化学发光免疫精选(九篇)

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第1篇：化学发光免疫范文

关键词：化学发光免疫法；免疫放射法；促甲状腺激素

促甲状腺激素（thyrotropin，thyroid stimulating hormone，TSH）是腺垂体分泌的促进甲状腺的生长和机能的激素。TSH多以游离的形式存在于血液中，其含量很低，是性质稳定的糖蛋白激素。TSH受下丘脑一脑垂体一甲状腺轴线控制，当人体的甲状腺功能发生变化时，血清TSH的水平出现波动。甲状腺机能低下即甲减者的表现，多为血清中的TSH水平增高，甲状腺功能亢进即甲亢者，多为血清中TSH的降低。临床上，因此，TSH是判断甲状腺功能和下丘脑垂体甲状腺轴功能是否正常的一线指标[1-2]。作者采用化学发光免疫法（CLIA）与免疫放射法（IRMA）两种方法同时测定正常人及患者血清TSH，对其结果比较分析，从不同角度探讨两种检查方法在甲状腺功能疾病中的临床诊断价值，现将结果报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料 所有人员均为来我单位健康查体或就诊的人员，见表1。

1.2仪器与试剂 CLIA采用美国雅培公司Axsym免疫化学发光仪，IRMA采用西安262厂F5-20089γ-放射免疫计数器。免疫化学发光测定试剂盒，由美国雅培公司提供，IRMA采用中国原子能科学研究院提供的试剂盒。

1.3方法

1.3.1样品采集 于每天上午采集研究对象空腹血清3 ml，然后分离血清，立即进行检测或-20℃冷冻保存，1 w内检测。

1.3.2 TSH的检测

1.3.2.1批内变异 分高、中、低三份质控样本，所有质控样本分别用CLIA和IRMA测定血清TSH含量，重复测定10次，计算批内变异系数。

1.3.2.2批间变异 将高、中、低三份血清样品，分别置于20只试管中，密封后置-20℃冰冻保存，于20个测定日复融后检测其含量，计算其变异系数。

1.3.2.3结果比较 将三组试验人员共213份血清样品同时采用CLIA和IRMA测定其TSH含量，对得出的结果进行比较。

1.4统计学处理 数据采用（x±s）的形式表示，对两种方法测得的结果行相关性分析，甲亢、甲减组和正常组比较采用T检验。

2结果

2.1批内变异和批间变异，见表2。

结果表明，CLIA的重复性和精密度优于IRMA。

2.2三组受试人员TSH测定结果比较，见表3。

2.3三组受试者诊断符合率比较，见表4。

TSH对甲亢组患者与甲减组患者的诊断符合率均较高，尤其是对于甲减的诊断，CLIA法检测TSH几乎是最为灵敏的考察指标。

2.4相关性比较 用CLIA和IRMA法分别对受检血清标本进行定量分析，结果表明，两法测定结果相关系数为0.995，提示两法相关性良好。

3讨论

TSH 是腺垂体分泌的一种糖蛋白激素，主要功能是调节甲状腺激素分泌，临床上是反映甲状腺功能非常敏感的指标[3]。目前，常用的测定血清TSH 的方法有免疫放射分析法（IRMA）和化学发光法（CLIA）。化学发光法（CLIA）测定是根据化学反应产生的辐射光的强度来检测物质含量的一种有效的痕量和微量分析方法[4]。

本报告数据显示，CLIA和IRMA法检测血清TSH相关性好。但比较两种检查方法，化学发光法具有以下优点：①无污染：CLIA 法检测以化学发光剂作为标记物，试剂稳定且无放射性，对周围环境无污染，工作人员也不会损害；IRMA通常以125 I标记，125 I半衰期仅为1个月左右，放射性碘对环境有污染，对工作人员也有伤害。②线性范围宽：有报道显示，低浓度时化学发光免疫分析法区线性范围较宽，在低浓度范围测定较免疫放射分析法更为准确[5]。③自动化程度高：化学发光免疫分析法自动化操作，这就排除了人为的误差，使操作更加简便，明显优于放射免疫法。④本组结果显示， CLIA的重复性和精密度优于IRMA。

综上，CLIA在检测血清TSH方面有着IRMA无法比拟优势，建议有条件的实验室采用。

参考文献：

[1]尹东光，贺佑丰，刘一兵，等.促甲状腺激素化学发光免疫分析的研究[J].分析化学研究报告，2004，7（32）：893-896.

[2]王华新，张立东，秦晓光.促甲状腺激素检验研究进展[J].标记免疫分析与临床，2008，15（5）：328-331.

[3]范仙萍 赵爱萍.血清甲状腺激素高灵敏度测定的临床应用探讨[J].实用医技杂志，2000，6 （7）：426 .

第2篇：化学发光免疫范文

【关键字】放射免疫法、化学发光免疫法、血清AFP、效果分析

【中图分类号】R426 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484（2014）07-4045-02

临床检测血清AFP中，应该对患者采用有效生长激素检测方式，这样才可以提高检测的准确性，提升患者的身体健康质量，提高治病疗效【1】。以下针对我院从2013年1月到2013年12月期间采集的100例住院患者血清标本进行分析，探讨临床中，采取化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP的效果。

1 资料与方法

1.1资料

对我院2013年1月到2013年12月的100例住院患者进行血清标本收集工作， 本次研究的血清标本采集中，均是由经验丰富的检验人员在2小时内，对清晨空腹患者抽取静脉血3 ml，并排除患者有先天性疾病、心肝重要器官疾病；试验仪器包括德国罗氏公司的检测试剂盒，以及电化学分析仪、放射免疫分析仪、深低温；将患者随机分配成对照组与试验组，且在每组中都具有50例患者的血清标本，患者在性别、身体状况以及年龄等资料方面，相互进行比较后，不存在差异，无统计学意义。

