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【关键词】光学显微镜;教学
【中图分类号】TG155.21+5.1 【文献标识码】B 【文章编号】2095-3089(2014)20-0248-01
光学显微镜是一种精密的光学仪器。熟练使用显微镜,是高职高专医学检验技术专业学生应掌握的一项基本技能。医学检验技术专业中的临床检验基础、血液学检验、微生物学检验及免疫学检验等课程中均应用到显微镜对各类型标本进行观察。即使在医疗技术飞速发展的今天,检验技术人员的这项基本技能依然不可缺失,可以作为体现检验人员水平和工作能力的重要技能之一。
本人从事医学检验技术专业教学工作多年,在临床检验基础、血液学检验等专业课程的实验教学中,经常要应用到显微镜,通过教学发现学生虽然经过医学基础课程的学习,但对显微镜的基本结构和使用并不熟练。现将这些问题总结出来,并提出一些建议,以提高教学效率。
1.光线的调节
普通光学显微镜光线调节装置主要包括反光镜(非电光源)、聚光器和光圈(也称虹彩光圈)等。[1]只有调节至合适的光线明暗度,才可能看清显微镜下的结构。观察不同的标本,对光线的要求也不相同。一般来说,观察染色的血涂片、骨髓细胞涂片、细菌涂片需要较亮的视野,尤其是使用油镜观察细胞形态;而应用细胞计数板计数细胞、观察尿液等不染色标本,需要较暗的视野。光线调节不当将影响标本的观察。以血液形态学实验为例,很多同学观察的视野光线非常暗,细胞结构很难识别。
2.粗、细准焦螺旋的方向
医学院校开设形态学实验需要大量的标本,这些标本有些是来自生物公司的商品成品,有些来自临床,都十分珍贵。学生使用显微镜不当,经常会出现砸坏标本的现象,一方面给实验室造成经济损失,另一方面,对于一些稀有标本,学生就失去了观察学习的机会。发生这种问题的主要原因是粗、细准焦螺旋使用不恰当。学生们一般从初中生物课中开始接触显微镜,来到医学院校后,医学基础课如医学生物学、组织胚胎学等也需要显微镜,医学检验技术专业课又使用到显微镜,但这些显微镜往往不是一种型号,粗、细准焦螺旋的方向也往往不一致,这就造成学生之前应用显微镜形成习惯,而对新的显微镜不熟悉,调错方向,导致砸片。当然也不排除某些学生根本就不会使用显微镜的情况。为了避免这种现象,我会提示学生,在使用显微镜还没有放标本之前,首先将物镜镜头与载物台调至最近,然后转动粗准焦螺旋,使物镜镜头和载物台逐渐远离,并牢记右手粗准焦螺旋的转动方向,一旦放置标本,记住这个调节方向,不能反向旋转,也就不会出现砸片的情况了。
3.观察位置
血液涂片制备是医学检验技术专业学生的另一项基本技能。制备良好的血涂片应该符合厚薄适宜、头体尾分明、分布均匀、边缘整齐、两侧留有空隙的标准要求。由于各种细胞体积密度不同,在血图片中的分布也不均匀。一般体积较小、密度较大的淋巴细胞在体部较多;体积较大、密度较小的粒细胞和单核细胞在尾部和边缘较多;异常大的细胞易见于尾部。因此,观察血涂片一定要选取细胞分布均匀、染色较好的部位,才能真实的反映细胞的比例、形态,一般选择在体尾交界处或片头至片尾3/4区域。[2]很多学生看到的细胞形态不典型、或大或小、染色或深或浅、细胞过多过少,甚至细胞互相挤压、结构不完整,大都是由于观察位置不当造成的。通过教师纠正,将观察部位调节至体尾交界处,学生发现细胞结构完整、染色清晰、易于辨认,节省了调节显微镜的时间,提高了学习效果。
4.油镜使用
血细胞形态等往往要在油镜下进行观察。要注意调节油镜的顺序,先使用粗准焦螺旋在低倍镜下找到像;然后调节高倍镜,转动细螺旋,方向一般为载物台远离物镜头的方向,旋转半周至一周,一般不会超过两周,避免过度旋转,在高倍镜下找到像,将需要观察的细胞放置在视野正中,滴香柏油;调节油镜,将油镜镜头尽在油中,转动细准焦螺旋,方向同前,旋转一般不到半周会看到像。在这个过程中应注意的是,一玻片有血膜的面朝上,不要把玻片放反,否则调到高倍镜后就会找不到像;二不能把高倍镜头误当做油镜镜头浸入油中,一旦发现,及时清理,避免高倍镜头污损;三有个别的显微镜,调节细准焦螺旋的方向相反,即载物台与物镜头接近的方向,这种情况就要特别注意,轻轻转动即可,不要强行旋转,以免砸坏玻片,必要时应请专业人员进行显微镜的维修;四调节油镜时,近推进尺的手可以左右或上下旋转旋钮,使玻片呈动态,更容易找到像;五观察细胞内部结构时,比如嗜酸性粒细胞的颗粒,也可以通过轻微前后的调节细准焦螺旋螺旋,以便观察颗粒的层次。
5.显微镜维护
正常科学的使用、维护光学显微镜可以有效延长其使用寿命,一定要加以重视。
首先,注意防尘防潮。镜头是光学显微镜的核心,镜头如果粘上灰尘,即影响观察,又会在清理镜头时划伤镜片;如果灰尘落入机械部分,会增加磨损,造成零件失灵;如果长期放置在潮湿的环境中容易发霉及损伤零件。所以显微镜一定要有防尘罩,并放在干燥通风的环境里,远离洗手池等潮湿环境,显微镜箱里应该放置防霉片或者干燥剂,并且定期更换。
其次,及时清理。使用油镜后,要先使用擦镜纸擦拭镜片,然后蘸取二甲苯去掉残留的油渍,再用擦镜纸去除二甲苯;如果发现镜头有污点,通过观察目镜、物镜、标本和聚光器,确定污点的位置,及时清理;如果镜片生霉,可以使用乙醇和乙醚的混合剂擦拭,擦拭前先用毛刷去掉灰尘沙粒,以免划伤镜片;如果镜片起雾,可以放到于燥箱中,使雾滴挥发。[3]
最后,轻拿轻放。显微镜不使用的时候,将物镜镜头调节至八字形。提起显微镜时,一定要一手握住显微镜臂,另一只手托住显微镜底座,避免单手拿显微镜;放置显微镜动作要轻,避免零件震动松卸。
