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1.1研究对象
1.1.1入选标准
年龄18~65岁,男女不限;新鲜烧伤创面、供皮区创面;烧伤深Ⅱ°创面,伤后48h内入院,烧伤面积小于30%者;无疤痕性体质及癌变者;无全身性感染者;无严重的心、肝、肾及造血系统合并症者;知情同意并签署知情同意书。
1.1.2排除标准
孕妇、哺乳期妇女和未成年儿童;伴有全身感染者;有严重的心、肝、肾及造血系统合并症者;对多类药物有过敏史或近期有过敏疾患者;4周内使用过已知对主要脏器有损害的药物者;不配合治疗,无法完成研究内容者。
1.1.3剔除标准
因种种原因不能按计划完成试验,观察资料登记不全者;但是有严重不良反应以至不能继续临床研究者,应纳入不良反应统计,但不记入疗效统计;观察过程中病情变化,必须改变治疗者;违背研究计划或者同时用其他相关药物治疗者;撤回知情同意书,不愿继续观察者;依从性差者。
1.2给药方法
2013年2月~2014年2月共入选216例患者,根据随机数字表法随机分为观察组(108例)和对照组(108例),两组常规清创后酒精湿敷再用等渗盐水清洗创面。两组同时给予抗感染治疗、消除水肿、氨基酸、脂肪乳等静脉营养输液,即根据患者的感染菌合理使用抗菌药,如庆大霉素、克林霉素、红霉素、环丙沙星、苯唑西林、青霉素、头孢唑林等,同一环境内应定期轮换使用、联合使用。单纯脑水肿的患者给予20%甘露醇静滴,同时静滴20%人血白蛋白;合并肺水肿的,交替使用20%甘露醇与呋塞米,4~6h/次;单纯肺水肿者,除脱水利尿外,同时给予酒精氧吸入。选择口服或经鼻胃营养管用喂食泵注入肠内营养制剂,如安苏、能全力、能全素、瑞代、瑞高、百普力等,或静脉给予定量氨基酸、脂肪乳和葡萄糖注射液等。在此基础上,观察组同时给予rh-aFGF冻干粉(上海万兴生物制药有限公司,规格:25000U/瓶,批号:20130302-1),入院第1天给予25000U/5cm2冲洗治疗后,每日喷雾治疗3~4喷/cm2,6~8次/d,连续治疗3周。对照组同时给予rh-bFGF冻干粉(珠海亿胜生物制药有限公司,规格:35000U/瓶,批号:20130302),入院第1天给予35000U/5cm2冲洗治疗后,每日喷雾治疗3~4喷/cm2,6~8次/d,连续治疗3周。冲洗喷雾治疗媒均为生理盐水。
1.3评价指标
近期随访30d,部分患者全部愈合后停止随访评价以下终点:①完全愈合时间,愈合标准为创面完全上皮化,无残留烧伤创面;②12d及15d完全愈合率,记录第12天及第15天完全愈合人数,并以百分比描述;③白细胞计数:0分,≤10×109•L-1;1分,10~15×109•L-1;2分,>15~20×109•L-1;3分,≥20×109•L-1或≤4×109•L-1。感染创面的渗出评分:1分,较少且渗出液清;2分,较多且渗出液不清;3分,非常多且渗出液含脓液。总评分分级(白细胞水平评分+感染创面的渗出情况评分):1~2分轻度;3~4分中度;5~6分重度。安全性评价标准:不良事件观察,准确界定“记录”报告不良事件,并评价不良反应与药物的相关性。治疗前后检测两组血常规,心、肝、肾功能。
1.4统计学方法
采用SAS8.0统计软件进行数据处理,计量资料根据数据是否符合正态分布采用t检验、配对t检验、秩和检验、配对秩和检验、中位数检验等,计数资料采用卡方检验,等级资料采用Ridit分析。一般统计检验均采用双侧检验,P<0.05为具有统计意义。
2结果
2.1临床基线资料各中心入组病例数
304医院30例,北京积水潭医院66例,上海第二军医大学附属上海长海医院46例,上海交通大学附属上海瑞金医院52例,南方医科大学附属广东省人民医院22例。两组患者年龄、性别、烧伤面积、烧伤类型、烧伤部位、入院时感染发生率等比较,差异无统计学意义(P>0.05),即两组基线可比。
2.2愈合情况
治疗组完全愈合时间为(13.2±2.4)d,对照组为(16.7±1.5)d,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01);观察组完全溶痂时间较对照组明显缩短(P<0.05),12d完全愈合率(P<0.01)、15d完全愈合率(P<0.05)均明显高于对照组,差异有统计学意义。
2.3总评分情况
治疗7d后,观察组白细胞水平(P<0.01)、渗出评分(P<0.01)、总评分为中度(P<0.05)等方面与对照组比较,差异有统计学意义,而在总评分为轻度和重度方面组间差异则无统计学意义(P>0.05)。
2.4安全性评价治疗过程中
观察组4例出现瘙痒反应,2例轻微红斑反应,对照组6例出现瘙痒反应,1例出现红斑。两组药品不良反应比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前后检测两组血常规,心、肝、肾功能无明显改变。
3讨论
