前言:一篇好文章的诞生,需要你不断地搜集资料、整理思路,本站小编为你收集了丰富的学校邀请函主题范文,仅供参考,欢迎阅读并收藏。
各中学及考生家长:
为使广大考生能够深入了解高校教育教学水平和综合实力,准确把握招生政策,掌握各校招生信息,选择自己向往的高校,科学、合理地填报学校和专业志愿。XX工业大学定于XX年6月26日在XX工业大学友谊校区内举办“校园开放日”暨20XX年度招生咨询活动。届时,我们将邀请哈尔滨工业大学、北京航空航天大学等工业和信息化部属高校,同济大学等卓越联盟高校,北京大学、清华大学等著名重点高校参与本次活动。
XX工业大学热忱欢迎中学领导、教师、考生及家长参加此次咨询活动。
时间:20XX年6月26日上午8:30-下午17:00
地点:XXX
学校活动邀请函范文
亲爱的家长朋友们:
又是一年春花烂漫时,孩子们最快乐的节日——“六一”国际儿童节来到了,让我们由衷的对孩子们说一声“节日快乐!”祝愿孩子们在我们的呵护培养下健康、快乐、茁壮成长!为了让孩子们在自己的节日中快乐地展现自我,体验成功,感悟成长,我园定于5月28日在本园举行庆“六一”联欢活动。今年的活动充分体现“我健康、我快乐、我成长”的主题,每一个孩子都有上场表演的机会,都是场上的主人、节目的主角。孩子们用投入的表演,庆祝自己的节日,表达内心的情感。相信今年的“六一”会给每位家长和孩子们留下最美好的回忆!
为了确保活动的顺利进行,请家长配合做好以下工作:
1、每个家庭至少有一人参加活动,最好是爸爸、妈妈都参加。
2、请在指定位置观看节目,本次活动将邀请专业摄影师全程摄影,如有需要,可登记购买。
3、活动过程中,不要随意在场上走动、喧哗,请注意保持会场秩序!服从我园的会场管理,听从老师的安排。
【范文1】
各位x同学:
xx大学管理学院将于2017年1月4日举行EDP校友新年联欢晚会,诚挚邀请xx黄埔一期全体同学参加盛会,相关事宜通知如下:
晚会地点:番禺潮府(番禺区番禺大道北南大路口)
参会校友:管理学院EDP2013届校友,往届校友代表,xx同学
晚会流程:
17:00-18:00 xx大学乘大巴出发前往番禺潮府(可自驾)
21:00- 大巴返校,各班自由安排下半场节目
注意事项:
学院经与理事会同学商议,本次联欢活动作为xx集体活动,活动费用由xx活动经费支出并公示。
既是xx成员又是2013届结业校友的同学请勿在xx重复报名,所缴纳晚宴费用将于活动后退还。
【范文2】
尊敬的各位领导,老师:
新年的钟声即将敲响,新的一年正欣欣然向我们走来。红梅烂漫,为我们带来春天的信息;雪花飘洒,为我们送来春天的祝福。在这辞旧迎新的时刻,我们向为学院教育事业发展正在辛勤工作的教职工致以新年的问候,祝愿大家:身体健康,工作顺利,新年快乐!
一元复苏,万象更新。为营造我院和谐氛围,增进师生交流,展现我院师生风采,系元旦来临之际,经过积极完善的筹备,以和谐之春为主题的我院2017年师生元旦联欢晚会即将与师生见面。
届时,XX大学副校长、法学院院长XXX院士一曲《沁园春雪》将再次展现北国的风光,祖国山河的壮阔。法学院师生将倾情奉献,用嘹亮、动人的歌声唱响元月和谐的乐章,用优雅、奔放的舞姿演绎春日的祥和。为此,我们特诚意邀请您参加此次元旦联欢晚会,相信您的参与一定能够使我们的晚会锦上添花。现将晚会相关事项函告如下,热切期待您的到来!
时间:XX月XX日晚7:00
地点:XX大学X校区大礼堂
XX大学X学院
2017年XX月XX日
【范文3】
亲爱的朋友:
四年的时光里,我们彼此陪伴,可是明日天涯,我们却要踏上孤独的旅途。我们将要穿着宽大的毕业礼袍在照相机前站成一排努力笑得漂亮;我们将要度过一个忙碌而感伤的暑假;我们将要独自面对未来的不确定;我们将会由轻薄浮华的少年身,变成背影狼狈的成年人。
离别不算件大事,我们不要听悲伤的那些花儿,我们不要唱撕心裂肺的离歌,我们要快乐的欢庆,要知道我们拥有彼此,这是一件多么值得庆祝的事。
等考完试,我们一起过年吧,一起庆祝我们在一起的最后的新年!
在xxx教育中,节日庆典是很大的一个特色活动。这些活动帮助孩子们体验各种节日及自然界中蕴含的意义,感受古老的文化氛围。又是一年端午节,诚挚邀请您和我们一起陪伴孩子共同体验这个传统文化节日的民俗活动。
我们将和孩子一起歌唱与端午相关的童谣、歌曲;
我们将和孩子一起画额、佩香包、系五彩绳、洗浴兰汤;
我们将和孩子一起制做粽子,共进晚餐;
我们将共同为孩子祈福,赠送节日礼物!
