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目前各种呼吸睡眠障碍性疾病日益增多,最常见的呼吸睡眠障碍性疾病如失眠、睡眠呼吸暂停综合征在我国患病率很高[1]。睡眠障碍疾病能对身体多个系统造成损害,能导致障碍、肾功能损害、心脑血管疾病、神经精神疾病。准确地诊断呼吸睡眠疾病及其类型并及时采取相应治疗措施就十分重要,多导睡眠仪(PSG)能够准确地诊断睡眠呼吸障碍疾病,并确定其类型。通过多导睡眠仪监测确诊睡眠呼吸障碍疾病,为医生确诊提供了充分的临床依据,进而采取相应的治疗方案,为提高人民的生活质量和延长寿命提供科学保障。我科室于2009年4月至2010年7月应用PSG对196例疑有睡眠障碍疾病患者进行了整夜睡眠或白天多次小睡的监测,报告如下。
1资料与方法
1.1临床资料:196例疑有睡眠障碍疾病患者,男性170例,女性26例,年龄4~70岁,均采用德国生产的EMBLAS4000多导睡眠监测仪(PSG),进行整夜睡眠监测或白天多次小睡监测。
1.2方法:在监测专用房内作PSG检查,连续监测7h。监测脑电、眼动、口鼻气流、鼾声、心电、胸腹式呼吸、血氧饱和度及等,通过微型记录仪进行实时记录、输入电脑进行处理、分析,给出结果。注意事项:做检测前沐浴、理发,监测当日午后禁饮咖啡及饮料,不得用镇静剂。所安装的电极要粘牢,不易脱落,胸腹运动带与胸壁相贴得体,松紧适度。
2结果
196例疑似睡眠呼吸障碍疾病中阻塞性呼吸睡眠暂停综合征160例(81.6%),失眠患者26例,发作性睡病4例,不安腿综合征[2]2例,反复发作性过度睡眠1例,癫痫3例(通过扩展PSG脑电导联发现癫痫棘波),其中阻塞性呼吸睡眠暂停综合征中阻塞型低通气119例(74.4%),混合型30例(18.8%),中枢性11例(6.9%)。在睡眠呼吸障碍疾病中阻塞性睡眠暂停综合征占绝大多数,而且对身体危害最大,在这里对此病的监测结果做详细分析,结果表明阻塞性睡眠暂停综合征存在较大程度的血氧饱和度下降(中重度占83.1%)和呼吸紊乱(中重度占89.4%),血氧饱和度下降分为轻度、中度、重度,呼吸紊乱是指呼吸暂停或不同程度的气流下降。睡眠呼吸暂停严重程度的标准以呼吸暂停低通气指数(AHI)来判断。AHI是指睡眠中每小时呼吸暂停和低通气的次数。轻度的呼吸暂停定义为AHI5~15次/h,中度为AHI15~30次/h,重度为AHI>30次/h[3]。监测结果:呼吸紊乱:轻度17例,中度34例,重度109例;血氧饱和度下降:轻度27例,中度41例,重度92例。对160例阻塞性呼吸睡眠暂停综合征中有解剖结构异常的患者进行手术治疗30例,对无解剖结构异常的给予配戴呼吸机治疗130例,并追踪观察。阻塞性睡眠暂停综合征经配戴呼吸机治疗后气道通畅,鼾声消失,睡眠呼吸暂停低通气指数降至5次/h以下,血氧饱和度提高到90%以上,因而及时诊断、及时治疗十分重要。
关键词:风湿免疫教学法;学生能力;培养
本研究特将以就业为导向的风湿免疫教学法引入风湿免疫内科实习教学中,并探讨其能力评分情况及教学方法满意度的数据差异,详情如下。
一、资料与方法
1.基础资料
从医院风湿免疫内科2015年2月~6月接收的实习学生中选取80名作为受试对象,利用随机平衡序贯法分为观察组和对照组。观察组23名实习学生中有男生40名,女生17名,年龄在22~31岁之间,平均(28.7±1.6)岁;对照组40名实习学生中男生25名,女生15名,年龄21~31岁,平均(28.5±1.7)岁。两组均为硕士学历,均为风湿免疫内科实习学生,组间基础资料数据比较无显著性差异(P>0.05)。
2.方法
对照组接受常规的教学法,即由带教老师带领学生将专业理论知识与实践操作相结合,向其详细讲解注意事项,并定期组织考核,鼓励学生在实践操作过程中向教师反馈发现的问题和疑问,教师应当向其详细解释处理方案和原因。观察组接受以就业为导向的教学法,主要内容为:首先,由带教老师通过问卷调查、谈话、匿名投票等方式了解学生今后的就业意向及规划;其次,教师除了教授学生理论知识外,还应当在教学过程中适当向学生介绍当前的就业形势,给予学生面对面的指导,引导学生做好长期的职业规划;再次,教师应培养学生在今后临床实践过程中需要的能力和工作技巧,如护患沟通技巧、特殊病患的处理方案、病历记录书写的注意事等;最后,在实践教学过程中,教师要适当穿插理论知识的讲解。若学生遇到疑问,教师应引导学生自主寻找解决问题的办法和方案。