烧伤后病情的复杂变化皆因烧伤创面的变化引起并随创面修复而告终,因此,正确处理创面是烧伤治疗成败的关键。修复创面的细胞包括表皮细胞、成纤维细胞和内皮细胞。机体受到创伤后,创缘的成纤维细胞和内皮细胞增殖、分化,同时迁移到创面;成纤维细胞分泌胶原,形成组织支架;内皮细胞形成新生血管,它们共同组成了修复真皮组织的肉芽充填伤口,最终由表皮细胞爬行覆盖创面肉芽,共同完成创面愈合。细胞外基质包括糖蛋白、蛋白多糖和胶原,主要由成纤维细胞产生,具有调节修复细胞生长、增殖、分化和迁移等功能。研究显示成纤维细胞生长因子具有可促进内皮细胞分化形成血管,促进成纤维细胞的增殖,促进肉芽组织生长的作用,促进创伤创面糖蛋白、蛋白多糖、胶原纤维的合成,因此,成纤维细胞生长因子是机体创面愈合不可缺少的多肽。目前成纤维细胞生长因子已经通过基因工程产业化,主要分为二类,一类是rh-aFGF,一类是rh-bFGF。而rh-aFGF作为第三代成纤维细胞生长因子,相比于rh-bFGF的促愈合作用更强,平均相比于缩短约3d。因此rh-aFGF可能是目前最适合用于烧伤创面的修复的药物之一。
4总结
一、省级卫视进入市场份额竞争时代的主要因素
导致省级卫视进入市场份额竞争时代的原因并不是惟一的,这其中既有各个省级卫视自身的原因,也有来自用户、新媒体、省级卫视全国战略的多方面原因。
1.有线用户接近饱和,进一步拓展空间有限,城乡家庭平均每户可收看频道数量持续增加。全国电视观众抽样调查分析报告显示,全国有60%以上的观众是通过有线电视网络收看电视节目的。在城市,有80%的家庭接入省市有线网,有线接收方式是城市观众收看电视的主要方式。而我国有线电视用户数一直在持续攀涨。
2.新媒体的迅速崛起,进一步与电视媒体争夺受众的收视时间。随着科技的进步和人们生活水平的提高,以互联网、数字电视、IPTV为代表的新媒体的迅速崛起,对传统电视构成了威胁和冲击。从时间竞争的角度看,在报纸、广播、电视、互联网这四大媒体中,互联网已成为电视最主要的竞争对手。从收入增长角度来看,过去几年国内各电视台自身15%~20%左右的年收入增长率,远低于优质互联网企业50%~100%的增长速度。数字付费电视正在全国各城市勃兴,在国家广电总局政策扶持和民营资本的大力推动下,我国数字付费电视的城市用户量不断上升,在青岛、深圳、南京、杭州、上海等城市数字付费电视已经并正在影响观众收视的习惯。不远的将来,将会是数字电视统治的时代。
3.频道数量激增,观众总量增长有限,观众分流加快。由于长期的四级办电视政策的影响,中国出现了大大小小级别的电视台,根据《中国广播电视年鉴2006》的统计,2005年初,我国共有368座电视台,2124套电视节目。频道数量激增,造成观众分流,引发媒体竞争的加剧,调查结果显示,从1997年到2002年5年时间内,中国观众家中平均能够接收到频道的数量增加了一倍,央视每5年进行一次的全国观众抽样调查结果显示:1997年全国有10.94亿人能够看到电视;到2002年9月,全国4岁以上电视观众总数为11.15亿人,比5年前仅仅增长了0.21亿人,电视观众总量增长已接近极限。而卫视频道由2002年的43个增加到目前的55个,这预示着不论是在观众市场还是在广告市场,电视频道都将不可避免地展开更为激烈的份额竞争。
4.卫视之间全国战略的相互挑战,市场份额竞争达到空前激烈的程度。覆盖全国的省级卫视摆脱了区域的局限性,把目光和发展方向扩展到了全国范围。近年来,包括河南卫视打着传统文化的品牌、湖南卫视誓做中国第一娱乐频道的气魄、海南卫视利用其旅游资源改名为旅游卫视、东方卫视“既资讯、又娱乐”的运作理念,这些省级卫视的改变,均是以覆盖全国范围的传播作为基础的。从纷纷上星,再到个个覆盖。省级卫视相互间得以直接对话,进而扩大了传播效应。由此产生的全国性竞争也越来越激烈,更多精彩节目得以展现,更多客户的需求得以满足。这就意味着,部分卫视频道将有可能彻底退出全国市场的竞争,重回到地方频道的位置。
二、省级卫视市场份额竞争现状
若论及省级卫视比拼的几个方面,覆盖最先开始,而紧随其后的则是品牌、资源。这些比拼的目的都是一个:提高各个省级卫视自身的收视率,进而获得相对较高的市场份额。
1.覆盖的比拼
覆盖率是市场份额一个基础因素,直接影响到省级卫视节目的收视率。频道覆盖面越广,潜在的收视市场越大,就有可能创造更多的市场份额和收视份额。上表是省级卫视晚间黄金时段收视市场分析。
可以看出,虽然覆盖率的增长未能带来收视率和市场份额的等量增长,却还是给后两者提供了一个坚实的基础和广阔的空间。这其中实现双赢的要属山东卫视,覆盖率和黄金时段的收视率均为首位,并且从市场份额中分得了最大的一块“蛋糕”。而江西、河南在覆盖率不足的情况下,依然跻身于黄金时段收视5强。说明这两家省级卫视能够充分利用覆盖资源,在投入和回报之间寻求性价比。因此对于频道或者电视台的创收来说,覆盖当属首要问题。其次,如何利用覆盖区域,针对覆盖区域的受众特点编排节目,最大化利用覆盖范围内潜在的收视群体,培养覆盖区域的观众忠实度,都是各个省级卫视在覆盖和收视博弈中,在市场份额的竞争中不可忽视的问题。央视市场研究股份有限公司袁方博士指出,中国电视业的洗牌已经结束,已经进入了以份额竞争为特征的全面营销时代。在央视和省级地面频道双重夹击下的省级卫视频道更是你方唱罢我登场,相继推出新类型、新风格的电视节目争夺收视率和市场份额,在夹缝中寻求突破口。
省级卫视晚间黄金时段收视市场分析
2.收视的比拼
在覆盖比拼的同时,各个省级卫视也在争夺全国范围内的收视率。而收视率也是影响市场份额的一个关键因素。