医学检验技术人员即要具有良好的专业技术水平、较高的职业素质,又要求有较强的实际操作能力和踏实、认真、细致、规范的工作习惯。学会熟练使用显微镜将为其打下良好的学习工作基础,提高学习效果,更重要的是培养学生独立思考,分析解决问题的能力,使学生养成良好的实验习惯及实事求是的工作态度。
参考文献
[1]孙宝清,许子华,任立平等.普通光学显微镜在临床检验基础实验教学中的使用注意事项[J].医学信息,2013,26(3):415-416
[2]熊立凡,刘成玉.临床检验基础[M].人民卫生出版社,2008,第4版
关键词:诺贝尔化学奖;显微镜;能力
中图分类号:G632 文献标识码:B 文章编号:1002-7661(2014)19-008-01
十一放假返校,校园里师生热议2014年诺贝尔奖,课余时间到办公室向教师咨询的学生也不少,这是一个难得的教育时机。其中的2014年诺贝尔化学奖与高一生物显微镜内容最贴近, 如何因势引导借力诺贝尔化学奖给学生一次适时的教育,笔者决定以此为契机,草船借箭,以刚学的显微镜内容为载体,升华知识为能力,在高一掀起一次学习生物的小。
在诺贝尔化学奖刚公布时笔者就在生物课堂上给学生布置任务:网上搜集2014年诺贝尔奖的内容,找出与我们高一生物所学知识最密切的奖项,用简要的语言概述该奖项,并写出该奖项给自己带来的体会,小组或班内交流, 奠定了知识升华的基础。最后同学一致认为本年度诺贝尔化学奖与高一生物内容最贴近,并概括如下:斯特凡・黑尔(Stefan W. Hell)、埃里克・贝齐格(Eric Betzig)和威廉・莫尔纳尔(William E. Moerner)共同荣获2014年诺贝尔化学奖,获奖理由是研发了超分辨率荧光显微技术。
一、以观察工具每一次改进催生新的理论成果的史实,引导学生认识科学,增添学习动力
2014年诺贝尔化学奖与显微镜内容相关,这是学生感兴趣的地方,从肉眼看不到到放大300倍左右的简易显微镜到放大1500倍左右的普通光学显微镜,再到放大一百万倍左右的电子显微镜、荧光显微镜,观察工具的改进, 拓宽了人类的视野,也取得了相应的理论成果, 从发现并命名细胞到提出细胞学说再到现代分子生物学,人类的认识水平不断提升,说明对细胞本质的认识是随着显微技术、物理学、化学和生物科学等的发展而不断深入的。推动社会发展和科技进步是每位同学应尽的责任和义务,高中阶段是人生中最宝贵的时光,必须志存高远,热爱科学,学有所成,打下坚实基础。
二、以显微镜的正确使用来设置疑问,培养规范严谨的习惯
在显微镜的教学中通过设计问题串,引导学生多层次多角度分析问题,针对与显微镜相关的知识可以引导学生思考以下问题串:如何判断细胞死活,如何区分原核细胞与真核细胞的异同?结合学生生活实际引导学生思考:在腌制白菜的过程中,白菜形态在宏观上有什么变化?制作装片后,显微镜下观察白菜细胞在微观上液泡大小、颜色有什么变化?能否辨识原生质层,是否与细胞壁脱离?导致此现象发生的内部因素是什么?白菜腌制前和腌制后的细胞结构图有什么变化?制作临时装片对比观察并绘图。通过多角度设置疑问,引导学生在实验操作中动手又动脑,逐步养成实验操作中规范严谨的良好习惯。
三、以荧光显微技术为背景,培养学生查阅资料和对比辨析能力
结合2014年诺贝尔化学奖发明的荧光显微技术问学生:荧光显微镜属于电子显微镜还是光学显微镜?这时可适时的引导学生查找相关资料,通过查阅,学生发现荧光显微镜属于光学显微镜的一种,由于二者激发的波长不同,荧光显微镜与普通光学显微镜在结构和使用方法上也不同。这时再引导学生列表比较光学显微镜与电子显微镜的区别,通过差异点的比较,培养学生的辨析能力。
在用显微镜观察比较细胞中的叶绿体和线粒体异同时,学生尝试从分布、形状、材料选取、是否染色等多方面对比辨析,从宏观上学生有了深刻认识,再引导学生从二者的亚显微结构上比较差异,再对比辨析二者的功能的不同,进而得出结构决定功能的结论。
在学习渗透作用内容时,让学生将动物细胞与成熟的植物细胞发生的渗透作用作对比,比较二者发生渗透作用的相同点和不同点。在比较后有学生发现植物细胞失水或吸水后体积没有明显的变化,对比辨析生成了问题,引导学生再次观察二者细胞结构特点,得出植物细胞壁的伸缩性小的缘故。
四、以简化实验步骤为突破口,培养学生化繁为简的能力
显微镜是高中生物常用仪器,必须熟练使用,要将实验步骤要点化,易懂易记易操作,多次训练后学生动手操作才会规范。学生在操作高倍镜观察标本时常常动作迟缓效果差强人意,主要原因是文字叙述内容多,学生抓不住要点,只有善于化繁为简才能抓住要点。比如高倍镜操作步骤简化为:找物像,移中央,换高倍,调清晰。观察制作的植物细胞临时装片时,操作步骤简化为:擦干净,滴中央,撕表皮,展平,盖缓放,染标本。实验步骤简化为操作要点后,简单扼要,易于理解记忆,规范了操作,提高了学生的动手能力,这些都得益于化繁为简能力的培养和训练。
五、以生物图引导学生读图说图,培养学生的图文转换能力
显微镜是高中生物重要的观察工具,课本上的许多图形都来自光学或电子显微镜。结合显微镜来锻炼学生识图绘图能力,教学会收到事半功倍的效果。如观察各种细胞形态大小、观察植物细胞液泡和叶绿体的流动,让学生绘出细胞的示意图;绘制各种细胞器如叶绿体、线粒体、高尔基体、内质网等的简图,加深学生对不同细胞器结构不同功能不同的理解。通过绘图,微观的图形变得直观生动,生物知识变得鲜活有趣,易于理解,易于接受,学生叙述时也变得轻松生动得心应手。在学习细胞增殖内容时,结合各时期特点和显微镜观察,让学生绘出各时期细胞的示意图,通过图文结合,有丝分裂各时期的特点呼之欲出,知识水到渠成。
