园艺生物技术精选(九篇)
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第1篇：园艺生物技术范文
1.实验内容开放园艺植物生物技术实验教学本着丰富实验教学内容、革新实验教学方式的核心原则，以培养学生创新能力为最基本的目标，提出以下园艺植物生物技术开放式实验教学模式。实验性质由验证性实验过度为综合性、设计性实验。传统教学中验证性实验占总实验学时的80%以上，采用开放性实验教学，验证性实验压缩到20%以内，增加了综合性、设计性实验内容。
2.实验场地开放实验场地是制约学生开展创新性实验的主要原因。以国家级植物生产类实验教学中心为平台，采用开放式实验室运行机制，结合学科点开放实验室，为学生自主选择和设计实验提供了良好的条件。实验室配2～3名研究生协助管理，仪器设备采用预约登记制度，使用前须经专人培训合格后才能使用。实验耗材按实验计划，由实验室统一提供。
3.实验时间开放以3～4人为一个实验小组，以小组为单位安排实验时间，实验室一次可以同时安排6个小组开展实验。实验时间由以前固定时间，改为课程理论授课3周开始至学期末前1周结束。学生可以根据自己的课程安排，合理选择实验时间。实验室时间采用预约制，由实验室管理人员统一安排。上班时间由实验室管理人员负责实验室，节假日和晚上由研究生协助管理实验室，为学生开展开放实验提供充足的时间。
二、开放式实验教学取得的效果
1.实验教学方式开放，激发学生兴趣在大多数同学印象中园艺植物生物技术实验教学以实验方法、手段、技术为主要内容，这些内容过于抽象，通过授课形式讲授或单独的验证性实验，学生理解效果很差，很难达到掌握实验内容的目的。任何研究都是从好奇和怀疑开始的，通过典型的生物技术实例，如柑橘细胞融合获得原生质体杂种、植物遗传转化获得转基因植株，人类基因组测序及园艺植物基因组测序的不断完成，生物信息学预测基因的功能分析等，这些实例在网络上的介绍与视频非常多，通过网站浏览和视频观看，让同学们真正了解生物技术的神秘与贴近生活的两个方面，将抽象的概念转化为切实可行的操作行动。
2.实验时间及空间开放，提高动手能力实验室的开放，即仪器设备和时间概念上的开放，在一定程度上可以解决实验人数多、实验室及仪器设备严重不足的问题。例如，生物分子实验室的定量PCR仪、PCR仪、离心机、核酸仪、电泳仪、紫外投射仪等，实验时间一旦开放，学生可以用充裕的时间来把实验独立完成，不会被课程所限制。通过开放实验室，本科生可以在课余时间多次进入实验室。同时，研究生可以一对一或一对三的带领本科生进行实验，开展相关的扩展实验内容，开阔视野，提高动手能力，还可以更好地参与教师的科研项目，增加教师和学生的交流机会。
3.实验内容开放，自主设计试验在教学内容上打破原有的实验课程结构体系，优化实验内容组合与创新，注重设计性、综合性实验，充分利用网络资源、视频资源及生物公司的广告资源，提高学生的技术应用能力和创新能力的培养，促进学生在学习能力、创新能力和社交能力等综合能力的培养。根据专业培养目标和实验条件，突出实用性，根据学校实验条件提出以下实验内容进行选择与优化。通过开放实验教学内容，学生打破传统的拟定学时的验证实验内容，充分利用学生的自主性进行大量的设计性、综合性实验教学。学生在学校提供的实验条件的前提下，自选实验内容，自定实验步骤，自选仪器设备，自己处理和分析实验结果、实验数据，给学生提供了创新思维的自由空间。这将有利于激发学生的自觉性和主动性，有利于培养学生的创新能力。自觉接受现代教育技术新的成果，把信息技术与学科有机的融合在一起，为学生创设良好的学习情景，突出双向性、参与性、互动性。在实验操作环节，鼓励学生独立完成操作，独立分析结果，发现问题。
4.实验结果灵活，革新考核与评价体系通过综合性、设计性实验，学生将与老师的课堂交流转变为通过面对面、QQ、微信等其他平台，对实验进展随时进行分析、讨论及总结，并且学生通过查阅相应的资料，最后得出科学合理的实验结果。开放式综合性、设计性实验，实验结果的不确定性也避免了同学之间相互抄袭、模仿。因此，既增加了学生动手操作的机会，又有利于学生系统的掌握园艺植物生物技术的实验方法和技能及分析与解决问题的能力。开放式实验教学除在以上方面进行开放外，同时也革新了实验教学的考核与评价体系，与以往实验成绩包括实验课堂成绩与实验报告成绩之外，在实验教学方面补充了实验设计、实验准备工作、结果分析与讨论的考核内容，形成了实验方案撰写(20%)+实验前的准备(20%)+实验过程(30%)+实验结果分析(30%)的实验教学考核体系，评价方式分为优、良好、中等、合格，不及格五种不同的方式。
第2篇：园艺生物技术范文
关键词：生物技术;生物信息学;教学;实践
中图分类号：G642 文献标志码：A 文章编号：1674-9324（2015）47-0123-02
生物信息学（Bioinformatics）是在生命科学的研究中，以计算机为工具对生物信息进行储存、检索和分析的科学，是一门新兴的交叉学科。生物信息学针对生物学问题，发展各种算法及软件，对迅速增长的浩如烟海的核酸和蛋白质序列进行收集、整理、储存、、加工等，目的在于通过生物信息学手段及分析，逐步认识生命的起源、进化、遗传和发育的本质，破译隐藏在DNA序列中的遗传语言，揭示生物体生理和病理过程的分子基础，为探索生命的奥秘提供合理和最有效的方法或途径[1]。作为当今生命科学和自然科学领域发展最为迅速的学科之一，生物信息学已成为介于生物学和计算机科学前沿的重要学科。实验室的每一项技术，从简单的克隆、PCR到基因数据分析都需要在计算机上应用生物信息学的方法进行处理。因此，对生物技术专业的学生而言，具备一定程度的理解和应用生物信息学方法和技术的能力是十分必要的。
