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一、关于“文化”、“城市文化”、“非物质文化遗产”内涵的引入
关于“文化”概念与范畴的界定一直是学界热衷探讨和研究的主题。近代最早对“文化”一词作出明确定义的是英国著名人类学家泰勒(E. B. Tylor),他在1871年出版的《原始文化》一书中提出:“所谓文化或文明,是知识、信仰、艺术、道德、法律、习俗以及包括作为社会成员的个人而获得其他任何能力、习惯在内的一种综合体。”[1]美国学者克罗伯(A. L. Kroeber)和克拉克洪(D. Kluckhohn)在1952年发表的《文化:一个概念定义的考评》(Culture: A Critical Review of Concepts and Definitions)中,对164条关于文化的定义进行了分析考察,并对文化下了一个综合定义:“文化存在于各种内隐和外显的模式之中,借助符号的运用得以学习与传播,并构成人类群体的特殊成就,这些成就包括他们制造物品的各种具体式样,文化的基本要素是传统(通过历史衍生和由选择得到的)思想观念和价值,其中尤以价值观最为重要。”[2]无论是泰勒的先行尝试还是克罗伯和克拉克洪的归纳概括似乎都不能穷尽“文化”给我们带来的认识体验和空间想象。拉尔夫・林顿(Ralph Linton)则认为“文化”就是任何社会的全部生活方式。[3]由于“文化”自身话语空间内部的不确定性和边界的宏观性,所以在其概念和范畴没有统一界定的情况下,学者们采取的研究对策往往是在“文化”概念前加个前缀框定论述的范围和细化研究的对象,又或者是避开对“文化”本体学理的纠缠而直接探讨其宏观共性的特质与作用。
城市作为“文化”的一种空间呈现进入到我们的视野,对城市文化的研究实质上就是对人的生存方式与现实境遇的反思与探索。鉴于国内外对城市文化的研究成果,本人曾以文化软实力的视角,从可操作的微观层面提出从文化价值吸引力、文化产业竞争力、文化知识生产力和文化w制引导力四个方面去构建我们的城市文化。《大英百科全书》将城市文化概括为“各种类型的城市或者城区的所有行为模式,这些模式既可以是过去的,也可以是现在发生的”。[4]该论述虽然对城市文化没有作出明确的概念定义,但指出了城市文化至少包涵了文化遗产(culture heritage)、文化实践(culture practice)和文化表述(culture expression)三层内容。其中,文化遗产分为两大范畴,物质文化遗产主要指传统历史文化街区、文物建筑、景观遗址等,非物质文化遗产(非遗)指被各群体、团体(有时是个人)视为其文化遗产的各种实践、表演、表现形式、知识和技能及其有关的工具、实物、工艺品和文化场所。文化实践是指发生在城市空间里的一系列行为活动,包括个体实践和公共参与。文化表述则体现在文化生产与消费过程中个体和社会的表达形式与情感意愿。在城市文化建构中,无论是文化价值、文化产业、文化知识和文化体制四个方面,还是文化遗产、文化实践和文化表述三个层面,它们都不是泾渭分明,而是彼此关联、互相影响。其中,非遗之于城市文化的表征功能值得我们深入研究。
人类存在的方式与生存需求推动了城市的发展进程,而非遗也随着这发展进程不断地演变与存留,它承载了人类对于存在和未知的敬畏,呈现了人类的本质属性,见证了人类智慧的积累,记录了时空对城市演变的作用和文化意义。因此,非遗是人类在过去与现在的双时空下对生命存在方式的一种认同与延续,是城市作为人类活动空间与生存媒介得以彼此区分的根源。探讨非遗表征城市文化的发生机制可助我们追根溯源,进一步地阐释与丰富城市文化的意义生产、价值认同与审美观照。同时,从非遗的表征功能反思探讨如何才能对其进行有效保护和活态传承。
二、社会记忆
记忆对于人类而言,不是简单的对过往事物的再现或临摹,它看似重复,其实充斥了对过往的反思和当下的权衡。记忆促使群体意识内在强化,但也使得群体内外历时性特质和群体内外共时性特质互相渗透与交融成为可能。不同的群体构成不同的社会记忆,而社会记忆会在有限的城市空间内进行意义生产,最后形成该空间特有的文化底蕴。
[关键词] 肺癌;上皮间质转化;分子标志物;上皮-钙黏素;波形蛋白
[中图分类号] R734.2 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2016)07(b)-0041-04
[Abstract] Lung cancer has become one of the diseases with highest mortality throughout the world. Epithelial mesenchymal transformation (EMT) played an important role in the process of the invasion and metastasis of tumor, including the lung cancer. Researches focusing on the processes of EMT and its related markers in lung cancer helped seeking for accurate ways for molecular targeted therapy and to provide practical and feasible methods to make clinical diagnosis. In this paper, it summarized the phenomenon of EMT and EMT-related lung cancer markers to provide a new way for anti-tumor therapy.
[Key words] Lung cancer; EMT; Molecular markers; E-cadherin; Vimentin
肺癌已成为世界上发病率和死亡率增长最快的肺原发性恶性肿瘤[1]。在我国每年大约有40万人死于肺癌[2]。肺癌的转移是肺癌患者死亡及治疗失败的常见原因。绝大多数肺癌患者由于肺癌早期症状不明显及诊断方法敏感性不高,导致确诊时已处于肿瘤晚期而错过最佳的治疗时机[3]。大量研究已表明[4-6],在肿瘤的侵袭和转移过程中上皮细胞向间质细胞的转化(epithelial-mesenchymal,EMT)扮演着十分重要的角色。EMT是肺癌发生侵袭转移的主要方式之一。在这个过程中,上皮细胞失去原来的特性,细胞间的黏附和连接逐渐减少,渐渐获得间质表型,运动性和侵袭能力有所增强,凋亡开始受抑,细胞形态开始发生间质样的改变等[7]。EMT发生的过程不仅是细胞形态的改变,还伴随着E-cadherin、Vimentin等相关分子标志物的改变。近年来,EMT在肺癌转移方面研究受到了广泛关注。因此阐明EMT在肺癌中的分子机制研究及标志物的研究进展有助于肺癌分子靶向治疗方式并为肺癌的临床诊断提供理论依据。
1 EMT概述
EMT这一概念早在1982年已由Greenberg提出,在体外培养鸡胚上皮细胞研究过程中发现晶体状体细胞出现上皮细胞转变为间质样细胞的现象[8]。EMT的发生过程是指细胞处于某些生理和病理的情况下,出现的一系列由上皮表型转变为间质表型的现象。在多种动物胚胎发育过程中EMT也发挥着重要作用,此种现象存在于胚胎早期发育过程以及外胚层和下腮弓间质融合的过程中,可导致鼻咽腔和口咽腔发生分离[9]。而通过对恶性肿瘤细胞株以及一些动物模型的研究表明[10],EMT的现象同样存在于恶性肿瘤细胞侵袭周围组织和转移至远处器官的过程中。EMT使上皮源性肿瘤细胞失去相互间的连接,细胞形态发生改变,迁移能力得到增强,侵袭转移能力便由此获得。由此可见,原有细胞形态发生改变,向成纤维细胞等间质细胞样转变。
2 肺癌中的EMT现象及机制研究
肿瘤患者死亡的主要原因为肿瘤的复发及转移,90%恶性实体肿瘤的死因为远处转移[11]。已有研究证实[6],在肺癌的侵袭和转移过程中也有EMT的发生,并且肿瘤的恶性程度由肿瘤细胞的EMT程度决定。恶性肿瘤中上皮间质转化现象的发生是引起肿瘤远处转移的关键步骤。在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)组织以及胸腔转移灶中螺旋-环-螺旋转录因子Twist会过度表达,其机制可能是通过分别下调和上调E-cadherin、Vimentin的表达,从而在NSCLC的发生与发展以及浸润转移的过程中发挥极大的作用[12]。而肺泡上皮细胞转化为间质细胞的过程可能是通过细胞形态学的一些改变和基质金属蛋白酶表达的增加,使癌细胞的侵袭性有一定增强,对肺癌的转移起到促进作用。抑制肺癌的转移可能可以通过阻断肺癌细胞的EMT过程及其信号转导途径来实现[13]。同时,也有研究表明[14],在肺癌中存在EMT现象,并可引起多药的耐药,从而促进肿瘤的发生。
近年来,研究人员通过EMT标志物对肺癌发生机制进行了探索。转化生长因子β(TGF-β)具有调节细胞生长、凋亡、分化和迁移等多种功能。TGF-β1使肺癌细胞发生了上皮间质转化,细胞失去极性,上皮标志分子E-cadherin表达下降,而间质标志分子Vimentin和Snail表达上升[15]。E盒结合锌指蛋白ZEB1是EMT的关键转录因子之一,在肺癌EMT发生中起到重要作用,能与其辅助因子共同结合在E-cadherin启动子的E盒上,可抑制基因转录和E-cadherin 的表达[7]。TLE1已被证明是肺部的特异性致癌基因,以人的肺腺癌A549细胞作为模型,通过抑制E-cadherin蛋白的表达促进EMT的发生,对E-cadherin蛋白的抑制揭示了TLE1调节EMT的作用,探讨了TLE1致癌活性的机制研究[16]。
因此阐明肺癌EMT的分子机制有助于为肺癌治疗提供新的思路和靶点。
3 EMT分子标志物在肺癌研究中的进展
本文选取对肺癌EMT相关的分子标志物E-cadherin和Vimentin进行叙述。
3.1 上皮-钙黏素(E-cadherin)