3.观察指标
教学时长均为1个月,教师于教学结束后采用百分制对两组实习学生理论知识、医患沟通技巧、实践操作水平、问题解决能力等方面进行评分,分值越高,说明教学成效越理想。两组学生对教师的满意度,分为非常满意、满意和不满意,由学生自主评定,非常满意和满意构成比之和即为总满意率。
4.统计学方法
采用SPSS20.0软件处理数据。量、等级和率分别采用t、非参数法和卡方检验,若P
二、结果
1.两组评分比较
观察组学生的理论知识、医患沟通技巧、实践操作水平、问题解决能力评分均远高于对照组,组间差异均具有显著性(P
2.两组教师满意度的比较
观察组非常满意、满意和不满意者分别有32人、8人和0人,总满意率为100.0%;对照组分别有21人、14人和5人,总满意率为87.5%。组间满意度分布及总满意率比较差异均有显著性(U=4.536,X2=5.207,P
三、讨论
风湿免疫科是近年来新兴的科室,其疾病类型复杂多样,患者发病机制、临床表现和治疗原理等方面的知识均比较琐碎,并且内容枯燥无味、难以理解。多数实习学生反映在风湿免疫内科实践教学中对理论知识和实践操作的理解程度并不理想,并且很多内容往往靠死记硬背才能达到教学要求。因此,当前的教学模式下仍然有很多风湿免疫专业学生的能力达不到临床实践的要求,因而制约了医疗单位的服务质量和发展水平。
以就业为导向的教学模式在风湿免疫内科实习教学中着重培养社会需要的多样化人才,在提升学生专业知识水平和实践操作能力的同时,还重视培养学生独立解决问题的能力。在具体操作过程中,以就业为导向的教学法比传统的教学模式成效更佳,优势也更为明显。相关研究指出,在风湿免疫科实习教学中引入以就业为导向的教学模式,有利于培养学生的兴趣,提升教学成效。本研究中观察组的评分和满意度均明显优于对照组,这证明了该教学模式的有效性。综上所述,笔者建议在风湿免疫科实习中引入该教学模式,这不仅有助于培养学生的综合能力,同时还可提升其满意度和学习兴趣,不失为一种理想的教学模式。
参考文献:
【关键词】“教学做评用”一体化;平面设计;项目
1.引言
平面设计(graphic design),也称作视觉传达设计,是创造性思维与艺术表达的融合,以“视觉”作为沟通和表达的方式,运用符号、图片、文字和色彩等视觉元素,通过多种表现方式创造出用来传达观念和信息的视觉表现。[1]
平面设计是我院计算机应用技术专业的核心方向之一,课程主要涉及招贴设计、包装设计、出版物排版等典型工作任务,每门课程对应学习掌握不同的设计软件,每个项目要求在“教学做评用”一体化模式下完成富有创意、内容丰满、形式新颖的作品,达成设计任务。
2.“教学做评用”一体化教学模式的设计
我院平面设计类课程已经开设多年,在教学中积累了丰富的教学经验,同时也发现了此类课程的教学弊端。
2.1 学生缺乏积极性
以往教学模式教学方法单一,教师演示学生模仿,没有更好的监管办法。在教师演示时很难控制学生注意力、走神现象严重,等到操作时再查书上的步骤,失去了教师演示的意义,导致学生缺乏学习积极性,学习效果差。
2.2 不能学以致用
以往教学模式学生的工作任务主要来自于书本,书本上的设计任务完成了就是学会了,这就造成了学生只会模仿课本的例子,难于发挥想象力,操作技术不全面,不能承担修改和变动的任务,无法满足用人单位的实际需求。
2.3 设计缺乏创意
创造性源于个人的积累,学生专业基础参差不齐、人生阅历浅、对艺术作品的鉴赏和感悟力低,这就要求教师的讲解更加生动、教学内容涉及范围更加广泛、教学形式更加多样化、教学任务更加体现时代气息和创造力。
针对这些弊端,课题组成员展开新一轮行业企业调研、毕业生调研和在校生调研,参考职业资格规范,重新梳理了平面设计教学模块的课程体系、核心工作岗位及典型工作任务,修订了相关课程的课程标准。结合“教学做”一体化教学模式,进行整理归纳和反复推敲,提出“教学做评用”一体化教学模式改革方案。该模式在教学过程中以教师为主导、以学生为主体、以典型工作任务载体,师生共同完成教、学、做、评、用等教学环节,实现提高学生鉴赏、创新和实践能力的培养目标。
3.“教学做评用”一体化教学模式的实现
3.1 教师教――教师主导
3.1.1 课程准备
