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关键词:急诊医学;留学生;临床实习;教学实践
随着我国医学教育体制的日益成熟和完善、我国和发展中国家的广泛合作,以及远低于发达国家的留学费用,参加我国医学教育的留学生人数呈逐年增长趋势,医学留学生教育也对提高医学院校国际交流水平、提升国际竞争力具有积极的推动作用。急诊医学作为一门涉及面广、内容繁杂、实践性强的学科[1],临床实践能力至关重要。临床实习是对理论课程的有力补充,也是培养学生临床思维和处理急危重症能力的重要环节。对于留学生而言,因为存在国籍、语言、宗教、文化等多方面的差异,使得留学生急诊医学临床实习面临更多困难,我院急诊医学教研室具有10余年留学生教学经验,结合多年留学生带教经验,对留学生急诊医学临床实习教学实践工作进行总结和进一步探讨。
一、优化教学资源,丰富教学内容
(一)加强教师队伍建设,实行带教老师资格准入制度
留学生临床实习教学对带教老师的英文水平有较高要求,由于急诊教学临床情景多样化、疾病谱复杂、突发状况多,熟练应用专业英语与留学生零障碍沟通并达到让学生充分理解,是急诊留学生临床带教中面临的最大难点和首要问题[2]。这就要求临床实习带教老师不仅能够熟练阅读及撰写英文文章,还应具备较强的英语口语能力,以保证与留学生的无障碍交流,确保留学生能够充分理解教学内容。1.加强教师培训。重视青年教师的专业及英语培训,建立起专业及语言过硬的教师队伍。医院及科室与国外相关学校及实验室建立长期合作交流关系,定期选派青年骨干出国学习,鼓励带教老师积极参与国际交流、出国进修以及国内相关留学生教学学习班,建立起长期稳定的教师梯队。形成“老带新”的教师培训模式,定期组织优秀教师分享教学经验,从带教模式、专业知识以及英语交流技能等多方面对新任教师进行培训,确保带教老师教学水平尽可能统一标准化。2.实施带教资格准入制度。首次承担留学生教学任务的教师必须提前备课后进行试讲,由教研室联合我校教学督导共同进行量化评估,涵盖专业知识讲授、语言表达、教学方法、课件设计等方面,考核合格者准予承担留学生教学资格。未合格者由教研室专家及教学督导提出问题所在及整改意见,以便进一步改进,下一学期经改进后再重新审核评估,直至评估合格方可具备留学生带教资格。3.提供教学培训机会,培养专业特长。临床实习带教老师多为年轻教师,教学经验虽然相对较少,但乐于尝试和接受新的教学方法,和留学生年龄差距小,容易调动实习课课堂气氛,因此加强对这些年轻教师的培训,鼓励教学相长,有助于显著提升实习课程质量。每学期固定为实习带教老师提供参加校级教学比赛的机会,鼓励参加教学技能培训及教学经验交流分享活动,将急诊教学临床实习常见内容,如心肺复苏、中毒等进行内容拆分,每部分由固定教师带教,要求带教老师熟悉并跟进相关技术、指南更新,充分查阅相关文献,及时补充并更新教学内容。
(二)规范留学生教材,丰富教学内容
目前留学生教学尚缺乏规范化的英文教材,很多教研室通过组织带教老师编写相关教材,但因参考资料以及教师水平的限制,这种教材缺乏统一性、规范性和灵活性,很难满足临床见习教学需求。我校急诊教研室为带教老师提供2—3种国外全英文教材,并与国内教材联合使用,便于带教老师迅速熟悉并掌握教学内容。与此同时,部分教学内容与国内、国际指南更新关系密切,如心肺复苏,基本间隔5年国际心肺复苏指南会进行更新,而中毒部分,国内中毒流行病学与国外有所不同,仍以农药中毒为主,因此针对心肺复苏部分及时补充最新原版英文指南,而对于中毒教学,则补充国内相关中毒如有机磷、百草枯等指南意见。进一步强化理论课教学内容,同时扩展、更新相关教学内容。
二、丰富教学模式,优化教学方法
开展临床实习课程除了帮助学生理解、巩固理论课知识,更重要的是培养学生的临床思维和综合能力。急诊医学作为一门涉及面广、内容繁杂、实践性强的临床学科,在有限的理论课教学时间内很难做到全面细化地逐一学习,临床实习则是进一步培养留学生职业道德,提升职业素养,培养临床思维和业务能力的重要阶段。留学生思维活跃,喜欢提问,传统的“填鸭式”显然不适合留学生实习课教学,因此教学方法和模式的选择对提升教学效果和质量尤为关键。本教研室经过长期留学生临床实习带教,形成多种教学方式综合应用的教学模式。
(一)以问题为导向的教学方法
以问题为导向(Problem-BasedLearning,PBL)的教学方法,自1969年在加拿大麦克马斯特医学院首先试行后,逐步成为国际上较为流行的教育模式,与传统教学模式不同,PBL教学坚持“以教师为引导,以学生为中心”的教学主线,根据学生的提问和教师的解答过程来激发学生的兴趣,将学习隐含于问题中,激发学生的自主学习、发现问题并解决问题的能力,已在教学中取得一定效果[3,4]。留学生思维活跃,乐于思考和提问,喜欢自己实践和探索,临床实习课程时间充裕,较理论课灵活性强,为教师引导下的学生主动讨论提供了可能。通过这种问题导向的讨论,可以有效提高留学生对急诊临床实习的兴趣和积极性,通过教师诱导的问题讨论,有效加深留学生对理论课内容的认识和理解,并通过主动查阅文献、解决问题的过程,进一步扩展理论课程内容,进而达到临床实习课与理论课互为补充、逐步深入并强化的作用。在急诊实习课教学实践中笔者观察到留学生普遍乐于接受这种教学方法,并能够积极参与讨论、总结相关知识点,在培养留学生的临床思维能力以及处理问题能力方面,具有积极作用。
(二)病例导入式教学方法
病例导入式教学(Case-BasedLearning,CBL)方法是以问题为基础,以病例为先导,根据教学大纲的要求将临床案例导入课堂,引导学生运用所学理论知识分析并解决实际问题的一种教学方法[5]。通过典型病例的讨论,将抽象理论具体化,使学生将理论和临床应用相结合,对疾病的诊治有充分的认识和理解。但实际工作中急诊病例具有突发性、偶然性和不确定性,急诊医学临床教学中缺乏可控的临床病例,也是急诊实习面临的突出问题之一,另外,留学生与患者沟通障碍也是留学生临床实习的重要障碍。因而在长期的教学工作中,注重总结典型病例显得尤为重要,如心肺脑复苏、中毒、热射病、创伤救治等疾病。总结并建立急诊医学典型病例库,在既定的教学时间内如果没有相应的临床病例,可导入病例库中的典型病例,结合PBL教学方法,使学生切身体会临床诊疗过程,提高学生对病史采集、查体、诊疗思路及解决临床实际问题的能力,培养临床思维、医德医风以及医患沟通能力。
(三)高仿真情景模拟教学