1.2 方法

对于对照组患者血清标本检测中，将会使用XAKP- 2000A/02 型 γ 计数仪【2】，并应用中国原子能科学研究所提供的AFP 试剂盒，对患者的待检测样本进行梯度稀释，使检测物浓度在12.5～8000umol/L范围间，进行放射免疫法检测；对试验组患儿50例血清标本检测中，将会使用KL1- e411 型全自动电化学发光仪进行检测【3】，并稀释其检测样本的梯度，可以保持检测物浓度为12.5～8000umol/L，进行电化学发光法测定。对两组检测方法比较中，分析比对其检测血清AFP水平差异，考察其之间的相关性；并对两组检测方法中的低值、中值、高值进行记录试验，且测定每日测定每份样本22次，连续测20天，并考察批内CV值。

1.3 统计处理

对本次两组研究结果，可以应用统计学软件SSPS 12.0【4】，针对最后两组的检测结果进行处理， 在数据处理之中，计量资料我们将会用t检验进行比较，技术资料用x2检验，设置统计学的水准是a=0.05。

2结果

两组检测结果，电化学发光法检测血清AFP线性范围更宽，电化学发光法检测血清AFP精密、灵敏度度更高，其两组检测结果之间差异非常显著（ P

3讨论

据悉，血清AFP是检测原发性肝细胞肝癌的标志物，是最灵敏性、特异性的肿瘤标志，在临床肿瘤诊断中发挥重要作用。针对血清AFP检测中，应该制定合理的检测方案，才可以取得准确的检测结果，提高肝癌患者的生活质量。因此在临床诊断检测血清AFP中化学发光免疫法，较常规放射免疫法检验有较好的效果，可以提高检测结果的准确性、灵敏性、高度特异性。

化学发光免疫法检测血清AFP，在临床中具有较好的效果，应用化学发光系统作为抗原抗体反应指示系统，定量检测抗原、抗体，并应用发光剂标记抗体，与其它检测方法相比，具有很高的稳定性，采用机器自动加样，具有准确性，化学发光免疫法检测的线性范围较放射免疫法检测更宽，更适宜于临床检测 血清AFP。在血清AFP测定中，应用电化学发光法进行检查，可以采用高度的特异性抗体【5】，有效起到清除样本干扰的作用，提高检测结果的灵敏度，减少误差，使用电化学发光法测定血清AFP，临床检验效果更稳定。

由上可知，在临床中对血清AFP检测中，应用放射免疫法与电化学发光法检测进行检验，电化学发光法检测较放射免疫法更具应用优势，具有更好重复性，精密度高，有很好的临床效果，值得在实际在推广应用。

参考文献

[1] 张红祥. 化学发光免疫法与放射免疫法检测血清AFP临床分析[J]. 中国现代药物应用. 2010（07）

[2] 章茂友. 放射免疫法与化学发光免疫法检测血清AFP效果分析[J]. 中国现代医生. 2010（36）

[3] 张改英，王耀荣. 化学发光免疫法和放射免疫分析法测定血浆脑钠肽浓度的比较[J]. 疾病监测与控制. 2010（10）

第3篇：化学发光免疫范文

关键词：化学发光免疫分析法 血清C肽 胰岛素

Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.01.209

Chemiluminescence immunoassay detection serum C peptide and insulin clinical analysis

Zhang Yangwen

Abstract：Objective：To investigate chemiluminescence immunoassay detection serum C peptide and insulin clinical application value.Methods：December 2010 to December 2012 were our Ⅱ diabetes patients were set to observe group， will be in the same period of our medical without diabetes health is set to 120 cases of control group， the two groups of serum insulin and c-peptide test comparing.Result：Two groups of C-P Insulin and compared with significant difference （P

Keywords：Chemiluminescence immunoassay Serum C peptide Insulin

【中图分类号】R9 【文献标识码】B 【文章编号】1671-8801（2012）01-0231-01

最近几年，非同位素免疫检测在世界各国得到了越来越广泛的应用，化学发光免疫分析就是其中一种[1]。现对2011年06月至2012年12月我院收治的Ⅱ型糖尿病患者应用化学发光免疫分析法检测血清C肽与胰岛素取得的良好情况报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料。将2011年06月至2012年12月我院收治的Ⅱ型糖尿病患者120例设为观察组，男72例，女48例，平均年龄57.9±4.1岁，病程1～4年，患者均无糖尿病并发症。将同期在我院体检的非糖尿病健康者120例设为对照组，男69例，女51例，平均年龄56.1±3.9岁，均无糖尿病家族史。受试者在处于安静状态的条件下，保持平卧位，抽取三到四毫升的静脉血，标本全部都按照实验室常规工作进行对应的分析测定。

1.2 检测方法。化学发光技术用到的抗体有两种，都是常量的。抗体一位于标记试剂里面，为吖啶酯标记鼠单克隆抗C肽。抗体二位于固相试剂里面，属于和顺磁颗粒予以共价结合形成的鼠单克隆抗C肽。试剂批号不同，对应的标准曲线也不一样，用前借助条形码阅读器，也可以通过键盘输定标曲线数值到系统里面，然后通过C-P以及Insulin定标液这两点定标的方法对标准曲线进行对应的校准[2]。测试样品的时候，一定要严格准确的测量质控品。通过西门子ADVIA CentaurXP化学发光免疫分析仪实施项目检测。

1.3 统计学处理。采用SPSS 13.0统计软件。采用X±S表示，采用X2检验。差异有显著性为P

2 结果

两组的C-P及Insulin相比差异具有显著性（P

3 讨论

准确严格的测定胰岛素和C肽，可以说对于正确地进行糖尿病的诊断，准确地做出分析治疗，以及随后的相关回访，意义都是非常的重大的。尤其是C肽，其无论是对于Ⅰ型，还是Ⅱ型的糖尿病来讲，都具有很好的诊断指引意义。借助于胰岛素对糖尿病进行治疗的过程中，一个特殊的问题就是如何更加准确的测定胰岛素的存在[3]。之所以这样说，是因为外周循环里面存在的抗体以及外源性的胰岛素极大的干扰了胰岛素的有关测定。不过用胰岛素予以具体治疗的病患，抗体对于C肽分析则没有特别明显的干扰。C肽测定能够帮助对患者内源性胰岛素的具体储备情况做出准确的评估，相比于胰岛素而言，这种方法更加的可靠。无论是胰岛素，还是C肽分泌出以后回来到静脉血循环里面，经由肝脏，最终进入到体内的系统循环里面。C肽有三十五分钟的半衰期，胰岛素只有五到十分钟的半衰期[4]。肝脏对C肽基本上没有什么摄取能力，故而代谢清除率非常的缓慢，也就是在外周血里面，C肽和胰岛素相比，稳定性更强，能够更加精准的对β细胞的具体分泌情况予以反映，对于借助胰岛素进行对应治疗的病人，这一指标更为有用。

