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一提起雷锋,很多同学都非常熟悉。我们在书里和电视剧里都曾经知道过他的故事。这位普通的中国士兵,在他短短的二十二年的人生岁月中,却为他人、为社会做了无数的好事,为人们送去了无数的温暖和安慰:
比如帮车上的列车员拖地、打扫候车室,为丢失车票的妇女买票,给家庭困难的战友家中寄钱等等。雷锋精神的核心就是奉献爱心,为他人服务,为社会服务。
有同学要问,我们为什么要学习雷锋精神呢 ?这是因为,我们的社会是一个大家庭,我们都是其中的一分子,只有大家都来奉献爱心,我们的大家庭才会充满友爱,充满温暖。想一想,为了我们能够在学校安静地读书,有多少人在为我们做着奉献啊。近一点说,有父母在辛勤地养育我们,有爷爷奶奶在关心着我们,有老师在教给我们知识 ;远一点说,有农民在为我们提供粮食,有工人在为我们生产各种各样的吃、穿、用的东西,还有解放军在保卫着我们的祖国安宁,不让敌人来侵犯我们的美好生活。没有他们,就没有我们今天在学校的安宁的生活。我们和社会的关系是这样密不可分。社会需要我们,我们也需要社会。这就是 人人为我,我为人人 的道理。特别是我们特校的残疾学生,经常得到社会各方面的很多人的关心,给我们送来各种各样的学习、生活用品。作为我们,在社会关爱我们的同时,也要尽自己的能力,努力为他人、为社会奉献爱心,来回报社会的关爱。
各位老师、同学们:
今天我讲话的题目是《雷锋精神,新时期学生思想素质中亮丽的火花》
阳春三月,神州大地草长莺飞,生机无限,真可谓是“风景三月独好”;而在雷锋精神的激励之下,涌动于大江南北的学雷锋为民服务的活动正掀起,织就着另一幅社会生活中的窗光画卷。放眼我校,我们高兴地看到,以学校为单位,开展的学雷锋活动有组织有成果,以班级为单位的做好事活动有实效、有意义。3月17日,由实习处季飞老师组织的我校烹饪专业为民服务队在港区菜场开展了很好的为民服务活动,他们以任劳任怨的工作作风,文明礼貌的精神状态,精巧娴熟的专业技能不仅为众多的居民提供了一次实实在在的服务,而且,在社会上富有成效地宣传了我校的办学特色和水平;同一天,由团委王惠新老师组织的入团积极分子志愿服务队数十人一早来到中兴敬老院,对老人们的起居,卫生环境等作了全方位的服务,两支志愿者队伍都展现了学校学生整体队伍好的文明素质和精神风貌,取得了良好的社会效益。
在校内,以班级为单位的学雷锋活动也正方兴未艾;99商储班学生在班主任何红珍老师的组织下,成立学雷锋活动小分队,定期持续地开展了系列服务活动;2000计大班戴辉3月3日,组织带领小分队在港务局开展服务活动,由于组织得法,服务彻底,受到港务局领导及员工的高度评价;99家电班刘春燕老师除组织学生前往敬老院奉献爱心之外,还立足校
内,将全校的灯箱广告的灰尘逐一擦拭;99计大班的同学把目光瞄准了地面上的口香糖残垢,凡此等等,都只是我校学雷锋活动的某些花絮,统计是不完全的,未被表扬的已经开展活动的班级可能很多,这一切充分说明:雷锋精神,这一新时期的学生思想素质中的亮丽火花,在我校是有根底、有源泉、有市场、有地位的。
[关键词]关节炎;类风湿;胱抑素C;肾损害;疾病活动度
[中图分类号] R593.22 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2017)02(b)-0022-03
[Abstract]Objective To explore the change of serum cystatin C (CysC) in patients with rheumatoid arthritis (RA) and its clinical significance.Methods 70 patients with RA were selected as observation group and 70 cases of healthy check-up were selected as control group in People′s Hospital of Macheng City from June 2015 to September 2016.CysC and serum creatinine (SCr) in two groups were detected by using an automatic biochemical analyzer.MDRD equation 7 was used to calculate creatinine clearance(CCr).The correlation between CysC and SCr,CCr,CRP,ESR,DAS28 was assessed respectively.After application of glucocorticoid combined with DMARDs for three months in 30 patients in the observation group (DAS28≥3.2),CysC and some other parameters were again detected and analyzed.Results The Cystatin C level in the observation group was significantly higher than that of the control goup (P0.05).In the observation group,CysC level was positively correlated with SCr,CRP,ESR,DAS28 (r=0.297,P=0.014;r=0.321,P=0.008;r=0.566,P=0.000;r=0.383,P=0.000),and negatively correlated with CCr (r=-0.347,P=0.004).Compared with before treatment,the CysC,CRP,ESR,and DAS28 in active RA patients decreased significantly after treatment (P
[Key words]Arthritis;Rheumatoid;Cystatin C;Renal impairment;Disease activity
风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节破坏为主要表现的慢性全身性自身免疫炎性疾病。RA患者常常出现临床前期肾脏损害,表现为肾小球滤过率(glomerular filtration rate,GFR)轻度下降,慢性炎症可能参与这一过程[1]。胱抑素C(cystatin C,CysC)与GFR密切相关,能反映早期GFR的变化。本文探讨RA患者CysC的变化及与反映RA病情活动的炎症指标的关系。
1资料与方法
1.1一般资料