医学模拟教学是通过正常人模仿的“标准化病人”或通过计算机模拟技术提供模拟病人,从而模拟真实临床情景的一种教学方法。急救技能作为急诊医学的重要内容,最能体现急诊医学学科特色和水平,但在我国现阶段医疗环境下,对于需要紧急处理或抢救的急危重症患者,让没有临床经验的医学生,尤其是存在一定语言沟通障碍的留学生进行实际诊疗操作,是不现实也是不合乎医学伦理道德的。因此仿真模拟教学作为一种模拟临床情景、锻炼急救技能的重要教学手段已成为我院留学生急诊实习课程的重要组成部分。长期以来我校临床技能中心培养了一批专业的标准化病人(StandardPatient,SP),经过反复培训与磨合,能够在临床实习中模拟相关疾病就诊及诊疗过程,具有反复性和可控性等优势,有效弥补了实习课中临床病人不足的缺陷。此外,针对心肺复苏见习,采用我院临床技能中心引进的挪威诺度公司SimMan模拟人进行仿真模拟教学,真实再现临床各种救治场景如急诊抢救室、重症监护室等[6]。留学生可组成3—5人抢救团队,模拟练习心肺复苏、气管插管、电除颤等最为重要的急救技术,模拟人连接监护仪可显示生命体征变化情况,实现临床真实场景下的诊疗及抢救过程,弥补临床缺乏实践操作机会的不足,并锻炼学生的团队协作、沟通及临床决策能力。
三、加强教学质量控制及改进
(一)使用实时反馈设备保证教学效果
在心肺复苏实习课中,初始操作练习者常常按压深度、频率参差不齐,此外由于胸外按压非常耗费操作者体力,随着按压时间延长,按压深度和频率不达标是初学者培训中的常见问题。为保证留学生培训的效果和均一性,我们将心肺复苏实时反馈系统应用于急诊实习课堂,该系统可以实时显示操作者的按压频率、深度、回弹、中断计时等重要监测指标,便于留学生随时自我调整动作达标,教师实时量化监测和评估学生操作,及时做出纠正和指导,确保胸外按压标准深度和频率,有效提升心肺复苏的培训效果。这种反馈装置的使用,在2015年最新心肺复苏指南中也得到推荐,并已经开始应用于心肺复苏培训,证实有助于达到实时优化的心肺复苏效果。
(二)加强教学监督及效果评估
[关键词]医学影像技术;医学影像诊断;CT;CR
医学影像主要包含X线片、超声、核磁共振以及CT等多种医学技术,其相对于传统临床诊断具有操作简单、对患者造成伤害小等优势,由于现阶段影像学发展迅速,其使用原理和检查方案存在较为显著的差异,并且其诊断范围也各不相同,因此临床医学影像诊断对检查技术有较强的依赖性[1]。
一、资料与方法
1CT影像技术分析CT主要是采用X线对受检者人体某部位或组织进行逐层扫描,然后采用计算机对诊断信息进行重建,以此获取受检者横断解剖图。现阶段,CT技术在临床诊断中应用比较广泛,并且也存在显著的临床优势,诊断过程中所获取的横切面图像分辨率也比较高,扫描操作比较简单、速度较快。其缺点主要在于扫描范围、速度和质量三者之间具有一定的影响作用,起到制约效果,对此相关科研人员应对此进行一定的改进和完善。
2CR影像技术分析数字化X线摄影(CR)主要是在影像板(IP)接收X线模拟信息后,扫描仪器中的激光阅读仪再次扫描影像板(IP),并使用数据转换器转换为图像。此技术能够使受检者通过以此摄影获取更多层次的身体信息,其优点在于降低受检者接受X线的剂量,并且其曝光度、宽度以及密度动态等都比较大,所以此技术可以在摄影量不足的情况下显示更为清晰的图像,有效避免了因为参数选择不合适而出现重拍的可能性[2]。
3超声成像(USG)技术分析USG技术主要是采用超声波对受检者身体进行扫描,同时对其器官组织反射、投射信号等进行处理,从而形成人体器官图像。此技术在临床中的应用有点在于无创伤、无辐射并且价格相对也比较低。临床上较为常见的超声成像技术主要包括A型、B型、C型、D型和M型。
4磁共振成像(MRI)技术分析磁共振成像技术的工作原理主要是在外部磁场的影响下,然后利用其与受检者体内组织中与之相关性的原子核,例如13C和23Na等,从而形成磁共振现象,并经过处理后形成图像。在临床诊断过程中需要受检者处于静磁场中,同时还需要其保持静磁场Z方向和长轴方向平行,接着使用脉冲频磁场作用受检者患处,然后采用计算机对输出共振信号进行处理,经过处理后形成三维立体图像或二维断层图[3]。
5数字减影血管造影技术(DSA)分析数字减影血管造影技术即血管造影的影像通过数字化处理,把不需要的组织影像删除掉,只保留血管影像,这种技术叫做数字减影技术,其特点是图像清晰,分辨率高,对观察血管病变,血管狭窄的定位测量,诊断及介入治疗提供了真实的立体图像,为各种介入治疗提供了必备条件。
二、医学影响技术在临床诊断中的应用研究
1CT技术在临床诊断中的应用CT技术在临床诊断中应用非常广泛,其主要在腰间盘突出、寄生虫病、颅内肿瘤、听骨破坏、鼻窦及鼻咽早期肿瘤等头颈部病变和心血管系统疾病具有重要的临床价值。
2CR技术在临床诊断中的应用CR技术在临床诊断中因为会采用射线,因此会对人体造成一定程度的损伤,并且其在诊断软组织病变中也有一定的局限性,不过在骨骼疾病临床诊断中具有重要的作用。同时在对神经系统中脊椎病变以及存在颅骨病变的患者具有良好的诊断效果,其在腹部脏器和中枢神经系统临床诊断中效果不够理想[4]。
3超声成像技术在临床中的应用超声成像技术主要应用于良性和恶性肿瘤诊断过程中,并且其取得显著的临床效果,特别是对于存在浅表淋巴结诊断和乳腺恶性病变诊断中具有较高的诊断率。此技术还可对患者内腔进行检查,主要采用微型探头对患者消化道内存在的小肿瘤进行识别,同时对肿瘤侵犯范围和转移程度进行精准判断,在食道肿瘤诊断中应用更具重要性。
4磁共振成像(MRI)技术在临床诊断中的应用磁共振技术应用较为广泛,其对受检者各组织具有较强的分辨力,临床上通过其对各系统疾病进行诊断,主要应用于先天性残疾、肿瘤以及创伤等,并且在中枢系统、脊椎、膀胱以及子宫等部位临床诊断有显著的效果,因为此技术不需要对比剂即可对患者血管结构进行有效成像,所以所获取的信心更为可靠和有效。
5数字减影血管造影技术(DSA)在临床诊断中的应用DSA由于没有骨骼与软组织影的重叠,使血管及其病变显示更为清楚,用选择性或超选择性插管,可很好显示血管及小病变,可实现观察血流的动态图像,成为功能检查手段。DSA设备与技术已相当成熟,快速三维旋转实时成像,实时的减影功能,可动态地从不同方位对血管及其病变进行形态和血流动力学的观察。对介入技术,特别是血管内介入技术,DSA更是不可缺少的。