E-cadherin是维持上皮细胞极性和上皮完整性不可缺少的细胞膜黏附蛋白,生理条件下E-cadherin蛋白具有调节细胞-细胞之间、细胞-基质之间的黏附,维持细胞组织结构完整性及稳定性的功能。E-cadherin蛋白若发生表达的下调则会使同种细胞之间黏附作用减弱或者失去,从而使得正常组织的发育成型不能完成;而当发生在恶性肿瘤细胞中时,细胞极性则会消失殆尽,进而使得细胞具备了侵袭性生长的特性。对E-cadherin的深入研究将对肺癌转移机制探索带来新突破。E-cadherin仅在上皮细胞中表达,而不在间叶细胞中表达[17]。
E-cadherin蛋白在肺癌中的表达具有一定的临床意义。孙菊杰等[18]对62例NSCLC患者肺癌组织和20例患者癌旁组织进行免疫组织化学检查,其中54.8%癌组织中E-cadherin蛋白表达增加,E-cadherin降低与肺癌临床分期和淋巴结转移有关,E-cadherin检测有助于评估肺癌恶性程度及预后。米丽丽等[19]采用免疫组织化学方法检测138例NSCLC肺组织发现,E-cadherin蛋白的低表达与肺癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及术后生存时间明显相关。彭海员等[20]通过流式细胞免疫法定量检测78例肺癌患者肺组织石蜡标本也发现,E-cadherin的低表达可能参与了肺癌的发生、发展以及转移的过程。
肺癌发生侵袭转移的一个重要原因就是EMT,药物靶向EMT这个过程或许是个有效的肺癌治疗策略。通过划痕实验和Transwell检测发现,采用我国传统中药人参皂苷Rg3,对肺癌细胞的迁移和侵袭能力具有抑制作用。人参皂苷Rg3通过增加E-cadherin可以明显的改变EMT标志蛋白,但是Snail、N-cadherin和Vimentin的表达下调了,同时还下调了肺癌中FUT4基因和蛋白的表达[21]。白雪峰等[22]采用免疫组化检测97例NSCLC术后病理标本中上皮性钙黏蛋白(E-cad)、β-连环素(β-cat)和神经性钙黏蛋白(N-cad)、纤连蛋白(Fibronectin,FN)、波形蛋白(Vimentin)等EMT相关标志物的表达情况,发现E-cad、β-cat表达发生了下调,而N-cad、FN、VIM表达升高,此结论证实了NSCLC中存在EMT现象,且与肿瘤侵袭转移相关,均可以作为 NSCLC恶性程度、转移复发、预后的判断指标。上述研究结果均表明E-cadherin可能参与了肺癌的发生、发展,检测E-cadherin或许可以作为肺癌治疗、预后的判断指标。
3.2 波形蛋白(Vimentin)
Vimentin是细胞骨架蛋白之一,特异性的分布于间质细胞中。波形蛋白是一种稳定表达于间叶细胞的中间微丝蛋白,通常在上皮组织不表达,癌细胞中一旦出现了波形蛋白的表达就预示着癌细胞从上皮表型向间叶表型发生了转变。经研究发现[23-24],波形蛋白在NSCLC中的表达与癌细胞的分化程度低、侵袭性强和易转移密切相关,可作为评判肿瘤患者预后的一个指标。Vimentin蛋白表达与肿瘤细胞的侵袭和转移能力增加正相关[25]。
李世武等[26]采用Cochrane系统评价方法,Meta分析免疫组化检测NSCLC患者肿瘤组织波形蛋白表达水平发现,波形蛋白高表达不利于NSCLC患者总生存期和无病生存期预后。郭凯等[27]采用免疫组化法对72例鳞癌及腺癌患者肺组织进行检测发现,波形蛋白在癌组织中阳性表达率为59.72%,Vimentin蛋白随肺癌分化程度的降低,表达逐渐增高。Dauphin等[28]通过对164例鳞癌细胞,108例腺癌细胞及23例其他非小细胞肺癌组织进行免疫组化法检测,在145例肺癌组织中发现了Vimentin蛋白,且其表达显著高于神经内分泌大细胞,波形蛋白的高表达与肺癌的转移,分化程度密切相关。但也有研究表明[29],上皮细胞可诱导出Vimentin蛋白的异常表达,在人类肺癌等许多上皮性肿瘤细胞尤其是低分化癌中确实存在Vimentin蛋白表达,且在上皮性肿瘤细胞中的异常表达与肿瘤局部浸润和转移的潜能密切相关。
4 讨论
随着对肺癌的不断深入研究,预防和治疗癌细胞转移已被公认为临床治疗癌症的关键。EMT通过增强癌细胞的流动性,浸润性和耐凋亡性刺激使得癌细胞具有转移的特性。确定EMT在肺癌的侵袭和转移的细胞及分子机制是研究重点。有研究表明,中药复方通过上调E-cadherin蛋白、下调Vimentin蛋白的表达从而阻碍肺癌组织EMT的发生,进而抑制肿瘤的增殖、侵袭、转移。因此药物作用于EMT途径是治疗肺癌的一个行之有效的方法。
综上所述,深入研究EMT在肿瘤侵袭转移中的作用及其调控机制,对于防治肺癌与开发抗肺癌药物具有重要意义,而寻找高敏感性与特异性的肿瘤标志物将对肺癌患者的肿瘤预防、早期诊断、预后判断发挥重要作用。
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1、控制饮食均衡搭配营养,以素食为主,减少脂肪的摄入。多吃一些蛋白质含量较高的食物,多食用碳水化合物。禁止孩子食用洋快餐,多吃水果。当孩子对这种控制饮食的方法抵触时,家长一定要坚持。
2、加强锻炼运动减肥是最好的减肥方法,而且儿童正处于成长发育的最佳时间,多锻炼对于孩子的骨骼、肌肉发育也有诸多好处。家长可以为孩子制定科学的减肥计划表,并陪孩子一起锻炼哦。
3、科学减肥减肥是一件要遵照科学方法的事情,尤其是对于儿童减肥更是要慎重,不要轻易听信一些医疗机构的宣传,采用什么医疗减肥的方法,这样会对孩子产生未知的副作用。
(来源:文章屋网 )
莎拉:资深身心灵上班族,多年来跨媒体从事身心灵文化交流及教学工作,始创曼陀罗心灵阅读卡。曾任占星皇驻场顾问、香港雅虎星相顾问及东亚卫视客席主持,并为塔罗牌、命理及手相导师。其专访及身心灵文字见于中外各大传媒。
白羊座
开运物品:粉色杯子
爱情运佳日期:8、21
事业运佳日期:5、17
运势旺盛日期:1、9
整体运势:
爱情指数:
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本月是白羊座难得一遇的收获期,无论在本月做什么事都会使你感受到辛苦努力所带来的成就感。本月需要多注意的是自己的健康方面的问题,因为所爆发的能量很强,不能视而不见,必须积极防御。爱情方面要坦诚相待,和伴侣可以一起做开心的事,出境游玩、放松。
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本月最佳减肥期:17―28
本月的木星逆行,有助于白羊座的减肥,稍稍多用点心就可以达到事半功倍的效果,所以一定要用心。
最佳减肥法:减肥舞蹈
金牛座
开运物品:小盆栽
爱情运佳日期:19
事业运佳日期:14、23
运势旺盛日期:27
整体运势:
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这个月很多问题都一起找上你,因此需要好好的用心的去处理。在这期间会有很多状况都搞不清楚,感觉自己身边的朋友变得不能理解,所以需要好好的去调理才会有机会改进。理财方面开始处理与钱有关的问题或债务,你感受到债务或经济压力迫在眼前。
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本月最佳减肥期:12―22
吉星进入境外宫位,为了保障自己的瘦身减肥能够最大限度的体现和发挥出来,因此需要跟自己定制一套最好的方案。
最佳减肥法:6天健康瘦身
双子座
开运物品:镜子
爱情运佳日期:27、29
事业运佳日期:1、13
运势旺盛日期:18
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本月双子座的很多有利因素会小时,因此若想要成功就不要依靠别人。爱情方面开始接触全新的花花世界,记住一定要看清楚,不要盲目乱相信人。学业事业方面要记住多花时间和别人进行沟通,让大家成为你前进路上的明灯。理财方面,与金钱有关的事卷土重来,必须谨慎处理,此时不要轻易相信别人给的建议。星座减肥学――【最减肥女刊瘦美人】微信频道特邀专家专业解析
减肥指数:
本月最佳减肥期:2―18
本月木星在双子的第二宫逆行,因此在减肥瘦身上面要多加小心,以免造成反弹,所以需要多做运动来保持良好的体魄。
最佳减肥法:动感单车
巨蟹座
开运物品:珍珠项链
爱情运佳日期:15、23
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运势旺盛日期:20
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本月命宫的行星逆行,巨蟹座在爱情方面会很愿意经营浪漫,用于表现自我,桃花运会较好。事业学业方面你不能再予取予求,若能知所进退,就会得到好处。投资理财方面耍多注意询问一下身边人的意见,说不定他们会带给你灵机一动的意见。
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减肥指数:
本月最佳减肥期:14―23
命宫的行星逆行,建议巨蟹在减肥瘦身方面是稍微收敛一点,不宜用力过猛,不然会造成不必要的麻烦。
最佳减肥法:纤体瑜伽
狮子座
开运物品:眼镜框
爱情运佳日期:16、20
事业运佳日期:17
运势旺盛日期:18、29
整体运势:
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本月对于狮子座的人来说是一个不小的挑战,更方面都有很多变化。在工作学习方面会感到很吃力,承担了较大的责任。事业学业方面会进入新的位置,对于年轻人来说,这是挑战也是机遇。爱情方面的桃花较强,可能会发生办公室/教室恋情。
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本月最佳减肥期:23―27
狮子座本月在在健康上可以改变自己的一些生活习惯,多仔细检查有没有别忽略的部分。要多休息,茶余饭后多走动。
最佳减肥法:慢走1小时
处女座
开运物品:耳钉
爱情运佳日期:12、21
事业运佳日期:23
运势旺盛日期:18
整体运势:
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处女座本月运势不好不坏,爱情方面有机会接触自己喜欢的人,是否能给对方深刻的印象,就看你怎么表现。学业事业方面需要小心的处理与对方的各种关系,处理好就会事半功倍,处理的不好就容易使绊子。理财方面家中大小事都需要支出,计划好就会游刃有余。