选择2015年6月~2016年9月在麻城市人民医院住院的RA患者70例为观察组,均符合2010年ACR/EULAR制定的RA分类诊断标准,其中男性10例,女性60例;年龄20~65岁,平均(49±13)岁。选择同期健康体检者70例为对照组,其中男性10例,女性60例;年龄24~65岁,平均(50±12)岁,两组性别及年龄比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。所有RA患者均按RA疾病活动关节评分28(DAS28)计分,计算DAS28评分[2]。在70例RA患者中,选择30例RA病情活动患者(DAS28≥3.2),经过醋酸泼尼松片(国药准字H12020123,天津力生制药股份有限公司)10 mg/d联合甲氨蝶呤片(国药准字H31020644,上海信谊药厂有限公司)10 mg/周和来氟米特片(国药准字H20000550,苏州-欣凯制药有限公司)20 mg/d正规治疗3个月。所有入选者均排除:①患有高血压、冠心病、心功能不全、糖尿病、甲状腺疾病、其他免疫性疾病;②有肝肾功能异常、严重感染性疾病。所有研究对象均签署知情同意书,本研究经我院医学伦理委员会同意。
1.2方法
^察组、对照组患者均行CysC、血清肌酐(SCr)等检测。CysC采用乳胶增强免疫比浊法经Hitachi760-020全自动生化分析仪检测,试剂为宁波瑞源生物科技有限公司,参考值为0.56~1.16 mg/L。SCr采用肌氨氧化酶法经Hitachi7600-020全自动生化分析仪检测,试剂为宁波瑞源生物科技有限公司提供,参考值为44~97 μmol/L,操作严格按照试剂说明书进行。采用MDRD方程7[3]的公式计算肌酐清除率(CCr)来估计GFR。
1.3观察指标
收集观察组患者和其中30例RA病情活动患者正规治疗后的一般资料、实验室检查结果,包括关节肿胀数、关节压痛数、疼痛视觉模拟评分、C反应蛋白(CRP)、血沉(ESR)等。
1.4统计学处理
采用SPSS 22.0软件对数据进行处理。计量资料均数±标准差(x±s)表示,数据符合正态分布,两组间采用两独立样本t检验,治疗前后采用配对t检验,相关性分析采用采用Pearson相关分析,以P
2结果
2.1两组CysC、SCr、CCr的比较
观察组患者的CysC水平明显高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)(表1)。
2.2观察组患者CysC与相关指标的相关性分析
观察组患者的CysC分别与SCr(r=0.297,P
2.3 30例RA病情活动患者治疗前后CRP、ESR、DAS28评分、CysC的比较
30例RA病情活动患者经正规治疗后,CRP、ESR、DAS28评分、CysC较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P
3讨论
CysC又称半胱氨酸蛋白酶抑制剂C,表达于所有的有核细胞,参与细胞内外蛋白水解的调节。CysC是一种较SCr更为敏感、特异性高的评价GFR的指标。此外,CysC参与了自身免疫性疾病的许多病理与生理过程,它的作用机制涉及抗炎、抑制酶与激素前体的活性等[4]。在几个大样本人群研究中,CysC和一些炎性标志物有相关性,这可能反映了它的免疫调节功能[5-6]。
有研究显示,在慢性肾脏病[估算的GFR30 mg/24 h]患者中,白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)较正常对照明显升高,IL-6、TNF-α水平是肾功能损害加重的独立危险因素[7],这和大规模人群的研究结果[8-9]一致。纵向研究显示,IL-6和TNF-α受体2水平和慢性肾脏病发生的风险相关[10]。总之,炎症机制在慢性肾脏病发病中起着重要的作用。
RA患者早期可以出现血尿、蛋白尿、肾功能损害[11],发病机制包括免疫性损伤、继发性血管炎、肾淀粉样变及治疗RA的药物,但发病病因并不完全清楚。RA患者较正常对照出现肾功能损害风险明显增加,炎症可能是其中的一个风险因素[12]。RA患者合并慢性肾脏病使用TNF-α生物制剂,使肾功能下降的速度明显减慢[13]。有报道,RA患者CysC水平较正常对照明显升高,可以反映炎症和未察觉的亚临床肾损害,它既可能是GFR下降的一个指标,也可能是反映RA炎症状态、疾病活动的一个标志物[14-15]。
本文研究显示,RA患者和正常对照比较,SCr、CCr正常,但CysC升高,在RA患者中,CysC和SCr成正相关,与CCr成负相关,显示CysC是反映RA患者GFR的一个非常敏感的指标,可以用来监测早期肾脏是否受损及受损的程度。RA患者CysC浓度和反映RA疾病活动的CRP、ESR、DAS28评分成正相关。在治疗后,疾病活动得到改善,炎性指标下降,CysC浓度也随之降低,显示CysC可能是RA患者病情活动的一个检测指标。其解释的原因可能为:RA患者炎症引起CysC升高,CysC发挥一定免疫调节作用,或者是炎症造成肾脏损害,引起GFR轻度下降,导致CysC升高,或者两者因素都存在,有待进一步深入研究。
综上所述,RA患者CysC既可能是一个反映GFR的敏感指标,也可能是一个反映RA病情活动的指标,可以用来监测RA患者早期肾脏是否受损、病情活动是否得到控制及指导治疗方案的调整。
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关键词:类风湿;关节炎;大鼠;细胞凋亡;穴位贴敷;雷公藤
中图分类号:R244.9文献标识码:A
文章编号:1673-7717(2008)05-0987-05
Effect of Rheumatoid Arthritis Cata-plasma Acupoint Application on CIA Rats Synovial Cell Apoptosis and Secreted TNF-α IL-1β
YE Tianshen1,ZHOU Xianfei2, CHEN Yong1,ZHU XiaoChun1,LIN Xiangyang1, YANG Kaiyan1,FANG Jianqiao3
(1.The First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical College, Wenzhou 325000,Zhejiang,China;
2.Wenzhou Medical College,Wenzhou 325000,Zhejiang,China;
3.Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310009,Zhejiang,China)
Abstract:Objective:A comparison of the therapeutic effects of different acupoint combination with "Rheumatoid Arthritis Cata-plasma" on CIA rats synovial cell apoptosis.Methods: Induced Arthritis Rats’ back were endermic injected with type Ⅱ cattle collogen as animal models. There are five groups for comparison. Arthritis index (AI),electron microscope Apoptosis scores,immunity index P53 bcl-2,NF-κβ scores, and the concentration of interleukin-1β(IL-1β)and tumor necrosis factor(TNF-α)of synovial cell clear supernatant liquid were observed.