试验证实，糖尿病Ⅱ型患者和健康组相比，对应的胰岛素以及C肽都明显的偏低，差异显著（P

参考文献

[1] 王学晶，徐国宾，李海霞，等.化学发光免疫分析法测定血浆B型钠尿肽的评价及参考区间调查[J].临床检验杂志，2009，27（4）：283-285

[2] 陈恺杰，揭育丽，陈建英.心血管疾病患者血中N末端B型脑钠肽水平的检测及临床意义[J].国际检验医学杂志，2010，31（5）：482-484

[3] 谢玮，赵枰，陶国华，等.化学发光免疫分析测定胰岛素及C肽在2型糖尿病诊断中的临床应用[J].标记免疫分析与临床，2009，16（5）：283-285

第4篇：化学发光免疫范文

目的: 研制人血清中促甲状腺素（tsh）的化学发光免疫检测试剂盒。方法: 采用辣根过氧化物酶标记的抗tshβ亚单位特异性单克隆抗体(mab), 与固相包被的抗tshα亚单位的另一mab配对, 以鲁米诺作为底物, 采用两步法建立了双位点夹心法人血清tsh的化学发光免疫定量分析法。结果: 该方法灵敏度为0.0788 miu/l, 批内cv平均为4.7%, 批间cv平均为8.4%, 平均回收率为93.05%。该检测与lh、 fsh和hcg无交叉反应。部分实验样品的测试结果显示该试剂与国外同类试剂（雅培architect i2000）的测定结果明显相关(r＝0.984)。结论: 该方法具有较高的灵敏度、 重复性和准确度, 与其他同类产品相比简便、 快捷、 成本低, 适于临床检测和科研应用。

【关键词】  促甲状腺激素（tsh） 化学发光免疫分析法 试剂盒

促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone, thyrotropin, tsh)是一种由垂体前叶分泌的糖蛋白激素, 由α和β2个亚基组成,  相对分子质量(mr)为28000[1]。tsh本身受下丘脑分泌的tsh释放激素trh的调控, tsh的主要生理作用是调节甲状腺激素的合成与分泌, 血液中甲状腺激素水平与腺垂体分泌tsh的量之间有负反馈抑制关系[2]。甲状腺功能改变时, tsh的波动较甲状腺激素更迅速且明显, 是反映下丘脑垂体甲状腺轴功能的敏感指标, 因此采用灵敏度高的tsh免疫分析法具有重要的意义。化学发光免疫分析(chemiluminescent immunoassay, clia)是一种灵敏的免疫分析方法, 在免疫诊断试剂研制中已得到了广泛的应用[3]。本研究根据化学发光免疫分析法的原理研制了血清tsh的检测试剂盒, 与国内外同类产品相比具有简便、 快捷、 成本低等优点。

1  材料和方法

1.1  材料  tsh单克隆抗体(mab)、 tsh标准品抗原和辣根过氧化物酶（hrp）为sigma公司产品, 光免板为thermo electron公司产品, 化学发光底物为biorad公司产品。

1.2  方法

1.2.1  标准品的配制  将tsh抗原标定后溶于小牛血清中, 配制成含0.1, 1, 5, 20, 100 miu/l的标准溶液。

1.2.2  抗体包被板的制备  将100μl含tsh mab（0.5mg/l）的ph9.6碳酸盐缓冲液加至包被板中, 37℃包被2 h, 再用含10 mg/l bsa的0.01 mol/l ph7.4磷酸盐缓冲液于37℃封闭2 h后晾干备用。

1.2.3  酶标记物的制备  tsh的酶标记物采用过碘酸钠法制备, 然后经0.01 mol/l ph7.4磷酸盐缓冲液透析过夜后, 加入等量的甘油于-20℃保存备用。

1.2.4  检测方法  将50 μl待测样品或标准品加入包被tsh的光免板中, 37℃温育30 min, 弃反应液, 用洗涤液（含0.5 mg/l tween20的0.01 mol/l ph7.4磷酸盐缓冲液）洗5次, 加酶标记物50 μl, 37℃温育30 min后同样用洗涤液洗5次, 然后加入发光底物于5～10 min内测定各孔的发光值rlu。样本中的tsh浓度依据由标准品tsh浓度和对应的rlu建立的数学模型进行定量。

2  结果

2.1  动力学性质  在hrp鲁米诺h2o2发光体系中, 将不同量的免疫复合物加入发光液中, 发光强度（rlu）随反应时间而变化。10 min后rlu接近峰值, 在5～15 min内rlu较为稳定, 随后开始缓慢下降。

2.2  反应条件优化

2.2.1  加样量对rlu的影响  样本和酶标记物的加样量分别为50 μl和100 μl考查标准品（0、 0.1、 1、 5、 20、 100 miu/l）rlu, 发现加样量为100 μl与50 μl rlu相差不大, 说明50 μl的加样量反应能达到平衡(图1)。

图1  加样量对rlu的影响（略）

2.2.2  反应模式对rlu的影响  采用二步法。第一步: 加入标准品和待测样品后, 将反应体系在37℃分别温育15、 30、 45、 60 min; 第二步: 加入酶标记抗体后, 将反应体系在37℃分别温育15、 30、 45、 60 min。结果表明温育时间为30 min时反应皆能达到平衡(图2)。

图2  温育时间对rlu的影响（略）

a: 第一步温育时间对rlu的影响; b: 第二步温育时间对rlu的影响.