目前，国内外许多高等院校相继开设了生物信息学课程，我校也于2007年针对生物技术专业学生开设了此门课程。该课程不仅是一门新兴的学科，而且学习难度大，理论课内容相对枯燥，如何让学生更好地掌握本门课程的内容，是教师在教学过程中值得深思的问题。实验教学是帮助学生理解抽象理论知识的有力手段，在教学中显得尤为重要，但由于开设专业的特殊性，生物信息学实验教学一直比较薄弱。本文对过去实验教学中存在的问题进行了分析，并针对问题结合《基因工程原理》课程以及自己的科研对教学内容进行了优化和教学方法上的改进，取得了一定的成效。
一、过去教学中存在的问题
（一）实验课教学学时偏少
生物技术专业五年制生物信息学课程总学时为72学时，其中理论48学时，实验24学时。生物信息学课程最主要的目标是培养学生通过在线程序或利用生物信息学软件来分析生物学问题的能力，有效解决学生实验学时不足，实际操作时间少，解决实际问题能力较弱的问题。
（二）与其他课程联系较少
生物信息学课程开设在生物技术专业教学进程的第6学期，此时学生已具备普通生物学、细胞生物学、分子生物学、生物化学、医学免疫学、遗传学、基因组学、基因工程原理等生命科学的基础知识。但是，在生物信息学理论课和实践课学习的内容，如查阅的文献、分析的目的则由授课教师自行指定，忽略了与其他课程的联系，不利于学生系统地学习专业课的知识。
二、教学体系的改革和完善
（一）增加实验课教学学时
从2012年起，我校生物技术专业由五年制调整为四年制，同时在修订教学进程的时候将学时调整为理论36学时，实验36学时，理论课结束后即为该内容的实践部分，以此增加学生的实践训练时间。
（二）将基因工程原理实验课程与生物信息学实践相联系
在基因工程原理的实验中，我们把家蝇防御素基因作为目的基因，主要设计的实验内容包括：（1）目的基因的获得：利用PCR技术扩增已经克隆到pMD-18T载体上的家蝇防御素基因;（2）pSK质粒载体的小量制备;（3）目的基因与载体的酶切;（4）目的基因与载体的连接;（5）大肠杆菌感受态细胞的制备;（6）重组质粒的转化;（7）重组子的蓝白斑筛选;（8）菌落PCR鉴定重组子[2]。
在学生对基因工程实验内容熟悉的基础上，我们在生物信息学的教学过程中对学生提出问题：家蝇防御素基因现有的研究现状是怎样的？PCR扩增目的基因的过程中引物该如何设计？获得阳性重组子后我们如何判断获得的插入序列就是目的基因呢？
针对这样的疑问，我们结合基因工程实验对教学内容进行适当的调整：（1）PUBMED获取文献信息：由学生通过PUBMED查找近五年发表的有关家蝇防御素基因研究的文献;（2）核酸序列分析：以家蝇防御素基因为对象，分核酸序列的检索、搜索开放阅读框（ORF）、限制性酶切分析、引物设计、载体序列识别、核酸序列的比对、分子质量/碱基组成/碱基分布分析和序列转换共8大部分内容进行讲解和学生实践操作;（3）蛋白质序列分析：同样以家蝇防御素蛋白为对象，分蛋白质序列检索、蛋白质序列比对、蛋白质基本性质分析（蛋白质的氨基酸组成、分子量、等电点、亲疏水性分析、跨膜区分析、信号肽分析）、蛋白质功能预测、蛋白质结构预测（蛋白质二级结构和三级结构预测）共5大部分内容进行讲解和指导学生进行实践操作。
（三）以科研促进生物信息学的教学改革
笔者所在课程组主要集中于功能基因组学的研究，涉及了功能基因的获取、生物信息学分析、功能验证等方面的内容。学生在课程学习中，参与到教师的科研课题中，学会运用生物信息学所学知识实际解决科研问题。学生可自行完成从文献的查阅、目的序列的获取（由公共数据库获得或实验室测序获得）、基因序列的分析、理论推导氨基酸序列基本性质的分析及结构和功能的预测、系统发育分析，如有可能，学生可通过实验的方法验证生物信息学分析的结果，同时鼓励学生自主选择感兴趣的基因、蛋白进行课程设计研究，实践结束后学生将结果以论文形式提交给教师。
三、教学探索的成效
生物信息学是一门实践性很强的学科，实验教学作为培养学生的重要手段，在该门课程学习中有着举足轻重的作用。在医学院校生物技术专业生物信息学课程的教学中，立足于生物医学视角的实践教学，以与医学相关的基因、蛋白质等数据作为研究的主体，结合基因工程实验教学改革生物信息学的授课内容，有利于学生对专业课程知识的系统学习。同时，结合生物信息学研究前沿和自主科研课题成果，形成科研教学相融合的实践性教学，能够充分调动学生学习的主动性和积极性，进而激发学生的求知欲和创新能力。教学与科研形成相辅相成的互助关系，科研成果转化为教学资源，明显充实了教学内容，提升了教学水平和学生能力。在教学改革探索过程中，已有学生参与到课题组的科研工作中，利用所学的生物信息学知识，通过指定题目或自主选题，顺利完成毕业实习并发表了科研论文《印鼠客蚤线粒体COⅡ基因的克隆、序列测定和分子系统学分析》[3]、《美洲大蠊i型溶菌酶基因的克隆及其功能预测》[4]、《致倦库蚊防御素基因的克隆与原核表达及蛋白纯化》[5]、《德国小蠊致敏原Blag 2的Glu 233突变的分子对接研究》[6]、《伏马菌素B1特异单链抗体的同源建模及分子对接模拟研究》[7]等，证明生物信息学课程教学改革切实可行。
参考文献：
[1]郭丽，赵杨，柏建岭，等.医学院校生物统计学专业生物信息学教学探索[J].南京医科大学学报（社会科学版），2013，10（5）：457-460.
[2]张洁，王S，刘红美.结合科研改进基因工程实验教学的教学实践[J].教育教学论坛，2012，28（42）：70-71.
[3]王S，张迎春，张春林，等.印鼠客蚤线粒体COⅡ基因的克隆、序列测定和分子系统学分析[J].贵州科学，2012，30（5）：35-39.
[4]王S，龙高群，张春林，等.美洲大蠊i型溶菌酶基因的克隆及其功能预测[J].动物医学进展，2012，33（9）：21-27.
[5]王S，王吉平，张春林，等.致倦库蚊防御素基因的克隆与原核表达及蛋白纯化[J].动物医学进展，2012，33（11）：45-50.