活动时间与安排:
xxxx年xx月xx日(星期x)下午
15:30-16:00 迎接家长、孩子起床及准备工作
16:00-16:30 为孩子祈福:雄黄画额、佩香包、系五彩绳、洗浴兰汤
16:30-17:30 歌唱、制做粽子
17:30-18:30 共进晚餐
18:30-18:40 赠送节日礼物
18:40-19:00 清洁、再见圈
温馨提示:1、欢迎孩子的爷爷、奶奶、外公、外婆与我们共享节日欢乐;
2、请每个家庭准备一些食物,同享节日晚餐;
3、请再备如下物品:脸盆(洗浴兰汤)、水杯、碗、筷、勺;
大学校庆的邀请函范文一
校庆邀请函(个人)
尊敬的 :
您好!
峥嵘六秩,桃李五洲。20xx年11月,XXXX大学将隆重举行六十周年华诞庆典。
XXXX大学在曲折中奋进,在奋进中发展壮大。目前,XXXX大学已是一所面向全国招生,以工为主,工管等学科协调发展的大学。 砥砺奋进,春华秋实。六十年来,学校办学规模不断扩大,办学水平稳步提高,综合实力日渐雄厚。在经济发展速度逐渐加快、国家对高精尖科技创新成果和专业技术优秀人才需求迅速增加的新形势下,学校将继续坚持科学发展、突出特色、推进改革创新、扩大开放合作、加强内涵建设,努力建设成为一所高水平大学。
沧桑铅洗,蕴积涵育。学校发展建设所取得的成就,饱含着历代教职工的智慧和心血,凝聚着您长期以来对学校的热情关心和大力支持。六十年校庆是学校发展史上的里程碑,是继往开来、再铸辉煌的新起点。值此盛典之际,我们谨代表三万余名师生员工热忱邀请您拨冗出席,共襄盛举!
专此诚邀,敬祈惠允!
(庆典活动相关安排我们将另行告知)
邀请人:XXX
XXXX年XX月XX日
大学校庆的邀请函范文二
校庆邀请函
悠悠六秩风华,漫漫征程如歌。20xx年11月,XXX大学将迎来60周年华诞。值此喜迎校庆之际,谨向多年来一直关心、支持xxx大学建设和发展的各级领导、专家学者、各界朋友、广大校友致以最诚挚的问候和最崇高的敬意!
六十周年华诞是xxx大学发展史上的重要里程碑,是校友宾朋欢聚的盛大节日,更是学校开放办学改革发展的一个新起点。学校将于校庆期间举行系列活动,诚邀贵单位领导出席校庆庆典大会、校庆文艺晚会及相关活动,与全校师生共襄盛典。如蒙应允,请于9月10日前以回执告知,以便安排接待等事宜;如不能亲临,请将贺电、贺信惠寄校庆办公室,或电话、传真告知。
敬颂
时祺!
xxxx大学
二一二年五月十日
大学校庆的邀请函范文三
校庆邀请函
尊敬的海内外校友:
你们好!
光阴荏苒,岁月如歌。纵览今昔,六十载栉风沐雨,六十年春华秋实,今天母校即将迎来六十周年华诞!这是母校发展史上一个重要的里程碑!六十个春秋桃李芬芳,六十载耕耘硕果累累.内蒙古工业大学已经走过了半个多世纪的辉煌历程。从1941年的绥远省高级工业学校辗转前行至今天的内蒙古工业大学,沧桑砥砺却始终坚持弘扬热爱内蒙古、建设内蒙古精神,秉承民主、团结、勤奋、严谨、求实、进取的优良校风。六十年来,人文蔚起,才俊辈出,为国家、社会的建设做出了不可估量的贡献。在校庆将至之时,母校师生感慨良多,激情飞扬。我们忘不了一代代校友在母校那同学少年、风华正茂的身影,忘不了你们刻苦研读,求实求新的精神,也为你们在各自工作岗位上为教育事业不辍耕耘,无私奉献所做出的贡献和取得的成就感到骄傲。内蒙古工业大学的发展也深刻着你们的足迹。你们为母校增光彩,母校因你们而自豪。 风雨沧桑半世纪,薪火相传六十载。母校革故鼎新、与时俱进,经过几代人呕心沥血、努力拼搏,学校已建设成为一所以工为主,工、理、文、经、管、法、教育相结合,具有本科、硕士和博士完整人才培养体系的特色鲜明的多科性大学。登高前瞻,任重道远,春和景明,前程灿烂,母校欣逢盛世,又将迎来一个蓬勃发展的春天!母校的历史,有你们的心血凝铸和精神传承;母校的辉煌,有你们的业绩辉映和实力见证;母校的未来,更有赖于你们的热心关注和鼎力支持。虽然你们身处五湖四海,但你们的心却与母校息息相通,始终关注和支持母校的建设和发展,并以自己良好的素质和杰出的业绩为母校增光添彩,为民族振兴和社会进步作出重要贡献。
忆往昔峥嵘岁月,青春的激荡,理想的光芒,都从这里起飞,翱翔。万水千山,隔不断对母校的挂念;时光流逝,忘不了对同窗的情谊。 群贤毕至,盛世如约。方遒挥斥间,韶华竞逝。昔君往矣,浓情依依植霖楼,铁骨铮铮机械厂,抚今追昔时,您定会思绪万千,激情难抑。同窗好友,共话当年,共叙友情,共襄盛举,畅谈别后,展望未来,何等快哉!倘若母校承蒙昔日学子反哺,得以锦上添花,实乃母校之无尚荣光!
