,企业文化进入教室,如在订单班开班前,由学校和企业人员将教室适当布置,通过KT板将企业简介、发展理念、产品等内容在教室墙面展示,定期出企业动态的黑板报,建立微信交流群。让企业文化进课堂,如在人才培养方案的制定中,每个学期安排一门企业课程,讲解企业文化和发展规划、员工养成及产品介绍等,如《初识老百姓》、《千金药业用人之道》等课程。同时,在学生穿着上,合作企业为订单班学生量身定做了印有企业标志的衣服,用于学生出席校企双方的活动或比赛,潜移默化中让学生了解企业、热爱企业。
(七)校企共同参与教学质量考核
根据订单培养协议,企业全程参与订单班的教学质量考核工作,这有利于订单班教学质量的诊断和改进[8]。订单班学生的每学期考核分为学校考核和企业考核两部分。在结束理论学习并参加完学校考核后,合作企业组织公司专业人员组成订单班考核小组对学生进行企业知识考核和实践技能考核,结合学校考试成绩、操行表现等确定学生名次,为后续淘汰及奖助学金评定提供依据,只有通过校企双方验收合格的学生才能进入企业实习。
二、思考
在校企合作订单培养问题上,我认为考察合作企业一定要慎重,避免用工需求量小、发展不稳定、社会责任感差的企业,以免为后续合作及学生实习和就业带来不稳定的因素。在修订人才培养方案方面,要在责任、权利、义务上体现校企共同参与,企业不能什么都不管,一定要在课程设置上体现企业课程,并且纳入学分管理,进行考核。在师资队伍建设上,学校要充分利用校企合作这一优势,选派骨干教师到企业实践锻炼、提高实践技能。在学生管理方面,以前采取辅导员直接管理,与普通班级无异,由于辅导员工作压力大,管理力不从心,导致合作企业对订单班缺乏管理,学生无法了解企业的文化和对岗位的要求,对企业的认同感也较差,进入岗位后还需要重新学习适应工作的环境,通过建立校企“双班主任制”,收到了很好的效果。总之,校企合作订单班工作需要学校和企业制定良好的合作制度、共同参与、共同管理、缺一不可。
参考文献:
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[2]王瑜,夏明兰.深化校企合作拓展高职院校“双师型”师资队伍建设途径[J].改革与开放,2010(6):141-143.
[3]吕美巧.基于订单班的高职校内实训基地建设与研究[J].实验技术与管理,2015(10):210-212.
[4]许良葵,聂阳.校企合作视野下高职校内中药实训基地建设的探讨[J].卫生职业教育,2016(10):11-13.
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[6]孙朝阳,杨琰.高职院校校企合作“订单班”学生管理工作研究———以三门峡职业技术学院为个案[J].三门峡职业技术学院学报,2010(3):10-12.
[7]金根木,经莉莉.高职院校校企合作班班级文化建设实践[J].芜湖职业技术学院学报,2010(4):62-63.
【关键词】 蛤蟆油;伪品;组织学;鉴别
1中药蛤蟆油是来源于脊索动物门两栖纲蛙科(Ranidae)动物中国林蛙Rana temporaria chensinensis David雌蛙的干燥输卵管。又称为哈什蚂油哈土膜油,其性平,味甘、咸,具有补肾益精、养阴润肺的功效。蛤蟆油的有关记录可以追溯到在宋代苏颂所著的《本草图经》及李时珍著作的《本草纲目》中所载的山蛤,到目前已有近百年的历史了。中国林蛙主产于黑龙江、吉林、辽宁等省,近年来,中国水质的污染和森林资源的破坏形式日益严峻,而且蛤蟆油的特殊来源注定其产量较低,随着这些形势的加剧已经不能满足临床不断增大的应用需求量,严重影响了中药蛤蟆油的正常供应。现笔者对林蛙和蟾蜍伪品的显微鉴别和紫外灯光谱法的鉴别,分析报道如下。
1 蛤蟆油
1.1 来源:中药蛤蟆油为9~11月间在采收于东北的中国林蛙,林蛙4月下旬到9月上旬生活在潮湿的山坡树丛中,9月底至次年3月间营水栖生活。捕捉的林蛙以降霜期进行捕捉最好,选肥大的雌蛙,从其口部穿过,连成一串,悬挂风干,剥油前先用700C热水浸烫1~2min,然后立即捞出装入麻袋中,闷润过夜后次日从用刀从腹部剥开,取出输卵管,去尽卵子及其他内脏,通风处阴干。或者可以将雌蛙烫死后,直接剖腹取油,干燥,所得的药材色泽、气味较好。
1.2 林蛙形态特征:中国林蛙外形与青蛙相似,雌蛙的体长为7~9cm,雄体较小,头较扁平,长宽相等或略宽。前肢较短壮,指细长,后肢长、胫长超过体长之半,足与胫等长或略长。蹼发达,皮肤上有细小痣粒,腹面皮肤光滑。其皮肤随着季节的变化,颜色也在变化,如夏季显黄褐色,秋冬季显褐色。
1.3 药材性状鉴别:蛤蟆油呈不规则的块状,弯曲而重叠,长1.5~2cm,厚1.5~5mm,表明黄白色,呈现脂肪样光泽,偶尔带有灰白色薄膜状干皮,手摸有滑腻感。在温水中浸泡其体积可膨胀10~15倍。气腥,味微苦,嚼之有黏滑感。以色黄白,有光泽,片大肥厚,无皮膜者为佳。