第3篇：园艺生物技术范文
1997年教育部正式批准，在高等院校设立生物技术专业，并于1998年颁布了《普通高等学校本科专业目录和专业介绍》，规范了生物技术专业的培养目标、主要课程和学制。专业课程包括微生物学、细胞生物学、遗传学、生物化学、分子主要生物学及基因工程、细胞工程、微生物工程和生物化学工程，涵盖了生命科学和生命工程的基本知识和技能，并以此构成了生物技术专业课程的基本框架。医学院校是医学生物技术人才培养的重要基地，临床医学也是医学生物技术应用的主战场，医学生物技术与临床医学相互依存、相互促进，缺少基础医学与临床医学专业知识和技能的生物技术专业毕业生，在未来的实际工作中不能很好地满足医药领域的科研及创新要求。这就提示我们，在医学院校生物技术专业开设临床医学课程，有着迫切需要和实际意义。我校生物技术专业自招生之初就开设了临床医学课程。生物技术专业有了临床医学的指引，人才培养基础更加扎实，方向更加明确。同时，具有一定临床医学知识的生物医学人才，能够更好地将自身优势辐射到传统医学专业上，为临床医学的发展提供新视野，开拓新思路，注入新的活力。医学生物技术已经在临床医学的发展中发挥了革命性的作用，如基因工程药物和疫苗、单抗导向药物、人工血液代用品等已广泛应用于癌症、传染性疾病和一些遗传性疾病治疗。同时，许多临床新问题、老难题，也越来越多地依赖于生物技术的发展，相关疾病的基因定位、组织工程、干细胞研究方面也都取得了重要成果。显然，医学院校生物技术专业开设临床医学课程既是生物技术学科发展的需要，也是临床医学发展的需要。
2医学院校生物技术专业临床医学教学现状和问题
2.1课程体系和教学内容完全照搬临床医学专业本科教育
课程体系和教学内容是培养目标的直接反映，是培养人才素质、提高教学质量的核心环节。生物技术专业临床医学课程体系和教学内容，应该紧贴生物技术专业实际需求，有针对性地进行设置。然而，目前大部分医学院校生物技术专业临床医学课程体系和教学内容完全照搬临床医学专业本科教育，将内科、外科、专科教学内容按照病因、临床表现、病理、诊断、治疗、预防等毫无取舍地灌输给学生，呈现教师教学无特色、无重点、无思路，学生学习无方向、无兴趣的状态。这与学科设置初衷和社会人才需求脱节，不能培养学生的自主学习能力及创新能力，没有达到预期效果。
2.2课程目标不明确，考核要求不严格
目前大多数医学院校对生物技术专业临床医学教学不够重视，没有真正意识到临床医学对该专业学生今后发展的重要意义。医学院校生物技术专业临床医学课程目标应该是：使学生具有一定临床思维，了解临床医学前沿和需要，并能在医学发展和临床需求中找到生物技术的落脚点、发力点，运用所掌握的生物技术理论知识和技能，从事相关领域的科学研究、技术开发，最终为医学问题的解决开辟新思路、提供新方法。但是目前医学院校对于生物技术专业临床医学课程目标认识比较模糊，在教学过程中需要学生掌握哪些内容、掌握到什么程度没有一个明确的标准。考核过程较为敷衍，甚至没有考核，使临床医学课程开设存在“鸡肋化”的危险。
3医学院校生物技术专业临床医学教学内容
医学院校生物技术专业人才培养，在强调基本素质共性的基础上，应该有不同的培养类型和专业方向。医学生物技术专业临床医学教学内容必须体现职业生涯发展目标，尊重学生多样性选择。目前的教学内容和课程体系不能完全符合专业发展和人才培养需要，不能完全适应现代医学发展需要，不能完全考虑到多样化、个性化、专业化，因此有必要对医学院校生物技术专业临床医学教学内容进行改革。
3.1紧贴实际，重点突出
临床医学是医学生物技术的出发点和落脚点，在课程设置上除了要整体介绍临床医学概况外，重点是要筛选出能够体现生物技术学科发展价值以及与生物技术知识有交集的内容，体现出医学生物技术特色和资源优势，如临床诊断的新方法，基因诊断、基因治疗技术在肿瘤及其他疾病中的应用等；而疾病的临床表现、物理诊断及常规治疗方法等内容应该淡化。这样才会贴近生物技术专业实际，更好地激发学生学习热情，避免浪费学生有限的精力。
3.2以临床问题为向导，以临床难点为突破
医学生物技术发展动力就是临床问题。医学生物技术的发展已为我们解决了一个又一个医学难题，开辟了新思路，提供了新方法，已有很多成熟的、新兴的生物技术应用于临床实践。因此，应将目前临床上亟待解决的问题和需要突破的难点贯穿在教学中，引起学生的思考和学习兴趣，从而更好地把生物技术和临床医学结合起来。
3.3着眼前沿，广泛涉猎
生物技术专业临床医学教学内容需要不断更新和发展。临床医学的最前沿往往与生物技术的发展密不可分，因此要把临床医学中最新的焦点和热点引入教学中，让学生体会医学生物技术对现代医学发展的重要性，增强荣誉感和使命感。同时，临床医学不断进展的案例也是很好的教学事例，让学生了解前辈们是如何发现问题、分析问题、解决问题，并推动医学科学向前发展的。但也要照顾到医学发展的冷门分支，给学生拾遗补缺的机会，在大家忽视的老问题上做出新文章。
4医学院校生物技术专业临床医学教学模式
生物技术专业临床医学教学模式应该有别于临床医学专业，要更加突出多样性、灵活性和自主性，最大限度调动学生积极性，将课程的作用发挥到最大化。
4.1课堂教学与课外教学相结合，选修和必修相结合
压缩课堂教学时数，将教学主战场放在课外，把更多的时间交给学生进行自主学习。增加选修课数量，鼓励学生选择自己感兴趣的方向进行探索。生物技术专业将来不从事临床医疗工作，对临床医学知识的学习应该是有重点和有取舍的，这个选择权不应掌握在教师手中，而应留给学生。让学生在课外通过文献查阅、学术会议、网络交流等多种形式，学习对未来职业发展有帮助的医学知识。
4.2大师进讲堂，将导师范围扩展至临床学科
师资队伍建设是实践教学体系改革的关键。目前生物技术专业临床医学师资结构中，中级职称教师比例偏高，真正的大师偏少。应该把临床医学的“大腕”请进讲堂，因为生物技术专业的导师往往更重视具体的新技术、新方法，而对临床医学前沿需求知之甚少，缺少宏观思路和顶层设计。这些可由临床导师很好地补充，他们扎根临床数十年，对疾病的发生发展、治疗的难点要点有更全面、深入的认识。要鼓励学生参与到临床导师的科研课题及科技创新活动中，使其不仅对原有理论知识和技术有更清晰的认识，还锻炼了临床科研思维能力；使学生能更准确地把握现代医学发展的脉搏，找到自己感兴趣、能钻研、有出路的研究方向，对未来职业发展进行合理的规划。
4.3启发为主，传授为辅
生物技术专业学生将来主要从事科研工作，应该是临床医生的益友良师。其临床医学教学不应以传授方式为主，而应采取引导、启发的方式，加入讨论及案例教学，让学生自己思考问题，用专业特长来分析问题、解决问题。强化学生创新思维和综合能力培养，在教学环节中启发学生自主学习和自由学习。在教学方法和教学手段改革中，坚持理论联系实际、基础联系临床的教学理念，强调教学过程的“四结合”：密切结合科研，密切结合临床，密切结合实践，密切结合新进展。