2014年诺贝尔化学奖是众多科学家长期合作、不懈研究的科研成果,生物学习中需要培养合作学习能力,学习小组成员之间的紧密协作会带来更高的学习效率;还要学习科学家孜孜不倦,勇于探索,勇于创新的科学精神和科学品质,不断克服学习上的困难,不断超越自己。
研究人员演示了一段约20 h的果蝇胚胎发育视频。在视频中,生物结构逐渐出现,从一小团简单的细胞簇慢慢变长,变成上万个细胞紧紧挤在一起的拉长的小胚胎,然后在新形成的肌肉收缩舒张下开始颤动,此时胚胎仅有0.5 mm长。此外,论文中还有一段果蝇胚胎中枢神经系统完整的发育视频,跟踪了单个细胞发育出感觉器官、脑叶及其他结构的过程,由于分辨力足够高,还能看到神经轴突尖端迅速变化。
发明该技术的珍妮莉娅法姆研究学院的菲利普・凯勒说,要理解一个单细胞怎样变成了复杂的组织,真实看到这一过程非常重要。传统光学显微镜速度太慢,无法跟踪细胞在生命初期的迅速变化,也容易破坏一个活胚胎,只能通过把多阶段、多组织的照片拼在一起,才能推测发生的变化,但“细胞分裂重组每次都不一样,这种观察方法可能会产生误导”。
新技术基于一种高速非侵入式光学显微镜,称为SiMView光层显微镜,能从4个角度同时拍摄图像,不仅能跟踪细胞运动,还能对发展过程进行数量分析。该显微镜由凯勒小组和德国的欧洲分子生物实验室合作开发,攻克了传统光学显微镜的两个难题:一是光源对样本造成的伤害,二是对海量数据进行处理分析。
大部分光源都会伤害细胞,使其中的荧光标记消失。研究小组设计的照明技术是一种激光扫描层,一次照射样本极薄的一层以减少伤害,由探测仪记录下被照亮的部分。光层来自两个相反方向,并用两个探测仪来探测荧光,照明与探测相结合,提供了4个不同的观察角度。不仅能避免由于光散射而造成的模糊,还将图像采集速度提高了50倍。
要让照亮样本和探测荧光在时间、位置上协调一致,时机吻合极为重要,光层交叉通过会造成图像模糊,发光间隔仅几毫秒。为了保持精度,SiMView还安装了实时调节的电子系统。
【关键词】信息技术;数码生物显微镜;实验教学
随着社会经济迅速发展,各级政府对教育的投入也在不断增加,办学条件有了明显改善。目前,许多中学实验室里都添置了一些现代化的实验仪器,然而这些仪器大多数是长期摆放在橱窗里,只是在有人参观、考察时才得以体现其“价值”。这些价值不菲的仪器有着强大的功能,如果利用的好,能很好地弥补传统实验教学的不足,提高实验教学的效果。本文以数码生物显微镜在高中生物实验教学中的运用为例,谈谈在信息技术环境下,如何最大限度地发挥现代化实验仪器的作用,从而实现信息技术与中学实验课程的有效整合。
一、数码生物显微镜简介
数码生物显微镜是由生物显微镜主机+显微镜摄像头+数码显微镜接口+计算机组合而成的。数码生物显微镜主要用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。在显微镜中看到的实物图像通过数模转换,使其成像在计算机上。数码生物显微镜是将精锐的光学显微镜技术、先进的光电转换技术、液晶屏幕技术完美地结合在一起而开发研制成功的一种高科技产品。
二、数码生物显微镜在高中生物实验教学中的运用
1.观察多种多样的细胞
用显微镜观察细胞的结构是中学阶段需要掌握的重要实验操作技能。在实际教学中,学生的积极性很高,但由于动手能力较差,再加上普通的光学显微镜成像质量不高,最终学生观察的图像往往是模糊不清。数码生物显微镜通过“光电图像转换装置”获得的图像可达到35万/130万/300万像素,图像清晰、线条细腻、色彩逼真,更便于学生观察。
数码生物显微镜不仅能更清楚地观察物体,还具有十字定位测量功能。十字线还可随观察物体颜色的变换而更改线条的颜色,这不仅便于教师对学生的指导,还可对微观物体大小进行测量,进而实现微观物体量化呈现。
2.探究培养液中酵母菌种群数量的变化
高中生物学课程标准“稳态与环境”模块将“探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化”列为活动建议。人教版和苏教版教材都安排了这一活动,但是在一些细节问题上,如酵母菌的抽样检测中的观察和计数,两个版本教材中的描述都不太具体,且缺乏直观的图解。如果利用好数码生物显微镜,就可以为学生增加一些直观的素材。教师可以在班级同学分组做这个实验前,亲自带领几位实验技能较好的同学先做一下。实验过程中每隔24小时利用血球计数板和数码生物显微镜进行抽样检测,调查酵母菌的种群数量。每次调查时在显微镜下找到一个理想的目标位置后进行拍摄,并对拍摄图片进行储存及处理,这不仅可以作为实验的数据进行对比,还能永久的保存下来作为一份有价值的教学资源,将来需要时可很方便地实现再现与共享。
3.观察黑藻细胞的细胞质流动
活细胞中的细胞质处于不断流动的状态,观察这一生命现象,可让学生认识到生命是运动的。观察细胞质的流动常以新鲜的黑藻为材料,用细胞质基质中的叶绿体的运动作为标志。在实验课上,我们可以用普通的光学显微镜观察黑藻的细胞质流动。然而,实际教学中发现,效果往往不太理想,很多同学观察不到细胞质流动,特别是阴天、低温时做实验。针对这种情况,教师可以事先准备典型的示范装片,使用数码生物显微镜的录像功能来弥补。这种教师演示的视频资源可以重复使用,既可以让学生能看到细胞质快速流动的真实状况,也减轻了教师在不同教学班重复演示的负担。教师还可以增加录制不同条件下黑藻细胞质流动视频让学生观看、比较。这一做法,可以让学生认识到细胞质流动不仅是客观存在的,流动速度还是可变的。