让我们相约内蒙古工业大学,我们深信,母校六十华诞的盛典定会因您的参加而更加精彩!母校的发展定会因你们的支持而更加辉煌!
敬祝
身体安康,事业辉煌!
小学同学邀请函样本一
亲爱的同学:
还记得我们的小学时光吗?还记得我们曾共同拥有的温馨往事、纯情岁月吗?
时光如水,岁月如梭,美丽的校园时光,恰似流光溢彩的画卷,烙在我们的记忆深处。同窗数载,温馨如昨,浪漫岁月,依稀如梦。一别十年载,荏苒中年,当年同窗,今散四海。曾记否?浑江岸边,寒窗苦读,不舍昼夜;曾记否?青青校园,风华正茂,促膝长谈;曾记否?运动场上,意气风发,龙腾虎跃。十年前的校园生活是什么情景?同班同学是何样面庞?同桌的你又是哪位?曾有多少个昼夜,常在和煦的阳光下希冀;常在绚丽的霞光下幻想;常在瞬时的闪光下寻思;常在皎白的月光下痴望。希望有一天,我们寒窗学友,故园重逢,忆旧叙新,通晓别后之情!
十功名尘与土,八千里路云和月。同学,不管你现在成绩的好与坏,不管你当时是怎样的作弄本人,恒久的同窗之情永远都不会改变。无论你贫穷还是富有,无论你闲暇还是繁忙,你终究不会忘记那课桌、那教室、那操场。因为同一个梦想激励着我们,我们曾拥有共同的时光。也许,你把这一切都冰封收藏,悄悄期待着重逢的春光。我们和你一样,多少次梦里相聚,多少次心驰神往。让我们抛开喧嚣,挣脱烦恼,再次走到一起。在青山秀水之间,在母校的鸟语花香之中,回首往事,畅想未来,交流感悟,相互鼓舞。听听久违的声音,看看久违的面孔,说说离别的思绪,尽情享受老同学相聚的温馨。让心栖息,忘却忧虑;说说真话,谈谈友情,让我们的同学之谊天长地久!
您一定还记得再过十年,我们来相会这句歌词,现在这熟悉的歌声所寄托的热情与希望即将成为现实。致此,抱全班同学思念之情,捧全体同学共鸣之心,筹备举行子霞小学02至01班同学聚会。(敬请各位同学届时光临,把您的别后之情带来,让我们共温同窗之谊!
同学们,让我们放飞心中的希望,期待人生的第二次握手,相聚在家乡。相信你除了欣喜和激动,还会有更多的收获!
祝您及全家身体健康,万事如意!并祝同学聚会圆满成功!
小学同学邀请函样本二
亲爱的同学:同窗多载,温馨如昨,依然常驻心头;悲欢岁月,依稀如梦,但愿记得你我!小学一别,至今已近7载,当年同窗、今各西东。但我们相信:无论你回到故里,或远在他乡;也无论你多么闲暇,或何等繁忙可是,同窗之情不变。你终究不会忘记在野鸡岗小学和我
们一起攀谈、一起嬉戏也许,你把这一切都冰封收藏,悄悄期待着重逢的春光。我们和你一样,多少次梦里相聚,多少次心驰神往。我们很想约你,约你去往事里走走:听听久违的声音,看看久违的面孔,说说离别的思绪尽管我们知道你很想抑制内心的期盼与波澜。但是这样难得的欢聚,会因你的缺席而黯然失色,更令我们黯然神伤!就让你我暂时抛开尘世的喧嚣、挣脱身边的烦恼,走到一起,尽情享受老同学相聚的温馨让心栖息,忘却忧愁;谈谈友情;回首往事,畅想未来;交流感想,相互勉励相信除了欣喜和激动,你还会有更多的收获!你会来吗?我们用一如当年热切而期盼的眼睛,一如当年火热而年轻的心在等待......................................................................活动会让大家意想不到的意外,活动主持人汪丹.余友.李行辉.鲍佳昭.还记得那时候她在学校给你们带来的快乐吗?我相信她当主持是最好人
选...............同学聚会草案一、活动旨回味纯真情谊、重温昔日情怀,延续同学友情、加强互助协作,现由本人(万正才)负责成立活动小组,组织咱们毕业之后的同学聚会。(组委会缺少人手,希望有时间的同学加入进来)
二、时间定于2017年2月7号(既大年初五)三、地点共同商定
四、人员安排请第一时间知悉此消息的同学相互传达,应该都能来吧(非常特殊的情况除外),希望大家提前做好安排。
五、组委会名单
总负责人:万正才袁喜郑学敏余东宝李行辉王蓉余友汪琴汪丹王通那边就由鲍佳召.余涛。王荣负责张杰那边就由余强.张霞负责(组委会缺少人手,希望有时间的同学加入进来)
成员:待定
聚会通知及人员到位联系由万正才余东宝龚涛郑学敏负责,其他成员密切配合。六、聚餐费用:(1)aa制.(每个人费用待定)
(2)使用原则:避免浪费。
(3)活动结束后,费用收支情况将具详细报告单在当日聚餐会上公布。
大家好!