4.4考核评价与教学目的相统一
第4篇：园艺生物技术范文
查；结论
【中图分类号】 G633.96 【文献标识码】 C
【文章编号】 1004―0463（2015）08―0100―01
受心理与生理因素影响，再加上课业负担，高中女生普遍对体育课不感兴趣，上课积极性不高，课堂效率低。针对这一现状，笔者把校园集体舞应用于女生武术攻防意识培养的课堂教学中，受到女生欢迎，收到良好的教学效果。
一、组织实施
体育课基本部分：根据教材内容自编了“武术攻防动作及路线的舞蹈套路”，由传统的陈述性教学变为节奏性练习教学，讲解示范并用口令带领学生练习。整个教学过程就像跳健身操一样有节奏，且动感十足。学生排成体操队形跟教师练习，掌握了动作和路线后，自行分组练习，以达到武术攻防意识培养的目的。
体育课结束部分：利用校园集体舞的韵律操进行放松及整理，并放轻音乐《希望之翼》达到放松目的。
二、调查分析
为了解女生对传统和创新后授课方式的评价和理解程度，为今后的教学工作提供依据，课题组进行了问卷调查和访谈。
1.调查对象：本校高一、高二23个班的女生，共738人，年龄15～17岁。
2.调查方法：问卷调查法和个别访谈法。
3.调查结果：（1）问卷调查结果：发放调查问卷738份，有效收回738份，有效回收率为100.00%。
调查显示，在体育课准备活动中运用校园集体舞，能达到热身效果的学生占99.19%，只有0.81%的学生没达到热身效果；能让身体各关节活动开的学生占98.78%，只有1.22%的未能将身体各关节活动开；感到身体轻松有力的学生占99.05%，有0.95%的学生没明显感觉；喜欢这种准备活动方式的学生有97.97%，只有2.03%的学生不喜欢。说明将校园集体舞作为武术课准备活动既能达到目的，又深受学生喜欢。
把基本部分的武术攻防动作及路线编成舞蹈套路进行教学，有97.83%的学生对体育课学习兴趣增加，有2.17%的学生没有增加；有97.02%的学生对武术攻防动作及路线明确，只有2.98%的学生没弄明白；有99.32%的学生因为这种教学方式对所学内容印象深刻，0.68%的学生没有印象；98.37%的学生能掌握动作要领，1.63%的学生没有完全掌握。说明利用舞蹈队形进行武术动作教学，既能提高高中女生学习的积极性，又能让她们很快地掌握动作要领，从而培养了她们的武术攻防意识。
结束部分利用校园集体舞中的韵律操进行放松活动，能让99.46%的女生身心得到放松；100.00%的女生认为采用这种形式能拓宽知识面；99.59%的女生接受这种教学方式。由此可见，韵律操配合轻柔、缓缓、恬静的乐曲，能使学生心情平静下来，身体各部位得到充分放松。
（2）个别访谈情况：通过访谈了解到，采用传统教学方式，许多女生对武术攻防知识掌握不佳，她们对一成不变的上课形式感到枯燥乏味，提不起兴趣，对攻防路线和动作不太明确，学完后印象不深刻。
三、结论
第5篇：园艺生物技术范文
【摘要】：一直以来，人类与病原微生物之间的斗争从未间断过。随着现代科学技术的发展，人们检测病原微生物的技术也在不断提高，这大大降低了其对人畜的危害。本文主要讲述了现代病原微生物检验技术的发展状况。其中以PCR和DNA芯片技术为代表的分子生物学技术的发展，大大提高了病原微生物检验技术。
【关键词】：病原微生物；检验技术；分子生物学
人类进入21世纪，虽然医疗事业已经发展到了历史最高点，但是感染性疾病仍然是危害人类健康的重要疾患，其中造成人类感染的病原微生物种类纷繁复杂，范围覆盖面更广,而且耐药性越来越强，其中还有一些传统的病原微生物像结核分支杆菌等又出现死灰复燃的现象，同时还出现了许多新的病原体，如2003年底出现的SARS病毒以及2004年又出现禽流感病毒。这些病毒给病原微生物的检测带来巨大困难，严峻的现实要求病原微生物检验技术不断更新。人类与病原微生物之间的斗争越来越激烈，本文所讲述的是现代的生物科学技术的发展现状。
一、 传统微生物检验技术
传统病原微生物的检查是以染色、培养和生化鉴定等为主,这些方法测试结果比较可靠，特别是微生物的分离培养,。在当前形势下，该方法仍然是很多微生物病原体检测的"金标准"。然而，细菌在生长繁殖时需要耗费不少的时间,这使得检测周期一直不能降低；与此同时，很多病原体的培养还会与营养需求、抗生素的使用以及病原体含量多少等因素相关。然而由于时代的发展，这种技术已远远不能满足对各种病原微生物的诊断，特别是针对流行病学的研究。随着现代科学技术的不断发展，特别是物理化学技术、分子生物技术、免疫学等的不断发展，新的微生物诊断技术和方法己广泛被应用。
二、 物理化学技术
物理化学技术主要是利用一些物理和化学反应来进行检测微生物，具体有色谱检测法和电阻抗法。
（1） 色谱检测法
在色谱检测法中，将细菌混合物通过不同固定相和流动相，进行溶解、解析、吸附和脱附等相关物理过程，在进行多次反复后得到分离,最后运用各种检测手段对细菌的属、种甚至株进行鉴定。在高效液相色谱法中，其分辨率高、分析速度快，同时操作简单方便。
（2） 电阻抗法
在电阻抗法中，它是在微生物代谢过程中，通过检测培养基导电特性变化，从而快速测定样品中微生物含量。主要原因是由于生理代谢，在微生物培养过程中，培养基中的一些如碳水化合物、类脂、蛋白质等电惰性物质逐渐转化为电活性物质。随着微生物数量的增长,培养基中电活性物质逐渐取代了电惰性分子，而使得培养基导电性增强，最终导致电阻抗降低。
三、 分子生物学技术
21世纪将迎来以分子生物技术为代表的生命科学的时代。最近发展起来的分子生物学基因诊断技术已经广泛应用在医学、遗传学等各个领域，这不断促使现代医学由细胞水平向分子水平、基因水平转变，从而形成了分子微生物学，这就满足了人们对微生物的认识需求：从以前的外部结构特征逐步转到现状微生物的内部基因结构特征研究。同时，微生物的检测技术相应的转向到基因水平的检测。在此基础上产生的众多新的检测技术中, 具有敏感、特异、快速等多种优点的核酸杂交和聚合酶链反应(PCR)现在已经应用到了病原微生物的检测中。此外，DNA芯片技术的兴起，为微生物学的检测带来了日新月异的革命。
（1） 核酸杂交和聚合酶链反应（PCR）技术
PCR技术的高度敏感性和特异性应用在病原体检测上时的优势如下：常规方法常难以准确检测一些对形态和生化反应不典型的微生物鉴定，但是PCR技术的出现，使得其成为可能，即使在出现大量死菌的情况下，也能做出准确而快速的鉴定；同时它还不受混合标本的影响，能够很方便地从含有大量正常菌群的标本中检测出病原菌；而且，对于如分支杆菌、幽门螺杆菌、支原体等一些生长缓慢甚至难于培养的微生物，采用PCR技术来鉴定这类菌株也有重要意义，采用其他方法则很难获得信息。