2007年5月,CSM媒介研究首次向社会全国收视率和市场份额数据。这个数据是按城乡人口构成比例在全国31个省市自治区布设调查点,采用抽样调查的方法,通过4000测量仪样本户调查统计得出的,可推及包括城市、农村的全国总体收视人口。
可以看出,收视率越高,带来的市场份额越可观(见右表)。
3.品牌的比拼
自2002年开始,湖南卫视发展势头迅猛,仅仅两年时间其收视份额实现了倍数增长,连续两年份额突破2%,位居省级卫视第一位。湖南卫视的成功当然有提高全国覆盖率、加大电视剧投放、加强自制节目创新和大型品牌性活动策划等直接因素,但不可否认的是,湖南卫视的成功背后有一只“无形之手”――“双虞效应”在发挥作用。湖南卫视在近年覆盖上并没有实现多大的突破,但仍能实现0.8%份额增长,去除自办节目不说,同样的电视剧,湖南卫视总能高出同步播出的其他卫视,这充分说明了该频道的观众高忠实度,频道的品牌效应正在形成。
2002年1月28日,海南卫视更名“旅游卫视”,名称看似专业,但核心资源稀少,形不成忠诚观众群,2004年不得不改弦易辙。此后,重庆卫视要打造“公信频道”,四川卫视即扯起“西部魅力频道”的大旗与之对垒。上海卫视、北京卫视提出荟萃全台精华,把卫视办成“精品节目集纳上星”频道。江西卫视提出“从‘心’出发,将服务进行到底”的口号,浙江卫视定位“文化”,广西卫视在谋划扩大在东盟地区的媒体影响力,把原来的“女性”频道定位扩展为“东盟的,民族的,时尚的”。这些频道定位或宣传口号的提出,至少在观念上意识到竞争的必要性和紧迫感。各个省级卫视已经注意到了潜在的收视市场,开始利用自身区域资源优势,着手进行频道特色建设,但如何不盲目跟进,发展出一条适合自身频道发展的道路仍是摆在各个省级卫视频道面前的最主要问题。
全天24小时全国收视率和市场份额省级卫视排行榜
4.节目背后管理、人才的比拼
【关键词】 病毒性脑炎; 心律失常; 危险因素; Logistic回归分析
病毒性脑炎是由病毒感染造成脑实质病变,并引起一系列相关临床表现的感染性疾病,儿科临床比较常见,属于儿科危急重症,治疗处理不当可导致预后不良。有文献报道病毒性脑炎与心肌炎可同时发生,称为脑-心肌炎[1]。病情呈急进性过程,患儿常因严重心律失常及多系统器官功能衰竭导致死亡。近年相关研究发现病毒性脑炎患儿发生心律失常病例有升高趋势。因此,探讨病毒性脑炎患儿心律失常发生的危险因素,以便尽早干预,同时进行及时有效治疗,对促进病情恢复及改善预后有重要临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 本组90例病例均为2010年1月-2012年12月在深圳市宝安区妇幼保健院儿内科住院治疗的急性病毒性脑炎患儿,其中,男47例,女43例,年龄最小为3个月,最大为12岁,1岁以下30例,平均(4.33±1.5)岁。
1.2 病毒性脑炎诊断标准 病毒性脑炎诊断依据杨锡强、易著文主编的《儿科学》(2003年第6版),临床上大多数患儿主要表现为反复发热、反复惊厥发作、不同程度的意识障碍和颅内压增高症状,部分患儿伴有肌张力改变,偏瘫或肢体瘫痪表现。惊厥多数表现为全身大发作样,发生抽搐持续时间不等,严重病例呈抽搐持续状态,少数表现为局灶性强直-阵痉或阵痉性发作。辅助检查主要依据脑电图、头颅CT或MRI、脑脊液检查、病毒学检查等。影像学检查主要提示大脑弥漫性水肿,大多数患儿脑电图主要表现为弥漫性或局灶性异常慢波,少数伴棘波、棘慢综合征。脑脊液病毒核酸的PCR检查及血清特异性抗体IGM检查病毒阳性患儿共23例,其中腮腺炎病毒7例,肠病毒11例(主要为肠道病毒EV-71型),疱疹病毒5例(单纯疱疹病毒3例、EB病毒1例、水痘-带状疱疹病毒1例)。
1.3 心律失常诊断标准 依据梁翊常主编《实用小儿心电图学》(1996年第2版)。经X线及心脏彩超除外先天性器质性心脏病变,此次病前无心律失常或其他心脏病病史。心脏听诊可发现心音强弱不等、心动过缓或心动过速、早搏(二联律或三联律等)、心音低钝或奔马律、心率不齐等。
1.4 观察指标 对90例患儿的性别、年龄、发热、头痛、呕吐持续时间,抽搐次数及抽搐持续发作时间,意识状态、血常规、C-反应蛋白、心肌酶谱、心肌肌钙蛋白、电解质、血糖、肝肾功能、凝血机制、脑脊液检查、心电图、脑电图及影像学检查进行比较分析。
1.5 心律失常处理 急性期主要是正确的支持治疗及对症处理,早期重要脏器功能严密监护、功能支持及营养支持,控制脑水肿和颅内高压、正确有效给氧、维持水、电解质平衡与合理营养供给等,对进食困难患儿给予鼻饲、静脉营养。抗病毒治疗:阿昔洛韦静脉滴注每8小时1次,持续用药10~14 d,阿昔洛韦主要针对疱疹病毒作用最强。对于继发细菌感染着可使用抗菌药物头孢曲松钠静脉滴注每24小时1次,持续用药5~7 d;甘露醇、地塞米松、速尿、白蛋白等防治脑水肿;控制惊厥:可用鲁米那或安定。危重病例需心电监护、免疫球蛋白进行免疫调节及血管活性药物应用、持续气道正压给氧及氧自由基清除剂应用、果糖、大剂量维生素C营养保护心肌和脑细胞治疗等。一般心律失常可得到纠正,如心动过速、早搏等,仅少数病例(4例)使用抗心律失常药物,其中包括严重窦性心动过缓(2例)室性心动过速(2例),抗心律失常药物有利多卡因注射液、异丙肾上腺素注射液、硫酸阿托品注射液等。
1.6 统计学处理
2 结果