1.4 显微鉴别:蛤蟆油加碘酒染色后,显微镜观察显现金黄色,腺体细胞肥大,呈长椭圆形,细胞壁明显,排列整齐。其细胞核呈椭圆形,位于细胞中间稍偏。腺体上端狭窄,底部宽,呈现圆锥形。
2 蟾蜍油
2.1 来源:蟾蜍油来源于蟾蜍科动物中华大蟾蜍的干燥输卵管。
2.2 蟾蜍形态特征:中华大蟾蜍外形和蛙相似,体长大于10cm,分明,颈部明显,无尾、躯干粗短。体粗壮,头宽大于长,鼻孔近吻端,眼间距大于鼻间距,前肢大于后肢之半皮肤腺瘤状突起明显,大小不均等,腹部的突起较小,皮肤极粗糙,头部较光滑,有大且长的耳后腺。体色随其生长期的不同也不尽相同,雌雄体的颜色也不相同。
2.3 药材性状鉴别:呈粉条状,弯曲盘旋或被压成块状,条形之间有明显可见的白膜相连。质坚硬有弹性,无光泽,乳白色或黄白色,断裂后容易呈段状,气味腥,味甘辛,微有麻舌感,嚼之有黏滑感。
2.4 显微鉴别:蟾蜍油细胞较小,排列不整齐,细胞核接近圆形,位于腺体内腔的一侧。其腺体的开口凹陷较明显,有较少的细小的纹理,显微镜下显示光亮的鲜艳色。
3 紫外光谱法鉴别
3.1 材料:安捷伦UV8453型分光光度计,正丁醇、石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、95%乙醇,所有的试剂均为分析纯试剂,药品经株洲药检所鉴定。
3.2 方法和结果:去蛤蟆油和蟾蜍油干燥药材粉末各精密称取0.2g,超声波提取,滤过,配成供试溶液,放置备用。取相应的试液作为空白液,用分光光度计测定各样品的紫外吸收,观察记录。
表一 正品和伪品蟾蜍油紫外光谱图峰位比较
药材 紫外光谱吸收值
石油醚 正丁醇 醋酸乙酯 三氯甲烷 95%乙醇
正品 213±3
227±1
268±2 234±3
272±2 269±2
253±1 243±2
275±1 203±2
230±4
伪品 268
214
269
236
268 245
268
243
274 394
204
231
蛤蟆油正品的特征吸收峰值为213±3nm为最强的吸收峰,在227±1nm处有一个特征吸收峰和268±2nm出有一个较弱的吸收峰,有时这两个吸收峰会被掩盖住而不易被观察出来。伪品的特征峰均不能全部的符号正品的峰形,总是有一处或者更多的不同。
4 讨论
近年来,由于自然环境的改变和临床用药量的加剧都促使了蛤蟆油价格的上涨和资源的紧缺形势,导致其不正常销售运作。正品蛤蟆油的来源正规,其性状特征都符合国家药典中的规定,对其显微特征进行鉴别可以观察其组织内的细胞排列方式及其结构。而各种各样的伪品药材的特征则各有特点,且都不同于正品药材或者是不能完全符合正品药材在药典中的规定。
在紫外光谱的检测中,正品蛤蟆油的在不同极性的有机溶液中的溶解不同,但是经过超声波的提取和反复检测,其峰形基本可以确定,东北各地区的正品蛤蟆油的重要成分相似,差异也只是存在于某些少量的成分中,其不同的含量所导致。正品蛤蟆油和伪品的紫外光谱图显示的图谱表示,各自的化学成分组成成分上虽然也有相似的部分,但是其又有很多的不同之处,且那些显示为相同成分的组分含量也不能完全符合正品的要求,因此,这些差异可以将正伪品蛤蟆油准确有效的鉴别出来。本次实验结果中,正品蛤蟆油和伪品在各个溶剂中的提取液图谱中,每个峰的峰形、峰位置和吸收峰的书面均存在有明显的差异,具有肯定的鉴别依据,可以达到鉴别真伪品的目的。
总而言之,本次实验研究结合传统的性状、显微等组织鉴别法和紫外光谱等组织鉴别方法,可以有效的将正品蛤蟆油和伪品鉴别出来。
参考文献
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关键词:中药美容保健品;药效学指标;测定方法;进展
我国是研究美容抗衰老最早的文明古国之一。几千年来,中医药学家和劳动人民在长期的医疗实践和日常生活中,在延缓皮肤衰老、美化容颜方面积累了丰富的经验,并逐渐形成了独具特色的传统医学美容保健体系。其中中药美容保健品是这一传统医学宝库中最为引人注目。我们在参阅大量的医药文献的基础上,结合长期从事中药新药与美容保健品的开发经验,综述了中药美容保健品的药效学指标与测定方法研究进展,旨在为我国的中药美容保健品的研究与开发提供一些有价值的思路与方法。
1 中药美容保健品的定义
美容中药作为传统医学的重要治疗工具[1-2],备受历代医家和养生学家的推崇。目前,中药美容在传统医学中占有举足头重的地位,这也是我们今天研究和开发中药美容保健品的取之不尽的源泉。所谓美容中药是指用来调整脏腑功能,美化肌肤,延缓皮肤老化的药物[3]。从广义上讲,美容中药主要是自然界中存在的天然药物,当然也包括食物。中药美容保健品,是在中医药理论指导下,运用现代先进的制备工艺技术研制而 成的美容保健制剂。
2 中药美容保健品的主要药效学指标与测定方法
2.1 抗氧化实验指标
自由基导致脂质过氧化,引起细胞破裂和进行性病变是衰老的主要原因。因此,自由基学说已被公认为人类衰老机制现论中具有代表性的学说之一。
2.1.1 抗氧化酶活性的测定