光阴荏苒,岁月如梭,逝者如斯夫。转眼间,我们从二甲小学毕业已有7年。7年间,我们每个人所走的路不尽相同,或春风得意,或平平淡淡,或艰辛坎坷……但是,无论人生如何浮沉,也无论世事如何的变迁,我们都没有忘记那份同学间的真挚友情,多少次梦里相聚,多少次心驰神往……
7年间,注定了我们共同的缘份,演绎着我们的激情、梦想和事业。小学同学的情怀是一种千金难抵的情缘;是一片真诚难求的心花瓣。 相信这份真诚的情怀,这瓣带露的心花会将你的生活装点得更加多彩而绚丽。岁月就象用这心花酿成的老酒,珍藏了多年的老酒,一定会令你我一醉方休!二甲小学六年发生的故事,沉淀了7年,依然让人感动,需要我们用一生去回忆、去收藏……
万仞青山,千里涧水;青春往事,萦绕心间 。虽天各一方,但婵娟千里,同学之间的情谊永远是别有一番剪不断的情愫,别有一种抹不去的思念。今天,为了那份思念,为了那份友谊,我们选择了相逢。亲爱的同学们,让我们暂时抛开尘世的喧嚣,挣脱身边的烦恼,去往事里走走吧,重温师恩同学情,听听久违的声音,看看久违的面孔,温习曾经的浪漫,尽享相聚的温馨。来吧,亲爱的同学,来参加二甲小学18班学联谊会,我们期盼你的到来,因为有你,我们会更开心。
我们期望每个同学在收到这份邀请时,尽快和我联系,让我们第一时间知道你的消息(为方便统计安排,请您收到邮件后务必编辑您的名字发送短信到曹良辉或者曹志强的手机上!)你的近况,因为我们已期盼了你很久很久,要知道这些对于老同学来说是多么的重要和珍贵! 请在收到本函后即通过qq和手机联系我们。同时请积极寻找没有地址或地址已经变化的同学并通知他(她)。
我们想:这样难得的欢聚,会因你的缺席而黯然失色,更令我们黯然神伤!盼望您早作安排,如期赴约。并请尽快给予回复。时空距离让我们更加珍惜友谊,更加彼此思念!
联系人:曹良辉 电话13135355558 qq: 460141061 曹志强 (协助) 电话:15115528008 qq:605974606
本活动属于大家自愿参加!如发生任何意外,组织人曹良辉(主办方)、曹志强(协助方)不负任何责任,和不负任何法律责任,本活动请各位一切听指挥。
活动费用:暂定300元/1人
活动地点:郴州
活动时间:2019年10月1号(暂定)
活动流程:到时在定
请各位同学联系你能联系到的人,不能联系其他人的、请速度联系我们!谢谢!
时间暂定2019年10月1号 请速度联系我们 谢谢!
邀请函发放成功与否是学术会议是否成功的关键,即使会议内容再好,请的讲者再权威,如果邀请不到重点客户,这场会议就达不到预期的效果。
发邀请函看似是个很简单的事情,似乎只是从代表手里递到客户手里如此简单的动作。但是我相信绝大多数人新人第一次递邀请函不会很成功,因为我也犯过同样的错误,一上来直接就递上邀请函,说“X主任,您好,我们公司在XX时候有场关于XX的学术会议,您有时间吗?”没有探寻客户的需求,没有放大客户的利益,没有炒作会议主题,除非你和主任客情关系非常好,不然多半就以各种理由推脱,或者就是当面答应,你走后随手往抽屉里一扔,忘到九霄云外。所以说这是失败的邀请。再说了,如今产品学术会议多的使人眼花缭乱,主任即使要参加会议,他又凭什么就会参加你们公司的会呢?笔者以为在处方药学术推广的营销方式里,如何专业有效的发放邀请函是至关重要第一步。
专业的邀请函发放应该包括6个步骤:1、拜访计划2、引导交谈3、炒作会议讲者及讲课内容4、处理异议5、到会的确认6、跟进。下面笔者就用一个实例来加以说明。背景是XX公司要举办一次关于偏头痛的治疗与预防以及该公司产品某药品在偏头痛中的治疗经验交流的学术会议,大会主席是XX医院的W教授,邀请的讲者是山东XX医院A教授,时间是下周六下午两点。邀请对象是市级某三甲医院神经内科主任。
1,首先是炒作会议主题,这是需要做访前计划的,这个计划应该是围绕此次的学术会议主题所准备的,比如我们此次举办的是偏头痛的规范治疗学术会议,所以我们应当去了解目前医生是否有比较系统规范的治疗指南及流程。初步判定他所感兴趣的话题,来炒作会议主题,让他看到此次学术会议所能带给他的利益。这是价值利益销售的关键。其次请记住主任的时间是很宝贵的,所以你要在见面后最短的并且最合适的时间内将自己的拜访目的表述清楚,以至于不会让客户觉得你是在浪费他的时间。
“主任,您好!我是XX公司的小张,负责XX产品的,不知道您还有印象没?”