4.构建互动式实验教学系统
传统生物实验教学中存在的一些问题,大致有以下几点:师生之间、同学之间缺乏交流与互动;现有的光学显微镜功能单一,教学内容局限性大;教师的指导都是个别的,也无法同时观察到全班同学的实验进展与现象等。
将普通生物实验室(或机房、语音室)重新改造,进行网络布线,把计算机、数码生物显微镜、光电图像转换装置等设备进行组网。然后,在教师机、学生机上安装各种应用软件(显微图像处理分析软件、互动网络教学软件等) 即可构建起互动式实验教学系统。教师只需通过自己的教师电脑就可以查看全班学生的显微镜画面,学生也可以通过自己的学生电脑观察老师的演示操作,这使教学更直观、更方便。师生之间借助多向多媒体互动系统进行随意交流,教师与学生实现全面互动,使沟通更快捷、有效。如配上投影机,增加一些多媒体中控设备,就可以实现多媒体教学。
【关键词】IQ200全自动尿沉渣分析仪;显微镜;尿有形成分;差异
DOI:10.3760/cma.j.issn 1673-8799.2010.06.146
作者单位:030012山西省人民医院检验科(刘锋); 青海省人民医院检验科(刘兰)
尿液沉渣检测方法从手工分析到半自动分析仪,目前已经发展为全自动尿沉渣分析仪,IQ200全自动尿沉渣分析仪是一套真正能对临床尿液标本进行自动吸样处理、对尿液中的各种有形成分(原称尿沉渣)进行自动成像并定量分析报告的系统[1]。为了能够进一步了解IQ200全自动尿沉渣分析仪与显微镜检测有形成分中的差异,现对此进行了深入的研究,报告如下。
1 临床材料
1.1 一般资料 2010年1月至2010年3月本院门诊及住院送检用一次性洁净专用尿液采样管收集清晨中段尿液800份,其中男510例,女290例,年龄2个月~85岁,平均48.5岁。
1.2 仪器 IQ200全自动尿沉渣分析仪及配套试剂(美国Iris公司),显微镜一台,KORA板,水平离心机。
1.3 检查方法 专用尿液采样管收集清晨中断尿液2管。均为5 ml。其中一管用IQ200全自动尿沉渣分析仪进行分析,第2管作显微镜复查时用,所有标本检测均在采样后2 h内完成。
1.3.1 IQ200全自动尿沉渣分析仪检测 工作前对IQ 200全自动尿沉渣分析仪进行Focus调焦并同时运行阴性、阳性质控物测试(仪器配套),确保在控后进行标本的检测。仪器分析严格按操作说明书进行。
1.3.2 显微镜检测 根据全国临床检验操作规程[2]:取新鲜尿液放入专用离心管,水平式离心机400 g离心5 min 弃上清液至1 ml,取0.2 ml注入KORA板用显微镜准确计数两次取平均值并记录。
1.4 参考值范围 IQ200全自动尿沉渣分析仪参考值:RBC:0~12/μl,WBC:0~12/μl,透明管型:0~3/μl,高于此范围为阳性。显微镜检查按《全国临床检验操作规程》进行RBC>3/HP,WBC>5/HP为阳性标本。阳性结果以显微镜法为标准,即IQ200判为阳性,而镜检为阴性的则认为是假阳性。假阳性率=假阳性例/IQ200阳性例
2 结果
800份尿液经IQ200全自动尿沉渣分析仪检测及显微镜检测,并进行假阳性率计算,具体见表1。
表1
两种方法检测结果
方法红细胞白细胞管型
IQ200阳性例18629145
阳性率(%)23.2536.375.62
显微镜阳性例15223226
阳性率(%)19.0029.003.25
假阳性例345919
假阳性率(%)18.2720.2742.22
3 讨论
尿液沉渣检测是临床检验中最常用的检验项目之一,尿液沉渣的检测目的是为了识别尿液中的细胞、管型、结晶、细菌、寄生虫等各种病理成分,对泌尿系统疾病的辅助诊断、定位、鉴别及预后有重要意义。
IQ200全自动尿沉渣分析仪是组合了流式细胞分析技术和成像技术两种方法[3]。流式细胞分析孔可以将尿液有形成分聚集于物镜的聚焦平面上,尿液有形成分在通过该平面时被拍摄像通过APR软件,根据大小、形态、对比度、质地可将尿液中有形成分,分为以下几类:白细胞、白细胞团、红细胞、鳞状上皮细胞、非鳞状上皮细胞、透明管型、未分类管型、结晶、细菌、芽殖酵母菌、、黏液丝。通过图像数据和扫描量,可计算出各种成分的浓度,并能在荧光屏上显示各种成分的图像[4]。具有快速、简便、复检率较低、灵敏度高、精密度高、重复性好、并能进行动态监控等优点。
而普通的光学显微镜检测在标准操作规程下能够有效的去除人为的操作误差,临床检测的结果误差小,可以有效的避免出现假阳性[5]。但光学显微镜检测受到临床上取样量、镜检液体厚度、镜检视野数、操作繁琐、耗时、检查效率低下等缺点。
IQ200的系统特点是不仅可以进行自动识别,而且具有修饰功能,可以直观地观察到有形成分,并对可疑成分进行人工判定,从而减少仪器判定误差,提高了检测准确性,降低了,复检率。当IQ200检测尿液病理成分呈阳性时,再进行尿沉渣显微镜检查具有重要意义,不仅可以及时发现和纠正IQ200尿沉渣分析仪的错误报告,还可进一步确定病理成分的性质和数量。IQ200全自动尿沉渣分析和显微镜检查相互结合的重要性,只有两者密切结合,才能既快速义准确地为临床疾病的诊断和鉴别诊断[5]。
通过两种方法进行检测尿沉渣检测中,IQ200全自动尿沉渣分析存在这假阳性结果,在临床应用中,对IQ200全自动尿沉渣分析阳性病例进行必要的光学显微镜检测是非常必要的,可以避免假阳性,又能够提高临床检查效率,有效的降低误诊和漏诊。
参考文献
[1] 顾可梁.尿有形成分的识别与检查方法的选择.中华检验医学杂志,2005,28(6):572-575.