常用邻苯三酚法,即在碱性条件下,能迅速自氧化,释放出O2-,生成带色的中间产物,其反应开始后溶液先变成黄棕色,几分钟后遂转绿,几小时后又转变为黄色。中间产物在420nm时有强烈的光吸收,在有SOD存在时,由于它能催化O2-与H+结合生成O2和H2O2,从而阻止了中间产物的积累,因此通过计算就可求出SOD的活性。
2.1.2 老化代谢产物测定
(1)过氧化脂质(LPO)测定
LPO含量测定,是国际上公认的看衰老指标之一,也是研究美容抗衰老药物作用机制的主要检测指标。主要检测方法为荧光法,即LPO的二级分解产物丙二醛与硫代巴比妥酸反应生成红色化合物,此红色化合物是荧光性物质。四乙氧基丙烷与LPO在同一条件下能进行化学反应产生丙二醛,因此用四乙氧基丙烷作为标准物质。
(2)脂褐素(LF)的测定
目前,脂褐素已被公认为生物衰老及皮肤老化的主要特征之一。而许多养颜法药物如菟丝子、玉竹、黄精、何首乌、五味子等均具有清除自由基、减少组织细胞内脂褐素含量的作用。脂褐素的测定方法主要有荧光法,即待测样品中的脂褐素经有机溶剂提取后,其提取物在360nm波长激发下,于发射波长450nm处可测得其荧光。以硫酸奎宁作为荧光相对强度的标准,从而计算出样品所含脂褐素的荧光单位数。
2.1.3 胶原蛋白和羟脯氨酸(Hyp)的测定
美容中药及方剂具有抗老防皱、增加皮肤弹性的作用,应用胶原蛋白等指标,从而证明美容中药的作用机理。一般采用P-DMAB比色法,即将待测样品加酸,在高温下水解,可使结合状态的羟脯氨酸游离,用氯胺T法将其氧化而形成吡咯环的氧化物,然后用过氯酸终止氧化,以对二甲氨基甲醛作为显色剂,生成紫色化合物,于562nm处进行比色测定。
2.1.4 酪氨酸酶活性测定
据研究,许多美容中药对酪氨酸酶活性有较强的抑制作用,如川芎、防风、叶本、独活、柴胡、白芷、当归、乌梅、楂皮、蔓荆子、白头翁、附子、大黄、益母草、皂荚、黄连以及有效成分大黄素等,其抑制率在60%-100%之间。而某些中药如补骨脂及制剂则能提高人体内酪氨酸酶的活性,促进黑色素的合成,从而能有效的治疗白癜风。一般采用比色法,即酪氨酸酶的化学本质是铜蛋白,其酶蛋白借巯基与铜离子结合,从而催化多巴及5-s-半胱氨酸生成黑色竖。其生成量大小与酶活力的大小呈正比。
2.2 内分泌功能检测指标
现代医学认为,人体衰老与内分泌功能密切相关,并存在下丘脑-垂体-靶腺轴不同环节不同层次均有明显的衰减现象。而补肾填精,滋阴壮阳药物能有效地改变内分泌衰老症状,使人面色转红润、色斑消失、恢复青春、增强。可见,调节或延缓内分泌衰老,对于延年益寿、养颜嫩肤是大有裨益的。
2.3 免疫功能检测指标
就美容而言,人类皮肤的免疫功能在青年期表现最强,各种有害病菌一般不易引起疾病,而35岁以后皮肤由于胶原蛋白合成量日趋减少,DNA、RNA及蛋白质合成率下降,加上微循环障碍,以至于皮肤疏松,皮脂分泌减少,表皮生长因子下降,因而不能有效地防止细菌等有害物质的侵害,从而诱发各种皮肤疾病。因此,面部美容、皮肤病与机体免疫功能正常与否关系密切。在美容保健品药效学试验中,无论抗皮肤衰老制剂,还是治疗损容性皮肤病新产品,均应做免疫学试验。
2.4 补血药理实验指标
补血是养颜润肤的重要治则。补血药物的药效学研究是利用人工办法制作血虚模型,然后给模型动物灌服药物,测定用药前后血象变化,由此判定药物有无补血作用。
2.5 抗菌抗炎抗病毒试验
现代医学研究表明,有些皮肤是由于细菌、皮肤真菌或病毒所引起的感染。因此许多清热解毒、清热燥湿、祛风止痒类中药如黄连、黄柏、黄芩、山桅、丹皮、白鲜皮、金银花、知母、板蓝根、等之所以能医治皮肤病,抗菌、抗炎、抗病毒可能是它们共同的作用机制,当然可能还包括调节免疫、改善微循环等其他作用途径。因此,开发和研制治疗损容性皮肤病的新药,抗菌、抗炎、抗病毒试验是必不可少的药效学指标。
3 结束语
美容中药的确切功效和现代研究成果,广泛地引起了人们的高度重视。中药美容保健品的药效学研究,是利用现代药理学技术和方法,研究美容中药及方剂的美容护肤作用及其作用机制的一门实验美容学科。由于我国美容实验研究起步较晚,许多方法与指标尚缺乏。我们根据自己多年来的研究实践,认为美容药物药理研究,应以中医药美容理论作指导,充分吸收现代抗衰老学说和实验方法,在整体、组织、细胞以及分子水平上揭示美容中药的作用与机理。药效学指标包括:抗氧化实验指标、内分泌功能检测指标、免疫功能检测指标、补血药理实验指标、抗菌抗炎抗病毒试验、皮肤止痒试验等,有的实验指标则通用,可根据新产品功能与主治特点来加以选择。总之,我们应当抓住机遇,迎接挑战,把我国的中医药美容事业发扬光大,开发出更多更好的美容保健品及药效学检测方法,为人类的健康美丽做出贡献。
参考文献
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[2]朱雷,余丽丽,张莎,等. 传统中医药及其原料在美容化妆品方面的应用研究[J].中国化妆品,2008,20:78-85.