首先确定课程培养目标,分析相关企业工作岗位和典型工作任务,确定引入课堂的教学项目,制定新型课程标准。要求教学项目来源于企业一线,教师每年每门课程至少开发2-4个教学项目,项目设定由简单到复杂、由特殊到一般、由单一到综合循序渐进。根据教学项目的工作任务,进一步确定工作角色。大多数平面设计类项目都可以分为产品设计、素材采集与处理、产品制作、印前处理等任务流程,据此划分不同角色,可供小组分配使用。
教学项目设计应以工作过程为导向适度拓展教学内容,即在项目实施中增加设计原理、表现技法、平面构成、色彩构成、文化内涵、创意原则、运营模式等行业岗位应知应会的内容,为学以致用打下基础。[2]
教师积极建设课程资源,根据教学项目和教学模式编写新型教材,本专业平面设计类课程已经先后出版教材5本,结合实际岗位需求设计教学项目,包括实用性、趣味性、创新型教学项目20余个。不断完善网络课程资源,开发教学项目视频、动画、课件、讲义、行业信息、参考资料等。博客、QQ、微信等多渠道与学生保持沟通无障碍,利用与学生的互动和信息反馈及时地为学生提供帮助和改善教学。
3.1.2 任务提出
课堂上,教师首先根据教学项目提出具体要求,任务流程和技能操作等不易说清的问题可使用教学视频或录屏视频,并发放项目指南。每个教学项目都配有项目指南,介绍该项目的教学目标、能力要求、角色分配、学习建议和学习进度,提供教学资源、参考资料或相关网站,供学生分析和实施任务时使用。教师定期布置自主设计任务,主题由学生自主确定、学生独立实施并展示作品,提高独立分析解决问题的能力。
3.1.3 任务分配
学生收到项目指南,熟悉项目具体要求以后,教师将精心设计的一个或多个情境化任务以小组为单位进行任务分配并对任务分配情况进行详细登记,以便任务实施过程的跟踪和落实。[3]
3.2 学生学――学生主体
3.2.1 任务领取(选取)
学生在明确项目具体要求后,以小组为单位领取任务或选取任务,并参考项目指南中的角色划分进行角色任务领取,每个人需填写角色任务单,小组组长需填写小组任务单,任务单将记录任务的完成过程和结果,并附有任务考核评价栏。
3.2.2 任务分析
学生收到角色任务单后,要对自身角色的主要任务进行分析和讨论,组长最终确定每个组员的角色任务,制定整体项目解决方案,强化团队协作精神和口头沟通能力的培养,组长将根据角色任务难度及完成情况,给出组员小组考核成绩分数或名次。
3.3 师生共做
平面设计类教学项目的实施要特别注意作品的实用性、观赏性和独创性,充分发挥学生的想象力和创造力,教师指导不能一味要求“一致性”。
任务实施:
在教师指导下,每位组员制定自己的角色解决方案,完成具体的角色任务并进行自评,之后与组内其他成员的角色任务进行连接,共同完成教学项目。组长组织进行小组评价后,上交每位组员的角色任务单和小组任务单,准备项目演示和答辩。各组在答辩中相互学习、取长补短,在小组互评和教师评价后,最终做出项目综合评价。
在任务实施过程中,教学方法的运用尤为重要。孔子云:知之者不如好之者,好之者不如乐之者。合适的角色、讲究的教学方法,将激发学生的学习兴趣,成为学生学习的强大动力。除了应用常见的项目驱动、案例教学、小组讨论、启发式等教学方法外,还要着重使用趣味教学法和分层教学法,因材施教、有的放矢。
3.4 师生共评
课程评价由评价形式、评价范围、评价方位形成师生全方位立体评价体系。
3.4.1 形式多元
评价方式由一元转向多元,平面设计类课程特别适合过程考核、技能测试、作品展示、项目分析和设计、课程设计等多种形式评价学生。定期举行作品展,将学生自主开发的作品进行公开布展并讲解,给学生搭建一个相互学习、提高鉴赏力和创新力的平台,可给予一定奖励或计分。
3.4.2 范围多元
评价范围由一元转向多元,树立以“综合能力测试”为中心的现代考核和评价观念,分别从职业能力、方法能力、社会能力等方面全面的评价学生。特别是学习态度、创新能力、团队协作等能力的考核,占总成绩的比例有所提升。
3.4.3 方位多元
评价方位由一元转向多元,分别从教师评价、自我评价、同伴评价、小组评价等多种方位公正客观的评价学生。同时引入技能大赛考核机制,选拔部分学生参加校级、市级乃至国家级技能大赛,根据技能大赛的级别以及获奖级别将给予不同等级的奖励,并可申请免试。
3.5 师生共用
3.5.1 与其他课程模块相结合
平面设计类课程要达到学以致用,还可以和其他模块相结合。例如和网页设计类、软件设计类课程相结合,进行网页或软件的界面设计,就可以合理其他模块的产品布局、丰富产品内容,提高产品质量,增强产品效果。现学院已开设界面设计课程,使平面设计类课程应用到其他领域。