[2] 叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程.东南大学出版社,1997:133.
[3] 玲,张延京,赵亚静,等.IQ200全自动尿沉渣分析仪的应用评价.医疗卫生装备,2008,29(2):82-85.
关键词:定义 实验 应用
一、凸透镜的定义
课堂上首先引入凸透镜的定义:凸透镜是根据光的折射原理制成的。凸透镜是中央较厚,边缘较薄的透镜。凸透镜分为双凸、平凸和凹凸(或正弯月形)等形式,凸透镜有会聚作用故又称聚光透镜,较厚的凸透镜则有望远、会聚等作用,这与透镜的厚度有关。(直接让学生观察到凸透镜,可以让学生对凸透镜有初步的认识)
二、通过实验方式引入凸透镜成像理论
(一)准备物品
蜡烛、光具座、火柴、凸透镜(焦距 f 已知)、光屏依次放在光具座上,使它们的中心大致在一条直线上。
(二)实验步骤
①观察凸透镜焦距,将凸透镜固定在光具座标尺中央,调节蜡烛到凸透镜的距离,从透镜的位置开始在左右两边的标尺上用粉笔标出等于焦距(字母f)和2倍焦距(2f)的位置。②点燃蜡烛,调整它们的高度,使烛焰、凸透镜、光屏的中心大致在同一高度。③把蜡烛放在离凸透镜尽量远的位置上,调整光屏到透镜的距离(字母u),使烛焰在屏上成一个清晰的像,观察像的大小、正立还是倒立,测出蜡烛与凸透镜、凸透镜与光屏间的距离(字母v)。把数据记录在表格中。④继续把蜡烛向凸透镜靠近,观察像的变化是放大还是缩小,是正立还是倒立,蜡烛与凸透镜、凸透镜与光屏的距离测出,将数据记录在表格中,特别是当蜡烛到凸透镜的距离等于一倍焦距时如何变化。⑤当移动蜡烛,使其到凸透镜的距离小于一倍焦距,无论怎样调节光屏,都不能在光屏上得到蜡烛的像,这时如果透过凸透镜,会在蜡烛的同侧,发现有一正立、放大的像,同时记下像的性质。
(三)实验结果
对凸透镜成像这一实验结果以分类方式进行进一步分析,从而引入凸透镜成像规律,给学生一个豁然开朗的收获:①实像与虚像的区别:在光学中,由实际光线会聚成的像称之为实像,能用光屏承接;反之,则为虚像。②当物距在一倍焦距以内时,得到正立、放大的虚像;在一倍焦距到二倍焦距之间时得到倒立、放大的实像;在二倍焦距以外时,得到倒立、缩小的实像。
三、提出生活中凸透镜的应用
1.放大镜
放大镜就是一个焦距短的凸透镜。从它成像的原理分析,是一个正立放大的像,显然这是当物距小于焦距时,凸透镜能成正立放大的虚像。当凸透镜成虚像时,物距变大,像也变大,像距也变大了。
2.显微镜
显微镜是由一个透镜或几个透镜的组合构成的一种光学仪器,是人类进入原子时代的标志。主要用于放大微小物体成为人的肉眼所能看到的仪器。显微镜分光学显微镜和电子显微镜,光学显微镜是用可见光照射被研究的物体,利用光学透镜使光线偏折而成像的;电子显微镜则是让电子束穿过被研究的物体,利用电磁透镜,使电子束偏转而成像的。电子显微镜的放大率比光学显微镜的放大率高一千倍左右。电子显微镜能观察物质的精细结构,可以拍摄出物质的原子结构图,在现代科学技术中有重要的应用。
3.望远镜
望远镜是一种利用凹透镜和凸透镜观测遥远物体的光学仪器。利用通过透镜的光线折射或光线被凹镜反射使之进入小孔并会聚成像,再经过一个放大目镜而被看到。望远镜的第一个作用是放大远处物体的张角,使人眼能看清角距更小的细节。望远镜第二个作用是把物镜收集到的比瞳孔直径(最大8毫米)粗得多的光束,送入人眼,使观测者能看到原来看不到的暗弱物体。
4.照相机
照相机是利用凸透镜到物体的距离大于2倍焦距时,成倒立、缩小的像这一原理制作的。照相机的镜头相当于一个凸透镜,胶卷相当于光屏,为了使远近不同的景物在胶片上产生清晰的像,需要旋转镜头上的调焦环,调节镜头到胶片的距离,拍摄近的景物时,镜头往前伸,离胶片远一些;拍摄远的景物,镜头往后缩,离胶片近一些,调焦环上刻有数字,表示出拍摄的景物到镜头的距离。
5.眼球
眼球中的角膜和晶状体的共同作用,相当于一个“凸透镜”,视网膜相当于照相机的底片。从物体发出的光线经过人眼的凸透镜在视网膜上形成倒立、缩小的实像,分布在视网膜上的视神经细胞受到光的刺激,把这个信号传输给大脑,人就可以看到这个物体了。这就是眼睛成像的基本原理。
四、总结
物理作为一门以实验为基础的自然学科,分阶段掌握凸透镜成像规律可以提高学生物理信息进行加工处理的能力,真实的实验结果和数据的记录使一些枯燥的理论生动而形象地显示出来,大大增强同学们对抽象事物和过程的理解与感受,促使我们教学过程更具有科学性和合理性,用实验证实理论,吸引同学们的注意力,使同学们在课堂上接受和掌握更多的知识,提高物理教学效率。
参考文献:
关键词:电子显微学;课程改革;材料科学
中图分类号:G642.0 文献标志码:A 文章编号:1674-9324(2016)41-0077-02
继光学显微镜发明之后,电子显微镜为人类打开了研究材料微观世界的第二扇大门,将人眼的分辨能力从0.2mm提高到亚埃量级,成为一种进行材料形貌、结构、成分以及电子结构分析的综合性分析手段。电子显微镜对材料的发展起到了巨大的推动作用,例如透射电子显微镜的三种分析技术:电子衍射衬度像、电子衍射以及高分辨成像技术分别在位错的证实、准晶的发现以及纳米碳管的发现方面发挥了无可替代的作用,其中准晶的发现获得了2014年的诺贝尔化学奖。目前,电子显微学的应用已经拓展到除材料以外的其他领域,如物理、化学、生物等科学领域,并且,伴随着球差校正电子显微镜的出现以及原位(高低温、环境气氛、电学性能测量)样品台的发展,结合X射线能谱分析以及电子能量损失谱分析,电子显微学在揭示材料的微观结构及其演化方面展示出其独特的高空间分辨分析能力。目前,几乎所有的理工科高校都有透射电子显微镜并且开设了电子显微学相关课程,然而,作为一种相对精密昂贵的设备,不可能对所有需要运用电子显微学分析的学生都进行仪器操作培训,而由于缺乏实践操作这一中间环节,学生在基础理论知识获取与透射电子显微镜结果分析方面之间存在断层,不能很好的将所学理论知识灵活运用进行结果分析。本文作者结合多年透射电子显微镜操作经验以及电子显微学课程的实践教学进行了思考和总结,对电子显微学课程的教学内容、教学方法以及考核方式进行初步的改革和探索,以期获得更好的教学效果。