关键词:剑叶龙血树;白藜芦醇;7,4’-二羟基黄酮;高效液相色谱法
DOI:10.3969/j.issn.1005-5304.2013.06.023
中图分类号:R284.1 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2013)06-0061-03
剑叶龙血树为百合科植物剑叶龙血树Dracaena cochinchinensis (Lour.)S.C.Chen的含脂木材,收载于《广西壮族自治区壮药质量标准》第一卷,壮药名为榧勒垄,具有活血散瘀、定痛止血、敛疮生肌等功效,用于跌打损伤、瘀血作痛、妇女气血凝滞、外伤出血和脓疮久不收口[1]。现代研究表明其主要含有黄酮类、二苯乙烯类、甾醇类、皂苷类等化合物,具有抗菌、抗炎、抗氧化活性,镇痛、止血、活血等药理作用[2]。目前,剑叶龙血树用作提取龙血竭的原料,其质量控制多集中在测定二氢查耳酮的代表性成分龙血素A、B,尚未见测定其中黄酮类、二苯乙烯类代表性成分的研究报道[3]。本研究建立同步测定剑叶龙血树中白藜芦醇和7,4’-二羟基黄酮含量的方法,
为全面评价其质量提供依据。
1 仪器与试药
Waters 2695高效液相色谱仪,PAD二极管列阵检测器(美国Waters公司);BUG-40超声波清洗仪(上海Branson公司);AL204电子分析天平(瑞士梅特勒)。
剑叶龙血树均采自广西崇左,经作者邹节明鉴定为百合科植物剑叶龙血树Dracaena cochinchinensis (Lour.)S.C. Chen;白藜芦醇对照品(批号111535-200502)、7,4’-二羟基黄酮对照品(批号111787-201002)均由中国药品生物制品检定所提供。
2 方法与结果
[关键词] 黄连饮片;HPLC;盐酸药根碱;盐酸非洲防己碱;盐酸表小檗碱;盐酸黄连碱;盐酸巴马汀;盐酸小檗碱;含量测定;药效学;主成分分析;分层聚类分析
[Abstract] To establish a method for determining the contents of six alkaloids (jatrorrhizine hydrochloride,columbamine hydrochloride,epiberberine hydrochloride,coptisine hydrochloride,palmatine hydrochloride,berberine hydrochloride) in six types of Coptidis Rhizoma pieces (crude pieces,ginger juice stir-fried pieces,vinegar stir-fried pieces,wine steamed pieces,wine stir-fried pieces,evodiae juice stir-fried pieces) by RP-HPLC,and explore the relationship with the curative effect of traditional Chinese medicine (TCM) and pharmacodynamics results. The chromatographic column was Welch XtimateTMC18 (4.6 mm×250 mm,5 μm),with 0.1% triethylamine solution (adjust pH at 10 with ammonium bicarbonate and ammonia) as mobile phase A and acetonitrile as mobile phase B for gradient elution (0-15 min,10%-25%B;15-25 min,25%-30%B;25-40 min,30%-45%B) at a rate of 1.0 mL・min-1. The column temperature was set at 30 ℃,and the wavelength was set at 270 nm. The six alkaloids showed a good linear relationship within the range of 0.85-16.96 mg・L-1 (r=0.999 7),1.25-24.96 mg・L-1 (r=0.999 9),2.05-40.96 mg・L-1 (r=0.999 9), 3.65-72.96 mg・L-1 (r=0.999 9),2.88-57.60 mg・L-1 (r=0.999 8),and 13.25-264.96 mg・L-1 (r=0.999 6) respectively. The average recoveries (n=9) of the six alkaloids were 102.4% (RSD 1.2%),101.8% (RSD 1.3%),100.3% (RSD 1.8%),100.7%(RSD 1.8%),101.2% (RSD 1.5%) and 97.90% (RSD 2.0%) respectively,and their average contents were 3.55,4.49,9.12,19.17,15.69,62.56 mg・g-1,respectively. This determination method was accurate and repeatable,which could be used for the content determination in six types of Coptidis Rhizoma pieces. Data analysis on contents determination and preliminary pharmacodynamics results was conducted by using principal component analysis (PCA) and hierarchical clustering analysis (HCA). The analysis results showed that three types of Coptidis Rhizoma pieces (wine steamed pieces,wine stir-fried pieces,and evodiae juice stir-fried pieces) had significant differences with crude pieces,and the wine steamed Coptidis Rhizoma pieces showed most difference with crude pieces especially,mainly related to triglyceride (TG) and fasting blood glucose levels (FBG) in serum. In addition,columbamine hydrochloride was most affected among the six alkaloids. Those three types of Coptidis Rhizoma pieces (wine steamed pieces,wine stir-fried pieces,and evodiae juice stir-fried pieces),had more advantages for "anti-diabetes" in TCM clinical application,especially in the treatment of diabetic hyperlipidemia.