3.5.2 校企合作
加大校企合作力度,利用学院技能社团和创新创业工作室,积极参与社会设计项目投标,接受企业订单,为作品明码标价,实现自我价值,这样既有利于激发学生的创作热情,又有利于其在实践中检验自己的创作水平[1]。我系已与多家企业达成合作意向,完成网页维护项目3个,宣传册设计项目2个,装帧设计项目2个,不仅提高了学生的设计水平,还创造了产值。
4.“教学做评用”一体化教学模式的效果
平面设计类课程应用“教学做评用”一体化教学模式产生了良好的教学效果,它不仅发挥了“教学做”一体化教学模式的优势,实现了学生自主学习,提高了学生学习的积极性和主动性。同时,还增加了“评”和“用”,“评”使学生加入到评价机制中来,为学生创造了相互学习、开阔眼界的机会;“用”拓宽了专业发展方向,架通了学生和企业之间的桥梁,使学生学以致用,提高了教学质量,为企业输送大批优秀人才。
参考文献
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【摘要】 目的:探讨补肾活血中药对小鼠自身免疫性卵巢功能早衰(premature ovarian failure, POF)的防治作用。方法:以BALB/c雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立卵巢早衰模型。分别在第1次免疫以及第3次免疫后给予补肾活血中药,灌服中药后分析阴道脱落细胞涂片,酶联免疫法检测外周血雌二醇(estradiol, E2)、卵泡刺激素(folliclestimulating hormone, FSH)以及黄体生成素(luteinizing hormone, LH)浓度。结果:POF小鼠卵巢间质可见淋巴细胞浸润,外周血FSH和LH升高,E2下降明显(P
【关键词】 卵巢功能早衰; 中草药制剂; 小鼠
Objective: To investigate the preventive effect of Bushen Huoxue Recipe (BSHXR), a compound traditional Chinese herbal medicine, on autoimmune premature ovarian failure (POF) in mice.
Methods: Ovarian antigen was prepared with the ovarian tissue of female BALB/c mice. A mouse model of POF was established by immunization injection of the ovarian antigen of isotype female mice on multiple subcutaneous sites and two posterior soles. The POF mice were treated with BSHXR after the first and third immunization. The levels of folliclestimulating hormone (FSH), luteinizing hormone (LH) and estradiol (E2) in peripheral blood were detected by enzyme linked immunosorbent assay.
Results: Lymphocyte infiltration was appeared in ovarian stroma of POF mice. The levels of FSH and LH were evaluated and the E2 level was decreased significantly (P
Conclusion: BSHXR can recover ovarian function in POF mice mainly by regulating the indiscriminate hormone level, and BSHXR has preventive effect on autoimmune POF in mice.