Results:Arthritis index (AI),synovial cell apoptosis inhibition and inflammation index in therapy groups were showed more difference than the control group. The systematic selection of acupoints is the best.There was also obvious difference between treatment group and model group in Arthritis index,apoptosis scores, bcl-2 scores,P53,NF-κβ scores,the IL1-β concentration and the TNF-αconcentration. The systematic selection of acupoints is the most effective among all.
Conclusion: "Rheumatoid Arthritis Cata-plasma"can effectually control the pathogenetic condition of the CIA rats and induce synovial cell apoptosis.The mechanism of the treatment probably is up-regulation the express of apoptosis related gene and adjust correlated cell factor and mediators of inflammation. Therapeutic effect of distant and near coordination of acupoints is better than distant selection or local selection of acupoints,that probably is because treating appearance and substance simultaneously, multitarget effect.
Keywords:Rheumatoid;arthrositis;rat;apoptosis;Sticking apply on acupoint;Tripterygium wilfordii
通讯作者:方剑乔,男,教授,博士研究生导师,研究方向:风湿病针刺镇痛。
类风湿关节炎(RA)是常见的严重危害人类身心健康的自身免疫性疾病。迄今为止,其发病机制仍不十分清楚,关节滑膜的过度增生是其主要病理改变。本实验通过给胶原诱导的关节炎(CIA)大鼠不同组合穴位贴敷以雷公藤为主的复方中草药制剂――“类风关巴布剂”,观察其对大鼠滑膜细胞凋亡的影响,并初步探讨经络腧穴在其中的作用。
1材料与方法
1.1动物模别及分组
Wistar大鼠,雄性,90只,体重120~160g,购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。适应性喂养7天后。随机选出 10只为正常对照组(正常组)。其余80只参照《药理学实验指南――新药发现和药理学评价》”[1]及相关文献方法造模。具体方法为:在无菌条件下,用0.1mol/L冰醋酸充分溶解牛Ⅱ型胶原(BcⅡ),浓度为4mg/mL,置4℃冰箱过夜后,与弗氏完全佐剂等体积混合、振荡乳化,制成BcⅡ乳剂(即每0.5mL含1mg BcⅡ)。置4℃冰箱保存备用。注射方法:于大鼠颈、背部5个部位行皮内注射总量0.5mL,含1mg BcⅡ型胶原。第21天后同法0.3mL加强注射。于首次注射BcⅡ乳剂后30天筛选出关节炎指数3分以上,单侧后足外踝以下隆起的体积1.6mL以上的发病鼠40只,按关节炎指数随机分为4组:类风关巴布剂局部贴敷组(局部组)、类风关巴布剂远道穴位贴敷组(远道组)、类风关巴布剂远近配穴贴敷组(系统组)和模型对照组(模型组)各10只。正常对照组(正常组)用生理盐水同法注射。
1.2药物配制及给药方法
1.2.1类风关巴布剂的组成及制作方法 雷公藤、白花蛇、乳香、没药等,共12味,按固定剂量配伍(其中雷公藤占总药量的28%),晒干,研粉,过20目筛,用80%乙醇渗漉提取,然后过滤取液,经低温低压(50℃,-0.8个大气压)蒸馏去乙醇后得浸膏,将浸膏按一定比例加入事先配制的巴布剂基质(主要成份:明胶、甘油、聚丙烯酸钠等)中,并加入0.5%的促渗剂(氮酮),一定比例的乳化剂及防腐剂等,充分溶合,均匀涂布于无纺布上,覆盖聚乙烯薄膜,切成3cm×3cm的方块(重量1g),密封包装,阴凉处储存备用。