“哦,知道的,你有什么事吗?”
“我刚看门诊上患者还挺多的,偏头痛患者占了不少。您看您是这方面的专家,您一定在偏头痛的治疗上有自己很多经验,我今天是想就偏头痛的规范治疗和您做个探讨,耽误您5分钟您看可以吗?”
“偏头痛是吧?行,你坐。”
2,因为这里所用的是一个相关疾病问题所做的开场白,所以80%是可以得到允许的,接着就要开始引导交谈,探寻。我们可以运用引导交谈探寻技巧识别客户的需求,并通过开放式及封闭式提问漏斗般的得出真正的需求,并放大及确认引起他的重视。
“谢谢主任,您所遇到的偏头痛的患者应该是不计其数了吧,那么偏头痛对患者的生活,家庭造成了怎样的困扰呢?”
“偏头痛是一种常见病,多发病,对社会经济和患者生活都造成比较严重的影响,发病轻重不一啊,轻则影响正常工作生活,重则生活不能自理,并且最近两年确实有调查说偏头痛患者在逐渐增加,可能跟环境和压力也有很大关系。”
“那偏头痛就患者本身而言会导致什么样的后果呢?”
“那并发症多哦,像什么小脑梗死,脑白质病变,并且还有增加发生脑卒中及不稳定心绞痛的风险。”
“也就是说偏头痛不仅仅只是头痛,而是可以带来那么多不堪设想的隐患及后果,是吗?“
“确实是这样的。”
“如果有很好的治疗方案为患者进行系统的规范的治疗,能够缓解乃至改善症状,那么对患者来说可是对工作,生活,家庭都有了很大的帮助。那么您在这方面是专家,您是如何治疗偏头痛的呢?”
“偏头痛的治愈确实能为患者带来很大的变化,但是现在并没有一个系统的规范治疗方案,大家都是经验性治疗,根据偏头痛的类型啊,症状啊进行对症治疗,也很复杂,所以治愈率也不是很高。”
“也就是说,我们现在是缺乏一套规范的系统的治疗方案,如果有的话是对您和患者来说是能帮助解决当前很多问题的,是非常有价值的,对吗?”
“是的。”
3,上面已经确认出客户的真正需求,“一个系统的规范的治疗偏头痛方案”。这时候时机成熟,我们就可以立马亮剑----亮出我们能满足他需求的学术会议的邀请函。
“像您刚说到的这个问题,其他医院的老师确实也都存在,也令很多老师真的是头疼。我们为了推动湖北地区在治疗偏头痛领域发展,更好的加强学术交流,所以特别邀请了XX医院的A教授来做偏头痛的报告,交流偏头痛的诊断与防治专家共识,这是会议邀请函,刚好能为您在偏头痛治疗上带来一些新的学术信息。”
“哦,邀请的A教授是吧?”
“是的,A教授是中华医学会神经内科专业委员会的副主任委员,曾经还在美国XXX医院神经内科工作过,是《中华内科杂志》《临床神经病学杂志》等多本医学杂志的编委,也主编了多本著作。您应该知道他吧?”
4,当你做好了铺垫工作已经递上了邀请函时,客户多半会抛出异议,这个异议可能是客户真实担心的问题,也可能只是拒绝的托辞,所以我们应该按照处理异议的4步法则来进行处理。澄清--回答--核实--延续
“恩,A教授我知道,看过他的一些文章,还不错,是什么时候?”
“是的,A教授发表的很多关于神经内科学的文章都得了不少奖项。会议时间是下周六下午2点,因为考虑到各位老师周六一般下午有时间,所以特意安排在这个时候,并且提前一周来邀请,您也好安排时间。”
“那好吧,到时候有时间没有别的安排我会去的。”
5,其实到这里事情还没有敲定,他并没有和你达成协议,只是敷衍的说没别的安排是会去的。所以接下来我们的到会确认是非常重要的。
“不知道您对会议还有没有什么其他的担忧?”
“A教授的会以前我没有参加过,文章写的可以,但不知道讲的怎么样,本来这段时间医院就比较忙!”
“我理解您的担心,毕竟您的时间是很宝贵的,如果在一场毫无意义的会议上浪费几个小时是非常不值得的。而且主任您放心,公司特别注重此次会议,我们还特别邀请了湖北XX医院的W教授做大会主席,我们去邀请的时候,W教授听说是请A教授来讲,立马就答应了,因为他听过A教授的课,讲的非常好。加上我们所邀请的嘉宾全部是湖北地区神经内科的主任专家,是绝对保证会议质量的。您在神经内科界也是很有声誉的,您也可以将您在这方面的治疗经验分享给其他老师。所以说这次会议对您和对其他专家都是很有价值的。”
“下周六下午2点半是吧?好的。我会去的。”
“那您看我下周五早上再给您打个电话提醒下,怕您到时候事情一多给忘了时间,周六中午1点30我到您家楼下接您。您看可以吗?”
“那行,你直接到医院来接我吧,我早上还在医院上班。”
“好的,那我就不耽误您了,主任再见!”
“再见!”