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减肥指数:
本月最佳减肥期:2―12
金星进入第五宫,在这段时间需要好好的调理自己的肠胃,弥补前段时间的节食减肥所造成的肠胃问题。
最佳减肥法:五谷饭
天秤座
开运物品:运动包
爱情运佳日期:7、19
事业运佳日期:2、21
运势旺盛日期:16
整体运势:
爱情指数:
事业学业:
投资理财:
水星进入财帛宫,会带来理性判断的能量,需要去为自己争取合理待遇,理财方面光靠说不如多多的行动起来。爱情方面,和恋人要把该说的话和心里的话都将清除明白,这样才不会引起误会和隔阂。事业学业方面要靠自己的脑力去征服别人,而不是随便说说而已。
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减肥指数:
本月最佳减肥期:18―27
本月是个很好的减肥机会,所以一定要好好的珍惜,给自己定制一份详细的瘦身计划表,然后每天按照计划表上的进行实施。
最佳减肥法:计划健身
天蝎座
开运物品:香水
爱情运佳日期:12、1 3
事业运佳日期:1、4
运势旺盛日期:30
整体运势:
爱情指数:
事业学业:
投资理财:
本月是天蝎座最有信心的一个月可以正视自己的缺点和缺陷,并且有勇气去克服。爱情方面要做长远的规划,不能走一步看一部,这样很容易感情出问题。事业学业方面,因你所担负的责任很繁重,所以需要调整好自己重新出发。理财方面偏财运较弱,所以保本最好。
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减肥指数:
本月最佳减肥期:13―21
重要星象木星逆行,使得本月的减肥运势不高,想要减肥能够较好的效果,可以试试从平常的晚餐下手,多吃点果蔬。
最佳减肥法:果蔬沙拉
射手座
开运物品:杂志
爱情运佳日期:1 2、21
事业运佳日期:17
运势旺盛日期:11、14
整体运势:
爱情指数:
事业学业:
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本月射手座各方面都只能算是中等,不过后期开始将会有一次转型的机会。爱情方面有很大机会遇到自己喜欢的人,要多注意观察周围的朋友。事业学业方面应该会有不错的成绩,但切记不要骄傲。理财方面,在家人、父母、朋友方面会有一些正常的支出。
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减肥指数:
本月最佳减肥期:18―28
本月金星从一宫移到二宫,在减肥瘦身方面会有一些较大的起伏,遇到瓶颈期也不要太棋类,顺利度过就好。
最佳减肥法:床上减肥小运动
摩羯座
开运物品:手机挂件
爱情运佳日期:16、21
事业运佳日期:9
运势旺盛日期:10、21
整体运势:
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本月摩羯座整体运势较好,爱情方面会有更进一步的接近,一定要记住把握良好的机会。事业学业方面会有一些小小的困难被难住,不过如果用心解答会顺利度过这个瓶颈期的。投资理财方面偏财运很好,对于很多事做起来都很有积极性。星座减肥学――【最减肥女刊瘦美人】微信频道特邀专家专业解析
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本月最佳减肥期:12―26
吉星在摩羯座第六宫,因此想要做任何事都会达成。减肥的事不能一蹴而就,想要健康的瘦身,一定要循序渐进。
最佳减肥法:绑缚带瘦腿
水瓶座
开运物品:蜡笔
爱情运佳日期:11、29
事业运佳日期:10
运势旺盛日期:18、22
整体运势:
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减肥指数:
本月最佳减肥期:7―17
[关键词] 青蒿琥酯;非酒精性脂肪性肝炎;过氧化物酶体增殖物激活受体γ;固醇调节元件结合蛋白-1c
[中图分类号] R575.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2014)08(b)-0004-04
Effects of artesunate on expressions of peroxisome proliferators activated receptor γ and sterol regulatory element binding protein-1c in the hepatic tissue of the rats with nonalcoholic steatohepatitis
CHEN Jing LI Li YE Yuefang
Department of Gastroenterology, the Affiliated Hospital of Hangzhou Normal University, Zhejiang Province, Hangzhou 310015, China
[Abstract] Objective To explore the influence of artesunate upon expressions of peroxisome proliferator-activated receptor γ (PPARγ) and sterol regulatory element binding protein-1c (SREBP-1c) in the hepatic tissue of the rats with nonalcoholic steatohepatitis (NASH). Methods High-fat diets were used in male SD rats to induce NASH. Rats were divided into six groups: normal group, model group, Essentiale Forte N group, artesunate low-dose group, moderate-dose group and high-dose group. Standard feed was used to the normal group every day. Equal volume of normal saline was applied to the normal group and the model group. After artesunate treatment for 8 weeks, the hepatic tissues of the rats were extracted, and the expressions of PPARγ and SREBP-1c in them were detected by immunohistochemistry assay. The contents of malondialdehyde (MDA) was measured with thiobarbituric acid assay, the contents of superoxide dismutase (SOD) was measured by xanthine oxidase assay, and the contents of GSH-Px was measured by spectrophotometry. The presence of hepatic fatty degeneration and the degree of inflammation and fibrosis were observed with light microscope. Results Not noly the expression of PPARγ decreased (1.67±1.01) significantly but also the expression of SREBP-1c increased(3.27±1.03) significantly in the model group compared with those of the normal group (all P < 0.05). The expression of PPARγ increased and the expression of SREBP-1c decreased in a dose-dependent manner in the artesunate low and moderate-dose groups compared with those of the model group. The expression of PPARγ was (3.21±1.02) and the expression of SREBP-1c was (1.32±0.77) in the artesunate high-dose group, which had significant differences compared to those of the model group (all P < 0.01). In the artesunate groups, both the contents of SOD and GSH-Px increased and the content of MDA decreased in a dose-dependent manner compared to those of the model group. Both the fatty degeneration and the degree of inflammation and hepatic fibrosis in rats were improved markedly by artesunate. Conclusion The mechanism of artesunate curing rat NASH may be associated with the up-regulation of PPARγ expression and the down-regulation of SREBP-1c expression.