（2） 基因（DNA）芯片技术
生物芯片是基于玻片和尼龙膜等的载体，有序排列了很多生物活性分子。这些分子在单位面积上密度非常高，从而在一次试验下，就能够同时检测到多种疾病或者对多种生物样品进行分析。
生物芯片根据芯片上固定的生物活性分子的不同可以分为蛋白芯片和基因芯片。而基因芯片的活性分子是寡核苷酸探针或靶DNA。DNA芯片与传统的检测方法相比，具有少样品需求、可快速、准确、高效地显示病原体的遗传信息的优点，已被广泛应用在分析宰基因序列、快速诊断病原微生物感染、研究变异及耐药机制、揭示发病机制以及感染性疾病的诊断和治疗等。由此可见，基因芯片技术发展前景和空间非常广阔。
随着科技的发展，计算机技术在不断提高。现代病原菌微生物检测将沿着高度自动化和简便快速的方向发展，其中尤其是对于分子生物学技术：通过在病原菌诊断、鉴定以及基因检测等方面成功运用自动化仪器，生物芯片技术的发展最终将完全改变临床病原菌检验的现状，实现集高效、高质和廉价等与一体的技术。同时，随着各学科之间的交叉发展，越来越多的新的检测技术将会不断涌现，从而不断促进病原微生物检验技术的发展。
参考文献
第6篇：园艺生物技术范文
所谓无公害蔬菜是指蔬菜中农药残留、重金属、亚硝酸盐等有害物质的含量，控制在国家规定的允许范围内，人们食用后对人体健康不会造成危害的蔬菜。随着社会的进步和经济的发展，蔬菜的营养和安全卫生问题越来越突出，因其生长速度快，生长期较短，可食用部分比例高，与人类日常生活关系更为密切，受污染后对人体影响较大而倍受重视，而化学肥料的施用原则及注意问题要求更为严格。
2.无公害蔬菜施肥原则
2.1因种类施肥
2.1.1瓜类，包括黄瓜、冬瓜等施肥原则：以有机肥为主，重在底肥，合理追肥，控制氮肥施用，禁止施用硝态氮肥。采取测土配方施肥技术，保持土壤肥力平衡。施足基肥：保证施腐熟的有机肥4000-5000公斤/亩，磷酸二铵30-50公斤/亩、硫酸钾20-30公斤/亩或三元素复合肥50公斤/亩。合理追肥：可追施腐熟人粪尿1000公斤/亩或三元复合肥（或尿素）10公斤/亩。同时可用0.5%尿素加0.3%-0.5%磷酸二氢钾辅以叶面追肥2-3次。保护地内可增补CO2气体。
2.1.2茄果类蔬菜，包括番茄、辣椒、茄子等施肥原则：以有机肥为主，重在底肥，合理追肥，控制氮肥用量，提倡使用专用肥和生物肥，专用配方肥，保持土壤肥力平衡。施足基肥：保证施充分腐熟的有机肥4000-5000公斤/亩，并配合施用磷酸二铵30-50公斤/亩、硫酸钾25-40公斤/亩或三元复合肥60公斤/亩。合理追肥：可追施腐熟人粪尿1000公斤/亩或尿素10公斤/亩。
2.1.3叶菜类，包括大白菜、甘蓝等施肥原则：以有机肥为主，重在底肥，合理追肥，控制氮肥用量，提倡使用专用肥和生物肥，禁止使用硝态氮肥，采取测土配方施肥技术，保持土壤肥力平衡。施足基肥：保证施腐熟的有机肥4000-5000公斤/亩，磷酸二铵30-40公斤/亩、硫酸钾30-40公斤/亩或三元复合肥60公斤/亩。合理追肥：前期和中期追施缓效肥料，可追施充分腐熟的人粪尿1000公斤/亩及草木灰50-100公斤/亩或三元复合肥（或尿素）10公斤/亩；后期适当追施速效碳酸氢铵20-30公斤/亩或尿素10公斤/亩。叶菜类不能采取叶面施肥，叶面喷施直接与空气接触，铵离子易变成硝酸根离子被叶片吸收，硝酸盐积累增加，又不耐贮存。
2.2因菜类施肥
不同种类的蔬菜，吸收硝酸盐程度也不同，施肥要求也就较为严格。茄子、辣椒、胡萝卜、番前、萝卜等果菜和根菜类，对硝酸盐积累较轻，收获前20至30天应停止施用硝态氮。卷心菜、缩叶莴苣等，对硝酸盐积累少，可少量施用硝酸盐类肥料。白菜、苋菜、菠菜、香菜等，容易积累硝酸盐，严禁施用硝态氮。
2.3因季节施肥
春冬菜少施氮，春冬菜光照弱，容易积累硝酸盐，应不施或少施氮肥；夏秋菜生长季节气温高，含硝酸少，可适量施用一些氮月巴。
2.4因地力施肥
高肥菜地应禁用氮肥：低肥菜地，蔬菜积累硝酸盐较轻，可施氮肥、有机肥培肥地力；富含腐植质的土壤，蔬菜的硝酸盐含量高，应禁施氮肥，不施硝酸铵、硝酸钾、硝酸钙及含硝态氮的复合化肥，容易使蔬菜积累硝酸盐。
2.5因肥料种类施肥
尿素、碳酸氢按、硫酸铵、酰铵态氮，都应控制其用量，使用时一定要深施盖土。氮肥深施盖土，深施在土壤15至18厘米左右，这样硝化作用缓慢，肥料利用率高，可减少蔬菜对硝酸盐的积累。要严格控制氮肥的用量：蔬菜中硝酸盐积累随施肥量的增加而提高，亩施肥量应控制在纯氮25公斤以内，60%至70%用作基肥，30%至40%用作苗肥深施。氮肥要早施：苗期施氮肥最好，有利蔬菜早发、快长、有利降低硝酸盐积累。重施有机肥：有机肥应经高温堆沤腐熟，杀死病菌、虫卵后施用，这样有机肥就不会导致蔬菜硝酸盐污染，不仅品质好，而且耐贮存。沼气废渣液肥效高，经常施用，病虫少，可减少农药用量，提高蔬菜产量。
3.无公害蔬菜施肥应注意的几个问题
3.1大力推广生物肥料
特别是要大力推广生物有机复合肥料，作蔬菜基肥，一般每亩施50-60千克，也可作追肥，亩施20-25千克。人粪尿及厩肥要充分发酵腐熟，追肥后要浇清水冲洗，严格禁止生、鲜人畜粪便施入土壤。
3.2化学肥料要深施、早施
深施可以减少氮素挥发，延长供肥时间，提高氮素利用率。早施则利于植株早发快长，延长肥效，减轻硝酸盐积累。一般铵态氮施于6厘米以下土层，尿素施于10厘米以下土层。
3.3温度和湿度对施肥的影响
在温度适宜的生长季节可多施肥料，低温季节少施或不施。当土壤中有适宜的水分时，有利于微生物活动和物质分解，可以多施；干旱条件下施肥效力不大，应少施肥或不施肥。当降雨过多时，会造成养分流失，由于土壤通气不良导致反硝化作用还原成亚硝态氮，造成亚硝酸积累。光照充足，要求供应较多肥料。因此，在水分适宜、光照好的时候，施肥效果好。蔬菜作物在高温时不利于累积硝酸盐，低温且光照弱由于硝酸盐还原酶的活性受到低温的抑制容易累积，所以夏秋可适量少施化肥，秋冬必须尽量少用或不用化肥。
3.4高肥地禁用氮肥
富含腐植质的土壤，蔬菜的硝酸盐含量高，禁施氮肥。低肥菜地，蔬菜积累硝酸盐较轻，可施氮肥、有机肥培肥地力。
第7篇：园艺生物技术范文
[关键词] 档案管理；医院管理
[中图分类号]R19 [文献标识码]B [文章编号]1673-7210（2008）01（b）-111-02
湖州市第三人民医院是浙江省三级甲等精神病专科医院。多年来，该院坚持以人为本，加强人才队伍建设，鼓励更多的中青年科研人才大胆探索，勇于创新，医院遵循“内培外引”的人才队伍建设思路，使医院构建起了一支高素质、高水平的人才队伍，为医院事业建设和发展起到了积极的作用。在激活用人机制的同时，加强医院卫生专业技术人员（以下简称卫技人员）的个人业务档案管理显得尤其重要。
1医院卫生专业技术人员的个人业务档案的概念