1.2.2给药方法 根据临床及有关动物实验的取穴方案[2]取穴。系统组:“大椎”、双侧“肾俞”、双侧“太溪”,共5个穴点;远道取穴组:“大椎”、双侧“肾俞”,共3个穴点;局部取穴组:双侧“太溪”,共2个穴点。根据贴敷总面积相同(剂量相等)的原则,系统组每穴贴敷面积为0.15cm2的圆形巴布剂(半径0.22cm);远道组每穴贴敷面积为0.25cm2(半径0.28cm);局部组每穴贴敷面积为0.375cm2(半径0.35cm)。在穴位处脱毛后贴敷,每3天1次,共5次,每次雷公藤甲素剂量约为3.8μg[3]。正常组和模型组模仿局部组贴敷不含药物的巴布剂基质。15天后各组同时处死取标本。
1.3主要及试剂
仪器:显微镜OLYMPUS(日本),低温高速离心机 BECKMEN(美国),透射电镜 H7500 (日本),酶标仪Bio-rad680(美国)。试剂:牛Ⅱ型胶原chondrex公司(美国),完全弗氏佐剂sigma公司(美国),IL-1β(白介素)试剂盒 biosource公司(美国),TNF-α(肿瘤坏死因子)试剂盒 biosource公司(美国),免疫组化试剂购于福建迈新生物技术开发有限公司(bcl-2) 1.5mL,NF-Kappa B/p50 1.5mL,P53 protein(DO-7)1.5mL,聚赖氨酸玻100片,EiVision+PolymerHRP(Ms/Rb) IHC Kit 6mL。
1.4标本采集及处理
1.4.1滑膜组织采集[4] 于给药15天后,全部动物用2%戊巴比妥钠腹腔麻醉,腹主动脉采血。仰位固定,沿后肢膝关节正中纵行切外皮肤直至暴露出以膝关节为中心约3cm×3cm的区域,可见髌骨下极向下延续有一层平滑光亮呈浅淡黄色的滑膜组织。用眼科直镊钝性分离关节囊的滑膜层和纤维层,完整剥离滑膜组织,最后以眼科镊轻轻夹住其中央,用眼科剪完整剪下滑膜组织约100mg。同法采集另一侧膝关节滑膜组织。
1.4.2 电镜标本制备 用简单随机法抽取各组大鼠一侧滑膜,用消毒的剃须刀轻轻切取约2mm×2mm×2mm的滑膜组织,固定于2.5%戊二醛中,过夜,磷酸缓冲液漂洗,1%锇酸后固定,再磷酸缓冲液漂洗,然后按50%、70%、80%、90%、95%、100%的乙醇系列脱水,再100%丙酮脱水。用spurr包埋剂与丙酮按1∶1(1h),3∶1(3h),纯spurr包埋剂(过夜)渗透。70℃聚合8h。超薄切片,用醋酸双氧铀染色,漂洗干净,然后柠檬酸铅染色,漂洗干净,最后透射电子显微镜观察。
1.4.3滑膜细胞上清液的制备[5] 将剩余滑膜组织充分剪碎,用含有5mg/L LPS的RPMI 1640培养液配制滑膜细胞悬液(1×109/L),加至24孔培养板,每孔1mL,于37℃,5%CO2培养箱中培养48h,收集上清液,-20℃保存作细胞因子检测。
1.4.4免疫组织化学标本的制备 将另一侧滑膜用4%多聚甲醛固定,常规脱水,石蜡包埋,5μm切片,分别进行与凋亡相关的P53蛋白、bcl-2和核转录因子(NF-κβ)的免疫组织化学法染色。免疫组织化学检测P53等的操作过程[6]:(1) 石蜡切片脱蜡和水化后,用PBS(pH7.4)冲洗3次,每次3min(3×3)。(2)根据每一种抗体的要求,对组织抗原进行相反的修复(采用柠檬酸修复)。(3)如有必要,每张切片加1滴或50μL 3%过氧化氢溶液,室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶。PBS冲洗3×3。(4)甩去PBS,每张切片加1滴或50μL的第一抗体(用户自选),室温下孵育60min或4℃过夜,建议阅读每种抗体的说明书。(5)PBS冲冼3×5。(6)甩去PBS液,每张切片加1滴或50μL聚合物增强剂(试剂A),室温下孵育20min。(7)PBS冲洗3×3。(8)甩去PBS液,每张切片加1滴或50μL酶标抗鼠/兔聚合物(试剂B),室温下孵育30min。(9)PBS冲洗3×3。(10)甩去PBS液,每张切片加2滴或100μL新鲜配制的DAB或AEC显色液,显微镜下观察3~10min,阳性显色为棕色或红色。(11)蒸馏水或自来水冲洗,苏木素复染,0.1%盐酸分化,自来水冲洗,PBS冲洗返蓝。 (12)如果用DAB显色,则切片经过梯度酒精脱水干燥,(二甲苯透明)中性树胶封片;如果用AEC显色,则切片不能经酒精脱水,而直接用水性封片剂封片。
1.5观测指标
1.5.1关节炎指数评分方法 参照文献[1]方法:0分:无红肿;1分:趾关节稍肿,足爪或足垫单个区域炎症;2分:关节轻度红肿,足爪和足垫或踝关节2个区域以上的炎症;3分:关节中度红肿,轻度功能障碍;4分:关节重度红肿,僵直甚至畸形,严重功能障碍。
1.5.2细胞凋亡计分[6] 用透射电镜观察,滑膜组织中的凋亡细胞体积缩小,形态不规则,表面微绒毛消失,双层核膜清晰,核固缩,染色质浓聚,胞质少量溶酶体,粗面内质网、线粒体肿胀,空泡变性,游离核糖体发达;或电镜下见滑膜细胞呈梭形,细胞膜皱缩,细胞体积变小,与邻近细胞分离,核内见染色质浓缩,集于核膜下,可见凋亡小体形成,胞质内见线粒体和溶酶体等结构完整,线粒体有空泡改变,根据这些细胞改变的特征被认定为早期阶段的凋亡细胞(见图1),每张切片沿滑膜组织带计算400倍视野中细胞的凋亡数,计数 5~10个视野,标出每个视野平均细胞凋亡数。