仅关注某一个检测项目,而忽略了疾病变化过程中所有检测项目的变化。目前的教学中均以检验项目的参考值、结果分析及临床意义为重点,但许多疾病的某一检测项目会有相同或相似的变化,而同一疾病的不同阶段某一检测项目也可能呈现不同的变化。所以,应加强检验项目与疾病关系的综合分析。比如肝功能检测一章,课本上往往对肝功能检测3大方面(蛋白质功能检测、胆红素代谢功能检测、血清酶类检测)进行重点讲解。在蛋白质功能检测一节,又分为白蛋白及总蛋白水平升高和降低以及球蛋白和总蛋白水平升高和降低等。那么,是否可以尝试一种新的方法,按照内科学中肝脏常见疾病依次讲解,如急性重症肝炎、慢性重症肝炎、肝硬化、肝癌等疾病过程中,应选择哪些监测指标;在肝性昏迷的患者中需要监测哪些指标。根据疾病的需要详细地进行讲解,使临床医学生更能明白针对这些患者应该开什么样的化验单,如何使用这些检测项排除某些疾病等,从而加强临床医学生疾病综合分析的能力。
2教学内容脱离临床
在临床医学生实验诊断学教学中应以“临床应用为导向,兼顾检验医学”。
2.1应向学生介绍实验方法学,了解每种检测方法的灵敏度和特异度,根据不同需要合理选择检测方法。比如梅毒的血清学检测,在临床应用中主要有3种方法:梅毒螺旋体特异性抗体检测、非特异性快速梅毒过筛实验、梅毒螺旋体明胶凝集试验。那么,哪种试验适合作为初筛,哪种试验适合作为确诊,哪种试验适合判断疗程等,应结合实际病例进行讲解。目前临床实验室已采用化学发光法进行梅毒特异性抗体检测,灵敏度和特异度均较以前的检测方法高,且方便快捷,可更好地服务临床,尤其是急诊患者,但临床医生对此还不太了解。另外,梗阻性黄疸时,理论上尿胆红素检测为强阳性,尿胆原检测为阴性。但因为尿胆原检测过程中,当尿胆红素水平较高时,会干扰尿胆原的检测,所以会导致梗阻性黄疸患者尿胆原假性轻度增高的现象。
关键词:兽医临床诊疗技术;教学;改革
中图分类号:G712 文献标识码:B 文章编号:1007-273X(2013)10-0092-01
《兽医临床诊疗技术》课程是畜牧兽医专业学生学习专业基础课向专业课过渡的桥梁,教会学生临床工作的方法和技术。随着畜牧业的发展和我国兽医诊疗行业的不断完善,养殖结构和养殖方法都有很大的改善和提高,兽医诊疗行业的准入机制变得异常严格,除了需要掌握一定的专业技能以外,还要获得国家承认的各种行业资格证书,如执业兽医师证书。所以,高职高专畜牧兽医专业学生仅仅掌握专业技能已经不能适应行业发展的需要,理论实践教学过程中必须要结合国家执业兽医师考试内容,有所侧重的去引导和强化这些知识的学习,只有这样才能提高应届毕业生考取执业兽医师的通过率。
执业兽医资格考试是行业准入考试,是评价申请执业兽医资格者是否具备从事兽医工作所必须的专业知识与技能的考试。实行执业兽医资格考试制度,是世界多数国家和地区通行做法。执业兽医资格考试科目分为基础科目,预防科目,临床科目和综合应用科目四个科目,每科目实行百分制,兽医临床诊疗分值在临床科目中占20%。因此,结合执业兽医师考试的课程改革显得尤为重要。就《兽医临床诊疗技术》课程为例,供大家参考。
1 要求专业课程教师取得国家执业兽医师资格
信阳农林学院积极鼓励专业课教师参加国家执业兽医师考试,费用由学校承担。兽医诊疗实验室共有专职教师6名,其中具有正高职称3人,副高职称1人,中级职称2人,3人已考取国家执业兽医师资格,根据国家政策,经考核也已颁发国家执业兽医师资格证书。通过参加国家执业兽医师考试,不仅提高了临床诊疗任课教师的理论水平,也让他们对执业兽医师考试有了更深刻的认识,便于引导和教授学生。
2 认真研读历年真题,融入临床理论实践教学过程
经过几年的实践,我们积累了大量的教学材料,特别是执业兽医师考试历年真题,经过归纳近3年临床科目中,消化系统临床检查累计分值达到28分,呼吸系统临床检查累计分值达到19分,泌尿生殖系统临床检查累计分值达到8分,其他系统检查占5分。所考内容基本上都是临床的基本检查方法,即所谓的“方法论”,检查程序部分涉及的很少,其中鉴别诊断内容逐年增多,诊断对象也由以前的大动物、家畜家禽,转为小动物、伴侣动物,影像诊断部分越来越受到重视。将这些详实的归纳材料在授课过程中加以运用,在课程考核过程中,也加入了执业兽医师真题内容,要求他们掌握。
3 结合执业兽医师考试,加强实践环节动手操作能力培养
【关键词】大学生异位妊娠;治疗
【中图分类号】R823【文献标识码】B【文章编号】1005-0515(2010)012-0112-02
所谓异位妊娠(ectopicpregnancy)指的是胚胎在子宫外组织着床发育的现象。这种现象又叫做“宫外孕”。用通俗的话说,就是受精卵并没有在子宫腔内的正常位置着床,而其他的地方着床。这种疾病常常是因为输卵管的管腔或者因为其周围的炎症引起的管腔内的不通畅,最终又阻碍了孕卵的正常运行,而使其停留在输卵管着床发育而造成的。这种疾病容易导致输卵管妊娠的破裂或者流产两种后果。作为异位妊娠,在发病前,主要表现为以下的症状:①有些病人会发生腹痛,②有些病人会有少量阴道出血,③有些会出现停经。由于这些症状与其他一般疾病的症状并没有明显的区别,因而常常被当作其他的疾病被误诊,或者有些病人并没有意识到这是一种疾病。但一旦这种疾病暴发,即妊娠破裂,则会出现急性的腹痛,阴道出血,甚至休克。异位妊娠破裂的治疗常常以手术为主。
1 资料与方法
1.1 临床资料。本组93例大学生异位妊娠破裂的病人年龄在17~26岁,平均年龄为23.6岁,腹部剧痛65例,一般疼痛18例,占100%;皮肤粘膜苍白75例,占90.36%;休克36例,占38.7%;有停经史55例,占59.14%,平均为46.3天;有阴道流血71例,占76.35%。
1.2 注意观察内容。
1.2.1 症状:有无性生活史;有无腹痛,腹痛的性质、度、时间;有无阴道流血,流血量、颜色、时间;有无伴随症状:如晕厥。
1.2.2 体征:皮肤粘膜颜色、温度;脉搏;血压等。
1.3 急救治疗方法。予吸氧,双管输液后收住院;对无休克患者直接收住院。
2 结果
2008年5月~2010年9月我院异位妊娠破裂住院总数为384例,其中大学生异位妊娠破裂人数为93例,占24.22%.93例住院后经手术治疗,成功率达100%,无一例并发症和死亡,均在7~11天痊愈出院。
93例大学生异位妊娠病例中,有55例出现停经现象,38例未出现停经或者停经不详。55例有停经症状的患者,根据他们阴道流血的症状以及加上HCG阳性和超声波检查发现有孕囊或者附件包块。38例没有明显停经现象的患者,通过检查发现他们均有以下之一或者多种情况发生:①阴道流血或者尿,②血HCG阳性,③通过超声波发现有附件包块或者孕囊。
3 讨论
3.1 大学生异位妊娠破裂特点。大学生由于身份不同,一旦怀孕且异位妊娠破裂,到医院就诊时往往有较多同学陪同,常不主动承忍有性生活史和停经史,有时对医生的初步诊断告知和进一步检查不配合,给诊断带来困难。所以医生告知时要注意避开陪人。
3.2 大学生异位妊娠的原因。造成异位妊娠的原因是多种多样的,作为大学生这一群体而言,主要是因为对于性知识缺乏、没有强烈的自我保护意识而滥用避孕药、不良的生活习惯等而造成的。