[Key words] Coptidis Rhizoma pieces;HPLC;jatrorrhizine hydrochloride;columbamine hydrochloride;epiberberine hydrochloride;coptisine hydrochloride;palmatine hydrochloride;berberine hydrochloride;content determination;pharmacodynamics data;principal components analysis (PCA);hierarchical clustering analysis (HCA)
doi:10.4268/cjcmm20162416
黄连系毛茛科植物黄连(味连)Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连(雅连)C. deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao、云连C. teeta Wall.的干燥根茎,以味连为主流品种。《中国药典》2015年版收载的黄连饮片有生品饮片、姜(炙)饮片、酒(炙)饮片、萸(炙)饮片[1],此外历代本草文献还收载了其他黄连饮片,如明代《本草纲目》收载了醋(炙)饮片、酒蒸饮片等饮片。
黄连饮片中主要含有小檗碱、巴马汀对照品、药根碱对照品、黄连碱等多种生物碱成分,其含量测定方法主要有薄层扫描法[2-3]、高效液相色谱法[4-7]等。现今文献报道的HPLC测定黄连及其炮制品中生物碱含量的方法,最多同时测定6种主要生物碱含量[7]。本文采用RP-HPLC对6种黄连饮片中的6种主要生物碱的含量进行同时测定,各生物碱峰分离良好,方法准确度高、重复性好,为黄连生品饮片及炮制品饮片的质量控制提供了依据,同时结合黄连“治消渴”药效学结果,进行了谱-效关系的主成分分析、分层聚类分析,探索中医临床用于“治消渴”(防治糖尿病)用途的黄连饮片与其他黄连饮片的差异性及其来源。
1 材料
日本岛津LC-10A高效液相色谱仪(LC-10ATvp输液泵A,B,AT-330柱温箱,SPD-10Avp紫外检测器,7725i手动进样器,N-2000色谱数据工作站,日本岛津公司);CQ-250型超波清洗器(上海必能信公司,功率200 W,频率40 kHz);BP211D电子天平(1/10万,德国Sartorius公司);ULUP-I-10T超纯水机(成都超纯科技有限公司)。
盐酸药根碱对照品、盐酸巴马汀对照品、盐酸小檗碱对照品(均由中国食品药品检定研究院提供,均为供含量测定用,批号分别为0733-200005,110732-200506,110713-200609);盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱(均由重庆市中药研究院中药药物化学研究所罗维早研究员提供,面积归一化法RP-HPLC检测其纯度>98%)。乙腈为色谱纯,甲醇、盐酸、碳酸氢铵、氨水、三乙胺等其他试剂均为分析纯,水为超纯水。生品、姜炙、醋炙、酒蒸、酒炙、萸炙6种黄连饮片各6批,由成都中医大惠康药业有限公司提供,按照《中国药典》2010年版一部附录规定的炮制方法,采用同一批次黄连药材(味连)加工制备而成,味连药材经成都中医药大学张艺研究员鉴定为黄连(味连)C. chinensis。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Welch XtimateTMC18(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱;流动相A-0.1%三乙胺溶液(用碳酸氢铵和氨水调pH 10),流动相B-乙腈,梯度洗脱(0~15 min,10%~25% B;15~25 min,25%~30% B;25~40 min ,30%~45% B);检测波长270 nm;流速1.0 mL・min-1;柱温30 ℃;6种生物碱的混合对照品以及6种黄连饮片HPLC图见图1。
1.盐酸小檗碱;2.盐酸巴马汀;3.盐酸黄连碱;4.盐酸表小檗碱;5.盐酸非洲防己碱;6.盐酸药根碱;A.混合对照品;B.生品饮片;C.姜炙饮片;D.醋炙饮片;E.酒蒸饮片;F.酒炙饮片;G.萸炙饮片。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸盐酸巴马汀、盐酸小檗碱对照品适量,以盐酸-甲醇(1∶100)分别制成质量浓度为1.060,1.040,0.256,0.456,0.480,0.552 g・L-1的溶液,做为对照品储备液,备用。分别精密吸取上述6种生物碱对照品储备液适量,以盐酸-甲醇(1∶100)分别制成质量浓度为16.96,24.96,40.96,72.96,57.6,264.96 mg・L-1的混合溶液,作为混合对照品储备液备用。
2.3 供试品溶液的制备
取本品(酒蒸饮片)粉末(过3号筛,下同)约0.1 g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加入盐酸-甲醇(1∶100)50 mL,密塞,称定质量,超声处理30 min,放冷,称定质量,用盐酸-甲醇(1∶100)补足失重,摇匀,0.45 μm滤膜滤过,取续滤液作为供试品溶液。
2.4 方法与结果
2.4.1 线性关系考察 精密量取6种生物碱混合对照品储备液0.5,1,2.5,5 mL置10 mL量瓶中,加盐酸-甲醇(1∶100)稀释至刻度,摇匀,制成不同浓度的混合对照品溶液。分别精密吸各混合对照品溶液各10 μL,按上述色谱条件,注入高效液相色谱仪,记录峰面积。以峰面积(Y)为纵坐标,各生物碱质量浓度(mg・L-1)(X)为横坐标,绘制标准曲线,计算相关系数(r)。结果表明,6种生物碱分别在0.85~16.96 mg・L-1(r=0.999 7),1.25~24.96 mg・L-1(r=0.999 9),2.05~40.96 mg・L-1(r=0.999 9),3.65~72.96 mg・L-1(r=0.999 9),2.88~57.06 mg・L-1(r=0.999 8),13.25~264.96 mg・L-1(r=0.999 6)呈现良好的线性关系。
2.4.2 精密度试验 精密吸取混合对照品溶液10 μL,重复进样5次,记录峰面积,结果6种生物碱峰面积的RSD分别为1.1%,0.96%,0.53%,1.8%,0.61%,0.61%(n=5),均小于2.0%,结果表明仪器精密度良好。