2.3  稳定性  将试剂盒放置于37℃ 6 d后, 比较与放置前参考标准品各点rlu值, 参考标准品各点rlu值未见明显降低, 且本底发光值无明显升高, 表明试剂盒标准曲线无明显漂移, 满足稳定性要求。

2.4  方法学评价

2.4.1  标准曲线与灵敏度  在设定的免疫反应和发光条件下, 以标准血清的浓度（0～100 miu/l）制作的标准曲线见图3。同时测定20个零标准, 用零标准均值加上2倍标准差, 计算出此方法的灵敏度为0.0788 miu/l。

图3  tsh标准曲线（略）

2.4.2  精密度  取低(4.44 miu/l)、 中(19.45 miu/l)和高(79.23 miu/l)3种tsh浓度各重复测定10次, 测定批内cv分别为6.2%、 3.3%和4.6%, 平均为4.7%。隔日分别进行5次独立试验, 测批间cv分别为8.3%、 7.6%和9.3%, 平均为8.4%。

2.4.3  准确性  在已知tsh浓度的血清中加入3种不同浓度的标准血清,测定加入回收率为93.05%。将tsh浓度为44.42 miu/l的血清用标准零血清分别按1/2、 1/4、 1/8、 1/16稀释, 测量各稀释浓度的tsh含量, 测定稀释回收率为99.86%。

2.4.4  特异性  在已知浓度的血清样品中加入不同浓度的lh、 fsh和hcg后, 对tsh的测定无干扰。

2.4.5  与进口试剂的比较  将研制的tsh clia定量检测试剂盒与abbott architect i2000全自动化学发光系统共同对30例正常人、 20例甲亢及80例甲低临床标本进行检测, 通过数据分析, 得出两个检测系统所得数值具有明显相关性(图4)。

图4  与abbott全自动化学发光系统相关性曲线（略）

3  讨论

   

血清促甲状腺素定量检测的方法主要有放射免疫法、 酶联免疫法、 时间分辨荧光免疫法和化学发光免疫法等几种[4]。考虑到目前化学发光和时间分辨荧光分析仪器几乎全部为国外厂商生产, 而绝大多数厂商采用仪器加试剂盒捆绑销售的垄断模式, 并在仪器中人为设置排它性检测程序, 从而抬高了配套试剂盒价格, 增加了检测成本, 所以本工作旨在开发国产低价、 稳定、 通用的人血tsh clia试剂盒。首先对读数时间进行了动力学研究, 发现其在5～15 min内rlu处于平台期,反应时间选择10 min。其次对反应条件进行了实验摸索, 在不同的温育时间和加样量的条件下, 各rlu值相差不大, 因此选择了50 μl的加样量与两步共1 h的反应时间。

   

我们研制的tsh化学发光免疫测定试剂盒通过方法学鉴定表明无论是灵敏度、 准确性、 特异性等技术指标均达到了临床诊断的要求[5]; 同时该方法具有操作方便, 反应时间短和成本低等优点, 具有较广阔的市场应用前景。

【参考文献】

 

[1] hay id, bayer mf, kaplan mm, et al. american thyroid association assessment of current free thyroid hormone and thyrotropin measurements and guidelines for future clinical assays[j]. clin chem, 1991, 37(11): 2002-2008.

[2] 尹东光, 贺佑丰, 刘一兵, 等. 促甲状腺激素化学发光免疫分析的研究[j]. 分析化学研究报告, 2004, 7（32）: 893-896.

[3] 叶成果. 促黄体生成素化学发光免疫定量检测试剂盒的研制[j]. 河南科技大学学报, 2004, 22（2）: 83-84.

第5篇：化学发光免疫范文

【关键词】 化学发光酶免疫分析法；酶联免疫吸附法；乙型肝炎病毒标志物；效果 

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2016.01.011 

我国是乙肝病毒感染疫情严重的国家， 我国人口中约有1/10为乙肝病毒携带者[1]。乙肝病毒标志物是检测乙肝病毒感染的直接证据， 同时， 可通过监测乙肝病毒标志物观察患者病情、评价药物治疗效果。目前， 临床常用的乙肝病毒标志物监测的方法为酶联免疫吸附法， 随着化学发光酶免疫分析技术的不断发展， 其在检测上的应用也逐渐为人们所重视， 且在乙肝病毒标志物的检测中应用效果良好。 

1 资料与方法 

1. 1 一般资料 选取本院传染科2013年1月～2014年1月门诊疑似乙型肝炎患者200例作为本次的研究对象。其中， 男108例， 女92例， 年龄19～68岁， 平均年龄（38.1±12.8）岁， 患者经基础检查， 无其他传染性疾病及肝脏器质性病变。 

1. 2 方法 所有患者均空腹采用静脉采血方式， 抽取适量血液。室温下离心分离15 min， 分离血清以备检测。 

1. 2. 1 仪器及试剂选择 化学发光酶免疫分析法选择实验仪器为郑州安图生物工程有限公司生产的LUMO半自动分析仪， 乙肝病毒标志物定量检测试剂为郑州安图生物工程有限公司试剂盒；酶联免疫吸附法检测乙肝病毒标志物试剂为上海科华生物工程股份有限公司试剂盒， 选择实验仪器为芬兰生产的W-k3酶标仪。 

1. 2. 2 检测方法 对采集的200份血清标本分别采用化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附法进行乙肝病毒标志物检测， 每次以定值参比血清作为质控， 检测方法严格按照仪器及试剂说明书进行。酶联免疫吸附法采用手工添加样品， 检测结果根据酶标仪结果显示判定为阳性或阴性；化学发光酶免疫分析法采用全自动加样器添加样品， 用LUMO半自动分析仪定量检测结果。 

另取1.0 ng/ml HBsAg定值参比血清， 两倍稀释后分别采用以上两种检测方法检验， 测定两种检验方法的最低浓度。 

1. 3 判定标准[2] 检测结果大于参考值的上限为阳性， 5项检测指标的上限标准分别为HBsAg：0.2 ng/ml， HBeAg：0.05 NCU/ml， HBeAb：2.0 NCU/ml， HBcAb：1.5 NCU/ml， HBsAb：10.0 mIU/ml。对单独一项为阳性或弱阳性或双阳性标本设置双空复查， 结果仍为阳性的则判定为阳性。分别统计各检测指标阳性、阴性的例数。 