2.1 发生心律失常的主要类型及发生率 90例病毒性脑炎患儿中有42例发生各种类型心律失常65例次(不包括窦性心律不齐),发生率46.7%(42/90)。其中,窦性心动过速5例,频发房性早搏5例,房性心动过速4例,房颤1例,室性早搏2例,严重窦性心动过缓2例,室性心动过速3例,室上性心动过速6例,室性早搏伴短阵室速及室上性心动过速1例,一度房室传导阻滞8例,二度房室传导阻滞5例。此外,多导联中有ST-T改变或T波平坦或倒置34例。共死亡3例,均发生严重心律失常,其中2例为室速,1例为二度房室传导阻滞。其余病例均基本临床治愈或康复出院。
2.2 心律失常病因与影响因素
2.2.1 对发生心律失常进行单因素分析 发现其中有5项因素差异有统计学意义,包括频繁抽搐、低年龄(1岁以下)、意识障碍程度、心肌肌钙蛋白I升高及低血钾是病毒性脑炎心律失常影响因素,具体情况见表1。
表1 病毒性脑炎患儿发生心律失常的单因素分析结果
2.2.2 对发生心律失常进行多因素Logistic回归分析 将单因素分析筛选出的5个变量进行逐步Logistic回归分析,有2个变量入选多因素Logistic回归方程(表2),提示病毒性脑炎患儿发生心律失常与频繁抽搐、心肌肌钙蛋白I升高有关(P
表2 病毒性脑炎患儿发生心律失常的多因素分析结果
3 讨论
自1912年Levy提出中枢神经系统心血管的作用以来,颅脑损伤及其他颅内疾病引起的心电图改变在国内外相继报道。脑心综合征是各种颅内疾患(急性颅脑损伤、急性脑血管病、颅内炎症及其他引起颅内压增高的疾病)引起的继发性心脏损伤,异常心电图中以ST-T段改变最为常见,其次是心律失常,还可见心肌梗死表现,发病72 h内最为明显[2]。本组资料显示:病毒性脑炎患儿心律失常常发生于疾病初期,其持续时间视原发病因的不同而异。严重影响病情的恢复和预后。因此,寻找病毒性脑炎并发心律失常的危险因素,对促进病情的恢复及改善预后有重要临床意义。
儿童时期心脏激动如果出现激动起源异常或激动传导异常,激动来自于窦房结以外的起搏点、激动传导不按照正常顺序进行或传导时间较正常延长或缩短、心肌细胞电生理发生改变等都可导致心律失常[3]。本组资料显示:病毒性脑炎患儿心律失常发生率46.7%(42/90)。单因素分析发现频繁抽搐、意识障碍、心肌肌钙蛋白升高,低年龄、低钾血症等是都与发生心律失常密切相关,多因素Logistic回归分析发现心肌肌钙蛋白升高、频繁抽搐是发生心律失常的高危因素。
病毒性脑炎是由病毒感染造成脑实质病变,并引起一系列相关临床表现的感染性疾病,病毒侵入人体后,通过血循环可感染多个脏器(包括心脏),可导致心肌细胞的变性和坏死;病毒入侵大脑后迅速增埴,直接破坏大脑神经细胞;大脑神经细胞缺氧及病原体毒素可直接侵犯血脑屏障及心血管中枢;同时神经组织对病毒抗原的剧烈反应可导致大脑神经脱髓鞘病变,以及大脑血管及血管周围组织损伤等。脑损伤早期,机体由于受到强烈刺激后产生应激反应,使血液中儿茶酚胺含量迅速升高,导致血液中血小板数量增多,聚集力加强,造成血流缓慢,甚至淤滞[4],同时,受损的脑组织可释放多种生物活性物质,如血栓素A2、自由基等进一步加重微循环障碍,上述因素均能使心肌损伤,促进心电功能紊乱、心律失常、心力衰竭、心源性休克的发生和发展,增加病死率[5-7]。
同时由于中枢神经系统感染导致脑血管扩张、脑细胞及脑间质水肿可引使颅内压增高,引起交感副交感神经平衡失调导致心肌电生理发生改变出现心律失常。本组资料中有3例死亡病例均为1岁以下患儿,起病急,发热、抽搐、昏迷,病情发展迅速,起病数小时即出现严重心律失常、心衰、心源性休克及肺水肿、肺出血等。心肌肌钙蛋白异常升高,电解质紊乱特别是低血钾。脑脊液病毒核酸的PCR检查肠道病毒EV-71型阳性2例,疱疹病毒阳性1例。临床经过与有关报道一致[1]。
本组资料显示,心肌肌钙蛋白升高患儿的OR值为1.834,频繁抽搐患儿的OR值为1.641提示频繁抽搐、心肌肌钙蛋白升高是发生心律失常的高危因素,频繁抽搐可导致体内氧和能量耗竭,全身代谢失调和酸中毒及重要器官功能衰竭,严重的全身性缺氧时心脏容易受累及。心肌缺氧可降低心肌的舒张和收缩功能,甚至使心肌细胞发生坏死、变性。不同程度的心肌缺血、损伤及坏死造成ST-T段偏移及T波倒置、异常Q波等。当心脏传导系统受到累及,心肌细胞自律性、应激性、及传导性受到影响,导致各种心律失常发生,其中以早搏,窦性心动过速、房室传导阻滞多见,严重的心肌受损可导致完全的传导阻滞。
心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)仅存在于心肌,是心肌特异性抗原,只有在心肌细胞损害后才释放进入血液循环,其特异性和敏感性均高于肌酸激酶和肌酸激酶同工酶,cTnI作为心肌损害的一项高敏感和特异性指标备受关注[7-8]。有文献报道病毒性脑炎与心肌损害存在明显的相关性,而且病毒性脑炎病情越重,心肌损害越明显,越容易出现严重心律失常[9]。因此,病毒性脑炎患儿应常规检查心电图,以便及早发现严重心律失常,及时采取治疗措施,改善预后。
在本研究单因素分析中,尚有其他具有显著性意义的变量如意识障碍程度、低钾血症、低年龄等未进入多因素Logistic回归分析,是由于其作用包含在已入选变量中,本组资料中,部分频繁抽搐患儿同时存在不同程度的意识障碍、低钾血症、低年龄等。本组年龄