2.4.3 稳定性试验 按2.3供试品制备方法制备供试品溶液,分别于0,2,4,8,12 h进样分析,记录峰面积,结果6种生物碱峰面积的RSD分别为0.25%,1.7%,1.6%,1.4%,1.8%,1.6%(n=5),均小于2.0%,表明供试品溶液在12 h内稳定性良好。
2.4.4 重复性试验 取同一批号酒蒸饮片粉末,按2.3项供试品制备方法平行制备供试品溶液,记录峰面积,计算含量。结果6种生物碱含量的RSD分别为1.3%,1.1%,1.3%,0.83%,1.6%,1.2%(n=6)。结果表明供试品溶液的制备方法重复性良好。
2.4.5 加样回收率试验 取已知含量的酒蒸饮片粉末,取0.05 g(6份),精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入6种生物碱对照品溶液(以μg计)各169.6,200.0,512.0,980.4,816.0,3 372.8 μg,按2.3项供试品溶液的制备方法制成回收率测定样品,按上述色谱条件,注入高效液相色谱仪,记录峰面积,计算回收率,结果6种生物碱平均回收率(n=6)分别为102.4%(RSD 1.2%),101.8%(RSD 1.3%),100.3%(RSD 1.8%),100.7%(RSD 1.8%),101.2%(RSD 1.5%),97.90%(RSD 2.0%),表明本法具有较好的回收率。
2.4.6 样品测定 分别称取6种黄连饮片各6批样品粉末分别约0.1 g,按2.3项下供试品制备方法制备供试品,按上述色谱条件进行测定,测定6批样品中6种生物碱的含量,结果见表1。测定6种黄连饮片共36个批次的6种生物碱的平均质量分数分别为3.55,4.49,9.12,19.17,15.69,62.56 mg・g-1。
2.4.7 生物A含量-药效学数据分析 主成分分析(principal components analysis,PCA)是一种多元多维数据挖掘技术,通过具有一定相关性多维数据的降维处理,较少的互不相关的新变量(主成分)来代替原有的多个变量,尽可能多地反映原来变量的信息[8]。分层聚类分析(hierarchical cluster analysis,HCA)属于另一类基于定量分类学的数据挖掘技术,通过衡量不同数值变量间的相似性,将不同分组变量降维处理分类到不同的类,同类对象具有很大的相似性、不同类对象有很大的相异性。因此,PCA,HCA可以较好地处理本文的多维相关数据。
本文前期对6种黄连饮片进行了与“治消渴”作用有关的药效学研究[9],结果见表2,分别观察了6种黄连饮片对高浓度葡萄糖诱导的小鼠急性高血糖模型、四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠模型和链脲佐菌素联合高脂饮食诱导的糖尿病小鼠模型相关生化指标的影响[9];由于生物碱含量与药效学结果之间存在一定的相关性,通过适当的数据挖掘方法,可以发现其中的相关性;本文采用Unscrambler 9.7及SPSS 22多元数据统计学分析软件[10],对6种黄连炮制品中生物碱含量数据与“治消渴”作用有关的药效学数据进行主成分分析(PCA)、分层聚类分析(HCA),以优选发现“治消渴”作用相关的黄连饮片及其相关的主要生物碱成分,进一步指导临床用药。
但是2类数据(含量测定数据与药效学数据)之间的量纲单位、数量级决定了不可能进行直接分析、比较,必须采用适当的数据标准化变换对各指标数值进行无量纲化处理,以解决数据指标之间的可比性问题。常用的数据数据标准化有对数标准化、反正切标准化、偏差标准化、离差标准化[11-12],本文采用4种数据标准化方法对表1,2的原始数据进行数据标准化预处理(药效学各数据为逆指标,即数据越大药效越差,按要求预处理结果将指标的正负号对调),对主成分的方差贡献率进行了比较,结果见表3。
结果表明2种数据标准化方法(对数标准化、反正切标准化,其PC1的方差贡献率在80%以上),适合本文2类数据的预处理,其中优选对数标准化为本文适用的数据标准化方法,对数变换后结果的数值在[-1,1]内,各指标均处于同一数量级,适合进行综合对比评价,对数标准化变换后的数值见表4。
采用Unscrambler 9.7软件,对6种黄连饮片生物碱含量-药效学数据的对数标准化变换数据进行PCA分析,结果见图2,3,表5。图2表示经过降维处理后6种黄连饮片在二维空间的分布情况,图中横坐标表示每种黄连饮片的第一主成分得分值,纵坐标表示每种黄连饮片的第二主成分得分值,主成分1(PC1)解释了总变异(方差)的86%、主成分2(PC2)解释了总变异的9%,可以看出酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片为一类,生品饮片、姜炙饮片、醋炙饮片为一类,可以看出生品饮片与其他饮片(酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片)存在明显差异。图3,表5表示各数据变量与主成分的相关性,代表各数据变量的影响程度,可以看出C-TG,A-FBG,B-FBG对主成分1(PC1)的载荷最大,表明C-TG,A-FBG,B-FBG是6种黄连饮片的主要药效学差异,说明黄连饮片在治疗糖尿病高脂血症方面可能疗效较好,而具有较大影响的生物碱成分中是盐酸非洲防己碱。
同时,对表4的数值,采用SPSS 22数据统计学分析软件,对6种黄连饮片进行HCA分析,应用wards方法,生成dendrogram分层聚类谱系图,见图4。
由图4可知,HCA可将6种黄连饮片聚类分成2类:酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片为一类,生品饮片、姜炙饮片、醋炙饮片为一类,可以看出生品饮片与其他饮片(酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片)基于生物碱含量-药效学数据的对数标准化变换数据。
存在明显差异,其中酒蒸饮片与生品饮片差异最大,甚至可以单独聚合成一类,说明酒蒸饮片在6种黄连饮片中独具“个性”,在糖尿病及其并发症的防治方面,具有进一步深入研究的必要。
从PCA,HCA的分析结果可以看出,本文使用的这2种数据挖掘方法都能够为6种黄连饮片的分类提供一个可信的规律:生品饮片与其他饮片(酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片,其别是酒蒸饮片可以单独聚为一类)存在明显差异;酒蒸饮片是历代本草收载的饮片品种,6种黄连饮片中,生品黄连饮片与酒蒸黄连饮片之间存在最大的差异;对STZ 高脂复合小鼠糖尿病模型的血清甘油三酯(C-TG)、对四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型的空腹血糖水平(B-FBG)、对高浓度葡萄糖致小鼠急性血糖升高模型的空腹血糖水平(A-FBG)的影响是6种黄连饮片在药效学方面的主要差异。同时,PCA结果还提示,具有较大影响的生物碱成分是盐酸非洲防己碱,但是,该成分是否与糖尿病及其并发症防治的药效学结果密切相关,有待进一步深入研究。
3 讨论