1. 4 统计学方法 采用spss18.0统计学软件对数据进行统计分析。计数资料以率（%）表示， 采用χ2检验。P<0.05表示差异具有统计学意义。 

2 结果 

2. 1 两种方法检测5种乙肝标志物阳性结果比较 化学发光酶免疫分析法对HBsAg及HBeAb的检出率明显高于酶联免疫吸附法（P<0.05）；两种方法对HBeAg、 HBcAb、HBsAb的检出率比较差异无统计学意义（P>0.05）。见表1。 

2. 2 灵敏度检测 化学发光酶免疫分析法检测的最低浓度为0.12 ng/ml， 酶联免疫吸附法检测的最低浓度为0.4 ng/ml。化学免疫酶免疫分析法的检测灵敏度高于酶联免疫吸附法。

3 讨论 

乙肝病毒血清标志物[2]是乙型病毒性肝炎的主要病原标志， 基于我国严峻的乙型肝炎疫情与不断增加的乙型肝炎患者， 采用有效的病原标志物检测方法对乙肝的早期防治与乙肝药物治疗效果的评定具有重要意义。 

酶联免疫吸附法[3]是检测乙肝标志物的目前应用最广泛的方法， 采用人工加样， 具有操作简单、快捷的检测优势。但通过临床研究发现[4]， 乙肝病毒测定结果为弱阳性患者在复查中也容易出现时阴时阳的情况， 采用酶联免疫吸附法进行复查， 结果的重复性较差， 说明酶联免疫吸附法灵敏性不高， 对临界结果的检测效率低。同时， 酶联免疫吸附法容易受试剂盒质量、仪器校准、工艺差别等众多原因的影响， 其检测结果可能存在较大差别， 稳定性较差。随着化学发光酶免疫分析技术的不断发展， 化学发光酶免疫分析法在乙肝病毒标志物的检测中逐步展现了其较高的应用价值。化学发光酶免疫分析法是借助发光底物自身的发光强度进行测定的分析技术， 相比于酶联免疫吸附法灵敏度较高。本次调查结果对200份血清样本分别进行化学发光酶免疫分析法与酶联免疫吸附法检测乙肝病毒标志物， 结果显示， 化学发光酶免疫分析对HBsAg的检出率为60.0%， 对HBeAb的检出率为24.0%， 明显高于酶联免疫吸附法的54.5%、17.5%（P<0.05）；另经灵敏度检测， 化学发光酶免疫分析法检测的最低浓度为0.12 ng/ml， 酶联免疫吸附法检测的最低浓度为0.4 ng/ml， 化学发光酶免疫分析法的检测灵敏度高于酶联免疫吸附法。 

综上所述， 酶联免疫吸附法具有操作简单、方便快捷的优势， 但化学发光酶免疫分析法可有效检测出病毒标志物中的假阴性情况， 检测结果稳定性高、重复率高， 对准确显示乙肝病毒的感染进程、评价抗病毒治疗效果具有重要意义。为保证测定效果， 临床采用化学发光酶免疫分析法检测结果更准确， 可有效减少漏检、误检的发生率。 

参考文献   本文由wWw.DyLw.NeT提供，第一论 文 网专业教育教学论文和以及服务，欢迎光临dYlw.nET

[1] 廖奕.化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附法检测乙肝病毒标志物的比较. 大家健康（学术版）， 2014（10）：48-49. 

[2] 郭辉. 化学发光免疫分析法与酶联免疫法测定乙肝病毒标志物的相关性分析. 中国伤残医学， 2013， 2（5）：270-272. 

第6篇：化学发光免疫范文

关键词：2型糖尿病；血清；C肽；胰岛素；化学发光免疫分析

2013年全球大约有3.82亿人患有糖尿病，而2型糖尿病占据了其中90%[1，2]。我国近年来2型糖尿病发病率也在不断攀升[3]，因此对糖尿病患者进行早期诊断及分型显得尤为关键。而化学发光免疫分析是目前免疫检验中技术领先的检测方法，具有准确性高，污染小，操作方便，检测速度快等优点，已得到广泛普及使用[4]。我院采用全自动化学发光免疫测定仪对110例初诊为2型糖尿病患者，63例健康体检者进行了血清C肽和胰岛素测定，以期探讨更有效更简便的糖尿病早期诊断检测方法。

1 资料与方法

1.1一般资料 糖尿病组：收录2013年10月～2014年3月本院首次确症的2型糖尿病患者110例，其中男68例，女42例；平均年龄（46.73±8.46）岁。对照组：63例健康体检者，男37例，女26例；平均年龄（47.16±7.20）岁，63例健康体检者肝肾功能、血尿常规、血糖血脂水平均正常，且无糖尿病病史。两组患者在性别、年龄方面无统计学差异（P>0.05）。

1.2仪器与试剂

1.2.1仪器 深圳新产业生物医学工程股份有限公司生产的迈格鲁米（MAGLUMI）2000型化学发光测定仪。

1.2.2试剂 深圳新产业生物医学工程股份有限公司生产的化学发光测定仪配套试剂，包括C肽测定试剂盒，胰岛素测定试剂盒。

1.3方法 173例受试者均于检测前1晚晚餐后开始禁食，在检测当天早晨空腹抽取肘部静脉血5mL。血液采集后均于室温下静置后离心，分离血清部分，并于2h内放于Maglumi2000化学发光测定仪检测血清中C肽和胰岛素水平。测定时严格按照操作说明执行。

1.4统计学处理 所得数据利用SPSS 19统计软件进行分析处理，获得数据以（x±s）表示。采用t检验进行组间差异处理。

2 结果

2.1检测性能检验 采用深圳新产业化学免疫分析仪及配套试剂测定C肽、胰岛素浓度水平，其中两项批内变异系数（CV）均≤5%，批间变异系数（CV）均≤10%。C肽分析灵敏度为0.01ng/mL，胰岛素分析灵敏度为0.3μIU/mL（见表1）。C肽测定约25min出第一个结果，之后每分钟完成3个测试果；胰岛素则约37min出首个结果，之后每分钟完成3个检测。