一、教学内容的改革
在选修《电子显微学》课程之前,学生应该先修《材料科学基础》、《晶体学基础》等相关课程,对材料的晶体学结构有比较好的了解,熟知描述晶体结构的布拉格点阵以及倒易点阵。作为研究生选修课,由于学生的晶体学基础各异,为保证良好的教学效果,需要对布拉格点阵以及倒易点阵进行系统的知识回顾,以便于学生更好的掌握后续授课内容。
以笔者所在的北京航空航天大学材料学院为例,《电子显微学》课程以往的授课内容涵盖了电子光学基础、透射电子显微镜的构造、样品制备、电子衍射、衍衬像、高分辨成像,其中授课课时过于偏重电子衍射以及衍衬像,均大于8个学时,而高分辨成像章节课时仅有2个学时,课时分配不太合理。其次,伴随球差校正电镜的发展,一些新的技术逐渐发展和完善起来,并在材料的原子尺度结构表征方面初显其独特的魅力。如利用物镜球差校正的透射电子显微镜,贾春林教授提出的负球差系数成像技术(negative spherical-aberration imaging(NCSI))可以进行轻原子尤其是氧原子的探测;而聚光镜球差校正的扫描透射电子显微镜中,高角度环形暗场像(high angle annular dark field(HAADF))与高探测效率能谱仪的结合已经可以同时进行材料原子尺度HAADF图像以及成分的分析,同时,相较于高分辨成像,HAADF成像技术由于图像强度不受实验条件如样品厚度、欠焦等条件的影响,更容易解释而受到越来越多的关注;而环形明场扫描透射图像可实现轻原子H、Li等元素的探测以及对轻重原子同时成像,在揭示新型能源材料如锂离子电池的充放电机制方面发挥了重要作用。另外,聚焦离子束制样技术的发展,使得可以对块体材料进行精确定位,并且针对微米尺度区域进行透射电镜样品制备,从而解决了传统制样方法定位减薄难、单次制样成功率低以及破坏性制样的缺陷,尤其适用于利用原位透射电子显微镜进行材料微观结构演化研究。因此,有必要对《电子显微学》的教学内容进行更新和调整,加入这些新技术的成像原理以及案例分析,让学生充分了解电子显微学领域最新的发展,从而选用恰当的成像技术解决其在科学研究中遇到的具体科学问题。
二、教学方法的改革
关键词:工程材料;工程结构;失效;分析技术
各个工业部门使用的不同种类的材料和构件在外力环境影响下,经常被磨损和腐蚀,导致断裂变形,最后失效。材料和构件的失效给国民经济带来了巨大的损失,还会对人们的生命安全造成威胁。失效分析有助于促进新材料、新工艺的发展,为了培养这方面的人才,如今失效分析已成为一门新的学科,设计化学、机械和力学领域。
1.工程材料与结构的失效
失效就是失去效力。工程中,零部件失去原有设计所规定的功能称为失效。失效包括完全丧失原定功能;功能降低和有严重损伤或隐患,继续使用会失去可靠性及安全性。机械零件的失效主要是由于整体断裂,过大的残余变形,零件的表面破坏,破坏正常的工作条件而引起的失效。机械产品的零件或部件处于下列三种状态之一时就可定义为失效:完全不能工作;仍然可以工作,但已不能令人满意地实现预期的功能;受到严重损伤不能可靠和安全地继续使用,必须立即从产品或装备拆下来进行修理或更换。
失效的原因可归结为以下几个方面:(1)用法不当,构件在非设计条件下运行。这是失效的一个普遍原因。(2)组装错误及不恰当的维护。组装错误包含这些因素,如少了一个螺栓或采用不正确的湘滑剂;设备维护的范围从油漆表面到清理及,对此不重视会导致失效;有的失效是因为系统中其他一些零件工作不正常而引起的,这样使此构件处于非设计的条件下导致失效。(3)设计错误。这是失效的很普遍的一个原因。可根据设计程序列出以下几条:a.零件的尺寸与形状,些通常决定于应力分析或几何约束;b.材料,这关系到化学成分及为获得所要求的性能而必需的处理方法(例如热处理);性能,这是有关应力分析的性能,但是其它性能如抗腐蚀性能也必须加以考虑。
2.失效分析技术
2.1痕迹分析技术
痕迹分析技术是比较常用的方法之一。痕迹分为机械损伤痕迹、腐蚀和污染痕迹、热损伤痕迹。机械损伤痕迹又分为,压入性机械损伤痕迹、撞击性机械损伤痕迹、滑动机械损伤痕迹和切入性机械损伤痕迹。实际中构件的实效往往是这几种痕迹组合起来的。通过痕迹分析,不仅可对事故和失效的发生、发展过程做出判断,而且可为事故和失效分析结论提供可靠的佐证和依据。
2.2裂纹分析技术
裂纹是材料表面或内部完整性或连续性被破坏的一种现象,是断裂的前期,断裂则是裂纹发展的结果。裂纹在方向上分为:纵裂纹、横裂纹等定向裂纹。裂纹分析包括裂纹的色谱分析、光谱分析、热分析、质朴分析。色谱分析:是一种分离和分析方法,在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。光谱分析:是根据物质的光谱来鉴别物质及确定它的化学组成和相对含量的方法。热分析:是指用热力学参数或物理参数随温度变化的关系进行分析的方法。质谱分析:是指利用质谱或质谱联用仪器对样品进行质谱分析,以得到样品不同的质谱图谱表征数据和理化性能,实现样品的定性定量分析和数据表征,满足各科研院所和企业对质谱仪器分析的需求。