3.2.1 生殖道的感染可能会导致异位妊娠的发生。异位妊娠的发生很大程度上与生殖道的感染有关,诸如宫颈炎和阴道炎这样的妇科疾病很容易造成输卵管的感染,进而引起输卵管炎症。作为大学生,有些并没有足够的自我保护意识,多次的进行人流手术,这就破坏了人体的地域机制,最终导致身体的抵抗能力的下降,这种情况下,输卵管很容易受到感染,最终导致异位妊娠的发生。进行过多次人流的患者,发病几率会更高。
3.2.2 进行过外科手术的女性发生异位妊娠的可能性会更高。现代医学(西医)治疗很多疾病采用的方法都是通过手术,而作为腹部手术治疗也是常见的治疗方法。比如阑尾手术。据研究表明,进行过阑尾切除手术或者有过阑尾穿孔历的患者发生异位妊娠的时候,会增加其危险性。
3.2.3 避孕药的使用可能会导致异位妊娠的发生。避孕药的工作原理就是通过抑制排卵,并改变子宫粘液的方式使不容易穿透,让囊胚在体内没有存活的条件,或者是通过改变子宫或者输卵管的活动方式以达到阻碍受精卵的运送。由于避孕药的使用,会造成激素分泌,进而影响到输卵管的蠕动。这些都会很容易造成输卵管妊娠。作为大学生,她们中的很大一部分人,并没有强烈的自我保护意识,滥用避孕药物。这就为其发生异位妊娠增添了可能性。
3.2.4 不良的生活习惯会造成异位妊娠的发生。不良的生活习惯如抽烟、喝酒等都会导致异位妊娠的发生。因为尼古丁和酒精都会影响纤毛的运动。这都是诱发异位妊娠的潜在性危险因素。
3.3 大学生异位妊娠如何避免。现在社会的开放度明显的增高,但是这并不是说就可以不在乎自己身体。作为大学生,应该懂得自爱;其次积极主动的学习有关性和生理知识。保持高度的警惕,实现自我保护,不要经常的进行流产。一旦有性生活后出现停经或者阴道不规则出血现象的时候,一定要去检查治疗。
3.4 大学生异位妊娠的危险性。部分异位妊娠破裂由于典型症状并不明显,在发病前很难做出判断或觉察到。即使去医院诊断,也会因为症状的不明显性而导致误诊的发生,异位妊娠破裂如果不能及时的诊断并得到有效的治疗,会有可能因为大量出血而导致休克,甚至会有生命的危险。这一点是非常可怕的。这就在无形中增加了危险性。
参考文献
[1] 冯炜炜,曹斌融,李勤.近10年异位妊娠诊断及治疗的变化.中华妇产科杂志,2000,7:406~407
[2] 贺子秋,张慧娟,戴钟英,等.输卵管性传播疾病病原体感染与输卵管妊娠关系的研究.实用妇产科杂志,1999,15:254~255
[3] 逢健,王峰,臧红,等.子宫动脉注药和栓塞法治疗输卵管妊娠10例分析.实用妇产科杂志,2001,4:225~226
[4] Pisarska MD,Carson SA.Clin Obstet Gynecol,1999,42(1):2~8
[5] Caserta D,Agneni M,Marci R,et al.Minerva Ginecol,2001,53(3):199~202
诊断的方法虽然很多,但最基本的仍然是病史采集和体格检查。
设计准备包括:①广泛查阅,收集资料。广泛查阅各类课本、期刊和网上资料,收集新资料,这在备课中需准备较长时间,也是教师提高教学质量所必不可少的,但课堂教学中能使同学明显提高学习兴趣。②充分利用多媒体技术设计课堂内容。以powerpoint软件为主体设计,充分利用其系统功能,在背景、颜色、文字等方面精心处理,可插入动画、录像、图片等,增强课堂的趣味性,提高学生的学习兴趣,有利于加强学生的理解和记忆。③紧密结合临床医学专业。强调病史采集和体格检查的重要性。强调采集病史和体格检查是最基本的诊断方法。正确诊断的前提是准确地详细地掌握病情,包括详细地采集病史、系统全面地体格检查和必要的辅助检查。
设计内容:该课程在医专临床专业第三学期开设,学生已有一定的医学基础知识,笔者就询问同学看病时,医生是怎样询问的,问了什么内容,用手触诊检查了没有,使用听诊器听诊了没有?由此提出诊断的目的及概念:诊断是通过疾病的表现来认识疾病的内在属性的一段程序,其目的是为了防治疾病。诊断疾病是临床医学的最基本的任务,是预防和治疗疾病的前提。
问诊是医生通过对病人或知情人进行全面系统询问而获得临床资料的一种诊断方法。通过问诊可详细了解疾病的发生、发展、病因、诊疗经过及既往健康状况等全过程,从中获得诊断依据。体格检查则是医生运用自己的感官或借助传统的工具(如听诊器、叩诊锤等)来检查病人身体状况的一组最基本的方法。包括视诊、触诊、叩诊、听诊和嗅诊。
临床诊断一般从先问诊,然后进行详细地体格检查。多数疾病的发生都有其相关的病因,继之出现相应的病理改变和临床表现。根据多年的临床经验,有时仅根据可靠、准确的病史即可作出初步诊断。即使有些的症状可能很轻微,通过仔细的询问和详细的体格检查,也可为诊断提供的依据。
对不典型症状和体征者才需要借助有关地辅助检查,如实验室检查、B超、心电图、X线等。这些检查在诊断疾病中起了重要的作用。近年来,随着生物学、物理学、化学、数学及基础医学的理论和技术的飞速发展,诊断学正向非侵入性、微量化、自动化和快速化的方向发展,新的诊断方法和技术不断涌现,如动态心电图,亦称Holter系统,使用随身携带器连续记录24小时、48小时或更长时间的心电变化,可不受病人活动的影响,记录病人在不同状况下的心电图,是重要的心电监测技术,为心血管疾病的诊断提供了重要价值;而彩超可形象地显示心血管内血流方向、速度和状态,对诊断先天性心脏病、心瓣膜病、血管有否狭窄或闭塞有重要价值;CT原理是利用X线束对人体选定层面进行扫描,取得信息,经计算机处理获得重建图象,其密度分辨率明显优于X线图象,扩大了检查范围,提高了病变的检出率和诊断的准确率。
讨 论
诊断技术的发展,明显提高了病变检出率和诊断的准确率,为医学诊断的发展提供了广阔的前景。但由于设备昂贵,费用高,不宜作为常规检查,更不能在诊断疾病时单纯依靠仪器检查来获得诊断结果。每位临床医生对先进的检查技术不可盲目依赖,详细的病史采集、规范的体格检查、科学的思维方法,才是临床医生最基本的、必须切实掌握的方法。
参考文献
关键词:基层医院;肺结核并咯血;病例分析
肺结核病主要缘于结核杆菌入侵人体肺脏器官而出现的结核病变,该病传染性强,并发症多, 咯血是为常见的并发症状。相关资料显示[1],有大约30%的肺结核患者有不同程度咯血现象的发生,且病情严重,尤其是大咯血,在短时间内能够使患者因血液大量流失而出现休克或因血块阻塞而出现窒息现象,甚至死亡,故积极预防肺结核并发咯血,发病后采取及时有效的治疗措施,是减少患者发生生命危险的关键。现选择我院近3年来确诊治疗的59例肺结核并咯血的病例,分析如下。
1资料与方法