[Key words] Artesunate; Nonalcoholic steatohepatitis; Peroxisome proliferator-activated receptors γ; Sterol regulatory element binding protein-1c
非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是世界范围内常见肝脏疾病之一,近年来在我国的发病率迅速上升,是继病毒性肝炎后第2位常见肝病。NAFLD从病理上分为单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎(NASH)、脂肪性肝纤维化和脂肪性肝硬化[1]。因此,NAFLD是对人类健康产生严重威胁的慢性肝病之一,对NAFLD发病机制及防治方法的探讨已经成为当前研究的核心,但其病理分子机制还不完全明确,故临床治疗上无特效药物且疗效欠佳。根据Day[2]提出的“二次打击学说”,本实验拟从其发病机制出发,研究过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)在脂肪代谢中的调节作用,初步探讨青蒿琥酯对NASH的保护作用。
1 仪器与试药
1.1 仪器
Leica2235轮转式切片机(德国),Biofuge 28RS低温高速离心机(德国Heraeus公司),OlympasB41显微镜(日本Olympas),生物安全柜(Thermo scienrific,1384),数显立式高压灭菌锅(上海博讯实业有限公司,YXQ-LS-30SⅡ),低温冰箱(Thermo scientific,MDF-U538-C)和纯化水制水系统(象山和信制药设备有限公司,FST-2B型)。
1.2 试药
青蒿琥酯(广西桂林制药二厂,批号:010901)、易善复(赛诺菲安万特制药有限公司,批号:D1157),丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒(南京建成生物工程研究所,批号分别为:A001-2,ba8150,20100107)。SREBP1兔抗(Santa Cruz Biotechnology,批号:C0907);Envision二步法免疫组化试剂盒(丹麦Dako公司,批号:00029661)。
1.3 实验动物
SPF级雄性SD大鼠购自浙江省医学科学院实验动物中心(动物许可证号SCXK浙-20080033)。大鼠普通饲料及高脂饲料由浙江省医学科学院实验动物中心加工生产,高脂饲料配方为:普通饲料82%、蛋黄粉5%、猪油10%、胆固醇2%、胆盐1%。
2 方法
2.1 实验分组
95只SD大鼠经适应性饲养1周后,随机分为正常组15只(每天予以标准饲料喂养),造模组80只(每天予以高脂饲料喂养),连续喂养12周;第12周结束后随机在造模组中处死5只。取肝脏进行病理切片检查HE染色法,评定非酒精性脂肪性肝炎程度,对已成模的大鼠分成5组,每组15只,分别是模型组、易善复组、青蒿琥酯低、中和高剂量组;青蒿琥酯低、中和高剂量组青蒿琥酯分别按5、15、45 mg/g剂量每日灌胃;易善复组给予易善复按300 mg/g剂量每日灌胃;正常组和模型组给予同等剂量的生理盐水,给药治疗8周后,处死各组大鼠,迅速取肝右叶中部切取数块肝组织,立即投入液氮中冻存,3 h后移入-80℃冰箱中保存备用。
2.2 各组大鼠肝组织MDA、SOD和GSH-Px含量测定
过氧化脂质降解产物中的MDA可与硫代巴比妥酸缩合,形成红色产物,在532 nm处有最大吸收峰。取各组动物血清,严格按试剂盒说明书操作,稀释倍数为1倍,上样量为10 μL,MDA含量公式为:血清中MDA的含量(nmol/mL)=÷标准品浓度(10 nmol/mL)+样本测试前稀释倍数。
通过黄嘌呤和XOD反应系统产生O2-,O2-氧化羟胺形成亚硝酸盐(NO2-),同时在显色剂的作用下呈现紫红色,测定其吸光度。通过公式计算出被测样品中SOD活力:血浆中总SOD活力(U/mL)=÷50%×反应体系的稀释倍数×样本测试前。
根据酶促反应中谷胱甘肽(GSH)的消耗,可以求出酶的活力(H2O2+2GSH2H2O+GSSG),然后取各组动物血清,严格按照说明书操作,稀释倍数为30倍,通过公式测定血清中GSH-PX含量。公式为:血清GSH-Px活力(U/mL)=×标准管浓度(20 μmol/L)×稀释倍数(6)×样本测试前的稀释倍数。
2.3肝组织病理
常规HE染色观察肝组织脂肪变、炎症及纤维化程度。病理诊断标准参考中华医学会学分会脂肪肝和酒精性肝病学组2006年2月修订的《酒精性肝病诊疗指南》[3]。
2.4肝组织免疫组化
取上述石蜡标本切片,采用免疫组化二步法进行免疫组化染色。每张切片于阳性表达区域选择10个无重叠视野,阳性细胞表现为胞浆或胞核呈棕黄色颗粒。着色细胞阳性范围:无着色为0分,着色阳性细胞小于1/3为1分,着色阳性细胞1/3~1/2为2分,着色阳性细胞大于1/2为3分;将每张切片着色程度与着色细胞阳性范围得分各自相加取平均值为其最后计分。
2.5 统计学方法
采用统计软件SPSS 18.0对实验数据进行分析,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,两组独立样本采用t检验,多组比较采用方差分析,两两比较采用LSD-t检验。计数资料以率表示,采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
3 结果
3.1 各组大鼠肝组织MDA、SOD和GSH-Px含量测定结果
与正常组相比,模型组大鼠肝组织MDA显著增加,差异有统计学意义(P < 0.05);与模型组比较,青蒿琥酯各剂量组大鼠肝组织MDA显著下降并且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P < 0.05);与正常组比较,模型组大鼠肝组织SOD和GSH-Px显著降低,差异有统计学意义(P < 0.05);与模型组比较,青蒿琥酯各剂量组大鼠肝组织SOD和GSH-Px显著增加并且呈剂量依赖性,差异有统计学意义(P < 0.05)。结果见表1。
3.2 各组大鼠肝脏组织HE染色结果
光镜下,正常组大鼠肝脏肝小叶轮廓清晰,结构正常,细胞索排列整齐,肝细胞呈无明显病变,核结构清晰。模型组大鼠肝组织可见中到重度脂肪肝,肝索出现紊乱,胞质疏松可见大小不一的脂滴空泡,肝小叶内出现点状坏死,汇管区有炎症细胞浸润;青蒿琥酯组可见轻度到中度脂肪变,细胞肿胀,胞浆内可见大小不等的脂肪空泡,肝小叶未见明显炎症细胞浸润。见封三(图1)。
3.3各组大鼠肝脏组织免疫组化结果
采用免疫组化二步法进行免疫组化染色,PPARγ主要定位于肝细胞核内,呈棕黄色颗粒主要分布在汇管区周围肝细胞胞核内;与正常组相比,模型组PPARγ阳性表达细胞明显减少(P < 0.05);青蒿琥酯中、低剂量组与模型组相比,PPARγ阳性表达细胞增多,并且呈剂量依赖性(均P < 0.05),青蒿琥酯高剂量组和模型组相比差异有高度统计学意义(P < 0.01);SREBP-1c 表达于胞浆质中,可见肝细胞质中散在分布浅黄色颗;与正常组相比,模型组SREBP-1c阳性表达增强细胞质中可见大量棕褐色颗粒沉积,同时大部分细胞核也呈阳性着色,两组比较差异有统计学意义(P < 0.05);青蒿琥酯中、低剂量组与模型组相比,SREBP-1c阳性表达细胞减少,并且呈剂量依赖性减少,青蒿琥酯高剂量组和模型组相比差异有高度统计学意义(P < 0.01)。见封三(图2、3),表2。4 讨论
青蒿素是从植物黄花蒿中提取得到的一种内酯化合物。青蒿素及其衍生物具有抗病毒、抗肿瘤和免疫抑制等多方面药理作用。青蒿琥酯为青蒿素水溶性的衍生物[4]。有学者发现青蒿琥酯对醋氨酚(AAP)与四氯化碳(CCl4)引起的小鼠急性肝损伤有保护作用[5-6];来丽娜等[4]发现青蒿琥酯能降低牛血清白蛋白致大鼠肝纤维化程度。因此,本实验初步探讨青蒿琥酯是否能通过PPARγ和SREBP-1c途径阻断NASH的形成。
氧化应激与脂质过氧化是“二次打击”学说的核心环节。正常情况下肝线粒体与内质网在脂肪酸β氧化过程中产生大量的活性氧(reactive oxygen species,ROS),使氧化和抗氧化处于动态平衡。在病理情况下,肝细胞内一旦ROS的过量产生与抗氧化能力降低,能促使氧化物与抗氧化物之间的动态平衡失调,从而导致脂质过氧化,很容易导致氧化应激状态[7]。SOD是体内一种重要的自由基清除剂,能够平衡机体的ROS,避免超氧阴离子自由基浓度过高时引起的不良反应。脂质过氧化终产物MDA可形成蛋白加合物,刺激机体产生抗体介导的免疫损伤[8]。GSH-Px是机体内存在的一种含硒抗氧化酶,它能特异性地催化GSH对H2O2的还原反应,进而清除H2O2,从而起到保护细胞膜结构和功能完整的作用。如果过氧化氢酶(CAT)在肝脏中含量极高,可以促使H2O2分解为分子氧和水,从而使细胞免于遭受H2O2的损害[9]。因此,提高SOD、GSH-Px活性与降低肝MDA含量对抗氧应激状态,提高肝脏抗氧化能力。本研究结果表明青蒿琥酯可通过增加机体SOD和GSH-Px活性,增强机体抗氧化能力,加速自由基的清除,抑制脂质过氧化反应,清除过量的MDA,从而保护肝脏的结构和功能。
PPAR有3种亚型分别为α、β、γ,其中PPARγ是由多种脂肪酸及其衍生物激活,是胰岛素细胞间信号传递和脂肪细胞基因表达的主要调控者,参与了脂代谢的调节及脂肪细胞分化,因此在NAFLD中起着重要作用[10]。SREBPs是一类膜连接蛋白,其位于内质网上。SREBP-1也是一种核转录因子,SREBP-1c是其中一个亚型,它主要参与糖代谢和脂肪酸的代谢,是脂肪合成基因转录的主要调节因子,与脂肪变性有密切联系[11]。本实验从蛋白水平结果显示:PRARγ和SREBP-lc与肝细胞病变程度有很好的一致性关系,两者可能协同作用参与并促进了非酒精性脂肪性肝病的发生、发展。进一步验证青蒿琥酯抑制PRARγ和SREBP-lc的不适当表达可能是预防和治疗NASH的一条有效途径。
[参考文献]
[1] Duvnjak M,Leroti I,Barsi N,et al. Pathogenesis and managementissues for nonalcoholic fatty liver disease [J]. World J Gastroenterol,2007,1(3):4539-4550.