此外本组资料的相关性分析结果表明心律失常发生与抽搐反复发作持续时间变化呈正相关(r=0.250,P=0.027),心律失常发生与心肌肌钙蛋白I呈正相关为(r=0.382,P=0.001),与有关报道一致[10]。因此对于频繁抽搐及心肌肌钙蛋白升高的患儿,应动态观察心电图变化,防止致命性心律失常发生。
本组资料表明病毒性脑炎患儿心律失常的发生与频繁抽搐、心肌肌钙蛋白I升高等多种因素有关,故其治疗主要针对病因治疗,急性期主要是正确的支持治疗及对症处理,早期重要脏器功能严密监护、功能支持及营养支持等,在治疗原发病同时,控制惊厥,改善心肌缺血、缺氧尤为重要,对于严重病例应及早开始持续气道正压给氧,大多数心律失常随着随着病情好转而消失,一般不需要使用抗心律失常药物,本组资料中,仅4例患儿使用抗心律失常药物,其中包括严重窦性心动过缓(2例)室性心动过速(2例),抗心律失常药物有利多卡因注射液、异丙肾上腺素注射液、硫酸阿托品注射液等。总之,心律失常是病毒性脑炎早期严重并发症,需积极防治,以帮助患儿安全度过急性期,早日获得较好转归。
参考文献
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目的:探讨异位宁对实验性大鼠子宫内膜异位症表皮生长因子受体表达水平的影响。方法:以免疫组化法定性检测各组子宫内膜异位大鼠的表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平。结果:模型对照组EGFR的阳性表达率偏高,与正常对照组比较有显著差异,异位宁高剂量组中EGFR的阳性表达率明显偏低,与模型对照组相比有显著差异(P
【关键词】 子宫内膜异位症 异位宁 表皮生长因子受体 大鼠
子宫内膜异位症(endometriosis,EM)是指具有生长功能的子宫内膜组织出现在子宫腔被覆黏膜以外的身体其他部位。由于现代诊疗技术的不断提高,EM的诊断率不断上升。而在内异症中,异位内膜病灶的生长需要新的血管供应, EGF是血管生长因子家族中的一员,可以刺激血管内皮细胞生长和体内新生血管形成。而EGF受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)是表皮生长因子(EGF)及转化生长因子的共同受体[15]。本研究采用免疫组化法定性检测各组子宫内膜异位大鼠的表皮生长因子受体(EGFR)的表达水平,探讨异位宁对EGFR表达的影响。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 选用Wistar雌性未孕大鼠,体重(200+20)g,鼠龄8~12周,购自黑龙江中医药大学实验动物中心,微生物控制等级为壹级。
1.1.2 实验药物 异位宁:由赤芍、柴胡、蓬莪术、延胡索、蜈蚣、黄芩、金银花、薏苡仁、秦艽、牡蛎等中药组成,购自黑龙江中医药大学附属医院,上药共计200 g,加水700 mL,浸泡30 min,头煎武火40 min,取汁200 mL,二煎文火30 min,取汁200 min,二煎共得药液400 mL,文火浓缩至100 mL,加95%乙醇200 mL,置冰箱静止24 h离心(1 600转/min),取上清液250 mL,置水浴锅提取乙醇,取药液40 min,相当于每毫升含生药5 g,置于4℃冰箱内备用。达那唑:100 mg/粒,上海华联制药有限公司生产,生产批号:20040902。EGFR免疫组化染色试剂盒免疫组化常用辅助试剂:武汉博士德生物工程有限公司。
1.2 方法
1.2.1 造模方法 雌性未孕Wistar大鼠,体重(200±20)g,皮下注射乙烯雌酚0.2 mg/只促情,以20%乌拉坦1.5 g/kg注射麻醉,待麻醉生效后,将大鼠固定操作台上,腹部剪毛,碘伏消毒,在无菌条件下开腹,约1.5 cm长,右侧离卵巢0.5 cm处分离子宫,结扎后在中间剪取约2 cm一段子宫,剖开子宫剥离子宫内膜,将内膜剪成3块,分别缝于子宫分叉处、左侧卵巢附近、左侧腹膜壁层,关腹缝合。每鼠注射庆大霉素0.1 mL,连用3 d,正常清洁饲养。
1.2.2 分组观察 正常饲养1个月后,随机抽取10只造模大鼠2次开腹。可见移植宫内膜体积增大,部分增大物内含液体物质,部分增大物表面被结缔组织包裹,大网、肠管、腹壁广泛粘连。此后开始灌胃给药。正常对照组:每日灌服等容量蒸馏水。模型组:模型动物术后1月开始,每日灌胃等容量的生理盐水。异位宁高剂量组:模型动物术后1月开始,每日以5.4 g/100 g异位宁药液灌胃。异位宁低剂量组:模型动物术后1月开始,每日以1.8 g/100 g异位宁药液给大鼠灌胃。西药对照组:模型动物术后1月开始,每日以3.6mg/100 g达那唑混悬液给大鼠灌胃。均给药4周后断头处死,剖取大鼠在位及异位子宫内膜组织,分为3部分分别放入10%福尔马林中供做免疫组化的石蜡切片。