1.5.3P53 bcl-2 NF-κβ计分[6] 在滑膜组织中肿瘤抑制基因P53蛋白(P53)、原癌基因(bcl-2)、转录因子核因子-κβ(Nuclear factor-κβ,NF-κβ)表达阳性的滑膜组织细胞核呈橘黄色或棕黄色(见图2),每张切片沿滑膜组织带计算400倍视野中阳性细胞的占有率,计数3个视野,标出每个视野平均阳性细胞占有率,并按阳性细胞占有率分为5级:0:无阳性细胞,+:阳性细胞0~25%,++:阳性细胞25%~50%,+++:阳性细胞 50%~75%,++++:阳性细胞 75%~100%。0级定积分为0,+积分为1,以此类推。
1.5.4凋亡相关细胞因子肿瘤坏死因子(TNF-α) 白细胞介素1β(IL-1β)的检测 按照试剂盒说明,以酶联免疫吸附法(ELISA)测定滑膜浸液的TNF-α、IL-1β浓度。
1.6统计学分析
统计学软件用SPSS11.0统计方法,若数据为正态分布总体比较采用多组单因素方差分析,组间比较用q检验(Newman-Keuls法),否则用秩和检验的Kruskal-Wallis法和Nemenyi法,P
2结 果
2.1关节炎指数积分比较
在表1中,治疗前各组关节炎指数差异无显著性,治疗后与模型组比较有非常显著差异(P
2.2电镜凋亡积分比较
由表2可见,各治疗组与模型组比较差异有显著性,治疗后滑膜细胞凋亡增加,而系统组接近正常组(P>0.05)。
2.3P53 bcl-2 NF-κβ计分比较
在表2中,与模型组比较,各治疗组的P53、bcl-2、NF-κβ积分差异均有显著性,P53和bcl-2积分增加,说明治疗后滑膜细胞凋亡增加,而系统组接近正常组(P>0.05);NF-κβ积分降低,说明炎症改善,此项指标也是系统组接近正常组。
2.4关节浸液的TNF-α IL-1β水平比较
在表3中,与模型组比较,各治疗组的TNF-α水平下降非常显著(P
3讨 论
细胞凋亡是一种由基因控制的细胞自主性死亡方式,对于维持组织器官的形态及机体正常的生理功能有着重要的意义,细胞增生和凋亡的相对平衡的破坏常导致疾病的发生。目前认为RA关节软骨和骨组织的损害主要是由于滑膜细胞的活化和增生而引起的,滑膜细胞过度增生源于滑膜细胞凋亡的相对不足。
RA病人滑膜细胞存在细胞凋亡过程的异常。这些异常与p53、Fas、FasL、Bax、Bcl-2等表达异常及体内其他调节因素(如细胞因子等)有关。最近研究表明[7],RA滑膜细胞p53蛋白存在过度表达,并证实p53蛋白是滑膜细胞凋亡的重要调节剂,p53蛋白表达异常导致RA滑膜衬里层细胞增生和关节损害;Bcl-2是一种抑制细胞凋亡的原癌基因,有研究认为[8]Bcl-2在RA滑膜衬里层细胞中呈高表达可导致凋亡障碍,并与细胞增值相关。
IL-1β前体由滑膜组织的单核细胞或滑膜细胞所分泌,并在细胞内由ICE(IL-1β转化酶)水解为IL-1β,具有较强的致炎作用,有实验表明它参与了RA的滑膜病变,它能刺激IL-6、IL-8和VEGF的分泌,IL-1与其I型受体相结合,触发MAPKs级联,导致NF-κβ移至核内。另据研究IL-1β以剂量依赖方式抑制滑膜细胞fas的表达,即抑制凋亡[9]。
TNF-α对RA滑膜细胞凋亡也有重要影响,它不仅直接引起滑膜细胞的增殖,还可刺激IL-2及TNF-α本身的分泌,进一步引起滑膜细胞的增生。近来研究发现,TNF-α过量表达可减少RA关节内Fas介导的细胞凋亡,继而有助于滑膜细胞的增殖[10]。
NF-κβ普遍存在于真核细胞,能与多种基因的启动子或增强子上的特异性位点结合并促进基因转录的一类蛋白质的总称。NF-κβ通过调节许多细胞因子、趋化因子、生长因子、黏附分子及多种酶的基因表达,参与机体免疫调节和炎症反应,并在细胞增殖、分化及凋亡方面起关键作用。NF-κβ与RA的相关研究成为热点之一。研究[11]证明NF-κβ与血管翳生成、关节软骨侵蚀密切相关。NF-κβ活性明显升高的结果是多种炎性因子、趋化因子、生长因子、黏附分子、受体及酶等物质生成相应增多,而在前炎性细胞因子TNF-α和IL-1介导的NF-κβ异常活化中,NF-κβ起主要的调控作用。
总之以上指标相互作用,密切联系,较全面地反映了RA滑膜细胞凋亡、炎症病理过程,因此,本实验对以上凋亡相关指标进行了免疫组织化学检测,还检测了滑膜细胞培养上清液的IL-1β和 TNF-α水平。同时增加了凋亡检测公认为最重要的指标电镜及有效反映关节炎症情况的关节炎指数。
胶原诱导的关节炎(CIA)的产生和发展与RA有着很多的相似性,二者都依赖于自身反应性T细胞和B细胞的激活,并能产生类似类风湿因子的抗体。本实验选用CIA大鼠为模型。在CIA模型中,滑膜细胞增生活跃的起点应在针对CⅡ的自身反应性T细胞和B细胞激活之后,具体时段可能在首次胶原皮内注射后10~20天或更长,文献报道[12]滑膜明显增生持续在首次注射胶原后3~8周,因此,本实验选择了该时间段。