[2] Day CP. Pathogenesis of steatohepatitis [J]. Best Pract Res Clin Gastroenterol,2002,1(6):663-678.
[3] 中华医学会肝病学分会脂肪肝和酒精性肝病学组.酒精性肝病诊疗指南[J].中华肝脏病杂志,2006,14(3):164-166.
[4] 来丽娜,任泽恩,宋晓亮,等.青蒿琥酯对肝纤维化大鼠肝脏基质金属蛋白酶-2表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(11):264-267.
[5] Arthur MJ. Matrix degradation in the liver [J]. In liver,1990,10(1):47-55.
[6] Herbst H,Wege T,Milani S,et al. Tissue inhibitor of metalloproteinase-1 and -2 RNA expression in rat and human liver fibrosis [J]. Am J Pathol,1997,150:1647-1659.
[7] 郑海音,赵锦燕,刘艳,等.粗叶悬钩子总生物碱对大鼠非酒精性脂肪肝病的抗氧化作用研究[J].中国中药杂志,2011,36(17):2383-2387.
[8] 王一平,谭华炳,王记红,等.非酒精性脂肪性肝病兔肝组织甘油三酯、丙二醛、超氧化物歧化酶与血浆内皮素的关系[J].中华临床医师杂志,2011,5(4):971-974.
[9] 王晶宇,马笑燕,夏苗,等.藏药柳茶提取物对非酒精性脂肪肝病大鼠肝脏保护作用及其机制研究[J].中国临床药理学杂志,2011,27(3):191-194.
[10] Mcirhacghc A,Fajas I,Gouilleux F,et al. A functional polymorphism in a STA5B site of human PPAR gamma 3 gene promoter affects height and lipid metabolism in a French population [J]. Arterioscler Thromb Vasc Biol,2003,23(2):289.
现在的你是否在想念曾经的她,可是这又如何呢々过去了的,谁能颠覆呢?
回想遇见段小瑞的那天,麦加正百般无聊地蹲在太阳底下看一群蚂蚁搬运着一只甲虫。平时小小的虫子。在蚂蚁家族中显得那么庞大。一只一只小小的蚂蚁排成一条长长的黑色小线,绿色的虫子就从一边慢慢向另一边传递。
此时的阳光还是很炽烈,麦加的额头上布满了细密的汗珠,然后她感觉到有一个高大的身影帮自己遮挡住了阳光,虽然并没有完全覆盖住她的影子。
麦加转过头,便看见一个男生气呼呼地瞪着自己,“小姐,你到底要踩着我的身份证多久啊!”
麦加“啊”了一声,抬起自己的左脚,没有。又抬起自己的右脚,她看到那张第二代身份证上一个胖嘟嘟的扑克脸,然后把它捡起来。
段小瑞。
麦加念出身份证上的姓名,却无论如何也不能将这两个人联系在一起。一个是肥得连五官都挤在一起,一个则是有着削瘦的侧脸,阳光在他脸上肆虐着。
“你确定这张身份证是你的?”麦加在观察了三分钟之后仍然不死心地问道,“你确定你就是段小瑞?”
对方翻出一对死鱼眼,然后指着自己右脸颊边的那颗痣,再指了指身份证,
“有痣为证!”
他的话音刚落,麦加立即跳了起来,使劲地拍了拍他的肩膀,
“师傅,你可以收我为徒吗?我想减肥!”
你看见了吗?一个胖胖的,长得像加菲猫的女生在追着一个男生满街跑,她嘶吼着要加入减肥协会,没错,那就是麦加同学。
男生段小瑞在拿回自己的身份证之后已经跑开了,体育成绩很差的麦加没有追上他。
这是在体育馆门口,麦加陪着好朋友栗欢去参加游泳班。可是,她却被拒之门外了,原因是教练觉得她太肥胖了,如果溺水了,很难有人能将她救起。
这让麦加感到无比伤心,她在门口等着栗欢,看着自己投落在水泥地板上巨大浑圆的影子,终于有了想哭的感觉。
因为游泳馆里还有一个很高很瘦的身影,他也在人群中偷偷地捂住了嘴巴。
噢,那是谢东培。
世界上最丢脸的事情莫过于在自己最窘迫的时候遇到曾经的高中同学。
世界上更加丢脸的事情莫过于这个同学是与自己曾经传过绯闻的前男朋友,分手一年。
麦加并没有追上男生段小瑞,她有些沮丧地瘫坐在地上,她觉得自己有些委屈,想着想着眼泪就慢慢地掉下来了。在麦加嚎啕大哭的前一秒,一双长长的微凉的手掌把自己从地上拖了起来。
麦加听到了男生带着抱怨的语气。
“这样一点小事就哭,真是的,比小孩子还没用。”
他的话音刚落,麦加刚止住的眼泪马上又像小雨一样噼里啪啦地落下。段小瑞脸上是无可奈何的僵化了的表情。
麦加,身高一百五十二公分,体重一百二十五公斤,拥有着一张圆圆的脸蛋,笑起来就像加菲猫一样可爱。
这是麦加的闺蜜加多年同学栗欢给她的评价,记忆中的麦加的身高从小学六年级开始就没有长高,而体重却一路飙升。
当麦加与朋友去游乐场游玩的时候,总会有那么一两个小朋友走过来要和她合影,当麦加与新朋友接触的时候,总会有那么一两个人捂着嘴巴挤出几个字――加菲猫。
然后你会看到,笑容凝固在加菲猫脸上。
在二十岁生日的时候,麦加同学非常诚心地许下她每一年都相同的那个愿望:希望减肥可以成功。
可是,这个愿望每一年都没有实现。
【篮球赛】lan qiu sai
麦加再一次遇见段小瑞的时候,是在学校的篮球场。麦加看到人群中两个显眼的人物,尤其是段小瑞,他几乎控制着整个球队。
这是体育系与医学系正在进行巅峰对决。其实,不用我说,大家肯定都会猜,医学系肯定是惨败。
可是事实不是这样的,最后的结果虽然是体育系胜出,可是他们只是小胜,赢了一个三分球。麦加看到满身大汗的段小瑞,一下子冲上前去,狠狠地在他肩膀上拍了一下。
“原来你是医学系的啊!哎呀,看不出你体育还是挺行的嘛!”她的话刚落,便看见段小瑞的脸上布满了阴霾。麦加这才发现,自己下手太重了。
穿着背心的段小瑞的肩膀上是五条红红的指印,麦加有些心虚地吐了吐舌头。她假装不经意地往谢东培所在的位置瞄了瞄,他正在喝水,旁边还有一个瘦小的女孩子在给他拿着毛巾。
其实,麦加心里还是有些不平衡的,她想起他和自己分手的时候说的话,她就觉得愤怒。
――小麦,我觉得我们不是很适合,我的肩膀太瘦小,承受不了你那么重的爱情。
言下之意就是,你太肥了,我看不上你。
麦加瞄了眼身边在擦汗的段小瑞,牵起他的手,然后大摇大摆地穿过谢东培的身边。段小瑞显然还没有反应过来,愣愣地被她扯着。
麦加走了很远,直到已经看不到篮球场,她才停下来,可是她没有转过头来。她背着身子问段小瑞,
“你可以帮我减肥吗?”