1.2.3 实验方法 EGFR采用免疫组织化学方法检测:(1)石蜡切片厚度5 μm,裱于PolyLlysine处理过的载玻片上,置45℃温箱拷片24 h。(2)切片常规加水。(3) 3%H2O2室温10 min,灭活内源性酶,蒸馏水冲洗,PBS浸泡5 min。(4)热修复抗原:将切片浸入0.01 M枸橼酸盐缓冲液,微波炉加热,温度保持在95℃,持续10 min。取出容器,室温冷却20 min,PBS洗涤。(5)滴加复合消化液,室温5~10 min,PBS洗涤2 min/次,共3次。(6)滴加正常山羊血清封闭,室温孵育10 min。(7)倾去血清,滴加适当比例稀释的一抗,置于湿盒内37℃温箱孵育60 min,PBS洗涤,5 min/次,共3次。(8)滴加生物素二抗,37℃温箱孵育20 min,PBS洗涤,5 min/次,共3次。(9)滴加链霉亲和素过氧化物酶,置于湿盒内37℃温箱孵育20 min,PBS洗涤,5 min/次,共3次。(10)DAB显色,显色10 min,蒸馏水洗。(11)苏木素轻复染,蒸馏水洗,树脂胶固定,显微镜观察。
1.3 统计学方法 实验数据均采用均数加减标准差(±s)表示,组间比较采用秩和检验。
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2 结果
各组大鼠局部组织EGFR表达结果比较:见表1。
表1 各组大鼠局部组织EGFR表达结果(略)
注:与模型组比较,#P<0.05,##P<0.01
3 小结
本实验通过探讨EGFR在实验性大鼠在位与异位内膜上的表达,及异位宁对EGFR表达的影响,免疫组化实验结果表明,模型对照组EGFR的阳性表达率偏高,与正常对照组比较有显著差异(P<0.05)。在内异症中,异位内膜病灶的生长需要许多新的血管供应,由此我们推测EGFR与EGF结合后,通过促有丝分裂的作用,促进细胞增殖,进而促进异位子宫内膜增生,而异位宁高剂量组中EGFR的阳性表达率明显偏低,与模型对照组相比有显著差异(P<0.01),表明异位宁可以抑制异位内膜血管的形成,从而抑制异位子宫内膜增生。
参考文献
[1]Oosterlynck D,et al.Angiosgenic activity of peritoneal fluid from women with endometriosis [J].Fertil Steril,1993,59:778.
[2]Mc:arenJ et al.VEGF concentrations are elevated in peritoneal fluid of women with endomentriosis[J].from women with endometriosis Obstet Gynecol,1994,83:287.
[3]Ryan IP,et al.IL8 concentrations are devated in peritoneal fluid of women with endometriosis[J].Fertil steril,1995,63:929.
为第做好第十六届中国科协年会召开期间医疗救治、重大疾病防控和突发公共卫生事件应急处置、公共场所和生活饮用水等卫生保障工作,我局高度重视,精心组织,目前前期保障工作正在有序推进,现将有关情况总结如下:
一、成立领导小组
为加强对第十六届中国科协年会卫生保障工作的领导,确保圆满完成“年会”卫生保障工作任务,市卫生局成立了以分管领导为组长、相关处室负责人和有关单位负责人为成员的领导小组,同时领导小组下设办公室、医疗保障组、疾病预防控制与突发公共卫生事件应急处置组和卫生监督组。
二、制定工作方案
根据省卫生厅和市委、市政府的要求,组织制定了昆明市《第十六届中国科协年会卫生保障工作方案》。在方案中对卫生保障工作进行了分解,并进一步明确了有关单位的工作职责。
三、有序开展前期卫生保障工作
1.卫生监督部门:按照谁发证、谁负责的原则,按照要求,对各自发证的接待单位开展公共场所和生活饮用水卫生监督和培训,并对存在问题的接待单位开出限期整改监督意见书,并计划5月21日和22日对重点接待单位开展公共场所和生活饮用水现场快速检测。
2.疾病预防控制部门:一是对接待单位分别落实了义务报病员;二是对定点接待单位义务报病员进行了传染病防治法的有关知识培训,明确报告方式、内容及时限;三是明确疫情报告电话号码及报告方式,由市疾控中心和接待单位双方共同负责宾客的传染病防治工作;四是对全市县区医疗机构、疾控中心进行疫情报告管理检查,督促整改存在问题;五是对接待单进行了指导消毒,并培训了相关工作人员。
3指定市延安医院、市一院、市三院和市中医院为第十六届中国科协年会医疗救治定点医院,并根据省卫生厅的要求,安排了市延安医院、市一院、市三院和市中医院共7组医护人员将于第十六届中国科协年会召开期间入驻7所酒店进行医疗保障。
《支点》记者 罗乐
近期,国务院陆续《关于促进信息消费扩大内需的若干意见》及《关于印发“宽带中国”战略及实施方案的通知》,TMT(即科技、媒体和通信的融合)行业正迎来发展红利期。TMT行业具有强烈的市场化特质,并且能够快速与全球接轨,这也决定了,在发展过程中,资本助推将是企业发展的必经之路。
那么,如何更快地获得资本青睐,得以加速爆发,奠定行业领先基础,将是TMT企业必须思考的问题。澳银资本(中国)控股有限公司执行总裁、创始合伙人熊刚认为,TMT企业在考虑资本进驻时,一方面要通过市场需求找到良好的商业模式,另一方面要对现金流有很好的控制,同时正确的估计自身价格,取得企业与投资方的双赢。
有市场需求才有投资意义
《支点》:您认为TMT领域的企业要赢得资金的青睐,需要从哪些方面入手?