1.1一般资料 59例肺结核咯血患者,男35例,女24例;汉族21例,维吾尔族38例;年龄17~74岁,其中 20岁以下6例(10.1%),21~45岁26例(44%),46~60岁14例(23.7%),60岁以上13例(22.2%);结核病史1~25年。咯血痰5例(8.5%),24h内咯血量300ml者8例(13.6%)。
59例均以咯血为首症,多表现为咳嗽、胸痛、发热、乏力、盗汗、食欲差、消瘦等症状,其中咳嗽48例,占81.4%,胸痛20例,占33.9%,发热盗汗11例,占18.6%,食欲差、消瘦8例,占13.6%,症状不明显者10例,占16.9%,12例咯血前感胸部不适、咽部发痒症状,占20.3%。肺部感染38例,占64.4%,慢性支气管炎21例,占35.6%,呼吸衰竭4例,占6.8%。伴其他疾病患者21例,6例为心脏病,5例伴有糖尿病,3例存在冠心病, 3例患者为肝硬化,2例存在支气管扩张,2例肺癌。
1.2方法 根据咯血量对症施治,小量咯血患者无需特殊治疗,减少活动量,多休息;中量咯血患者强调侧卧位卧床休息、镇静、将存留在气管内的积血咯出,适当给予维生素K1、酚磺乙胺、氨甲苯酸血凝酶、6-氨基己酸等一般止血药物,必要时也可给予垂体后叶素治疗;大咯血患者均应用垂体后叶素治疗,一般以10~20U加入葡萄糖液250~500mL中静脉滴注,也可首次以5~10U垂体后叶素加入25%葡萄糖液20~40mL,缓慢静脉注射,可重复用药。同时积极治疗肺结核和并存病,对肺部感染较轻者,选用广谱抗生素,对有呼吸衰竭者肺部感染老年咯血患者,可联用多种抗菌素,并保持呼吸道通畅。对糖尿病患者要控制血糖,对病情严重者要加强支持疗法或转院。
2结果
本组59例患者经过规范化肺结核治疗及咯血的对症处理,52例患者咯血量逐渐减少至停止,4例患者给予介入止血治疗,治愈出院,3例大咯血并严重并发症患者抢救性治疗后及时转院。
3讨论
咯血是肺结核病的常见并发症,发生率超过50%[2],诱发原因多为渗出和空洞病变存在或支气管结核及局部结核病变引起肺毁损、支气管变形、扭曲和扩张所产生的高压力导致支气管动脉破裂,咯血量的大小与受损血管部位和血管损伤程度密切相关,也与肺部原发病变程度大小成比例。由于卫生状况和防病意识相对薄弱,农村肺结核发病率明显高于城镇,达5.7%[3],故农牧区肺结核咯血患者数量更大,基层医院应更加重视肺结核咯血的预防和诊治。
肺结核咯血一般多见于青壮年,本组病例中45岁以下患者占54.1%,显然比例较低,中、大量咯血患者合计比例为62.7%,究其原因,是因为农村居民收入低,对肺结核及咯血的知识了解少,出现肺结核咯血痰和小量的咯血在治疗上并不积极,往往在中老年后因为肺结核继发毁损肺及/或支气管扩张、空洞性肺结核产生中、大量咯血后才会寻求治疗,使患者因血块阻塞而出现窒息现象或因血液大量流失而出现休克症状,甚至导致死亡[4,5]。所以基层医院应该针对农村做好肺结核病理知识及预防宣传,提高肺结核咯血的早期治疗率。
肺结核咯血患者主要症状是咳嗽、胸痛、发热盗汗,本组病例临床表现分别达81.4%、33.9%、18.6%,有20.3%病例咯血前出现感胸部不适、咽部发痒症状,这有利于该病的诊断和确诊。治疗咯血可根据咯血量和并发症轻重行止血、防气道阻塞、维持患者的生命功能的治疗。本组中22例痰中带血或少量咯血者,在治疗肺结核及并发症的同时,要求患者减少活动量,以镇静、休息为主,未做止血特殊处理治疗,咯血自行停止。中、大量咯血均要求卧床休息,行患侧卧位以避免血液溢入健侧肺,其中5例出血部位不能明确者暂取平卧位,止血用药多用垂体后叶素,但用该药时候一定要注意对孕妇、冠心病、心力衰竭、高血压、肺心病患者的禁忌,考虑选用其他止血药[6]。对7例精神紧张、恐惧的患者可口服安定、鲁米那、奋乃静等镇静药,但量宜少,9例大咯血患者咳嗽剧烈,适当给予奥勃舒、复方甘草片等镇咳药,对于吗啡等强镇咳药则禁用,以免过度抑制咳嗽反射及呼吸中枢,使血液及分泌物淤积气道,不能排出,引起窒息。治疗中要保持呼吸道通畅,让患者采取头低足高俯卧位,轻拍背部,排出积血,同时尽快挖出或吸出口、咽、喉、鼻部凝结的血块,必要的时候也可以采用硬质气管镜吸引、气管插管或气管切开以解除呼吸道阻塞[7]。治疗过程中积极做好肺结核原发病的治疗,因为咯血量的多少与肺部原发病变程度存在比例关系,从病理基础分析有20~90%的咯血是因为患者肺血管受到结核病病变累而产生的(例如肺毛细血管渗透性增高,血管破裂及钙石刺破血管等)[8],本组病例肺部感染占64.4%,针对肺部感染的轻重,选用适当的抗生素给予控制以维持生命功能。基层医院由于技术力量有限,对并发症危重的咯血患者,宜及时转院治疗,降低死亡发生。
总之,咯血是肺结核患者最为严重的并发症,基层医院应做好肺结核预防宣传工作,患者可根据咯血情况给予对症药物治疗,降低肺结核咯血量,减少患者发生生命危险的几率。
参考文献:
[1]柴松蓬,杨顺.45例肺结核咯血临床分析[J].中国卫生产业,2012,10:156-158.
[2]李永琦,顾植i.肺结核咯血90例临床分析[J].中国医药导报,2010,5:161-162.
[3]苑方方.肺结核咯血患者80例临床治疗体会[J].临床合理用药杂志,2013,6(20):127.
[4]Wang F,Shen H,Guan M,et al.High-resolution melting facilitates mutation screening of rpsL gene associated with streptomycin resistance in Mycobacterium tuberculosis.[J].Microbiological Research,2011,166(2):121-128.
[5]Ren, J.,Ma, L.,Li, Z,et al.Simultaneous and early detection of Mycobacterium tuberculosis resistance to antituberculosis drugs using an indirect series piezoelectric system[J].Biosensors &; Bioelectronics,2013,43:115-119.
[6]Ozcaglar, C.,Shabbeer, A.,Vandenberg, S.L. et al.Epidemiological models of Mycobacterium tuberculosis complex infections[J].Mathematical Biosciences,2012,236(2):77-96.