2.2检测结果比较 经过SPSS 19数据软件处理，2型糖尿病组患者基础C肽平均浓度水平为（3.37±0.89）ng/mL，基础胰岛素平均水平为（22.32±7.18）μIU/mL，而健康体检组人群基础C肽平均浓度水平为2.11±0.97ng/mL，基础胰岛素平均水平为（13.50±3.77）μIU/mL。糖尿病组餐前C肽、胰岛素水平与健康体检组相比差异均具有统计学意义（P

3 讨论

胰岛素是由胰岛B细胞合成份泌，分子量5734，半衰期只有5min。胰岛素的分泌受各种刺激所影响，如脂肪、蛋白质的代谢产物、胃泌素、胰泌素、抑胃肽等，葡萄糖是最强的刺激物质。而儿茶酚胺、α-肾上腺素、生长抑素、苯妥英钠对胰岛素的分泌起抑制作用[5]。C肽是一种分子量为3018的多肽，半衰期大约为30min。在胰岛B细胞中，胰岛素原被酶促裂解为胰岛素（A链加B链）和C肽分子，二者同时以等摩尔浓度被分泌入血液中。但由于胰岛素半衰期短，直接受肝脏的代谢作用，且血液循环中的胰岛素抗体以及外源性的胰岛素疗法及其他药物也会干扰人体内胰岛素水平，故血清胰岛素水平通常并不能代表胰岛细胞的分泌功能。而胰岛细胞分泌的C肽半衰期较长，含量水平不受体内、体外胰岛素等影响，也不被肝脏灭活或代谢，其血清水平能较准确地代表胰岛细胞功能。因而，在测定胰岛素的同时对C肽进行测定，将获得更加有效的结果，更能为准确地了解胰岛细胞的合成与分泌能力，为临床2型糖尿病早期诊断提供依据。

本研究结果显示，化学发光免疫分析方法测定C肽、胰岛素灵敏度高，批内变异系数、批间变异系数小，且检测速度快，有利于早期糖尿病的辅助诊断。对比分析两组测定结果提示，糖尿病患者空腹测定前，其体内C肽、胰岛素均有一定储备，说明2型糖尿病组受检者体内存在一定程度胰岛素抵抗，机体自身无法有效识别胰岛素，而最终造成血液循环中C肽，胰岛素基础含量水平抬高，符合二型糖尿病的基础定义。

参考文献：

[1]Williams textbook of endocrinology [M].12thed）Philadelphia：Elsevier/Saunders，1371-1435.

[2]"International Diabetes Foundation：Diabetes Atlas"[J].Retrieved，2014.

[3]黄沛隆，血C肽和胰岛素测定在2型糖尿病中的应用[J].实用医学杂志，2005，12（2）：336-337.

第7篇：化学发光免疫范文

【关键词】 化学发光； 放射免疫； 胰岛素

中图分类号 R446 文献标识码 B 文章编号 1674-6805（2013）28-0068-01

胰岛素可以分解血糖，对于治疗糖尿病等症状有很好的功效，所以测试血清中胰岛素的含量有非常重要的医学意义。目前盛行的两种检测血清中胰岛素的方法为化学发光法和放射免疫法，它们的费用、精准度都不相同。本研究主要针对这两种方法作出对比和分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取笔者所在医院于2012年8月-2013年2月收治的糖尿病患者90例，均接受放射免疫法检测、化学发光法检测胰岛素。其中男49例，年龄19～68岁，平均（43±5）岁；女41例，年龄21～70岁，平均（41±4）岁。

1.2 检测方法

先用真空干燥管采患者的静脉血，且于室温下离心约10～20 min以后置于冷藏室保存[1]。

1.2.1 化学发光检测法 本研究中使用的化学发光检测仪器为罗氏公司生产的E170化学发光仪，它有极高自动化程度和高速准确的测试性能。将所采样本加入到反应器中混合，再记下显示读数[2]。

1.2.2 放射免疫检测法 本研究中使用的放射免疫检测仪器为先进技术工业公司生产的CM570801分析仪，它性能好、检测灵敏度高。因本过程涉及到放射性物质，故须在特定环境中由专业工作人员进行检测。

1.3 统计学方法

本研究所得结果由SPSS 12.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，进行t检验，以P

2 结果

化学发光法和放射免疫法的批内变异系数、批间变异时间比较差异无统计学意义（t=1.78，P>0.05）。化学发光法和放射免疫法检测结果虽有差异，但是它们之间的相关度却很高，相关系数r值为0.994。详见表1。

3 讨论

近年来人们的生活水平和生活方式都发生了很大的变化，糖尿病患者逐渐增多。胰岛素作为胰岛分泌的可以降低血糖、促进糖原、脂肪、蛋白质合成的激素，其地位非常重要，若血糖中胰岛素含量太低则会引发糖尿病。所以检测血清中胰岛素的含量有非常重要的医学意义[3]。目前临床上最常用的检测血清中胰岛素含量的方法是化学发光检测法和放射免疫检测法，两者效果皆很好而且特点各异。应用化学发光检测法和放射免疫检测法检测同一份标本，两个结果之间有显著性差异，但两种方法检测结果之间高度相关。

化学发光检测法优点为：设备简单，环保无污染等，以化学发光作为标记物进行定量检测，其试剂具有稳定和无毒的优点。但它也有自身的缺点，如试剂价格较昂贵、需要特殊的设备来进行检测[4]。放射免疫检测法优点主要表现在适用范围、使用复杂程度等，以及特异性很好。它的缺点：只能测定特定物质、放射性物质因有半衰期保存的时间较短、放射性物质会造成环境污染和机体损伤等[5]。本研究结果显示，化学发光法和放射免疫法的批内变异系数、批间变异时间比较差异无统计学意义（t=1.78，P>0.05）。化学发光法和放射免疫法检测结果虽有差异，但是它们之间的相关度却很高，相关系数r值为0.994，因此所测得的结果均是可信的。

综上所述，放射免疫和化学发光检测方法均有可取之处和局限性，两者在检测时间、检测效果以及费用等方面皆不尽相同，临床上可根据具体情况来选择检测方法。另外，若能将两者结合，充分发挥其优点，也许可以有更好的效果。

参考文献

[1]鲁彦，岳建云，苑芳，等.化学发光法和放射免疫法检测胰岛素[J].医学研究杂志，2012，41（7）：40-41.