也许是麦加的声音带着细细的哭腔,也许是段小瑞突然觉得麦加其实有点可爱,他就答应了下来。可是,他说完好之后才发觉自己上当受骗了。
加菲猫扯着一张笑脸对他比了个胜利的手势。
段小瑞也在这个时候想起了一件事。
“我的手机和书包还在篮球场!”
当麦加和段小瑞气喘吁吁地跑回篮球场的时候,他的手机已经不知道落入了谁人的口袋,可是钱包还在。
“虽然命没有了,可是总算收回了尸体!”麦加对着他空空如也的钱包发出了感慨,然后很大气地又一次拍他的肩膀,“走,我请你吃顿丰盛的晚餐去!别说我不照顾你!”
她口中的丰盛的晚餐便是学校门口的五块钱一份的炒饭。他们两个挤在热火朝天的大排档里,段小瑞看着麦加塞满了饭的嘴巴,很不忍心问她,不是要减肥吗。
【地铁站】di tie zhan
麦加那一天吃得很饱,因为她除了吃掉自己的那份炒饭之外,她还偷偷舀了几勺段小瑞的。她吃完之后豪气地甩下十块钱,然后很有气势地对段小瑞说,
“我们走吧!我给你买地铁票!”
周围的人都看着他们,段小瑞的脸上火辣辣的,可是麦加却不觉得,她像是喝醉了酒一样地呢喃着:
“我要减肥,减肥之后他就会喜欢我了‘明天开始一定要减肥l”
段小瑞叹了一口气,然后跟在虎背熊腰的麦加后面。她过去帮他买了地铁票。段小瑞不知道麦加是怎么知道自己不住校的,而麦加似乎看透了他的心思,咯吱一笑,“我也不是住校的!”
当段小瑞踏上一号线的时候,麦加还在等地铁。十五分钟后,段小瑞发现自己坐反地铁再折回来的时候,麦加还是在那里。
她显然很困,靠在地铁站旁边的椅子上,睡着了,她睡觉的表情很难看,两条眉毛紧紧地皱着,她睡得很熟,在人来人往的地铁站,她居然在磨牙。
因为如此,在第二天,麦加便收到了段小瑞给的一瓶钙片,真不愧是医学系的高材生。
可是麦加对此并不感兴趣,她依旧不依不饶地问着段小瑞一个问题――为什么他可以瘦了那么多,而自己尝试了那么多种减肥方法都没有效果。
其实段小瑞也不知道,在三年前,自己还是个大胖子,可是慢慢地慢慢地他自己就瘦了下来。可是麦加并 不相信,还是纠缠不清。
她指着不远处的一对情侣,大声地吼着,
“我要像她一样瘦!”她的声音太大了,以至于前面的人转过了头来看着他们。
那不是别人,那便是麦加的前男友谢东培与他的新女友。
麦加可能也不知道是他们,她还在半空中的手一下子不知道如何是好,干脆便提起来朝他们招手:
“好久不见!”
她说完之后便扯着段小瑞想跑掉,可是谢东培却突然叫住了她,
“小麦,你不要减肥啦!其实个人的体质不同,你又何必呢!”
麦加没有搭理他们,可是毫无疑问+他的话对麦加减肥的决心像是一针催化剂,麦加这一天就开始行动了。
她没有吃早餐,然后绕着操场开始一圈又一圈地跑着。她的白衬衫已经被汗水湿透了,大滴的汗珠顺着脸颊滑落。
麦加的心中只有一个信念――她要减肥。
【好爱情】hao ai qing
专家说,减肥是一场恐怖的战争,除了要有作战经验之外,还要是个自信的将军。
可是,麦加并不是个好将军。
当段小瑞问麦加为什么要减肥的时候,她说不出理由,可是她却一定要减肥。
麦加说,只有瘦子才能找到好爱情。
[医学系] yi xue xi
麦加果然是被谢东培刺激到了,她每天就只是喝水还有吃那盒段小瑞给的钙片,她一有空就往操场上跑,四百米的跑道。她每天要跑好几圈,短短的几天,她跑坏了两双帆布鞋。
麦加的闺蜜栗欢在她后面追着她,扯着嗓子喊她,“麦加,你这个神经病……”
麦加假装听不见,沿着跑道一直跑,周围的香樟树开始变得混乱起来,日光下,篮球场上的谢东培奔跑的身影开始慢慢融为一个光亮的小点。
于是,在酷暑中,她倒下了。
醒来的时候,是在校医务室,白色的墙壁,整个房间充斥着一股浓烈的消毒药水的味道,栗欢的脸忽然凑了上来,无限放大。
这可吓了麦加一大跳:
“是你送我来的?”
栗欢摇了摇头,指了指后面,麦加便看到段小瑞铁青着的脸。他举着一本类似课本的东西,咚咚咚地敲着麦加的头。
“你营养不良,需要好好补充点营养,为了减肥,你值得吗你!”他又摆出了他医学系高材生的样子,“我们每天吃的食物不是仅仅为了填饱肚子,还是为了补充我们身体所需要的糖分,水分……”
麦加自知理亏,不敢说话,段小瑞训完话之后,从桌子上抓起一杯热可可,塞在了麦加的手上,“给我喝下去!”
麦加不敢反抗,咕噜咕噜地喝完,可是喝完之后她就想哭。一杯热可可的卡路里该有多高啊,她这几天的减肥成果肯定都没有了,辛苦都是白费的。
段小瑞走了之后,麦加还不想离开,她哭丧着脸瘫坐在床上。栗欢却突然凑了过来,“喂,他是你的新男朋友吗?对你那么好!”
麦加指了指段小瑞又指了指自己,急忙摆摆手,“才不是呢!我们认识还不到一个月。你看看。他那么瘦,而我那么胖,怎么可能嘛!”
她的话音刚落,栗欢便跳了起来,
“这样的话,那是不是代表我可以去追他啊?”
麦加张大了嘴巴,不知道说什么好,她只是撇了撇嘴巴,然后蒙上被子准备大睡,她此时正在悲伤着,她的减肥计划又一次落空了。
虽然她减肥不成功,可是她却成功地和段小瑞成为了好朋友。
在此之后,麦加又制定了好几个计划表,可是没有一次能够成功。因为每次在她节食了之后,段小瑞总是会跑出来,拉着她去吃各种各样好吃的小吃,麦加根本无法拒绝。
她是个美食主义者,从来都拒绝不了美食的诱惑,一个月下来,麦加的体重并没有减少,反而还增加了几公斤,看起来更像一只胖乎乎的加菲猫了。
当段小瑞捏着麦加胖乎乎的脸蛋喊她加菲猫的时候,麦加也不知道自己怎么了,突然发了好大的脾气。
她狠狠地打掉了他放在自己脸上的手,然后狠狠地推开了他,段小瑞没有防备,被她这一推,整个人摔在了地上。
栗欢也被麦加吓了一大跳,她像是要哭出来一样板着脸。
【麦当劳】mai dang lao
“你们肯定都在嘲笑我。我胖得就像一只笨熊一样!”虽然她的比喻不是那么恰当,但麦加想这也许就是他们对自己的看法吧!
“胖或瘦又怎么样呢?只要你身体健康就好啊……”
“是的,胖或瘦没有怎么样,可是,没有一个男生会喜欢他的女朋友是一只加菲猫的!”麦加打断了段小瑞的话,
“没有一个男生会喜欢胖乎乎的女生的!”
段小瑞还想说些什么,可是麦加紧紧地捂住了耳朵,她什么也不想听。请原谅这只正在烦躁中的加菲猫吧!
段小瑞也没有再说什么了,他叹了口气就转身走吧。
只是,麦加没有想到,她的好朋友栗欢没有站在她这一边,她只是说了一句,“麦加,你太过分了!”然后就朝着段小瑞离开的方向追去了。
麦加一个人站在原地,感觉有些落寞。麦加看着他们远去的背影,在那一瞬间她突然感觉到栗欢和段小瑞其实还是蛮般配的。
谢东培就是在这个时候出现的,他拍了拍麦加的肩膀,说了句,“你还好吗?”