亲爱的同学:
弹指一挥间,一晃毕业多年。
环肥燕瘦者,如今为人妻为人母;英俊倜傥者,如今为人夫为人父。想目睹一下当初的他(她)么?
煽情少表,牛叉少吹,言归正传:
兹定于某日举行同学聚会,万望还在乎四年同窗情义的你,积极参加。
地点:你骂千遍万遍嫌少,人骂半句一句嫌多的母校!
为了保证将此次聚会搞成安定团结和谐的盛会,特要求如下:
第一,为方便交流同学感情,避免晒幸福秀恩爱,原则上,单人参加,不欢迎家属列席。
【友情提醒】小三、小白、前妻、前夫、情人、小蜜及其他中国法律不予认可的亲密关系人,不在家属范畴。
第二,只叙同窗情,取缔攀比炫富之风。
1、严禁显耀房产、珠宝及干爹、干娘。.
2、严禁驾驶豪车,倘若驾驶劳斯莱斯、兰博基尼、奔驰、宝马及同等车型来会者,有承担本次聚会所有费用的义务,并为他人提供往返路途之费用。
3、严禁佩戴名表,单价低于30000的不在名表之列。
4、严禁配用Gucci、LV、Chanel等名包。
5、严禁当着同学面对属下、秘书、乙方及家属大声电话呵斥,太有炫权之意。
第三,以一颗平常心参加同学会,若是怀有“没事开开同学会,拆散一对是一对”之恶俗念头者,谨慎参会。本组织者有保障家庭和谐稳定之义务,倘若发现,及时纠偏,不留情面。
若是,a.保密工作到位,不被其他同学察觉;b.其他同学视而不见;c.聚会结束后,单独交流者,均不在此列。
第四,费用:两天,暂定1000/人。最终核算,多退少补。
为保证费用的安全、放心,实行“物钱分开”原则,本组织者负责联系住宿、吃饭、娱乐等事项,另选一名信赖之同学(财务)负责埋单事宜。
务必请同学们参会前将费用转账至该财务,凭汇款通知单或是网上汇款截图打印件参会!
烦请财务务必仔细认真,做好记录,最后公布决算。
第五,各自做好安全工作。
包括人身安全、财物安全。小心驾驶,安全第一。严禁酒后驾驶。住宿注意防火防灾防盗。
【摘要】 【目的】探讨尿毒清胶囊含药血清对人近端肾小管上皮细胞(HK2)增殖与转分化的影响。【方法】将体外培养的HK2细胞分为6组:正常对照组,体积分数5%、10%尿毒症毒素血清组(简称尿毒症血清组),体积分数5%、10%尿毒清胶囊含药血清组(简称含药血清组),蒙诺组(浓度为10-6 mmol/L)。采用四氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期和α平滑肌肌动蛋白(αSMA)阳性细胞百分率。【结果】5%、10%尿毒症血清组光吸收值(D)显著高于正常对照组(均P
【关键词】 尿毒清胶囊/药理学;肾纤维化/中药疗法;血清药理学;细胞培养
肾纤维化是各种肾脏疾病慢性进展到肾功能衰竭的共同病理机制,而以肾间质细胞外基质沉积为主要表现的肾间质纤维化过程是影响肾功能的重要因素[1]。肾小管上皮细胞增殖、转分化在肾纤维化形成中占重要地位。尿毒症毒素血清能促进肾小管上皮细胞增殖及转分化已得到证实[2]。益气升清、通腑泄浊法组方尿毒清胶囊对5/6肾切除所致肾功能衰竭大鼠肾组织胶原沉积、转化生长因子β1(TGFβ1)表达具有抑制作用[3],但对人肾间质纤维化中起重要作用的肾小管上皮细胞(HK2)增殖、转分化的作用尚未明了。本研究观察正常人的尿毒清胶囊含药血清对尿毒症毒素血清刺激的HK2增殖、转分化的影响,现将研究结果报道如下。
1材料与方法
11主要试剂与仪器RPMI1640培养基为美国Gibco公司产品,新生胎牛血清为杭州四季青生物材料工程有限公司产品,四氮唑蓝(MTT)、二甲基亚砜(DMSO)、25 g/L胰蛋白酶、碘化丙啶(PI)均为美国Sigma公司产品,蒙诺(福辛普利)原药粉为美国施贵宝医药公司产品,鼠抗人α平滑肌肌动蛋白(αSMA)一抗IgG2a、荧光素FITC标记山羊抗鼠IgG二抗均为德国Calbiochem 公司产品。WZEF型净化工作台为苏州净化设备厂产品,HEPA CLASS100 3131型CO2培养箱为美国Termo Electron Corporation公司产品,ALTRA型流式细胞仪为美国BECKMAN COULTER公司产品,722型紫外分光光度计为上海光学仪器厂产品,TS100型倒置显微镜为日本Nikon公司产品,DG3022A型酶标仪为美国BIOMETRA产品。
12培养条件采用RPMI1640培养基,临用前加体积分数20%新生牛血清、100 U/mL青霉素、100 μg/mL链霉素。消化液为25 g/L胰蛋白酶。人近端肾小管上皮细胞(HK2)由中山大学医学院肾脏病研究所余学清教授惠赠。
13血清制备
131尿毒症毒素血清(简称尿毒症血清)收集血清肌酐在707~1 685 μmol/L之间,近期内无明显全身及局部感染,未接受过血液透析治疗的患者血清40份,清晨空腹无菌静脉采血5 mL,室温静置2 h,无菌条件下将全部血清混匀、灭活、抽滤分装,-20 ℃保存。同期收集正常人血清,收集方法同上。