[2]De Vries M G，Westerink B H C，Verporte E，et al.Development of micro-fluidic glucose sensing system based on an enzymatic micro-reactor and chemiluminescence detection[J].Science China（Chemistry），2012， 4（24）： 515-523.

[3]吕莉，冯凭.不同血糖水平人群血清脂联素水平与胰岛素抵抗的关系[J].现代诊断与治疗，2008，1（22）：9-11.

[4]孙振亚，郑定容，杨庆，等.化学发光免疫法与放射免疫法检测血清PSA的比较[J].中国热带医学，2010，24（9）：1660-1661.

第8篇：化学发光免疫范文

【摘要】化学发光分析是根据化学反应产生的光辐射强度确定物质含量的一种痕量分析方法，这种技术日益得到重视，它灵敏度高，线性范围宽，不需要外来光源，仪器设备简单，操作方便，分析快速快，易实现自动化，价格便宜，选择性强。常用的化学发光技术有电化学发光、化学发光免疫分析、微粒子化学发光等。本文主要探析此技术在临床检验中的应用。

【关键词】化学发光 分类 临床应用

化学发光(chemiluminescence，CL)早在19世纪80年代就得到证实，即在化学反应过程中瞬间以释放光子的形式放出能量。化学发光法因其灵敏度高、线性范围宽和分析速度快等优点，已在医学检验中得到广泛地应用。

一 化学发光的基本内涵

化学发光分析法是近30年来发展起来的一种高灵敏的微量及痕量分析法，化学发光分析具有灵敏度高、线性范围宽、不需要外来光源、分析速度快、仪器设备相对简单、便宜等优点。化学发光分析测定物质的方式可分为直接法和间接法。化学发光分析反应类型可分为酶促反应和非酶促反应两类。此外化学发光分析法可以与其他分析技术联用，如流动注射分析、电化学分析、免疫分析、固定化试剂技术、传感器技术等分析技术相结合。

二 常用的化学发光技术

首先，电化学发光。该技术是通过对电极施加一定的电压进行电化学反应而发光，通过测量化学发光光谱和强度来测定物质含量的一种痕量分析方法。它将电分析化学手段和化学发光方法相结合，具有独特的优点，如重现性和灵敏度进一步提高，在多种组份同时存在时，可施加不同波形、不同电压的信号进行选择性测量等，是潜在的分析手段之一。

第二， 化学发光免疫分析是以标记发光剂为示踪物信号建立起来的一种非放射标记免疫分析法，具有灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单、操作方便、分析速度快和容易实现自动化等优点。鲁米诺、异鲁米诺及其衍生物、吖啶酯衍生物、辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶是目前化学发光免疫分析中使用最多的标记物。

第三，微粒子化学发光是化学发光免疫分析的特殊形式，是以化学发光剂为底物的酶免疫技术，同时应用了磁性微珠做固相载体，增加了吸附面积，使抗原抗体最大限度的结合。微粒子化学发光技术所需标本量极少，孵育时间大大缩减，同时因其选择性吸附抗原，从而提高了特异性、灵敏性，使测定结果准确、可靠，并减少污染。

第四，化学发光生物传感器是通过非创伤或非损伤性的办法，连续、实时、动态地检测生物体内的某一种或几种物质浓度的技术。特别是化学发光免疫传感器是将具有分子识别作用的抗原或抗体以适当的方式固定化而制成，它结合了化学发光高灵敏度和抗原抗体特异性结合的高度专一性以及无污染等特点，是替代放射免疫分析的重要分析工具，已日益受到重视。

三 化学发光分析在临床实验室中的应用

第一，化学发光法与血液系统疾病，化学发光免疫分析在测定G一CSF上是敏感的，可用于测定正常人或疑有G一CSF减少疾病的患者血清G一CSF，对于预测免疫抑制剂治疗再障的效果有一定的作用。例如，慢性骨髓增生性疾病，如慢性髓性白血病和真性红细胞增多症(Pv)是与中性白细胞功能失常有关的。Pv的PMN在用趋化肤(fMLP)刺激后化学发光值及丁量减少.这与磷醋酶D活性受损有关。而没有或用PMA刺激的化学发光值及了量是正常的。慢性髓性白血病患者也可观察到这个现象，但程度更小。

第二，化学发光法与消化系统疾病。幽门螺杆菌(HP)在慢性胃炎和消化性溃疡的发病中起着重要作用。病理组织学研究显示已感染HP的胃粘膜具有吸引中性白细胞积聚的特点。在鲁米诺增强的化学发光反应土表现为增强；溃疡性结肠炎患者结肠粘膜面虽然有中性白细胞浸润.但有人发现溃疡性结肠炎患者和正常人相比，在发光的峰值、峰时、斜率方面无明显差异。仅27%具有活动性溃疡性结肠炎患者刺激物有增高的化学发光。可能的原因是在这些患者中性白细泡不起主要作用或者不呈高活动性。慢性肝病(特别是肝癌时)0:的产生和HZOZ一MPO一CL一系统是抑制的。依赖Cypridina虫荧光素类的化学发光及依赖鲁米诺的化学发光均是降低的。但是慢性肝炎由于体内免疫复合物含量的增高而诱导发光增强，与正常组相比基础化学发光增强。急性肝炎由于体内免疫复合物增加不明显，吞噬细胞应答能力及血清调理活性均未明显受损。因此，急性肝炎的基础发光、峰时、斜率与正常人相比变化不明显，但单位PMN峰值低于正常，说明急性肝炎中性粒细胞的吞噬功能也降低；