2.3断口分析技术
断口是物体受力后,按不同方向断裂。破裂面形成凹凸不停的形状称为断口。由于断口真实地记录了裂纹由萌生、扩展直至失稳断裂全过程的各种与断裂有关的信息。因此,断口上的各种断裂信息是断裂力学、断裂化学和断裂物理等诸多内外因素综合作用的结果,对断口进行定性和定量分析,可为断裂失效模式的确定提供有力依据,为断裂失效原因的诊断提供线索。显微组织和断口表面结构的特征在材料失效分析中起着突出的作用。普遍使用的是光学显微镜、扫描电子显微镜和透射电子显微镜。光学显微镜是利用光学原理,把微小物体放大,以便人们观察。扫描电子显微镜是利用电子和物质的相互作用,获取样品的物理和化学性质信息。透射电子显微镜可以看到光学显微镜不能看清的细微结构,分辨力可达0.2nm。
3.失效分析思路
失效分析思路是指导失效分析全过程的思维路线,是在思想中以机械失效的规律为理论依据,把通过调查、观察和实验获得的失效信息分别加以考察,然后有机结合起来作为一个统一整体综合考察,以获取的客观事实为证据,全面应用推理的方法,来判断失效事件的失效模式,并推断失效原因。
3.1逐个因素排除的思路
失效事件的原因包括操作人员、机械设备系统、材料、制造工艺、环境和管理6个方面。如果失效已确定纯属机械问题,则以设备制造全过程为一系统进行分析,即对机械所有的制作工序逐个进行分析,逐个因素排除。加工缺陷、铸造缺陷、焊接缺陷、热处理不当、再加工缺陷、装配检验中的问题、使用和维护不当、环境损伤等11个方面,含有可能引起机械失效的121个主要因素。上述逐个因素排除的思路,面面俱到,不放过任何一个可疑点。此思路是早期安全工作中惯用的事故检查思路,一般不宜采用这种方法,当找不到任何确切线索时,这种方法是一种比较好的办法。
3.2残骸分析法
残骸分析法是从物理、化学的角度对失效零件进行分析的方法。以失效抗力指标为线索的失效分析思路,关键是在搞清楚零件服役条件的基础上,通过残骸的断口分析和其它理化分析,找到造成失效的主要失效抗力指标,并进一步研究这一主要失效抗力指标与材料成分、组织和状态的关系。通过材料工艺变革,提高这一主要的失效抗力指标,最后进行机械的台架模拟试验或直接进行使用考验,达到预防失效的目的。值得指出的是,在不同的服役条件下,要求构件或材料具有不同的失效抗力指标的实质是要求其强度与塑性、韧性之间应有合理的配合。因此,研究构件或材料的强度、塑性等基本性能及它们之间的合理配合与具体服役条件之间的关系就是这一思路的核心。而进一步研究失效抗力指标与材料或零件的成分、组织、状态之间的关系是提高其失效抗力的有效途径。
3.3失效树分析法
失效树分析法是一种逻辑分析方法。失效树分析法是:在系统设计过程中,通过对可能造成系统失效的各种因素进行分析,画出逻辑框图即失效树,从而确定系统失效原因的各种可能的组合方式或发生概率,以计算系统失效概率,采取相应的纠正措施,以提高系统可靠性的一种设计分析方法。失效树分析法简称FTA。FTA法具有很大的灵活性,即不是局限于对系统可靠性作一般的分析,而且可以分析系统的各种失效状态。不仅可分析某些元部件失效对系统的影响,还可以对导致这些元部件失效的特殊原因进行分析。
总 结:
我国工程建设在高温、高压和高负荷的恶劣环境中发展已成为现代建筑业的重要标志。而工程材料与结构的失效常常会造成严重的损失和人员伤亡,通过失效分析可以起到预防失效的作用,对保障经济建设具有重要意义。
参考文献:
[1]刘高航,刘光明.工程材料与结构的失效及失效分析[J].失效分析与预防,2006(01)
[2]李晓东,李旭东,张赋.工程材料叠层结构失效行为的跨尺度分析[J].甘肃科技,2011(12)
【关键词】 海藻酸钠;淀粉; 微球;盐酸小檗碱
ChinaAbstract:ObjectiveTo prepare blend microspheres natural polymers alginate and starch and to study their controlled release performance on berberine hydrochloride. MethodsA modified emulsification/gelation method was applied to prepare blend microspheres. Shape of those microspheres was observed with optical microscope. Drug distribution inside the Microspheres was observed with CLSM. Encapsulation efficiency was determined by UV-spectrophotometer. Drug release performance in two medium was also tested. ResultsMicrospheres appeared to be spherical and well dispersed in water. Encapsulation efficiency was higher than 80%. Microspheres was found to have a certain effect on the controlled release of berberine hydrochloride. ConclusionBlend microspheres with good performance were prepared with alginate and starch.