132尿毒清胶囊含药血清(简称含药血清)3名正常志愿者口服治疗剂量尿毒清胶囊5 d后、最后1次服药后1 h均抽血30 mL,分离血清,并将含药血清置于56℃水浴箱中30 min灭活、抽滤分装,-20 ℃保存。
14实验分组所有血清浓度均是体积分数。为保持培养基中血清浓度均为20%,及根据预试验和文献[2],设定尿毒症血清和尿毒清胶囊含药血清体积分数分别为5%和10%。实验分6组:(1)正常对照组: 10%胎牛血清加10%正常人血清加80 % RPMI1640培养液。(2)5%尿毒症血清组: 10%胎牛血清加5%尿毒症血清加5%正常人血清和80% RPMI1640培养液。(3)10%尿毒症血清组:10%胎牛血清加10%尿毒症血清和80% RPMI1640培养液。(4)5%尿毒清含药血清组:10%胎牛血清加5%尿毒症血清加5%含药血清和80% RPMI1640培养液。(5)蒙诺组:10%胎牛血清加5%尿毒症血清加5%正常人血清加蒙诺(浓度为10-6mmol/L)和80% RPMI1640培养液。(6)10%尿毒清含药血清组:5%胎牛血清加5%尿毒症血清加10%含药血清和80% RPMI1640培养液。
15人近端HK2增殖的检测[2]常规消化、收集HK2细胞,每孔按1×104个/mL接种于96孔培养板,置37℃、体积分数5%CO2培养箱内培养24 h,换成无血清培养液培养24 h使细胞处于静止期(G0期),分别接种于6组培养液中培养,每种浓度设3个复孔,实验重复2次。继续培养48 h,每孔加20 μL(5 g/L)MTT溶液孵育4 h后弃除培养液,每孔滴加DMSO 100 μL,振荡待紫蓝色结晶完全溶解,在490 nm波长处,用酶标仪检测各孔光吸收(D) 值。
16流式细胞术(FCM)检测细胞周期及αSMA阳性细胞百分率各组(每组3瓶,实验重复2次)培养的细胞,继续培养48 h后,消化、收集细胞,每管细胞数为1×105个/mL,冷磷酸盐缓冲液(PBS)洗2次,体积分数75%冰乙醇固定,摇匀、吹打,4℃保存过夜,用于细胞周期检测。检测时离心,弃乙醇,PBS洗1次,加500 μL PI染液(含50 mg/L PI、1 g/L TritonX100、100 mg/L 的Rnase A),4 ℃避光染色30 min,采用流式细胞仪检测。收集培养的细胞,用20 g/ L多聚甲醛固定20 min,1 000 r/min,离心5 min,去上清,加5 μL一抗αSMA小鼠抗人单克隆抗体1∶100, 37 ℃孵育30 min ,PBS冲洗,1 000 r/min,离心5 min,滴加FITC羊抗鼠IgG二抗,浓度1∶100,37℃避光孵育30 min,PBS冲洗后,每管加PBS 05 mL上机。FCM在氢激光光源,激发波长为488 nm,变异系数小于2%条件下测试分析,每管分析105个细胞,联机专用软件处理,计算出各时相细胞的比例、细胞增殖指数[4] 。增殖指数IP=[(pS+pG2/M) /(pG0/G1+pS+pG2/M)]×100%。 注:pS指细胞周期的DNA合成期细胞数,pG2/M指DNA合成后期至有丝分裂期的细胞数,pG0/G1指静止期至DNA合成前期的细胞数,从流式细胞仪中直接读出的是各期细胞占总细胞(pG0/G1+pS+pG2/M)的百分比]及αSMA阳性细胞百分率。PBS代替一抗或二抗作为阴性对照。
17统计学方法采用SPSS 115软件进行统计,采用单因素方差分析(OneWay ANOVA)进行处理,每两个均数间的比较根据方差齐性检验(HomogeneityofVariance),当总体方差齐时选择Bonferroni法,当方差不齐时选择Tamhanes T 2法。
2结果
21尿毒清胶囊含药血清对人HK2周期和增殖的影响
211流式细胞仪检测结果表1结果显示,5%、10%尿毒症血清组G0/G1期细胞百分数显著降低(均P
212MTT法检测结果表2结果显示,5%尿毒症血清组、10%尿毒症血清组D值均显著高于正常对照组(P005)。5%含药血清组D值显著低于10%尿毒症血清组(P
22尿毒清胶囊含药血清对HK2 αSMA阳性细胞百分率的影响表3结果显示,5%、10%尿毒症血清组HK2αSMA阳性细胞百分率显著高于正常对照组(P005)。5%含药血清组与5%尿毒症血清组比较差异无显著性意义(P>005),但与10%尿毒症血清组比较差异有显著性意义(P
3讨论