医院卫生专业技术人员的个人业务档案（以下简称个人业务档案）是国家机构和社会组织管理活动中，直接产生的反映个人经历、政治思想、职业道德、工作表现和业务实绩等为内容的文件材料；是以个人为立卷单位，按照一定的原则和方法加工整理而成的个人业务档案材料。它为组织上选拔、使用人才、晋升职称、年度考核等提供依据、凭证和参考。它对于一个医疗卫生单位专业技术人员的配备结构比例、技术力量、综合素质等方面具有重要的现实意义和深远的历史意义。
个人业务档案归档范围：①考核类：包括专业技术人员年度考核表、工作人员年度职业道德考核表。②教育培训类：包括学历、学位、各类培训证明材料。③奖惩类：包括奖励、处惩结果证明材料。④论著成果类：包括论著期刊、成果奖励证明材料。⑤其他类：包括职工履历表等有关职工基本情况证明材料。而最早形成的材料是由学校毕业分配来院的有关学生个人的学历、思想表现、学习成绩、实习评语、奖惩情况等文件。其后在从事业务技术工作中不断形成的新的有关聘用、奖惩、政治思想、职业道德、业绩水平以及履行岗位职责情况等真实记录，经整理而成的个人业务档案。因而个人业务档案立卷后，不是一成不变的，而是随着个人所从事的社会实践活动不断增加而丰富，是一个人业务经历面貌的客观反映。 因此，档案管理人员要不失时机地维护好个人业务档案的完整性。
2加强个人业务归档管理工作的措施
从当前我院个人业务归档管理工作的实际情况来看，在材料收集完整方面，存在一定难度，究其原因大致有二：一是从业后，为晋升晋级继续报考院校的毕业生档案中缺少继续深造的学习与鉴定情况登记表等材料。二是年度考核材料归档不全。为了做好我院卫技人员业务档案材料的收集归纳
和整理工作，建立和完善卫生专业技术人员的业务档案，作者认为应做好以下几方面工作：
2.1领导重视是医院开展业务档案工作的有力保证
随着医院各项管理制度的健全落实，医院档案管理工作已摆到领导工作的重要议事日程，该院领导非常重视对个人业务档案的管理工作，充分认识到它既是关系到卫技人员个人的切身利益，又是医院卫技人员人力资源配备的客观反映。因此，在加强对专兼职档案人员业务素质培训和教育的同时，重视对档案材料的收集工作。一是对收集的档案材料必须是办理完毕的正式材料，材料应齐全、真实、文字清楚、对象明确，有承办单位及形成材料的日期。二是对档案的材料凡规定由人事部门审查盖章的，须经人事部门盖章。三是档案管理部门要经常了解和掌握形成档案材料的信息，加强沟通渠道，建立联系制度，不断改进工作和服务方法，取得业务部门的支持和配合，积极主动、认真负责地做好个人业务档案的收集工作。
2.2加强责任意识是档案人员做好档案工作的关键
档案工作要求档案人员要进一步增强责任感，忠于职守、熟悉业务、严格把关，该归档的材料要及时归档。如毕业生报到建档、人才流动关系转接等，都要保证个人档案材料归档的及时和完整。特别是在发现缺少应有的档案材料，又无法从原院校或单位收集时，应及时通知本人，能积极配合单位尽快想办法通过各种途径将自己的材料找回或及时补充，一旦时间久了会给当事人在从业证明、职称晋升、资格认定等方面带来诸多困难，甚至造成凭证材料无法弥补的损失。如一位专科毕业的已工作了几年的护士，在办理领取本科自学考试毕业证书时，要求复印专科毕业的成绩单，经我院人事档案部门查阅，发现唯一缺少原就读高校的成绩单，经辗转虽补回了专科成绩证明，但给档案部门和她本人都带来了不必要的麻烦。通过档案利用工作的一个实例，进一步宣传档案的作用和价值，了解收集档案的实际效益，做好档案工作。
2.3严把质量关，真正为医院卫生专业技术人员服务
个人业务档案与一般人事档案比较而言，具有一定的特点，因而在管理模式和方法上侧重点不同。因此，在认真收集好归档材料的同时，要严格把好个人业务档案归档质量关。对卫技人员在各自的岗位上完成年度工作后，在进行自我总结的基础上，经科室负责人评议后，交由专业归口职能部门。如医生系列归医务科负责考评，护理系列交护理部负责考评，然后由人事科对其个人进行各项评分标准的综合考评，其中包括工作业绩、科研成果、奖励情况、论文出刊等，将考评汇总资料提交院专业技术与非专业技术考核小组进行考评，遵循公平公正、择优推荐、统筹兼顾等原则，按专业技术人员考核的一定比例，择优排序进行综合考评，最终为优秀、称职或不称职的考评结果，经人事部门签字盖章后，移交综合档案室归档。因此，个人专业技术年度考绩材料形成过程，涉及内容真实可靠、全面完整。在归档时，应加强工作责任感，理顺内部关系，完善运行各个过程，环节之间的衔接，严格按照归档范围要求，及时、准确、详实记录其年度工作表现，严格把好质量关，力求做到归档材料齐全完整，缺一不可，保障档案材料的数量和质量，真正为医院卫生专业技术人员服务。
第8篇：园艺生物技术范文
圣旨骨酥鱼作为中国的骨酥鱼始祖,自2005年面向大众推广以来,横扫各地鱼类消费市场,创下一个又一个销售奇迹,让一批又一批捷足先登的投资者快速致富。了解圣旨骨酥鱼的读者都知道,圣旨骨酥鱼之所以能让学员大赚特赚:一是品质好、味道绝、消费者吃了还想吃;二是品牌号召力强,有国家级的信誉保证,消费者敢吃,大品牌保证了大利润。三是完善的服务功不可没。
骨酥鱼祖 专一做鱼
圣旨骨酥鱼博大精深无人及
“绝了,绝了,真是做绝了!”这是每一个吃到圣旨骨酥鱼的人最由衷的赞叹。见过的人说:不可思议;吃过的人说:真过瘾!圣旨骨酥鱼之所以能做到“骨酥味绝”、“吃了还想吃”,是十数代人代代相传、一点点积累才成,这不是传授“二手”技术的仿冒者像模仿广告一样能一夜速成的。
圣旨骨酥鱼的专用砂锅,是由几千年历史的中国北方最大的磁州窑生产,并且添加了稀有珍贵的岩石风化土,能使风味更加独特,做出的鱼额外好吃。
圣旨骨酥鱼的“料窨”工艺,是以专用砂锅为“窨器”,以“祖传秘制核心料”为“料”,在温度的作用下,才能达到“料窨”的目的,才能使做出的鱼:无腥味、无异味,大鱼、小鱼都可做,热吃凉吃皆宜,达到骨、刺、肉味道统一,从头吃到尾,口味都一致,鱼鳞、鱼鳍都美味,连从来都不吃鱼的顾客,吃了圣旨骨酥鱼都说好。如果磁州窑专用砂锅、“料窨”工艺和“秘制核心料”,三者缺一,就做不成正宗地道的骨酥鱼。
圣旨骨酥鱼的“秘制核心料包”,精选药食同源植物和骨酥鱼专用香料组成,不仅能让顾客吃第一口就能感觉和曾经吃过的任何鱼都不一样,而且长吃能形成味觉依赖,所以做圣旨骨酥鱼,即能赚快钱,又能时间越长,赚得越稳。别看“秘制核心料包”效果奇特,但制作一斤鱼“核心料”成本才6分钱,一个学员一年仅需千元左右的“核心料”,纯利润即可10万元以上。“核心料包”不在市面出售,只在内部配送,保护了正宗学员的利益,断了跟风仿冒者的竞争。如果有仿冒者号称破译了圣旨骨酥鱼的“核心料包”,或者说不用“核心料包”也能做,请读者要小心了。学圣旨骨酥鱼技术,品质有保证,赚钱才有了基础,所以学技术不光要看投入多少学费,关键要看能产出多少利润。拜真师,学真技,才能真赚钱。