文献[5-6]报道的HPLC测定的黄连及其炮制品的方法中多采用x子对色谱法,但是该条件下黄连中盐酸药根碱和盐酸非洲防己碱的分离度达不到要求,而且加入离子对试剂(《中国药典》2015年版一部黄连项下采用十二烷基硫酸钠)的操作及干扰比较复杂。本文与文献[7]均采用三乙胺为流动相改性剂,在碱性条件下对6种黄连饮片中6种生物碱进行分离,可将盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱完全分离,实现了同一色谱条件下同时测定6种黄连饮片中6种主要生物碱的含量。本文还考察了大连依利特C18色谱柱、Diamonsil C18色谱柱,结果表明XtimateTMC18色谱柱能够适应宽pH范围(其允许的范围为1.5~12),可以在碱性流动相条件下抑制生物碱成分的离子化,与离子对试剂有相近的效果,从而在XtimateTMC18色谱柱上实现了生物碱成分的良好分离,而前2种色谱柱可耐受的pH范围较窄(仅为pH 2~8)。
本文建立了6种黄连饮片中6种生物碱成分的含量测定方法,需要使用6种生物碱对照品,日常测定中常有生物碱对照品供应问题,为简化含量测定操作,以盐酸小檗碱为内参物s,用一测多评法进行了计算,结果表明盐酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸黄连碱、盐酸表小檗碱等4种生物碱成分符合《指南》[13]的RSD方面的要求,但是,本文由于黄连饮片样品的批次数量不符合《指南》要求(每种黄连饮片仅有6批样品),不能建立6种黄连饮片中这4种生物碱成分的一测多评法,仅适合建立传统含量测定方法。《指南》在建立方法环节要求代表性样品数量必须符合统计学要求 “原则上拟建立质量标准的药材样品不低于40批”。在验证标准环节要求 “测定样品应≥30 批”,而盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱2种生物碱成分暂不符合《指南》对RSD方面的要求,因此,本文没有建立黄连饮片的一测多评法。在《中国药典》2015年版一部黄连项下也仅建立了以小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀等4种生物碱成分的一测多评法,是否也是因为盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱2种生物碱成分的RSD超过了规定的5%,或是其他原因,这些都需要进一步深入研究。
酒蒸黄连是历代本草、医籍收载品种[14],明代《玉机微义》记载:“酒蒸黄连丸,治消渴,饮水无度至二三升,小便五七十次,发热瘦弱,口干,食已如饥,此名消瘅。今用味苦无毒,除热正气,消渴厚肠。消渴之人,脾胃恶湿,黄连为对。黄连净,半斤,酒一升,汤重蒸。伏时晒干用,右末,滴水丸,梧子大,每五十丸食前温水下。”明代李时珍也认识到不同黄连饮片之间的临床功能存在差异,总结历代对黄连用药经验,在《本草纲目》中记载“治消渴,用酒蒸黄连”。由PCA,HCA的分析结果可知3种黄连饮片(酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片)与生品饮片之间存在差异,特别是酒蒸饮片甚至可以单独聚为一类,差异主要来源于药效学结果中对STZ 高脂复合小鼠糖尿病模型的血清甘油三酯(C-TG)、对四氧嘧啶致小鼠糖尿病模型的空腹血糖水平(B-FBG)、对高浓度葡萄糖致小鼠急性血糖升高模型的空腹血糖水平(A-FBG)的影响,药理研究结果表明酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片都有明显的降低空腹血糖水平的作用[9],而且本文PCA,HCA的结果表明这3种黄连饮片与生品饮片的药效学差异主要在明显降低对STZ高脂复合小鼠糖尿病模型的血清甘油三酯(C-TG),对糖尿病模型的血脂、血糖具有明显的影响,加之中医临床中应用黄连“治消渴”(治疗糖尿病)有着悠久的历史[14-15],对酒蒸黄连治消渴作用更是“言之凿凿”,因此,酒蒸、酒炙、萸炙3种黄连饮片用于中医临床“治消渴”(防治糖尿病)更有优势,特别是在治疗糖尿病高脂血症方面的用途。可以预见,酒蒸饮片、酒炙饮片、萸炙饮片在中医临床应用中必将发挥其应有的作用[16-18]。
本文的含量测定与前期药效学研究发现酒蒸、酒炙、萸炙3种黄连炮制品饮片与生品饮片的化学成分并未发生显著变化,但在改善糖脂代谢紊乱等方面作用均明显优于生品饮片[19],而且,在糖尿病及其并发症防治方面,中医古籍与现代研究均显示出这3种黄连饮片具有良好的应用前景,提示炮制可能改变了药物在体内的生物利用度。同时,PCA结果表明,6种生物碱成分中,具有较大影响的是盐酸非洲防己碱,但是,目前非洲防己碱在糖尿病相关的生物活性方面研究不够深入,该成分是否与糖尿病及其并发症防治相关?是否还有其他成分的协同作用?有待进一步系统研究。
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有效的顶岗实习有利于学生巩固专业知识和技能,强化职业工作能力,完成由学生到企业员工的角色转换而顺利就业。笔者通过对北京市实验职业学校2010级药剂班顶岗实习生进行职业指导和调查,针对存在的问题提出了解决策略,以期为职业学校顶岗实习的课程改革和专业教师的职业指导工作提供参考。
《国务院关于大力发展职业教育的决定》中指出:要加强与企业的联系,加强学生的生产实习和社会实践,改革以学校和课堂为中心的传统人才培养模式。中等职业学校在校学生最后一年要到企业等用人单位顶岗实习。教育部在2007年出台的《中等职业学校实习管理办法》,进一步明确规定了顶岗实习是中等职业学校专业教学的重要内容,中等职业学校应按照专业培养目标要求和教学计划的安排,组织在校学生三年级到生产服务一线参加顶岗实习。顶岗实习是中等职业教育的重要实践教学环节,是学生学校课程学习的延续, 为学生进一步强化和巩固专业知识和技能,培养职业意识和能力,完成角色转换并平稳过渡,从而顺利就业提供了有力的保证。
目前,笔者所在学校在北京市课改专家的引领下正在进行专业课程改革,主要是课程设置、教学内容和教学方法的改革等,还没有做顶岗实习课程改革的尝试。笔者所在专业是中药专业,学生顶岗实习的企业主要是药店、医院药房、药品批发企业、医药制药公司和药厂等,由于这些工作岗位专业性强、职业素养要求高,以及其他多方面的原因致使学生在短时间内很难实现从学生角色到职业角色的转变,岗位适应性差,实习状态不稳定,离职率较高。为此,笔者作为实习指导教师以访谈、问卷等形式对2010级药剂班实习生进行了社会调查和职业指导,以期针对存在的问题寻找解决方法,为职业学校顶岗实习课程改革和专业教师的职业指导工作提供参考。
学生顶岗实习职业指导情况调查分析
1.调查对象
2010级药剂班实习生分别在10家企业进行顶岗实习,所调查的企业分别是北京鹤年堂医药有限责任公司牛街店、菜市口店,王府井医药商店有限责任公司,宣内药品有限公司,金象大药房爱乐坊东直门店,北京同仁堂健康药业东长安街店,北京国药控股华鸿有限公司,北京好得快医药有限公司,北京圣永制药有限公司,北京嘉事堂有限公司鲁古药店。这10家企业是北京市医药行业知名度较高、非常具有代表性的企业,基本可以反映北京市医药企业的整体需求情况。
2.调查方法