在纤维化的肾脏中,正常功能的肾小管上皮细胞明显减少或消失,一方面是由于在各种损伤因子的作用下,肾小管上皮细胞发生坏死或凋亡,另一方面是因它可能会发生适应性转化。转分化(epithelial mesenchymal transition, EMT)可提高成纤维细胞或肌成纤维细胞的活性,促使其产生大量细胞外基质,从而促进肾间质的纤维化。在大鼠肾小管间质纤维化研究中发现,损伤的肾小管上皮细胞处于萎缩和再生状态,随着病变的进展,肾小管上皮细胞内出现αSMA和波形蛋白(vimentin)的阳性表达,而αSMA是肌成纤维细胞的标志性蛋白。透射电镜下可见肾小管上皮细胞内原纤维出现以及突破基底膜游离到肾间质中,并与间质细胞、胶原纤维混合存在,说明在大鼠肾间质纤维化的发生过程中,受损并处于再生状态的肾小管上皮细胞可向肌成纤维细胞等间胚叶细胞转化并产生细胞外基质[5]。αSMA阳性的肌成纤维细胞数目与肾小管间质纤维化严重程度之间存在显著正相关,它是肾间质纤维化过程中细胞外基质沉积的最主要来源,其数量是判断疾病预后的重要指标[6]。增生活化的肾小管上皮细胞及其转分化而来的肌成纤维细胞可以产生血管活性肽如内皮素1(ET1)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)以及表达细胞因子如转化生长因子β(TGFβ1)、结缔组织生长因子(CTGF)等,加速细胞的增殖和分化,进而加速肾纤维化的进程。由此可见,异常增殖和转分化的肾小管上皮细胞一方面促进细胞外基质的合成直接参与肾间质炎症及纤维化过程,另一方面可通过分泌多种细胞因子和生长因子,促进肾间质固有细胞增殖,从而加速肾纤维化进展。已有研究证明,尿毒症毒素不仅对肾小管间质的损伤有加剧作用[7],而且对体外培养的人肾小管上皮细胞增殖和转分化有促进作用[2]。本研究也证实,尿毒症毒素血清能促进HK2细胞增殖并转分化为αSMA阳性的肌成纤维细胞,虽然较低浓度(5%)的尿毒清胶囊人含药血清能部分抑制细胞增殖,对细胞转分化的抑制作用也不明显,但较高浓度(10%)的含药血清则对这两方面的作用均有抑制作用。结合前期研究[3],说明中药制剂尿毒清胶囊抗肾小管间质纤维化作用机理可能有两个方面:(1)通过通腑泄浊,从肠道排泄尿毒症患者的毒素而降低患者血液中的尿毒素,进而减轻尿毒素的促肾小管上皮细胞增殖和转分化产生的间接的抗肾纤维化作用[8]。(2)可能是通过直接抑制肾小管上皮细胞的增殖和转分化而达到抗肾纤维化作用,确切机制有待进一步研究证实。
血管紧张素Ⅱ的促肾纤维化作用和血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)、血管紧张素受体1(AT1)拮抗剂(ARB)的抗肾纤维化作用已经得到广泛证实和认同[9-11]。本研究也证明了ACEI类药物蒙诺(福辛普利)对尿毒症毒素所致的人肾小管上皮细胞的增殖和转分化抑制作用,而中药尿毒清含药血清具有与蒙诺同等程度的抑制作用,说明在抑制肾纤维化作用方面,中药尿毒清胶囊同ACEI类药作用相近。由于中药的多方面综合作用,且ACEI类药在肾功能严重受损时使用受限,故中药尿毒清胶囊具有进一步研究和临床应用价值。
参考文献
[1]Badid C,Vincent M,Fouque D,et alMyofibroblast:a prognostic marker and target cell in progressive renal disease [J]Renal Fail,2001,23:543
[2]刘海燕,刘华锋,何惠娟,等.尿毒血清对人类肾小管上皮细胞增殖及转分化的影响[J].中国病理生理杂志,2004,20(4):651
[3]汤水福尿毒清胶囊对慢性肾功能衰竭的影响及分子机理探讨[D]广州中医药大学博士学位论文汇编,2004:6
[4]董力,杨文敏大气颗粒物有机组分对人淋巴细胞周期的影响[J].毒理学杂志,2005,19(3):221
[5]张海燕,李幼姬,叶任高,等结缔组织生长因子介导转化生长因子促肾小管上皮细胞转分化[J]中华肾脏病杂志,2003,19(6):360
[6]Ng Y Y,Huang T P,Yang W C,et alTubular epithelial myofibroblast transdifferentiation in progressive tubulointerstitial fibrosis in 5/6 nephrectomized rats[J]Kidney Int, 1998,54:864
[7]Kumagai H,Katoh S,Hirosawa K,et alRenal tubulointerstitial injury in weanling rats with hyperhomocysteinemia[J] Kidney ,2002,62(4): 1219
[8] 张秋林 尿毒清胶囊对慢性肾功能衰竭患者肾纤维化指标的影响[J].广州中医药大学学报,2007,24(2):108
[9]乔青,魏翠英,佟光明,等 血液透析对尿毒症患者血清内皮素1、一氧化氮、血管紧张素Ⅱ的影响及临床意义[J].中国医药导刊,2004,6:405