品牌的力量如虎添翼
大品牌保证了大利润
云南大理学员苏建设说:全国吃遍,圣旨骨酥鱼做得最好吃。但“骨酥味绝,吃了还想吃”,只是赚钱的基础,真正要赚到钱,消费者能放心购买和巨大的品牌号召力,一个都不能少,因为骨酥鱼在云南本地属新鲜事物,外在好好的一条鱼,里边却骨酥刺烂了,一般人都担心有什么化学药水,是不敢吃的。我的骨酥鱼刚在大理上市时,也有很多顾客有顾虑,但一提“圣旨”,男男女女、老老少少都知道,几千年的皇家文化熏陶,更是让“圣旨品牌”家喻户晓,影响力巨大,充满王者之气,特别有可信力。“既然这鱼能叫圣旨骨酥鱼,叫了上千年,现在又被国家批准,一定错不了”,我不止一次听消费者这样说。很多人从一开始试着买,到被口味吸引,再到最后每天吃点圣旨骨酥鱼成为习惯,“圣旨”这个品牌真是帮了大忙,如果换同样的鱼,没有圣旨这个品牌,我也未必像现在每天能挣这么多。另外,圣旨骨酥鱼先后获得“最佳诚信企业”、“全国消费者首选放心食品”、“最具爱心企业”等数十个荣誉和大奖,我都摆在销售处的显眼处,进一步增加了消费者的信赖度。尤其是圣旨骨酥鱼荣获的“全国消费者首选放心食品”荣誉,往那儿一放,比我们自己说一百个放心都管用。一旦消费者放了心,口味又不错,赚钱真的像捡钱了。“选项目,就是在选品牌,我的眼光决定了我现在的财富。”最后苏先生自豪地说。
甘肃学员李继红说:大家都知道,现在是品牌消费时代,衣食住行,品牌的力量无处不在,圣旨所拥有的权威和号召力,非一般品牌所能比,其影响力在卖鱼时特别明显,能额外的多卖,3800元不仅学到了正宗的源头技术,而且还能免费使用圣旨品牌,确实太值了,现在回头看,就是再交上几千元的品牌使用费,我都会干。一条鱼能和圣旨有关,你说这条鱼有多厉害?你说这条鱼到哪儿大家不争相品尝?
大品牌蕴含大实力
圣旨骨酥鱼的服务独一无二
浙江学员赵千瑞说:圣旨骨酥鱼作为骨酥鱼祖,其独一无二性不仅体现在做鱼技术上,方方面面都能让学员感受到大品牌蕴含的大实力。做鱼赚了钱,想有大发展,总部有“骨酥鱼真空包装机”资助学员,办个家庭工厂绰绰有余。还有砂锅,在仿冒者那里也许能看到几个,但圣旨骨酥鱼却拥有中国北方最大的磁州窑在支持,另外,传授“二手山寨”技术的跟风者不仅没有做鱼特别好吃的“核心料包”,更不会有加工“核心料包”价值不菲的加工厂了。在技术学习上,圣旨骨酥鱼有接待部、培训部,从一盆清水开始,老师手把手传授,直到做出骨酥味绝的圣旨骨酥鱼为止,而且很多细节都已量化,学习起来掌握容易,在服务上,总部有售后服务部、物流部,向总部要点什么,比如真空袋、超市卖鱼专用盒等,特别的方便快捷。“一分价钱一分货”,说实话,3800元学圣旨骨酥鱼,学对了。
相关链接:为庆贺圣旨骨酥鱼总部迁至省会石家庄,在保持原学费3800元一分不涨的前提下,近期学员除免费送磁州窑专用砂锅、秘制核心料包、宣传海报、荣誉证照、国家批准的圣旨品牌授权书及鱼晶冻、日本腌鱼、韩国卤鱼、300道特色鱼菜VCD等技术,一律再赠“圣旨骨酥鱼真空包装机”一台!
中国圣旨骨酥鱼唯一授权培训总部
地址:石家庄市自由港大厦晨座8层B区(胜利大街与和平路交会处)
电话/传真:0311-89183183
89183187
第9篇：园艺生物技术范文
【摘要】 目的 研究异黄酮苷元滴丸和片剂的药动学及相对生物利用度。方法 以sd大鼠为实验动物，采用高效液相色谱法测定异黄酮苷元滴丸和片剂单剂量灌胃给药后大鼠的血药浓度变化。用3p97软件进行药代动力学数据处理， 计算 分析药代动力学参数和相对生物利用度。结果 异黄酮苷元滴丸：auc为46.30 μg·min·ml-1，cmax为0.89 μg·ml-1，tmax为18.03 min;片剂：auc为36.01 μg·min·ml-1，cmax为0.41 μg·ml-1，tmax为31.43 min，滴丸相对于片剂的相对生物利用度为128%。结论 异黄酮苷元滴丸、片剂均符合一室模型，滴丸较片剂具有较高的生物利用度。本研究为异黄酮苷元滴丸研制提供了一定的依据。
【关键词】 异黄酮苷元滴丸;异黄酮苷元片剂;高效液相色谱法;药代动力学;相对生物利用度
abstract:objective to investigate the pharmacokinetic and relative bioavailability of isoflavone aglycone dripping pills and tablets in healthy sd rats,and evaluate the pharmacokinetic effects of the two dosage forms of isoflavone aglycone. methods 36 sd rats were intragastrically administered with the suspension solution of isoflavone aglycone dripping pills and tablets at single dose,and changes in plasma concentration were determined by hplc. pharmacokinetic data were processed with 3p97 software and the pharmacokinetic parameters and relative bioavailability were calculated. results for dripping pills of isoflavone aglycone:auc=46.30 μg·min·ml-1,cmax=0.89 μg·ml-1,tmax=18.03 min; and for tablets of isoflavone aglycone:auc=36.01 μg·min·ml-1，cmax=0.41 μg·ml-1，tmax=31.43 min. the relative bioavailability of dripping pills and tablets was 128%. conclusion the pharmacokinetics of dripping pills and tablets of aglycone isoflavone were in accordance with single compartment model，and the relative bioavailability of dripping pills of aglycone isoflavone was higher.