麦加转过身看着这个自己曾经喜欢过的男孩,他的白衬衫还是那么白净,她面对着他,是那么坦然。于是,麦加接受了他的邀请,一起去喝杯咖啡。
他们没有去星巴克,因为从前他们在恋爱时都没有去过那么奢侈的地方,现在更是没有可能。他们去了麦当劳。在麦当劳买了两杯咖啡,其实,这也是喝咖啡嘛!
麦加没有往咖啡里放糖和奶精,只是拿着塑料咖啡勺不停地搅拌着那个塑料杯子,迟迟不喝,因为她知道,实在太苦了。
谢东培被她逗笑了,他宠溺地揉着她的头发,
“小麦,你不要减肥了,其实这样也蛮好的!”只是,你不喜欢而已,麦加在心里帮他补充道。
麦加在这个时候愣住了,他怎么可以对她做出这么亲密的动作,要是被人看到这可该如何是好。
可是事情就是那么巧,这个城市有那么多的麦当劳,麦加偏偏就遇见了刚刚与她分开的两个人,栗欢与段小瑞。
他们与自己隔着几张桌子,栗欢朝自己眨眼睛,可是她却看不到段小瑞的表情。他与栗欢聊得正欢,丝毫没有过来打招呼的意思,其实麦加心里还是有些不舒坦的。
麦当劳里充斥着汉堡鸡翅与冰淇淋的香气,麦加听到肚子咕噜咕噜地叫着,可是她咽了咽口水,对谢东培说:“我不饿!”
段小瑞和栗欢已经吃完东西准备走人了,麦加转过头去的时候,段小瑞把一块麦乐鸡塞进了麦加的嘴巴里,然后头也不回地走开了。
这一天的减肥计划落空,麦加被一块麦乐鸡攻破防线。
当然,她和谢东培并没有像你们想象中的一样,很快地和好了,他们还是各走各路,因为他那个比猴子还瘦的女朋友约他去看电影了。
【谈恋爱】tan lian ai
麦加在最近已经很少遇到医学系高材生段小瑞了,就连总是与她形影不离的死党栗欢也消失得无影无踪,偶尔她会出现,给正在减肥的麦加塞几盒钙片或者VC片,说是补充营养和体力。
麦加总感觉有些不对劲,可是她却又说不出哪里不对劲。直到栗欢也苦口婆心地劝自己不要减肥,并捏着 自己的脸说“加菲猫多可爱”的时候,她终于明白了。
她记得从哪本书或者哪部电影上看过,当你爱上了一个人,你就会变得和他(她)很像,或者会去模仿他(她)所爱的那个人。
麦加现在所看到的栗欢,就像第二个段小瑞一样。麦加没有说话。她只是看着她,心里堵得难受,也许他们在谈恋爱了吧,可是没有人告诉她。
栗欢没有,段小瑞也没有。但其实自己本来也就是一个局外人。
麦加在这一刻有种想放弃减肥的冲动,她看着自己买回来的那一袋苹果和魔芋,这是她这几天的早餐午餐加晚餐,她有种想哭的冲动,可是她没有哭。
麦加一个人孤零零地跑在学校的跑道上,她抬起头就可以看见在不远处打篮球的谢东培,她没有停下来,因为没有人来制止她。
可是即使是这样,麦加也没有瘦下来。当她有一次奔跑在跑道上的时候,她想起了段小瑞,如果现在他跳出来告诉麦加停下来,她想自己一定会听他的话。但是他没有出现,所以,麦加找不到可以休息的理由。
时间已经从夏天奔腾到冬天,可怜的麦加真的是瘦了,她的体重慢慢地慢慢地随着温度计一点点一点点下降,在水银柱突破0℃的时候,麦加的体重终于跌破百了。
她很兴奋,想要找人分享,却不知道找谁好。此时已经快到圣诞节了,麦加看到谢东培和他的小女朋友戴着滑稽的圣诞帽依偎着走远了,她突然想到了段小瑞。
她需要找一个理由去找他,好吧,现在她睡觉还是磨牙,麦加还是缺钙,她要去找他看病去。
可是,麦加没有想到会是这样一个场景。
段小瑞真的和栗欢谈恋爱了,他们的手指紧扣着,像是粘了胶水一样粘得死死的。麦加有些冷,她去年冬天的大衣现在穿起来已经不合身了,宽宽的袖子冷风嗖嗖地往里钻。
“我们去吃火锅吧!”麦加提议。然后她跟在段小瑞和栗欢的后面,她的衣服是土黄色的,可是她现在看起来一点也不像加菲猫,因为她已经很瘦了。
【火锅店】huo guo dian
在火锅店里,他们点了鸳鸯火锅,虽然火锅店里是暖烘烘的,可是麦加还是感觉到有些悲凉。段小瑞给麦加央了很多菜。
“你多吃点吧,减肥看你减成什么样子了,为了那个谢东培你值得吗?”段小瑞絮絮叨叨地说着,麦加愣了一下,没有再说什么。
火锅的热气朦胧了麦加的双眼,有水滴滴在了碗里,麦加看着栗欢与段小瑞,长期的节食让她的胃不是很好,她甚至得了厌食症,吃不下东西,麦加为了不让他们担心起身往洗手间走去。
段小瑞似乎有什么话想说,可是他还是没有说。
在洗手间里,麦加吐出了刚吃下去的东西,然后她还是哭了出来,她看着镜子里瘦瘦的自己,忽然很想念胖乎乎的加菲猫。
麦加想,也许段小瑞已经忘记自己了吧!他已经不记得在两年前的时候,失恋的麦加在公园里哭得昏天暗地,他给自己买过一杯热可可和递过一包纸巾。
他也许忘记了。所以他不知道,麦加是从那个时候开始爱上他的。
其实,麦加的减肥无关谢东培。如果段小瑞还是两年前胖乎乎的段小瑞,麦加一定会鼓起勇气向他表白的,可是现在他已经瘦瘦的,麦加却怎么也抬不起头来。
其实,加菲猫喜欢的只是你而已。
2008年的冬天,麦加已经实现了生日愿望,可是她却未能如愿以偿。
冬天到来了,加菲猫已经瘦瘦的了,可是她还是没能拥有爱情。
麦加猜,段小瑞对自己多多少少还是有那么一点感情的,可是那又怎么样呢?他们中间还隔着一个栗欢。
当前我国社会经济进入了全面发展阶段,人民的生活质量得到了全面的改善和提高,各种休闲方式中尤其以沐浴(SPA)业发展最为迅速,集休闲、美容、健身、舒压、养生为一体的SPA正在全世界流行,全球SPA产业高达20~30的快速年发展率使人惊叹,将逐渐成为现代休闲行业的主导产业之一,是目前中国休闲行业中极具发展潜力的朝阳产业。传统的美容或化妆品类展览,已经无法满足SPA行业的发展和需要,市场急需一个专业的平台为行业服务。
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城市的星级宾馆/饭店、体育场馆、居民小区、学校、度假村、高级别墅、健身房、桑拿场所、游泳池、浴场、中小型浴室、高级会所等建设随着国内经济的发展也有着非常惊人的增长,大大增加了对于沐浴休闲的消费需求,带动了桑拿、泳池设施和沐浴休闲等产业的急速发展,和对相关技术的要求提高,消费者在娱乐休闲同时强身健体以及国民健康的观念逐步提高。
市场分析:
SPA——快速成长的新兴产业
根据国际SPA协会(InternationalSPAAssociation)的统计,最近几年,全球SPA产业呈现出惊人的快速成长,高达20~30的年发展率。在美国休闲旅游产业中,SPA已连续3年发展率最高,去年大约有1500万人次美国人进行过SPA;在欧洲,平均每年使用SPA的人次超过20__万。20__年Ispa国际SPA协会统计,全球SPA人口已达10倍台湾人口数,晋身美国第四大休闲产业。
近年来各种各样的SPA在亚洲各国大城市逐渐兴起,受到越来越多的白领和家庭旅游者的青睐。一些高档饭店也纷纷增加SPA设施,以满足高端客人的需求。新加坡水疗协会主席彼得日前在接受法新社记者采访时表示,SPA行业在新加坡、中国、马来西亚、印尼等亚洲国家正在蓬勃发展,在越南和柬埔寨等相对落后的国家也开始认识到发展SPA行业的好处。
20__年,SPA开始登陆我国上海。20__年,SPA在中国专业美容市场上一路攀升,掀起一股SPA消费热,并被一些媒体称之为“20__年中国美容第一消费”。在我国台湾,SPA结合健身运动,成长速度惊人。目前台湾的SPA产值超过50亿元,且每年以20的速度增长。光是台北市就有超过千家登记有案的SPA中心,这还不包括精油、薰香烛、沐浴盐……