Key words: Alginate; Starch; Microsphere; Berberine hydrochloride
盐酸小檗碱(berberine hydrochloride)又称盐酸黄连素,是一种异喹啉生物碱,其药理作用十分广泛,如抗菌、抗癌、抗炎、降血糖浓度、降胆固醇、舒张血管[1]等。海藻酸钠和淀粉都属于天然高分子材料,和人体相容性好,并具有来源广泛、价格便宜的优势。海藻酸钠可以被多价阳离子(如 Ca2+)交联形成“蛋格”结构[2]而瞬时凝胶化,反应条件温和,因而作为原料常被用来制备载药微球。复合微球通常被认为比单种材料制备的微球更具优势[3],由于淀粉和海藻酸钠结构类似,相容性好,用它们作为材料来制备复合载药微球,可以在保证对人体无毒害的条件下,实现药物缓控释,减少服药次数,降低药物的毒副作用,提高药物的稳定性和生物利用度。
1 材料与仪器
1.1 材料
盐酸小檗碱(98%)购自西安飞达生物技术有限公司;海藻酸钠为化学纯(高粘度)购自广东西陇化工厂;可溶性淀粉(分析纯)购自国药化学试剂公司;其余试剂均为分析纯。
1.2 仪器
94-2恒温磁力搅拌器(上海梅颖浦仪器仪表制造有限公司)。Tu-1900型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限公司)。CFM-300荧光生物显微镜(上海长方光学仪器厂)。MRC1024型激光共聚焦显微镜(英国Bio-Rad公司)。
2 方法与结果
2.1 海藻酸钠/淀粉复合微球的制备
采用改进的乳化凝胶法,首先配置1.5%海藻酸钠(W/V)、1.5%淀粉(W/V)和1%盐酸小檗碱的20 ml混合水溶液,然后加入60 ml液体石蜡作为油相,2 ml司盘-80和吐温-80(9:1,V/V)作为乳化剂,搅拌形成乳液A。同样,配置6 ml质量浓度为8%的CaCl2溶液,加入20 ml液体石蜡和0.5 ml乳化剂后再加入2 ml乙醇搅拌得到乳液B。光学显微镜下观察均形成稳定乳液后将乳液B加入乳液A中进行交联反应。10 min后停止反应,离心分离得到微球,依次用醋酸乙酯、无水乙醇、去离子水进行洗涤,室温放置干燥。不加入盐酸小檗碱而其他条件相同以制备空白微球。
2.2 标准曲线的测定
2.2.1 测定吸收波长的选取
分别精密配置20 μg/ml的盐酸小檗碱水溶液和20 μg/ml的空白微球溶液,用紫外分光光度计在波长为200~700 nm处进行扫描,得到吸收曲线(见图1),盐酸小檗碱分别在波长为227,265和345 nm处有3个大的吸收峰,空白微球在波长超过330 nm后基本无吸收,为避免空白微球对药物浓度测定的影响,选取345 nm作为测定吸收波长。
2.2.2 标准曲线的绘制
精密称取5 mg盐酸小檗碱溶于去离子水中并定容于100 ml容量瓶中。分别取2.0,3.0,4.0,5.0,6.0和8.0 ml置于10 ml容量瓶中,用去离子水稀释至刻度,在345nm波长处测定盐酸小檗碱的吸光度,绘制吸光度对浓度(μg·ml-1)的标准曲线,并求得回归方程为:Y=0.065 65X-0.022 54,r=0.999 8,表明盐酸小檗碱在10~40 μg·ml-1的浓度范围内线性关系良好。
2.3 微球包封率的测定和计算
取载药微球5 mg,用1%(W/V)EDTA溶液定容于100 ml容量瓶中。置于恒温振荡器中,在(37±0.5)℃下以150 r/min的转速振荡30 min后用移液管取5 ml上述溶液,在345 nm处采用紫外分光光度计测定吸光度,根据标准曲线得到浓度,计算药物含量,通过下式计算出包封率为82.1%。
包封率(%)=(包裹于微球中的盐酸小檗碱含量 /投药量)×100%
2.4 微球在不同介质中的药物释放曲线分别含有500 ml pH7.4磷酸盐缓冲液(0.01 mol·l-1)和500 ml pH1.2盐酸溶液的两个600 ml烧杯置于恒温水浴振荡器中,在(37±0.5)℃以100 r/min的转速振荡。依次加入20 mg载药微球并记录时间,在设定的间隔时间点用移液管取出5 ml介质并随即加入等量的同种介质,用紫外分光光度计测定浓度,浓度换算成药物含量并对时间做曲线。见图2。
2.5 微球形态及药物分布
2.5.1 光学显微镜观察微球形态制备好的微球分散于去离子水中,超声处理2 min后,取1滴至载玻片上,盖上盖玻片,用荧光生物显微镜观察并拍照(见图3)。微球形态圆整,分散性好。
2.5.2 激光共聚焦显微镜观察药物分布由于盐酸小檗碱有荧光性,而海藻酸钠和淀粉都没有荧光性,因而可以在激光共聚焦显微镜下观察盐酸小檗碱在复合微球内的分布状况,制备好的微球分散于去离子水中,超声1 min后取一滴置于盖玻片上,采用激发波长为488 nm的氩激发器,于激光共聚焦显微镜下观察,并拍照(见图4),药物被很好地包裹在复合微球内,且分布均匀。
3 讨论
由于海藻酸钠和钙离子的交联反应迅速剧烈,制备过程中如果直接向乳液A中滴加CaCl2溶液容易造成微球相互聚集[4],双乳液可以有效地避免这一状况。
由于盐酸小檗碱水溶性差,因此释放介质的量大,可以增加药物释放量。
药物在pH 7.4磷酸盐缓冲液和pH 1.2盐酸溶液中释放速率差异大,这是由于一方面海藻酸钠在pH>3时带负电荷,同种电荷的相互排斥作用使得海藻酸钠呈舒展态,微球的溶胀度较大,而当pH
盐酸小檗碱在复合微球内的包封率可达到80%以上,且分布均匀,微球对药物具有缓控释功能。
参考文献
1]Ko WH, Yao XQ, Lau CW, et al. Vasorelaxant and antiproliferative effects of berberine [J]. Eur J Pharmacol, 2000, 399 (2~3): 187.
[2]Sikorski P, Mo F, Skjak-Brak G, et al. Evidence for Egg-Box-Compatible Interactions in Calcium?Alginate Gels from Fiber X-ray Diffraction [J]. Biomacromolecules, 2007, 8 (7): 2098.
[3]Babu VR, Sairam M, HosamaniK M, et al. Preparation of sodium alginate-methylcellulose blend microspheres for controlled release of nifedipine[J]. Carbohydr Polym, 2007, 69(2): 241.