【摘要】 目的观察针刺干预心血管疾病伴发抑郁的临床疗效。方法将98例心血管疾病伴发抑郁患者随机分为2组。治疗组55例采用针刺加支持性心理治疗和一般药物治疗;对照组43例采用支持性心理治疗加一般药物治疗。2组均28日为1个疗程,1个疗程后统计疗效。结果2组治疗后自评抑郁量表分值(SDS)、自评焦虑量表分值(SAS)比较差异有统计学意义(P<0.01);甘油三酯(TG )比较差异有统计学意义(P<0.05);三碘甲状腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过针刺干预心血管疾病伴发抑郁,可以改善负性情绪,降低血脂水平及T3升高。
【关键词】 抑郁;心血管疾病;针刺疗法
Study of cardiovascular disease with depression interfered by acupuncture
【Abstract】ObjectiveTo research the effect of cardiovascular disease with depression interfered by acupuncture. Methods98 cases with cardiovascular disease with depression were randomly pided into two groups. Fifty five cases (treatment group) were treated with acupuncture plus sustain psychotherapy and general medicine. Other forty three patients (control group) underwent sustain psychotherapy and general medicine. Before and after giving treatment, the changes of blood lipid, T3, T4, SDS and SAS were measured.ResultsAfter treatment symptoms of depression and anxiety disorder were improved in both groups. TG decreased and T3 and T4 increased in both groups. Decrease of CHD, LDL-C and TG in treatment group were obvious. ConclusionTherapy of combination of acupuncture plus sustain psychotherapy and general medicine can improve negativity emotion, decrease blood lipid and T3, abate severity of cardiovascular disease.
【Key words】Cardiovascular disease; Depression; Acupuncture
心身疾病是心理—社会因素在发病、发展过程中起重要作用的躯体器质性疾病。在许多心血管疾病中,如冠状动脉粥样硬化性心脏病(以下简称冠心病)、高血压病均属心身疾病范畴。此类疾病除与遗传因素、肥胖、营养因素及生活习惯等因素有关外,患者的人格、情绪及心理应激与疾病的发生发展也密切相关。目前,人们越来越重视心血管疾病伴发抑郁、焦虑的问题。用针刺干预抑郁障碍,可以改善临床症状,同时血脂及甲状腺功能等也有相应的变化。
1资料与方法
1.1诊断标准[1]高血压病根据世界卫生组织(WHO)诊断及分期标准明确诊断;冠心病根据临床症状、心电图、超声心动图明确诊断。抑郁障碍根据临床症状、自评抑郁量表分值(SDS)≥40分及自评焦虑量表分值(SAS)≥40分明确诊断。
1.2一般资料98例均为2002-2005年天津市南开医院心内科住院或门诊患者,随机分为2组。治疗组55例,男30例,女25例;年龄36~45岁3例,45~55岁25例,55~65岁17例,65~78岁10例;病程<2年10例,2~5年29例,5~10年9例,>10年7例;中医分型[2]:肝阳上亢型20例,痰湿壅热型35例。对照组43例,男25例,女18例;年龄36~45岁2例,45~55岁19例,55~65岁13例,65~75岁9例;病程<2年8例,2~5年25例,5~10年7例,>10年3例;中医分型:肝阳上亢型15例,痰湿壅热型28例。2组病例一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.3治疗方法
1.3.1对照组采用支持性心理治疗加一般药物治疗。一般药物治疗:硝苯地平控释片,30 mg/日,或再加上洛汀新10 mg/日。心理治疗:心理医生治疗,1次/周,20 min/次。具体做法:①接受原则,建立良好的医患关系。②理解原则,倾听、关心患者。③鼓励原则,反复鼓励、增强信心。④保证原则,在以上基础上,进一步分析患者致病的外因与内因,对疾病的心身相关性给予通俗、科学的说明、解释,增强其保护意识,促使疾病早日康复。
1.3.2治疗组在对照组治疗基础上加用针刺治疗。肝阳上亢型,取穴:印堂、百会、上星、太冲、阳陵泉。针法:印堂穴平刺0.3~0.5寸;百会穴平刺0.5~0.8寸;上星穴平刺0.5~0.8寸;太冲穴直刺0.5~1寸;阳陵泉穴直刺1~1.5寸。痰湿壅盛型,取穴:印堂、百会、上星、足三里、丰隆。针法:印堂穴平刺0.3~0.5寸;百会穴平刺0.5~0.8寸;上星穴平刺0.5~0.8寸;足三里穴直刺1~2寸;丰隆穴直刺1~1.5寸。针刺得气、无不适后,留针30 min。隔日1次。
1.3.3疗程2组均28日为1个疗程,1个疗程后统计疗效。
1.4统计学方法采用SPSS11统计软件,计量资料用均数±标准差(±s)表示,进行t检验,计数资料进行χ2检验。
2结果
2.12组治疗前后SAS、SDS分值变化比较见表1。
表12组治疗前后SAS、SDS分值变化比较(略)
与本组治疗前比较,*P<0.01;与对照组治疗后比较,#P<0.01
由表1可见,2组治疗后抑郁、焦虑皆出现了好转,分值明显下降,2组比较治疗组SDS、SAS下降更明显,说明针刺和支持性心理治疗均可改善患者的情绪,两者配合治疗会取得更好的疗效。抑郁状态可以明显改善。
2.22组治疗前后血脂变化比较见表2。
表22组治疗前后血脂变化比较(略)
与本组治疗前比较,*P<0.05,**P<0.01;与对照组治疗后比较,#P<0.05
由表2可见,治疗组中TC、TG减低,LDL-C升高,对照组中只有TG、HDL-C有所减低,2组治疗后TG比较差异有统计学意义(P<0.05)。
2.32组治疗前后甲状腺功能变化比较见表3。
表32组治疗前后甲状腺功能变化比较(略)
与本组治疗前比较,*P<0.05,**P<0.01;与对照组治疗后比较,#P<0.05
由表3可见,治疗组中治疗后T3、T4数值升高(P<0.05,P<0.01),而对照组T3升高(P<0.05)。2组治疗后T3、T4比较差异有统计学意义(P<0.05)。
3讨论
西医多认为,心理因素是导致高血压病的一个重要因素。焦虑、抑郁性情绪反应和心理压力是高血压病发病的重要心理因素,经常性的情绪紧张会使大脑皮层及血管运动中枢兴奋性增高,儿茶酚胺释放过多,导致血压升高[3]。血压长期升高造成细小动脉的痉挛、内膜纤维组织及弹力纤维增生,管腔变窄,导致高血压病。同时冠状动脉的变窄加上脂质的沉着,增加了冠心病的发生[3]。中医学认为,此类疾病主要与情志、饮食或体虚年老有关。病情有虚实两端,虚者多为肝风内动,实者多为痰湿壅阻。综上所述,中西医均认为高血压病发病均与心理因素有关。百会穴为手足三阳经督脉之会,可宁心安神;印堂为经外奇穴,具有调神醒脑之功[4];上星穴具有主治眩晕头痛等功能,常用于神经衰弱等疾病的治疗。上穴被临床广泛应用于治疗抑郁症,主要用于情绪中的抑郁状态、焦虑障碍的改善,这些穴位临床早已证明对焦虑及反应性抑郁障碍,尤其对早老年、老年期抑郁状态中抑郁情绪、焦虑状态、焦虑躯体化状态有显著疗效[5,6]。上星、太冲、阳陵泉、足三里、丰隆对单纯的抑郁症有明显的疗效[7]。同时对心身疾病的抑郁障碍同样有效。
我们发现存在抑郁状态的患者几乎95%以上合并焦虑障碍,与文献相符[8] 。2种治疗方法均可改善情绪障碍。随着情绪的改善,加上冠心病、高血压病的系统治疗,2组血脂均可显改善。针灸治疗后更能长久改善患者的抑郁、焦虑障碍,更好地控制甘油三酯。其原因有待于进一步研究。