RA属于中医学痹证范畴,近年来,有报道中医药、针灸[13]能够诱导过度增生的RA滑膜细胞凋亡。并有采用含雷公藤的复方中药穴位贴敷治疗CIA大鼠的研究[14]。笔者将以雷公藤为主药的复方中药制剂与针灸穴位有机结合,研制类风关巴布剂进行了药毒理、制剂学及临床的研究,在大鼠佐剂性关节炎穴位贴敷研究中[15],证明相同的给药剂量(贴敷面积)不同的穴位组合,作用有差异,以系统组(远近配穴)最佳。据检测每1g类风关巴布剂含雷公藤甲素1.71mg[2]。雷公藤甲素体外给药研究[4]发现其主要作用于S期的滑膜细胞,既只能诱导已活化T细胞发生凋亡,而不能造成静止期的T细胞发生凋亡;另据研究[16]雷公藤甲素还对CIA大鼠滑膜细胞产生的TNF-α和NF-κβ等有显著抑制作用。
本实验采用四肢关节肿胀计分法(关节炎指数)评价动物四肢的关节炎症,与以前的结果[15]相似,治疗后各穴位贴敷组与模型组比较均有明显改善(P
今后的研究目标,从微观看,要从分子生物学的角度(如基因、信号转导机制等)深入研究作用的主要机理;从宏观看,应该进一步优选药物和穴位处方,以达到最佳疗效。
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说是七个孩子,实际是七位老人,其中最年轻的孙桂琴也已经63岁了。她是雷锋生前当少先队校外辅导员时辅导过的最小的孩子,她见到雷锋时只有7岁。其他六位也是雷锋辅导过的学生。
虽然离开雷锋已经超过半个世纪,可是这些老人的报告还是那么生动感人。因为他们讲的这些事情,对他们的影响太深了,影响了他们一辈子,又影响了无数后来人。
孙桂琴还记得看见过雷锋叔叔两次流眼泪。一次是雷锋被抚顺建设街小学聘请为校外辅导员,校团委书记把红领巾系在雷锋胸前时,雷锋激动地流下了眼泪。他说:“几年前我刚刚摘下红领巾,今天我又重新戴上了红领巾,以后我就是你们的大朋友了。”另一次是听小朋友们议论幸福生活从哪里来,许多人只想到爸爸、妈妈、老师,雷锋哭着举起带有伤疤的左手给孩子们讲起自己苦难的童年。孙桂琴大学毕业后当了军医,14次被评为学雷锋标兵和先进个人,作学雷锋报告一千多场。
展世荣在学校担任文娱委员,学校组织看电影,她负责收电影票钱,收完钱后发现少了三角钱,她眼泪汪汪,不想干了。雷锋帮她掏了三角钱,又教育她做好事也不能粗心大意。她作为公共汽车公司的乘务员,因为附近有聋哑学校学生,特意学了手语。
张雅琴记得一次义务劳动,有个男同学摘红领巾擦汗,雷锋走过去用自己的手绢帮那个同学擦汗,教育孩子要爱护红领巾。她在档案局工作,帮助一位九十岁高龄的空巢病危老人找到失散四十多年的独生子。
韩颂东讲了雷锋教他们尊重老师、认真学习知识的故事,教他们到菜地抓害虫。她后来在中学和大学当老师,多次被评为先进,退休后加入“抚顺市学雷锋志愿者联谊中心”。
陈雅娟记得雷锋帮他们建节约箱,热爱每一颗螺丝钉。她后来在烟草部门工作,曾经帮助失足青年、贫困学生。
刘静记得雷锋鼓励她学画,多画英雄人物和大好河山。她考上抚顺教育学院艺术系。退休后画了一批以雷锋为主题的美术作品。
李长宁曾经在元旦早上在小树林里和雷锋偶遇,帮雷锋捡了半天粪。他曾经多次帮老人抢救牲口、下河救人。
三月份,我系的雷锋活动从缅怀、理论、实践三个方面将开展六个活动:“弘扬雷锋精神,共建文明初教”的签名会;“雷励锋行,你我共参与”知识竞赛活动;“暖春三月,爱心绽放”心理讲座;“你是我的同学爱心基金会”捐款活动;“我爱我校,感恩师情”清扫校车活动;“以爱之名,两校携手,共创文明卫生城市”活动。此外,我系将号召各班开展雷锋主题班会及学雷锋活动。
三月份,我系也将配合协助校团委所举办的一系列的学雷锋活动的开展,及号召我系学生积极参与。
为了进一步深入建设文明卫生校园,为响应学校号召,我系将于三月份完善月工作考核评比制度。
从这个学期开始,我系的早锻炼将改为早自习,是学生都能养成好习惯,全身心投入到学习到来。
围绕团员这一方面,我系将配合全校团委做好补证补档的工作,并且力求将各班团员率达至100﹪,此外,将组织学生参加五月份的团员宣誓活动。
将选拔四名口才方面及反应方面优秀的学生参加校社联与四月份举办的辩论赛活动,并积极提交一些创建新辩论题及做好考勤方面的工作,安排好学观看。
五月份,我系将挑选一些优秀作品参加校团委举办的“五四书画展”活动,和一些优秀节目参加校团委举办的走进社区的活动。
为了体现我系专业特色,活跃我系文化生活,发掘学生的潜力我洗将从四月份至六月份举办“第二节魅力教师文化艺术节”。此次艺术节共分为10项进程:开幕式晚会、教师专业手抄报及书画、手工制品、“我心中的教师”朗诵比赛、校园歌曲比赛、教师教学专业舞蹈比赛、儿童情节剧表演、教师基本功三笔一画比赛及教师课堂多媒体课件制作比赛。
关键词:网络环境;课堂教学模式;探索研究