熊刚:澳银资本所关注的TMT,属于广义的TMT,包括了创意在内。TMT企业要取得关注,首先要以需求推动为主,创司作为商业机构,始终要以投资人的利益为考量,有市场需求的新模式和技术对于创投来说才有意义。在有市场需求的前提下,好的商业模式比技术能力更为重要,因为对一个可能具有广泛需求的未来行业而言,商业模式决定了行业发展的基础。当然,如果技术和能力兼备自然是最佳,但是这个比较难做到。
另外,国内外对于创意产业的接受程度也不同,有些在国内兴起的新的模式,可能在国外比在国内更受欢迎,这些企业在国内很难上市,但在国外就很容易,同样地,在国内非常受欢迎的企业,可能到了纳斯达克就会一泻千里。这是资本市场的投资偏好和投资方式的不同所造成的。
《支点》:作为投资人,您更看好TMT领域的哪些具体行业?
熊刚:在TMT行业中,与消费升级有关联的市场会非常广阔,比方说旅游。中国的旅游行业,在组织安排、个人旅游管理方面已经十分发达,同时在旅游的行程安排、当地旅游活动安排、旅游攻略这些需求性领域,已经有了一些资本化运作的方式,这还仅仅只是资本进入旅游产业的一些方面,所以,对于中国的旅游产业而言,还有很大的机会。互联网产业也是如此,这是一个巨大的需求市场,如果能够推动消费者消费行为的升级,就能够赢取广阔的发展空间。
不会关注“一直在路上”的企业
《支点》:澳银资本是以什么样的标准选择TMT产业中的企业的?
熊刚:除开需求和模式的原则,实现现金流平衡是我们实现投资的优先标准。首先,我们会关注,当我们把现金流交给企业时,它的技术需求是否有爆发力;其次,为了实现技术的爆发,企业每年“烧”多少钱才能维持现金流的平衡?如果给你两年的钱能达到平衡,我们就给你两年的“烧钱”的时间,如果不能确定这个时间,我们会在开始就明确地告诉创业者,我们不会关注一直在路上的企业。
当时,优酷的老总给华尔街讲故事,说“我们一直在路上,虽然没有营利,但我们一直在往营利的路上去奔”。我说,“这样不行,我们会给你一个时间,但是你一定要在一定的时间里面有一个满意的现金流状况,两年、三年,甚至四年都可以,但是必须明确。”
所以,如果我们投资的企业,“烧”完了既定时间的钱,还没有实现现金流平衡的时候,我们就会选择退出。
《支点》:所以,企业想要获得投资者的持续支持,要优先考虑现金流的问题。
熊刚:是的。对于投资者而言,如果资本都开始进驻同一个行业,投资价格就会上涨,同时退出一个行业,最后的结果就是谁都走不了。所以说,大家都进的时候我们不进,大家都想退的时候我们可能不会退,大家都在关注、摇摆不定的时候,就是我们要退的时候了。
前两年,我们投资了一家做导航的公司,当时3G刚刚开始兴起。2009年,国外3G应用的第一批公司就是做定位服务的,以此为参照,我们认为中国也具有相当大的市场。但是后来,我们选择了退出。当时,我们给予了这家企业两轮融资,也就是准备了“烧”两轮的钱。第一年,董事会开得非常平和,大家都很好,我们给了企业充分的发展时间。但是到了第二年,我们很坚定地告诉他们,如果你找不到盈利点、找不到现金流的平衡点,我们就只能选择退出。
没有卖不出去的产品
《支点》:在资本退出上,投资机构会选择什么样的方法和途径?
熊刚:对投资追本溯源,其实就是一个买一个卖,买进时讲好价钱,卖出时多一点渠道,再掌握好买卖时机,就是投资的过程。
作为VC来讲,从头跟到尾上市不太容易的,第一个投资谷歌的股东,不知道哪年就已经离开了,能够将企业上市从头跟到尾的,我认为在投资领域不到20%。
资本的退出方式,大体分为并购和分红两种。投资的本质是推动企业发展,资金只是一个“笼子”。一般而言,投资人靠分红得到的资金回报会占到20%左右,还有60%可能来自于各种各样的并购,而在并购中,就可以选择多种的资金退出方式。
《支点》:什么决定了资本能否成功地退出?