在冠心病合并高血压病的患者中,临床有许多低T 3 、T 4 的患者,而RT 3 、FT 4 、FT 3 皆无变化[9],我们称为低T 3 综合征。病情越严重,下降越明显。T 3 、T 4 的减低预示着疾病的严重程度,说明T 3 、T 4 的变化是冠心病时继发或伴发改变,是保护性的反应[10]。随着疾病的好转,T 3 、T 4 可恢复正常。在抑郁障碍的患者中,同样存在T 3 、T 4 的减低。冠心病或冠心病合并高血压病患者伴抑郁障碍时,病程进展较快,死亡率增加[11] 。我们观察的患者中,均存在低T 3 、T 4 ,与文献报道相同[12]。经针灸治疗后,随着抑郁状态的改善,2组T 3 、T 4 均有所增加,治疗组T 3 、T 4 升高明显,说明针灸干预抑郁障碍的作用更明显,降低疾病的严重程度。
参考文献
[1] 姜乾金.医学心理学[M].北京:人民卫生出版社,1991:109
[2] 周仲瑛.中医内科学[M].北京:中国中医药出版社,2003:312-320
[3] 李广平.实用临床心脏病诊断治疗学[M].北京:中国医药科技出版社,2002:491-523
[4] 杨卓欣,虢周科.针灸治疗抑郁症的临床疗效观察[J].针灸临床杂志2003,19(8):28-29
[5] 吕梅,王玲玲.针刺治疗抑郁症选穴频次的分析[J].针灸临床杂志,2003,19(8):15-16
[6] 沙岩.抑郁障碍的针灸治疗概况,针灸临床杂志,2003,19(6)55-56
[7] 李丽萍,华金双,孙忠人.近10年针灸治疗抑郁症的研究进展[J].中医药信息2003,20(4):30-31
[8] 袁勇贵,张心保,吴爱勤,等.焦虑和抑郁障碍共病的血脂水平研究[J].中国精神神经疾病杂志,2002,28(1):33-35
[9] 刘国庆,许莹,姜秋菊,等.高血压病患者血清甲状腺素水平变化的临床意义[J].中华心血管杂志1992,20(4):206
[10] 苏颖,宋广荣.冠心病甲状腺功能的改变及意义[J].上海中医药杂志,2003,37(1):26-27
[关键词] 血清miR-1;急性心肌梗死;临床意义
[中图分类号] R542.22 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2016)05(c)-0124-03
Clinical meaning of serum miR-1 in the early diagnosis of acute myocardium infarction
ZHOU Zi-jian CUI Xiu-ping FENG Ke-qing MA Kun
Department of Cardiology,Meihekou Central Hospital in Jilin Province,Meihekou 135000,China
[Abstract] Objective To study the early expression level of miR-1 in AMI patients and to explore the possibility and clinical meaning of it for the early diagnosis standard for AMI. Methods 40 AMI patients,40 anginal patients and 40 health people from July 2013 to July 2014 of cardiology department in our hospital were selected.The serum samples were collected at 1,2,6,12 and 24 hours after acute chest pain.The expression of serum miR-1,CK-MB and cTnI were tested by using RT-PCR.The relationship between serum miR-1,CK-MB and cTnI was analyzed.The clinical value of serum miR-1 expression level in early diagnosis AMI was explored. Results The relative expression level of serum miR-1 in AMI patients was 1.77±0.52,obvious higher than that were respectively 0.19 ±0.04 and 0.57±0.09 in health people and anginal patients (P
[Key words] Serum miR-1;Acute myocardium infarction;Clinical significance
近年来随着心血管疾病发病率的逐渐升高,急性心肌梗死(AMI)由于其在心血管疾病中很高的发病率及死亡率而严重影响人们的身体健康和生活质量[1-2]。早期和确切的诊断急性心肌梗死,对于积极采取有效的治疗措施,减少患者死亡率以及良好的预后起着决定性作用。微小RNA(miRNA)是近年来发现的一类长度为20~25 nt的非编码调控单链小分子RNA。研究显示,其具有降解靶标基因mRNA或抑制其翻译的特性,因而在调控细胞发育、增殖、分化、凋亡等一系列重要生理病理过程中起着非常重要的调控作用[3-4]。最新的研究证实,miRNAs能在血液中稳定存在,且其表达谱和表达水平改变情况也与相应的疾病有关。因此,科学家们推测miRNA可能是一个理想的生物检测标志物[5-6]。miR-1是目前已知的主要表达于骨骼肌和心肌组织中的miRNA[7]。本次研究笔者通过检测AMI患者血清miR-1的表达水平,并与心绞痛患者和正常人血清中miR-1表达情况进行对比,探讨miR-1在AMI早期诊断中的应用价值。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2013年7月~2014年7月在我院心内科接受治疗的40例AMI患者作为研究对象。所有AMI患者均符合心肌梗死的诊断标准。其中男性31例,女性9例,年龄44~72岁,平均年龄(58.5±7.6)岁;均为自述胸痛发作后1 h内入院。另选择40例心绞痛患者和40例正常人作为对照。所有患者研究前均被告知签署知情同意书。
1.2 主要设备及试剂
RNAisoTMPlus和RT-PCR试剂盒(Takara公司);mirVanaTMmiRNA Isolation Kit和miScript Reverse Transcription Kit(Ambion公司);miR-1及U6引物序列购于上海吉凯基因化学技术有限公司;微量高速离心机(Eppendorf公司);ABI PRISM 7900 实时荧光定量PCR仪(ABI公司)。
1.3血清样本采集
所有研究对象均在胸痛发作后1、2、6、12、24 h采集静脉血5 ml,室温下自然凝固20 min,然后2000 r/min条件下离心15 min,吸出上层血清,放入-80℃冰箱待实验。
1.4 miR-1的检测
1.4.1 血清总RNA提取 采用RNAisoTMPlus并按照操作说明提取血清中的总RNA,异丙醇沉淀法浓缩RNA,NanoDropR ND-1000检测RNA浓度并评估纯度,1.5%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳检测RNA质量。
1.4.2 反转录(RT)反应 采用miScript Reverse Transcription Kit并按照实验步骤说明进行操作。建立20 μl RT混合反应体系:dNTP(2.5 mmol/L) 2 μl;Total RNA 0.3 μg;RT特异引物(1 μmol/L):0.5 μl;MMLV反转录酶(10 U/μl):2μl;RNA酶抑制剂(40 U/μl):0.3 μl;10×RT Buffer 2 μl;加入无RNA酶水至总体积20 μl。反应条件:16℃,30 min;40℃,40 min;85℃,5 min。
1.4.3 PCR 构建20 μl反应体系:通用引物1 μl,目的引物1 μl,QuantiTect SYBR Green PCR Master Mix 10 μl,模板CDNA 1 μl,无RNA酶水7 μl。按以下程序进行扩增:95℃,3 min;40个PCR循环(95℃,15 s;60℃,20 s;72℃,20 s;77℃,20 s),收集荧光。实验重复3次。数据采用2-ΔΔCT法对 miR-1表达进行分析。
1.5 统计学处理
采用统计软件SPSS 13.0对实验数据进行分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,采用t检验。相关性采用Pearson相关分析,以P
2 结果
2.1 RNA质量检测结果的统计