中图分类号:G434 文献标识码:A 文章编号:1671-7503(2013)13/15-0113-03
随着网络不断向教育教学领域渗透,网络环境下的各学科教学引起了人们的思考。在教学实践中,笔者着力研究如何让计算机作为辅助手段,在“任务驱动”的教学模式中,为音乐教学所用,为学生所用。让学生变枯燥的学习为快乐地畅游知识海洋。
常规的音乐教学很难兼顾到学生的个体化学习。不管学生的个体需求如何,只能按照教师设计的统一的路子或听或唱。因此,就出现了好的学生吃不饱,差的学生跟不上,课堂上很难实施因材施教。而网络环境下的音乐教学有两个最显著的特征,那就是灵活性和自主性:针对同一首歌曲,学生可以根据自己的学习风格、兴趣爱好、能力水平,翻阅资料、点击窗口,灵活调节,选择自己喜欢的方式来学习,而不是依靠教师设计的单一的线式教学来学习。自主性指在学习过程中学生主动控制学习过程,控制学习步调,在教师的指导下确定自己的学习目标,学会与他人合作、交流、学会如何评价学习成果,这些技能的培养,有助于提高学生的学习自主性。
下面笔者以小学音乐《学雷锋》为例,简要说明如何运用Frontpage平台来进行教学。
一、创设情景,明确任务
音乐课有很多课型,在这里笔者主要以学习歌曲的综合课进行了探索和尝试。要使学生的学习能在与现实情况基本一致或相类似的情景中发生,需要创设与当前学习主题相关的、尽可能真实的学习情景,引导学生带着真实的任务进入学习情境。学生点击课题进入《学雷锋》这一课的学案界面,出现了学习任务、教师导航、歌曲学习、协作平台、相关资料、自我测评六个菜单。学生选择“学习任务”进入。屏幕显示“学习任务”为:同学们,你们知道雷锋吗?你知道人们为什么要学雷锋吗?人们不仅在行动上学雷锋,小歌手们还要歌唱《学雷锋》呢。就让我们一起走近雷锋,一起学习歌曲《学雷锋》,比一比,谁能成为最佳小歌手吧!相信自己,你一定能行!这样一来,学生一方面明确了今天的任务,另一方面对完成这项任务充满兴趣,带着真实、具体的任务进入学习状态。
二、教师导航,掌握方法
学生接受这个任务以后,心情很兴奋,处于一种积极的学习状态。但是,怎样完成这个任务呢?需要教师导航,在师生的共同讨论中,给予学生方法上的指导,方法指导是导航,要从多个方面进行。在这一课的方法导航中,经过讨论确定从三个方面进行指导。其一是“最佳小歌手对你说”。这里主要是从歌手的素质方面提出了一些要求,让学生了解和知道什么样的小歌手才是最佳小歌手。其二是“歌曲《学雷锋》对你说”。主要是从歌曲的背景、情绪、演唱提示的角度告诉学生要想唱好这首歌,必须了解哪些相关的知识,怎样表现歌曲才能更好,等等。其三是“学习小博士对你说”。这是从怎样学习的角度来指导学生,如何利用教师提供的网上资源去了解雷锋;要做最佳小歌手,建议你如何根据自己的实际情况,利用自己的优势去学习这首歌曲(例如:有的学生识谱能力较强,可先学谱后学词,而有的学生识谱能力较弱,那就可以先唱词再识谱。)等方面去指导。这样,学生明确了任务,又得到了方法的指导,就可以通过自主学习的方式和相互协作来完成任务了。
三、自主学习,独立探究
通过阅读“教师导航”,学生已经很明确了要想做个出色的小歌手,就要认真学习。教师为学生学习提供了相应的学习资源。“歌曲学习”中有“MTV欣赏”、“范唱欣赏”、“歌曲伴奏”、“歌谱学唱”、“音乐乐园”、“演唱提示”。需要说明的是,“MTV欣赏”主要是通过对歌曲情景的再现,一是激发学生的学习兴趣,二是帮助学生更好地理解音乐作品。一般可以通过三种方式来制作。一是把现有的MTV作品或是录像片放到网页上(如歌曲《嘀里嘀里》)。二是根据歌曲表现的内容从有关的录像片中寻找合适的片断剪辑起来,通过Authorware配上范唱,下面配上歌词,做成课件的形式,链接到网页上。如:《过新年》就是用的这方法,效果非常好。还有就是歌曲所表现的内容现有的录像资料中很难找到,简单的歌曲可通过FLASH做成动画,如:《小雨沙沙》,复杂的可根据歌曲内容画成若干幅画,再配上范唱和歌词,效果也很好(当然如果能用FLASH来做是最好了),如:《学雷锋》笔者就是用的此法。
而在“范唱欣赏”中,屏幕显示的是整首歌曲的歌谱和歌词。在计算机教师的帮助下,实现了歌曲可以反复播放,并且可以做到想听哪一句,鼠标一点就可以听到哪一句。这样,学生遇到难点句,就可以反复播唱这一句。在“歌谱学唱”中也可以实现这一点。大大降低了学生学习的难度。
“相关资料”里边,链接了两部分内容。其一是关于歌唱方面和乐理方面的相关知识。其二是很多关于雷锋的文字、图片和视频资料。都是经过教师认真筛选的和歌曲紧密相关的资料。如:雷锋的生平、雷锋的短片、少先队员学雷锋的小故事和有关雷锋的歌曲,等等。学生面对它,就能够更好地理解歌曲、把握歌曲,并通过歌曲学习了相关的知识,拓展了学生的文化视野。
四、网上协作学习
这个环节既可以独立存在,又贯穿在学生的整个课堂学习过程之中,学生在学习过程中需要通过网上协作更好地完成学习任务。首先,进行网上分组,让学生通过小组内的协商、交流和讨论,通过不同观点的交锋、补充,促进他们对歌曲的理解和对歌曲的表现能力。