key words:isoflavone aglycone drippping pills; isoflavone aglycone tablets; hplc; pharmacokinetics; relative bioavailability
异黄酮苷元(isoflavone aglycone)是一种来源于豆类植物的游离苷元，包括染料木素、黄豆苷元、黄豆黄素3种活性成分，其中染料木素的结构与雌二醇相似，且含量最高，生物活性最强[1]。wWw.133229.coM异黄酮苷元是一种具有较强的抗氧化活性和神经保护作用的植物雌激素，在防治老年性痴呆和由于雌激素缺乏导致的骨质疏松等方面有良好的应用前景[2]。但异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低，影响了其在体内的生物活性。本实验通过考察自制异黄酮苷元滴丸[3]和片剂[4,5]的药代动力学特征，为异黄酮苷元滴丸的临床应用提供依据。
广东药学院学报 第25卷 第6期 杨红,等.异黄酮苷元滴丸和片剂在大鼠体内的相对生物利用度研究
1 材料与仪器
1.1 材料
异黄酮苷元滴丸和片剂是由本实验室从大豆中提取制备的游离苷元研制而成(平均丸重25.03 mg·丸-1，染料木素含量为133.2 mg·g-1;平均片重453.84 mg·片-1，染料木素含量为5.40 mg·g-1);染料木素对照品(上海同田生化技术有限公司);无水甲醇(分析纯,天津市科密欧化学试剂有限公司);磷酸(分析纯,沈阳 经济 技术开发区试剂厂);甲醇(色谱纯,tedia公司);异黄酮苷元滴丸灌胃液(精确称取0.05 g滴丸细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 ml，得到含染料木素66.6 μg·ml-1的灌胃液);异黄酮苷元片剂灌胃液(精确称取1.234 剂细粉，0.5%羧甲基纤维素钠定容到100 ml，得到含染料木素66.6 μg·ml-1的灌胃液);其余试剂均为分析纯。
1.2 动物
sd大鼠36只，鼠龄8～12周，体质量(200±10)g，广州中医药大学实验动物中心，许可证号：scxk(粤)20080020，粤监证字2008a002。
1.3 仪器
p680a高效液相色谱仪(美国戴安公司);re52cs旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);低sh2d循环水试真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司);数显恒温水浴锅(江苏省宏华仪器厂);xw80型旋涡混合器(上海第一医学院仪器厂);高速离心机(日本日立公司)。
2 实验方法
2.1 对照品溶液的制备
取空白血浆6份,分别精密加入染料木素对照品制得质量浓度分别为0.05、0.10、0.20、0.40、0.80、1.60 μg·ml-1的对照品溶液，4 ℃保存备用。
2.2 色谱条件
参照 文献 [6,7]进行改进：色谱柱为diamonsil c18色谱柱 (250 mm×4.6 mm，5 μm);柱温为25 ℃;流动相为甲醇0.3%磷酸溶液(体积比48∶52);流速为0.7 ml·min-1;测定波长为254 nm;进样量为20 μl。
2.3 血浆样品预处理
取血浆1 ml， 加入1 ml乙酸乙酯， 涡旋振荡
2 min，3 000 r·min-1离心5 min，移取上层有机相于另一试管中;将下层溶液重复上述步骤，合并有机相溶液，通风橱中挥干，残留物加无水甲醇溶解，0.45 μm微孔滤膜过滤，用无水甲醇定容于2 ml容量瓶，得血浆样品溶液。
2.4 方法专属性
在“2.2”项色谱条件下，测得空白血浆、对照品血浆(含染料木素)、样品血浆(含异黄酮苷元)的色谱图见图1。从图1可见，血浆中的杂质不干扰测定。
2.5 标准曲线[8]
取“2.1”项下的对照品溶液，按“2.3”项下处理并进样测定，以染料木素溶液的质量浓度为横坐标,相对应的染料木素的峰面积为纵坐标,用最小二乘法进行线性回归 计算 ，得回归方程为y=3272.06 x-1.87，r=0.999 9。表明染料木素对照品的质量浓度在0.05～1.60 μg·ml-1(n=6)范围内与峰面积呈良好的线性关系。
2.6 精密度试验
取空白血浆1.0 ml，按“2.3”项下处理，制得高、中、低3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·ml-1)的样品溶液，分别于1 d内和3 d内连续进样5次测定，并计算rsd值，结果见表1。表1 精密度试验结果
2.7 相对回收率试验
精密吸取血浆样品3份，按“2.3”项下操作处理，得血浆样品溶液并根据标准曲线计算样品溶液浓度，将所得浓度与实际浓度的比值即相对回收率，见表2。表2 相对回收率结果
2.8 稳定性考察
取“2.1”项下的3种浓度(1.60、0.80、0.40 μg·ml-1)的溶液，分别于0、2、4、6、8、12 h进样分析，结果显示溶液中染料木素的rsd为0.83%，表明样品溶液在4 ℃避光条件下12 h内稳定。
2.9 血浆样品测定
取sd大鼠36只，随机分成2组，隔夜禁食，分别灌胃给予异黄酮苷元滴丸灌胃液或异黄酮苷元片剂灌胃液(2 ml·只-1),于灌胃后0、5、10、15、30、45、60、75、90、105、120、150 min对大鼠进行眼眶取血(约1.5 ml·只-1)， 置肝素试管中抗凝， 5 000
r·min-1离心5 min，分离上清液，得血浆样品。按“2.3”项下方法处理得到血浆样品溶液并进行测定，利用回归方程求出血药浓度。
3 结 果
3.1 血药浓度测定结果
按不同时间点求出平均血药浓度，并绘制血药浓度-时间曲线，见图2、3。由图可见：15 min时滴丸的血药浓度为0.706 μg·ml-1，片剂的血药浓度为0.405 μg·ml-1，相比其他时间点，此采血点的血药浓度最高。
3.2 药动学参数
血药浓度数据经药代动力学软件3p87拟合处理后，药动学参数结果见表3。从表3可见：异黄酮苷元滴丸和片剂均符合一室模型;滴丸和片剂的主要药代动力学参数具有明显的差别，滴丸在18.03 min时达到血药浓度峰值0.89 μg·ml-1，而片剂出现2个峰值，分别在15 min和75 min，血药浓度峰值为0.41 μg·ml-1和0.365 μg·ml-1;滴丸的auc为46.30 μg·min·ml-1，而片剂的为36.01 μg·min·ml-1，滴丸的相对生物利用度约为片剂的128%。表3 异黄酮苷元滴丸和片剂药代动力学参数
4 讨 论
异黄酮苷元具有苯并吡喃酮结构，有较强的紫外吸收，3种活性成分均难溶于水[9]，影响了其在体内的吸收利用。本实验对自制异黄酮苷元滴丸和片剂的药代动力学特征和生物利用度考察，结果显示滴丸的血浆药物浓度-时间曲线为单峰，而片剂表现为双峰，说明片剂可能在大鼠体内存在肝肠循环;异黄酮苷元滴丸生物利用度为片剂的1.28倍，说明滴丸可显著改善和提高异黄酮苷元在体内吸收和代谢，在一定程度上解决了异黄酮苷元难溶于水，生物利用度低的问题。本文结果为进一步的体内研究提供了依据。
【 参考 文献 】