提取血清RNA经检测吸光度(A)值A260/A280在1.6~1.8,表明RNA浓度和纯度较高,无DNA及蛋白质污染。变性凝胶电泳结果显示为3个清晰条带,18 S和28 S条带清晰无明显拖尾,证实RNA提取成功,无RNA降解发生(图1)。
血清总RNA
图1 变性凝胶电泳结果
2.2 AMI患者、心绞痛患者和正常人血清miR-1表达情况的比较
正常人血清中miR-1表达相对水平很低,仅为0.19±0.04;心绞痛患者血清miR-1表达水平较正常人有比较明显的升高,为0.57±0.09;而AMI患者血清miR-1表达水平则最高,为1.77±0.52,显著高于正常人和心绞痛患者(P
与正常人比较,*P
图2 各组血清miR-1表达情况的比较
2.3不同时间点AMI血清miR-1的表达情况
AMI患者胸痛发作后血清miR-1迅速升高,在胸痛发作后1 h血清miR-1表达即可出现明显升高,12 h左右达到高峰(图3)。
图3 不同时间点AMI血清miR-1的表达情况
2.4 血清miR-1的表达与肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)的相关性分析
Pearson相关分析结果显示,AMI血清中miR-1的表达与CK-MB、cTnI呈正相关(r=0.71,r=0.74,P
3 讨论
目前临床上最常用的诊断AMI的生物标志物主要有cTn、CK-MB等。CK-MB主要存在于心肌组织中,AMI患者胸痛发作后4~6 h,患者血清中CK-MB浓度水平即开始升高,曾被认为是诊断AMI的金标准[8]。cTn为心肌肌肉收缩的调节蛋白,正常人血液中cTn含极微量,当心肌受损时,cTn会大量释放到血液中导致血液循环中cTn浓度水平升高。研究显示,心肌受损后3~5 h,患者血液中可以检测到cTnI呈阳性,因而是目前心肌损伤最具特异度的标志物[9]。但上述生物标志物在诊断AMI中并非尽善尽美,其在AMI发生的2~4 h内灵敏度较低。AMI患者往往为等待血清相关生化标志物的检查结果而延误疾病的治疗。因此,寻找能早期诊断AMI,且特异度、灵敏度更高的标志物是非常有必要的。
大量的研究证实,miRNA与各种疾病的发生及发展密切相关,且在患者病变组织、血液中均可以发现异常表达的、与疾病发展密切关联的miRNAs[10],如恶性肿瘤患者(多发性骨髓瘤、肺癌、肝癌、乳腺癌等)血液中均被证实有异常表达的、与肿瘤相关的miRNA的存在[11-12]。近年来随着心血管相关miRNA研究取得的重大进展,越来越多在心肌细胞异度表达的miRNAs(如miR-1、miR-208、miR-21等)被发现。这些miRNAs不仅对心脏的发育有着精细调控,还在心血管系统的病理生理过程中起重要作用[13]。miR-1是心肌组织中富含的一种miRNA。研究显示,miR-1参与调控心脏发育、心肌肥厚、心律失常和心肌缺血等多种病理过程[14]。Cheng等[15]在构建大鼠心肌梗死模型的研究中发现,大鼠血清miR-1在发生心肌梗死后迅速表达,并在梗死后6 h达高峰。由于蛋白类标志物必须由mRNA翻译过来才能具备生物学效应。因此,miRNA的特性使得miRNA标志物能更早、更直接地反映机体生理和病理状况。因此,以上研究提示miR-1可能成为诊断心肌梗死新的标志物。
本次研究笔者采用RT-PCR检测AMI患者血清miR-1的表达水平改变情况,结果发现AMI患者血清miR-1表达水平要明显高于心绞痛患者和正常人,且心绞痛患者血清miR-1的表达水平也要高于正常人,提示血清miR-1在鉴别AMI上具有较高的准确性。通过进一步对AMI发病后不同时间点患者血清miR-1的表达水平进行研究,发现在胸痛发作后1 h血清miR-1表达即可出现明显升高,12 h左右达到高峰;Pearson相关分析结果显示AMI患者血清中miR-1的表达与CK-MB和cTnI呈明显正相关。可见,血清miR-1可能成为早期诊断和正确评估AMI严重程度的新指标。
[参考文献]
[1] Andres E,Garcia-Campayo J,Magan P,et al.Psychiatric morbidity as a risk factor for hospital readmission for acute myocardial infarction: an 8-year follow-up study in Spain[J].Int J Psychiatry Med,2012,44(1):63-75.
[2] Aundhakar SC,Mahajan SK,Mane MB,et al.Reactive thrombocytosis leading to acute myocardial infarction[J].J Assoc Physicians India,2013,61(10):745-747.
[3] Bhayani MK,Calin GA,Lai SY.Functional relevance of miRNA sequences in human disease[J].Mutat Res,2012,731(1-2):14-19.
[4] David R.Small RNAs:miRNA machinery disposal[J].Nat Rev Mol Cell Biol,2013,14(1):4-5.
[5] Blondal T,Jensby NS,Baker A,et al.Assessing sample and miRNA profile quality in serum and plasma or other biofluids[J].Methods,2013,59(1):S1-S6.
[6] Morales-Prieto DM,Ospina-Prieto S,Chaiwangyen W,et al.Pregnancy-associated miRNA- clusters[J].J Reprod Immunol,2013,97(1):51-61.
[7] Duan L,Xiong X,Liu Y,et al.miRNA-1: functional roles and dysregulation in heart disease[J].Mol Biosyst,2014,10(11):2775-2782.
[8] Akeson J,Bostr■m PA,Gustafson C.Study of CK-MB activity in patients with acute myocardial infarction after percutaneous coronary intervention[J].Georgian Med News,2015, 239(1):47-51.
[9] Gupta S,Singh KN,Bapat V,et al.Diagnosis of acute myocardial infarction:CK-MB versus cTn-T in Indian patients[J].Indian J Clin Biochem,2008,23(1):89-91.
[10] Leidinger P,Backes C,Meder B,et al.The human miRNA repertoire of different blood compounds[J].BMC Genomics,2014,15:474.
[11] Mar-Aguilar F,Rodriguez-Padilla C,Resendez-Perez D.Use of serum-circulating miRNA profiling for the identification of breast cancer biomarkers[J].Methods Mol Biol,2014,1165(1):71-80.
[12] Dong L,Li Y,Han C,et al.miRNA microarray reveals specific expression in the peripheral blood of glioblastoma patients[J].Int J Oncol,2014,45(2):746-756.
[13] Devaux Y,Vausort M,Goretti E,et al.Use of circulating microRNAs to diagnose acute myocardial infarction[J].Clin Chem,2012,58(3):559-567.
[14] Pan Z,Sun X,Ren J,et al.miR-1 exacerbates cardiac ischemia-reperfusion injury in mouse models[J].PLoS One,2012,7(11):e50515.