在对学生进行分组时,教师要根据学生特点进行分组,使每一个小组内的学生各有所长,有效地提高学习效率。因为,在学生对歌曲的理解和表现方面,每个学生都有自己的经验世界,不同的学生对歌曲的理解都会有所不同。有的学生觉得力度记号在歌曲中的作用很重要,而有的学生更注重情感的表现,通过学生之间的沟通互动,他们会了解各种不同的观点。而在此过程中,学生要学会理清和表达自己的见解,学会聆听和了解他人的想法,学会互相接纳、赞赏、互助。他们需要不断地对自己和他人的见解进行反思和评判。通过这种协作和沟通,学生可以从不同的侧面更好地理解歌曲,对歌曲的表现手法也有了更丰富的认识。
学生在自主学习和网上探索的过程中,对所遇到的问题和所形成的看法可以通过人机对话、师生交流、生生协作(协同、伙伴、角色扮演,等等)得到进一步的理解和解答,从而较好地完成学习任务。
五、网上测评
经过在网络环境下的自主学习、网上协作学习,学生都努力完成了学习任务,并在“自我测评”中进行了测试并提交。“自我测评”包括“我的收获”、“我的感想”两个部分。在以往的教学中,对歌曲的理解一般都是教师请几个学生站起来说一说,其他学生听。而在这里,每个学生都可以把自己的所感、所想在“我的收获、我的感想”里畅所欲言,而且可以随时调看其他学生的,每个学生都积极参与到集体的沟通中来,这种相互作用促进了每个学生的发展。
六、分组展示
音乐教学有其特殊性,具有直观性和现场生成性的特点。因此,所有的学习过程和成果展示自始至终通过网络来实现也是不现实的,所以,评选最佳小歌手和小组成果的展示,就让学生走下网络进行表演。有的小组采用了一人独唱,其他用打击乐器伴奏的形式,有的小组采用了分角色表演的形式,有的小组采用了齐唱的形式,有的小组还编配了优美的舞蹈动作。通过这个环节,让学生对各自的表演再评价,同时,进一步地学会评价他人,欣赏他人,通过这种自评、他评、师评的评价方式,培养学生评价意识和品质,培养学生欣赏别人的习惯,学生在这种评价过程中也得到了交流。
在进行课后讨论的时候,学生们各抒己见。基础好的学生说:我不但学会了歌曲,还了解了更多的乐理知识和有关雷锋叔叔的事迹,学得很尽兴。基础薄弱的学生说我不需要精神紧张地跟着集体学习,对不会的句子我可以反复听唱,完成学习任务,我体验到了从没有过的轻松。
当然,在网络环境下进行音乐教学也有一些需要注意的问题和其不足之处。其一,网络教学对环境的要求高;其二,无论教师还是学生,必须具备相当的计算机操作能力,所以,一般适合在中高年级应用;其三,教学过程的设计,要从学生学的路子来设计,而不是把教师教学的路子转移到网络环境中,克隆成学生学习的过程;其四,教师设计的学案要尽量是超文体、非线性的,以满足不同特点、不同基础的学生的学习需要。
总之,当网络走进我们的课堂,怎样用、怎样用好、怎样用出最大的效益,值得我们每一个教师去思考。特别值得广大一线教师结合本地区、本学校的实际情况去开创网络环境下音乐教学的新模式、新局面。
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敬爱的老师,亲爱的同学们:
大家好!我叫田##,是**学校一(3)班的学生。很荣幸能参加“学雷锋”讲故事活动,今天我为大家讲的题目是“学习雷锋 品德铸就未来”。
雷锋是全心全意为人民服务的楷模,雷锋精神影响着代代中华儿女;下面就让我为大家讲雷锋乐于帮助他人的故事。
同学小朱上课不专心,作业做得马虎,字写得歪歪扭扭。雷锋为了帮助他,放学后,情愿自己多绕点路,也陪着他一同回家,给他讲要努力学习的道理,教给他写字方法。经过多次帮助,小朱的进步还是不大。有一次,雷锋悄悄地把小朱的作业本拿来,用纸蒙着他的作业本中写得歪歪扭扭的字,一个一个地描下来。第二天,雷锋拿出描的字给小朱看,问他可认得是什么字?小朱便噘着嘴说:“这是鬼画桃符,哪像字呀。”雷锋说“这些字就是你自己写的呀!!”小朱听了,不禁吃了一惊,心里感到十分惭愧。雷锋又耐心地劝他一定要好好学习。这件事对小朱的教育可大了。从此,他学习认真了,字也写得规矩了,成了班里的一个好学生。在雷锋眼里为人民做好事,助人为乐,是他最大的幸福和快乐。
朵朵花儿在胸前开放,
张张笑脸喜洋洋.
看!我们长大了,
就要离开幼儿园了,
亲爱的老师,
我们要毕业了,
我们要好好谢谢您!
是您,教我们从小学雷锋,
团结互助爱集体;
是您,教我们唱歌.做画,学做人,
还给我们讲有趣的故事;
是您,带我们散步,游戏,做早操,
天天锻炼身体.
亲爱的叔叔阿姨,
在我们离开你们的时候,
我们心里非常感谢.
你们每天做出可口的饭、菜、点心,
让我们吃得津津有味;
你们把幼儿园打扫得干干净净,
让我们愉快地生活学习.
啊 ……
亲爱的老师,亲爱的叔叔阿姨,
在你们辛勤的培育下,
我们象小树苗一样长大.
我们到小学以后,
一定要好好学习,
争取戴上鲜艳的红领巾,
来向你们汇报成绩.
再见吧,亲爱的老师!