本调查主要采用问卷调查和访谈调查相结合的方式进行,为了使调查结果更具有说服力,除了对顶岗实习的学生进行调查外,还对企业单位的相关负责人、带教师傅和企业员工进行了相关情况的访谈。
3.调查结果分析
(1)总体情况分析。从学生层面来看,学生实习岗位与所学专业相关,实习强度、时间比较适度,并能获得一定的劳动报酬。大部分学生对工作岗位职责、要求和程序能熟练掌握,能独立完成本职工作;能自觉遵守企业单位的劳动纪律,服从安排,积极、主动完成各种工作任务,专业技能和业务能力经过实习后提高较大,个别学生已成为业务骨干或提升为小组长;能正视自己的不足,不断完善并改正,并具有一定的创新意识。从企业层面来看,大多数企业对顶岗实习学生比较重视,比如进行岗前培训、安排带教师傅、支付劳动报酬、客观评价实习生表现、继续留以任用等。
(2)学生顶岗实习中存在的问题。虽然整体上学生顶岗实习的情况比较好,但在调查中笔者发现其中还存在着很多问题,致使学生顶岗实习无法完全达到预期的效果,汇总如下。
①学生专业技能和实践能力与岗位需求存在差距。从对顶岗实习学生和企业相关负责人、带教师傅、企业同事的访谈情况来看,学生的专业技能和实践应用能力与岗位需求存在着较大的差距。主要表现为:学生专业知识和技能不够熟练,如在西药柜台销售中,实习生不熟悉药品的适应症、用法用量、不良反应和配伍禁忌等(王府井医药商店、鹤年堂牛街店);在中药调剂岗位,实习生对工作程序的熟练程度不高,达不到企业要求(宣内药品);在保健品与医疗器械柜台销售岗位上,实习生的专业知识和销售技巧不够熟练(金象东直门店);实习生还存在对专业知识不能灵活运用,找不准货位(同仁堂健康药业东长安街店)等问题。由此可见,学校的教学特别是课程设置和专业技能训练与企业实际需要还有较大差距,亟待进行课程改革,以提高学生的专业技能和综合职业能力。
②学生对顶岗实习存在认识偏差。通过调查笔者发现,大多数学生认为顶岗实习就是就业,对自身缺乏明确的要求和规划,对实习内容如锻炼技能、培养职业意识等方面考虑较少。当实习内容与工作地点、工作环境、工资待遇、毕业后能否留用等发生矛盾时,他们往往忽略了实习内容的锻炼,而出现了更换实习单位、不安心工作、不继续留用等问题。笔者调查的多家企业表示:目前实习生专业能力有差距不是主要问题,更严重的是他们眼高手低、发展目标不明和过于看重薪酬;很多实习生不能摆正心态,抗挫折能力差,遇到困难就打退堂鼓,人际关系紧张,不甘心每天做简单、枯燥、重复的劳动,从而不能安心工作,甚至离岗等。2010级药剂班在实习期有26%的实习生更换了实习单位,实习后的留任率也只有68%。
③学生顶岗实习指导效果不佳。据学生问卷调查显示,有31%的实习生认为有人指导,效果好;32%的实习生认为有人指导,效果一般;16%的实习生认为有人指导,效果差;而21%的实习生没有专人指导。虽然大部分实习企业会安排相关负责人、有经验的老员工负责带教实习生,但是由于这些领导、师傅还承担着许多其他工作任务,他们无法实时了解学生的实习环节并及时做出指导,许多学生处于“被放羊”的状态。而班主任只能在思想上帮助疏导,并不能为其做专业性的技术指导,致使许多学生得不到优质、有效的实习指导。比如金象大药房爱乐坊店主要从事保健品和医疗器械销售,由于新开店、店面小、没有带教师傅等问题,实习生只能自己摸索着工作,致使对自我的认同感极差,以致实习期满后离职。
④企业重视经济效益而轻视学生培养。从和实习生访谈的结果来看:企业经常将实习生直接或者经过简单的培训后就填充到空缺的工作岗位上,缺乏对学生的培养,相关指导并不到位,一些培训流于形式。从图2中我们可以看到只有42%的学生参加了正式培训,而26%的学生参加了非正式的培训,32%的学生则没有参加培训就直接上岗。
有些企业将实习生按正式员工来要求和考核,如同仁堂健康药业东长安街店的保健品销售岗位以销量记个人业绩,但实习生没有提成奖金;如药厂的外包装岗位要完成和正式员工一样的“计件”任务,实习生不仅要面对较大的工作压力,还要不间断、长时间地从事简单、技术含量低的劳动;企业只是按照需要安排岗位,对学生专业对口问题考虑较少,如鹤年堂菜市口店安排实习生做前台接待工作,国药控股华鸿药业安排实习生做开票员等等。企业只要求实习生能够进来做事,能给企业的生产性或服务性劳动带来效益即可,对学生的实习活动缺乏有效的规划和培养。统计结果显示,实习期间按照《顶岗实习课程标准》要求至少转岗2~3次只有3人,只占总人数的0.16%,多数企业将实习生固定在一个岗位上,学生轮岗严重不足。
对职业指导工作的思考及建议
目前笔者所在学校职业指导仅限于开设职业生涯设计课程、提供招聘信息、培训制作简历、开招聘会和就业指导讲座等为就业而进行的指导,没有从学生的角度深入给予一定的启示或引领,没有教会学生如何进行自我职业决策,以至于影响学生未来的职业生涯发展,致使很多学生实习后的就业率和稳定率不高,不利于专业的建设和学校的发展。为此,笔者有如下建议。
1.运用多种形式加强实习生的思想教育,培养其职业意识、提升其能力
(1)通过多途径开展实习动员工作。通过学习相关实习文件、介绍优秀实习生事例、了解实习单位情况、开展实习动员活动等多种形式,让学生充分认识到顶岗实习的重要性。职业指导者要帮助学生尽快转换角色,明确实习目标,加强自我管理,达到岗位要求。
(2)加强多方面的联系与沟通。与实习生、企业领导、带教师傅保持密切的联系,通过电话、电子邮件、QQ、飞信和亲自查访等多种方式对学生进行切实有效的跟踪指导,帮助学生解决问题。带队老师要记录好工作日志,对学生的各方面尽量做到第一时间了解。
(3)时刻做好学生思想上的“灯塔”。督促学生在工作中遇到困难时要及时与单位领导、带教师傅、班主任沟通联系,寻求帮助和指导,不能莽撞行事,做到不轻易离岗,把顶岗实习作为锻炼自身实践能力与职业素养的平台,而不是作为就业的跷跷板。职业指导者要帮助学生树立良好的择业观,消除不良情绪,处理好人际关系,主动、踏实地工作,为顺利就业打下基础。
2.加强“双师型”教师队伍建设,增强专业技能的指导
学生在顶岗实习过程中往往因为没有受到优质的专业技能指导和重视而不得不选择离岗,这对学校和企业无疑都是极大的损失。为此,学校有必要加强“双师型”教师队伍建设,这不仅有利于校内的实践教学,而且也有利于指派专职实习指导教师进行校外指导。专业教师可以通过脱产顶岗实习、开展“第二职业”、为企业提供技术支持和服务等方式到企业去培训和学习,提高教学和专业技能指导能力。专业教师最好能到有实习生的企业进行顶岗实习,这样既能给实习生提供专业技能指导,又可以对实习生实时管理,及时做好思想疏导,便于实习管理的顺利进行。
3.开展“全程化、全员化、全面化”的职业指导
将职业指导渗透于教育教学各个环节之中,如招生宣传、职业生涯规划设计、实习生跟踪调查等;保持家、校、社的互动,建立由学校领导、就业指导教师、班主任、学生代表组成的工作网络;采取以“活动”为主要形式,以“实践”为主要特征的职业指导,帮助学生建立责任意识、规范意识、服务意识,学会与人沟通,学会团队合作。
通过对学生的职业指导教育,我们可以帮助和引导学生了解自己,了解岗位,了解社会;帮助学生明确职业能力提高的内涵及其途径;引导学生调整心态,适应环境,养成的良好职业习惯。所有这些将极大地促进学生将来顺利就业,乃至有利于其一生的职业生涯发展。