文/玉鸣
通过音乐陶冶心情,克服心理障碍,在养生与治疗中取得效果。这里就唐代伟大诗人白居易的诗篇中有关内容,做点简单介绍,如果有兴趣,希望你也能通过音乐,陶冶心情,增进健康。
白居易在《听弹古渌水》一诗写的:“闻君古渌水,使我心和平。欲识慢流意,为听疏泛声。西窗竹阴下,竞日有余清。”一曲《渌水》使他心平气和,整天都有好心情。在另一首《听幽兰》中写着:“琴中古曲是幽兰,为我殷勤更弄看。欲得身心俱静好,自弹不及听人弹。”说明幽兰使他身心安静、良好,同时他还身有体会地说“自弹不及听人弹”。可见以音乐来使人放松、安静,自然以聆听为最好方式。
在白居易的诗中,不仅可以看到以音乐“平心”的生动描写,更值得注意的是,在他的诗中,还可以看到音乐对人的强烈移情作用。在《琵琶行》中有:“座中泣下谁最多,江州司马青衫湿”的诗句,可见诗人在音乐的感动下,情感上的剧烈反应。
诗人在《五弦琴》一诗中有“十指无定音,颠倒宫徵羽。坐客闻此声,形神若无主。”说明那些坐客的心理、行为已经随着音乐而引起变化,这就是音乐心理行为治疗的原理所在,也是音乐治疗实施中所追求的移情效果。诗人在另外一首《五弦弹》中写有:“五弦并奏君试听,凄凄切切复铮铮,铁击珊瑚一两曲,冰泻玉盘千万声。铁声杀,冰声赛。杀声入耳肤血,寒气中人肌骨酸。曲终声尽欲半日,四坐相对愁无言。”在这里,音乐的心理反应强烈,已经引起肤、血、肌、骨等组织的生理变化,是音乐引起生理变化的确切记录。
许多人对传统医学中的“五音”理论深有体会,音乐不但可以给人以美的享受,也能使人心旷神怡,身心健康。如能在闲暇中倾听音乐,也许能使你心情舒畅,进入恬静、和美、美好的境界。有了良好的心境,可以增强人体免疫功能,音乐能养生治病,道理也在此了。
谈为我辈寻常事 笑是人间不老方
文/熊经浴
此联虽为寻常俗语,却是休闲养生的至理。
[关键词] 法医学;bFGF;损伤时间;免疫印迹法;SABC
[中图分类号] R318 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2012)08(b)-0016-03
The inference study on the change of the expression of basic fibroblast growth factor and the time after brain contusion in rats
JIA Meijuan LIANG Xinhua JIAO Yan
School of Law Medicine, Shanxi Medical University, Shanxi Province, Taiyuan 030001, China
[Abstract] Objective To study the temporality expression rule of basic fibroblast growth factor after brain contusion in rats, and to investigate the relationship between the expression of basic fibroblast growth factor (bFGF) and the time after brain contusion, in order to provide scientific evidence for practice of legal medicine to conclude the time of inchoate brain contusion. Methods 64Sprague-Dawley rats were randomly divided into 8 groups (7 of experiment groups and 1 of control group). The rats in experiment group were divided into 7 groups after contusion injury which was performed by the drop method with Feeney's way: 1 h group, 6 h group, 12 h group, 1 d group, 2 d group, 3 d group, 7 d group. Immunohistochemistry and Western blot were used to study the expression levels of bFGF in brain tissue of rats. Results Positive cells increased at 6 hours after brain injury, the most prominent was at third days after contusion injury, and decreased at 7 days after brain injury, but it was more than basal levels. Conclusion There is temporality regular between the expression of bFGF and the time after brain contusion in rats, this regularity can provide experiment evidence for practice of legal medicine to conclude the time of inchoate brain contusion.
[Key words] Legal medicine; bFGF; The time of brain contusion; Western blot; SABC
碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)属于成纤维细胞生长因子家族,是一种存在广泛的多功能肽类生长因子,在细胞的转化、增殖、分化和细胞生长周期中发挥着重要的作用[1]。bFGF广泛存在于中枢及外周神经系统中,对神经组织具有生长分化、维持存活的作用,是有效的神经营养因子之一。本文采用自由落体装置建立大鼠脑挫伤模型,联合采用免疫组化(SABC)法及免疫印迹(Western blot)法两种方法检测该模型中脑挫伤后不同时间段大鼠脑组织中bFGF含量的变化,探讨脑挫伤后bFGF表达的变化与时间的关联性。
1 材料与方法
1、落实安全教育领导和管理工作
为进一步加强学校日常安全管理工作,牢固树立“安全第一”的思想,切实落实安全工作责任制,我校认真组织全校师生学习安全教育材料,制定了相关安全工作措施以及相应的应急预案。
2、强化教育宣传
通过多种方式和途径,采取多种措施,在深度和广度上狠下功夫,切实加强安全宣传教育。广泛开展各种形式的活动,如国旗下讲话、安全知识讲座,主题班会等教育活动。
3、构建家校联系体系
加强学校与社会各部门及家庭的联系工作。根据我校实际情况,组织和动员全社会都来关心学生的生命安全,共同做好学生校外安全工作,并通过与学生家长签定《加强家庭教育承诺书》和印发《告家长书》、家访、家长会等形式,加强了学校与家长的沟通和联系,并取得家长的支持和配合。
4、强化饮食卫生
一是必须加强宣传,进一步提高学生饮食卫生安全意识。利用校内各种宣传阵地定期刊发播报有关饮食卫生安全的信息,要通过班主任、学生家长科学引导,劝阻学生不买街头无照(证)商贩出售的盒饭及食品,不食用来历不明的可疑食物,使学生养成良好的饮食卫生习惯。二是必须坚持督查,进一步做好饮食卫生每日检查制度。对于学校的饮食卫生问题要常抓不懈,坚持做好每日检查制度。要组织相关人员对食品卫生、校园环境卫生进行检查、督促,及时做好检查记录备查,发现问题,及时处置。