另据台湾工研院研究调查显示,SPA将在20__年赚走全球2020亿美元。台湾将在20__年把SPA纳入重点发展产业。
毫无疑问,这是一个快速成长的新兴产业与市场。
中国市场需求旺盛
20__年的北京奥运会、20__年的上海世博会、20__年广州亚运会、杭州要积极打造世界休闲之都,这必将带动旅游行业及酒店宾馆和休闲场所的投资建设,这无疑给沐浴产业的发展带来了巨大的契机——具有多种消费功能的现代综合性沐浴场所正在成为商务洽谈、商务招待的极好场合之一。
在中国目前共有10000多个游泳场所、嬉水乐园;26000多家桑拿洗浴中心,大部分游泳场所、桑拿洗浴中心都需要改建、更新、增加新的设备设施。大都存在设备老化、功能单一的现象,无法满足大众的个性和多样化的消费需求,在设计上也存在较大的问题,没有考虑嬉水功能、水健身、水文化等,还有水质消毒、节水、安全的问题等,已经到了必须改建、更新、增加新的设备设施的高峰时期。因此,本次博览会的举办,必将为行业内企业提供一个展示企业品牌形象和促进产品销售的最佳平台。
国内同类展会分析
目前各类行业与市场越来越专业,沐浴从原来附属于美容、化妆品、装饰建材等行业中逐步分离出来作为单独的行业展会出现也是在06年才刚刚出现,属于新兴展种,具有挑战也具有发展前景,今明两年国内展览市场最主要的同类展会有北京举办的“20__年东亚(SPA)沐浴行业联合大会暨中国国际沐浴(SPA)设施用品及技术展览会”、深圳举办的“20__首届中国国际SPA装备暨高新技术展览会”、“20__广州沐浴文化嘉年华”、上海举办的“20__中国国际游泳池建造设计、泳池设备及技术展展览会暨桑拿设施、沐浴用品洽谈会”,从地域看基本集中在北京、上海、广州、深圳四个中国会展一线城市,其他二线城市尚未出现,时间上三、四月份比较多,与他们相比,杭州作为会展二线城市,中国著名的休闲旅游城市同样具有巨大的发展空间和市场需求空间,前景与挑战共存。
项目设置
基本情况
展会名称:20__浙江休闲沐浴(SPA)暨泳池技术、设备博览会
展会时间:20__年4月20-23日
展会地点:杭州和平国际会展中心
组织机构
主办单位:
浙江省旅游协会
浙江省建筑装饰行业协会
浙江省游泳协会
杭州沐浴行业协会
承办单位:
杭州佳德展览服务有限公司
支持单位
浙江省饭店业协会
浙江省美发美容协会
台湾SPA协会
上海市沐浴行业协会
杭州装饰装修商会
。。。。。。
展会规模
和平一楼,保底500个展位,10000平方米
展览内容
¨SPA会所、专业连锁机构:SPA美疗沙龙、温泉SPA度假、地产SPA会所、酒店SPA、SPA
规划设计公司与SPA顾问管理企业¨SPA工程设备:水池设计规划、水处理与过滤、水泵装置、水疗设备、水流按摩浴缸、水池清洗设备与材料、防滑设施、安全装置、蒸汽房、桑拿房
¨SPA仪器及配套设备:医疗整型器械及材料、皮肤检测分析仪器、美疗仪器、减肥器械、健身休闲设备、管理系统软件等
¨沐浴设备及用品:桑拿、理疗、SPA水疗、锁具、家具;SPA水疗用品、足疗用品、护理品、精油类产品、美容美发产品、素彩产品、日化用品、桑拿服、浴盐、浴桶、毛巾类产品、一次性用品、洗涤用品等
¨休闲卫浴产品:按摩浴缸、休闲淋浴房等休闲卫浴产品
¨泳池建造技术及设备:泳池技术、材料、供热供暖设备、节水、水体消毒、循环过滤、保养清洁系统;安保系统、泳池设施等配套设备;
¨配套设施及服务:设计机构、品牌店形象展示、连锁加盟、温泉、饭店、系统软件开发公司、工程公司、培训机构、服务机构、相关刊物、媒体等;
定位
展会定位:展示休闲沐浴文化、促进行业发展和技术交流。
展商定位:沐浴、泳池设备、产品生产厂商、技术单位、专业连锁机构、经销商、配套服务机构等。
观众定位:相关行业协会领导、大量的贸易商、经销商、商、家庭、会所、高档住宅别墅、休闲中心、康复中心、美容院、医院、疗养院、养老院、公用浴室、体育馆、娱乐场所、洗浴桑拿中心、星级酒店宾馆、健身减肥中心、美容美体(SPA)会馆、高温瑜伽会馆等专业采购商、水池泳池SPA会所设计师、建筑师和建筑顾问、大厦以及别墅的所有者、房地产公司等
展会目标:打造成为国内具有知名度、影响力的沐浴休闲类专业交流盛会。
展会主题:展示沐浴文化打造休闲生活
招展、招商工作
招展工作:
1、与各主承办单位、支持单位沟通确定职责,分工协作,就工作达成一致思想。
2、招展宣传资料的准备和设计:包括展会LOGO、招展邀请函、门票、杂志报纸宣传资料、参展合同等,要求资料新颖、印刷精美,既突出宣传本次展会的特点,又展示各项活动的优势。
3、根据展览内容对业务人员进行分工培训学习相关知识,通过各种渠道寻找收集客户资料,分类列出客户名单,进行访问。
4、洽谈专业媒体进行展会信息配合招展工作的进行。
5、收集客户反馈,进行重点客户的拜访及电话访问促成一批重点客户参展,带动中小客户参加。
6、组织客户见面会或新闻会在客源集中地进行展会宣传达到招展目的。
招展计划表(见附件一)
招展进程表(见附件二)
招商工作:
1、发动主办单位、协办单位、支持单位等合作单位组织邀请相关的专业观众、商贸客户到会。
2、通过专业杂志、网站、报纸进行展会宣传吸引专业人士参观。
3、与专业网站合作在网上进行专业观众预登记,提前寄发邀请函和参观券。
4、提供足够数量的请柬和参观券通过行业数据库邀请专业客户参加。
5、通过参展商对其专业观众和目标客户进行邀请。
6、设立专人通过电话、传真等邀请观众。
7、设立行业相关会议、研讨会和推广会吸引专业观众参加。
同期活动
20__休闲会所及环境设计论坛
概况:邀请国内外以及台湾的建筑设计和室内设计方面的专家现场通过对20__休闲会所、SPA会所等建筑环境及室内环境的设计方面相关问题以及目前最新的设计潮流和趋势进行探讨,现场还将邀请相关用户单位听众参加。
20__SPA西湖论剑高峰论坛
概况:邀请国内外SPA专家以及特色SPA企业共同举办SPA高峰论坛,共同探讨如何将SPA潮流与杭州打造休闲之都有效结合,创造具有西湖特色的SPA文化;邀请SPA行业专家、酒店业、房地产业、旅游业、美疗业人仕以及相关媒体总共参与,营造成行业沟通与交流的平台。
新产品、新技术专场推介会
概况:组织单位搭建SPA行业、泳池行业拥有先进技术和新品的企业进行自我推介的平台,组织相关用户单位和目标观众作为听众参加。
宣传推广:
1、利用主承办、支持单位的行业资源进行信息和宣传;
2、通过中国沐浴休闲网、中华沐浴网、中国水疗网、中国洗浴网、中华洗浴网、中国浴场网、中国沐浴桑拿网、中国洁具网、深圳桑拿网、中国扬州沐浴、中国浴房网、中国美容网、中华美容网、中华浴霸网、中国国际美容网、环球厨卫网、美容时尚频道、中国水暖卫浴网、中华卫浴商情网、中国洁具采购网、E商网、浙江酒店网等专业网站进行宣传推广;
3、通过《游泳池沐浴休闲》、《中国沐浴》、《居然之家》、《中国卫浴文化》、《旅游休闲》、《健康与美容》、《休闲》、《中国展会》杂志进行宣传;
4、整合电视台、电台、大众报纸进行全面的组织报道;
5、经过长期收集整理,拥有全国各地数万条行业专业买家资料,展会前夕,组织机构将通过邮寄、传真、邮件等形式向组织单位独有的庞大数据库内的厂商及观众发出邀请。