第三，化学发光法可以准确检测心血管疾病。例如，急性心肌梗时，中性粒细胞的化学发光值逐渐升高且与CK山条高度相关。因此，可通过患者PMN一CL的变化估计病情。冠心病心绞痛时化学发光值是升高的。

第四，化学发光法与内分泌疾病。首先，甲状腺疾病。甲状腺激素是临床许多疾病(尤其是甲状腺疾病)诊断常用的指标。甲状腺激素(TH)具有抗氧化作用，这种作用可能是由于中性白细胞特异的受体一配体相互作用引起的。TH的抗氧化作用可通过鲁米诺增强的化学发光法测定，化学发光值表现为抑制。第二，糖尿病。患者由于可溶性或颗粒性因素激活多形核白细胞(PMN)膜上的NADPH氧化酶产生超氧阴离子自由基，然后转变为过氧化氢和轻自由基。糖尿病患者分离的PMN的基础化学发光值与正常人相比明显升高。但当NADPH氧化酶被抑制或磷酸己糖旁路被阻断，则糖尿病组及正常组的化学发光值均受到不同程度的抑制。NO可用多种方法测定，但化学发光法是其中最为理想的一种。NO本身不产生化学发光，当它与超氧阴离子反应时可产生很强的光，外源的精氨酸加入反应系统中，化学发光值会更显著地提高。糖尿病患者的化学发光值还可体现循环免疫复合物的水平。具有高循环免疫复合物的患者，化学发光值也高。

参考文献

［1］ 何建文.中国实验临床免疫学杂志，1991年第6期。

［2］ 游利.化学发光在临床检验中的应用［J］.国外医学临床生物化学与检验学分册，1998年第3期。

［3］ StephenAreher.FasebJb.1993，7(2):349一360

［4］ 刘庆艳.化学发光在疾病检测中的应用［J］.国际医药卫生导报，2003年第8期

第9篇：化学发光免疫范文

关键词：降钙素原；化学发光；定量；检测

中图分类号： R446.61 文献标识码：B

降钙素原（procalcitonin，PCT）在健康人血清中含量极低。在全身性细菌、真菌和寄生虫感染时，PCT水平异常增高，且增高的程度与感染的严重程度及预后相关。但在病毒和支原体等感染时不升高或仅轻度升高[1，2]。因此，PCT在全身性细菌感染和脓毒症鉴别诊断、预后判断、疗效观察等方面有很高的临床价值。目前PCT的检测试剂大都为进口产品。我们将洪诚公司开发的国产PCT化学发光免疫检测试剂与梅里埃公司PCT荧光发光检测试剂进行临床比对实验，同时检测临床血清样本121份。现将临床比对结果报道如下。

1 资料与方法

1.1样本来源 福建省立医院2013年8月5日～8月7日临床血清样本121份（男75例，女46例，年龄0～95岁，平均年龄61岁）。

1.2主要试剂与仪器 PCT化学发光免疫检测试剂、HC-CLA-III化学发光分析仪（洪诚公司产品）；洗板机（北京天石公司）。对照试剂与仪器：PCT定量检测试剂、Minividas荧光分析仪（梅里埃诊断公司产品）。第三方验证试剂为罗氏PCT电化学发光定量试剂盒、罗氏E601电化学发光仪。

1.3方法

1.3.1洪诚PCT化学发光定量测定方法 采用化学发光定量检测方法检测临床血清样本121份。严格按照说明书方法进行操作（试剂批号：130510）。

1.3.2梅里埃PCT荧光定量测定方法 采用一步免疫荧光测定法定量检测临床血清样本121份。严格按照说明书方法进行操作（试剂批号： 1002139250）。

1.3.3罗氏PCT电化学发光定量测定方法 以上两种方法经复检结果仍然不一致的临床样本，用第三方罗氏PCT电化学发光定量试剂盒检测。严格按照说明书方法进行操作（试剂批号：171526-01）。

1.3.4统计分析 按重症感染的分级阈值（PCT≥0.5ng/mL），将临床样本检测结果分为重症感染组和非重症感染组分别统计，求出总符合率。对两种试剂盒的测定值进行相关性分析，求出相关系数r值。考核试剂与对照试剂检测结果之间的一致性比较采用Kappa值进行分析。

2 结果

2.1PCT检测结果 两种方法同时检测临床血清样本121份，见表1。其中，2例经复检后结果仍然不符合的病例用第三方罗氏PCT试剂盒进行检测，见表2。

2.2符合率及一致性强度 与进口试剂（梅里埃PCT荧光定量试剂盒）比对，国产PCT化学发光定量检测试剂的灵敏度（重症感染符合率）=39/40×100%=97.5%，特异度（非重症感染符合率）=80 /81×100%=98.8%，准确度（总符合率）=119/121×100%=98.3%（见表3）。Kappa值=0.963，一致性强度为最强。

3 讨论

降钙素原是近年来发现全身严重感染性疾病的标志物，与其他传统实验室指标相比，PCT在诊断细菌性感染疾病中有更好的特异性，是一个非常有应用价值的诊断感染状态的指标。近几年来在国内发展迅猛。目前国内用于PCT检测的试剂大都为进口试剂，由于进口试剂和仪器的价格比较昂贵，不利于在国内的普及和推广。

我们将洪诚公司开发的PCT化学发光免疫检测试剂与梅里埃公司PCT荧光发光检测试剂进行临床比对实验，同时检测临床血清样本121份。结果表明，洪诚产品的剂量-反应线性相关系数为0.998；与进口试剂盒具有良好相关性（r=0.988）；以0.5为重症感染的阳性阈值，检测结果的阳性符合率为97.5%，阴性符合率98.8%；一致性强度为最强（Kappa值=0.963）。以上结果表明，PCT化学发光免疫定量检测试剂在灵敏度、特异性等技术指标均达到了临床实验室诊断的要求；同时由于制备该试剂盒所用的大部分原料均为国产试剂，因此其生产成本低，试剂盒的市场售价将大大低于进口试剂，非常适合临床检验推广应用。

参考文献：