Keywords: ovarian failure, premature; herbal preparations; mice
卵巢早衰(premature ovarian failure, POF)是一类严重影响妇女生殖健康及身心健康的疾病。患者于40岁前出现闭经,伴烘热、汗出、烦躁等低雌激素症状,并常伴随其他内分泌自身免疫疾患,故其治疗比较困难。POF的发病率为1%~3%,占继发性闭经的10%~20%[13]。由于病因不明,治疗颇为棘手,尚无有效措施,尤其对于特发性或自身免疫性卵巢功能衰竭的患者而言,如何减缓卵巢功能衰退的速度以恢复卵巢功能,提高生活质量,是目前生殖内分泌临床研究的一项重要课题。
本研究用BALB/c雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立卵巢早衰模型。分别在第1次免疫以及第3次免疫后给予补肾活血中药,检测生殖内分泌及卵巢形态学改变,探讨补肾活血方(Bushen Huoxue Recipe,BSHXR)防治POF的作用机制,为临床运用中药治疗POF提供理论及实验依据。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物 SPF级BALB/c雌性小鼠200只,体质量15~20 g,由上海中医药大学实验动物中心提供。动物合格证号为SYXK(沪)20042005。
1.1.2 药物及试剂 补肾活血方由仙灵脾15 g、巴戟天15 g、覆盆子15 g、菟丝子15 g、蛇床子10 g、石楠叶10 g、枸杞子15 g、党参15 g、黄芪20 g、当归15 g、川芎10 g等组成,由上海中医药大学岳阳医院制剂室采用醇提法制作成合剂(相当于含生药2.5 g/ml)。卵泡刺激素(folliclestimulating hormone, FSH)、黄体生成素(luteinizing hormone, LH)及雌二醇(estradiol, E2)小鼠ELISA试剂盒为美国R&B公司生产。弗氏完全佐剂(complete Freund's adjuvant, CFA)和弗氏不完全佐剂(incomplete Freund's adjuvant, IFA)购自美国Sigma公司。
1.1.3 仪器 JY922Ⅱ型超声波细胞粉碎机(宁波新艺科器研究所),Sigma Diagnosis酶标仪(美国Sigma公司生产)。
1.2 实验方法
1.2.1 卵巢抗原制备 收集BALB/c雌性小鼠卵巢组织,称质量、洗净,于TrisHCl缓冲液中剪碎并研磨成匀浆,低温下超声粉碎5 min,低温离心(4 000 r/ min,15 min;10 000 r/min,5 min),取上清液。调整浓度,使每0.1 ml含卵巢组织20 mg。
1.2.2 造模方法 参考文献[4]制作POF模型,按每只小鼠10 mg(0.05 ml)卵巢抗原皮下多点注射免疫BALB/c雌性小鼠,建立POF模型。连续3次,每2周1次,第1次免疫加入等量CFA,第2、3次免疫加入等量IFA。
1.2.3 动物分组及给药 小鼠常规喂养标准颗粒饲料,采用随机数字表将80只小鼠分为正常组、模型组、预防组和治疗组,每组20只。预防组于第1次免疫后开始给药,共给药7周。治疗组于第3次免疫后开始给药,共给药3周。正常组及模型组均灌胃等量生理盐水,每周休息1 d。药物剂量按小鼠与人体表面积转换系数计算后,每只小鼠每天灌胃0.5 ml。所有动物在造模后7周(动物处死时)取材,正常组也于此时取材。
1.2.4 阴道脱落细胞检测 每天下午4时各组固定取3只小鼠阴道脱落细胞做涂片,置光学显微镜下观察其动情周期变化。
1.2.5 血清FSH、LH及E2检测 小鼠摘眼球采血,离心,取血清,按试剂盒说明书操作要求,采用酶联免疫测定法测定FSH、LH和E2含量。
1.2.6 卵巢组织形态学观察 称取卵巢质量后,福尔马林固定,梯度酒精脱水,石蜡包埋,切片,脱蜡,常规HE染色,置光学显微镜下观察。
1.3 统计学方法 采用SPSS 10.0软件进行统计学分析,计量资料均数用x±s表示,多组间比较采用单因素方差分析q检验,即NewmanKueuls法。
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2 结果
2.1 阴道脱落细胞涂片 小鼠性周期一般为4~5 d,包括动情前期、动情期、动情后期和动情间期。在第1次免疫后,除正常组外,各组小鼠周期均不规则,表现为动情期和动情间期延长。第3次免疫后,模型组小鼠表现为动情间期延长,渐至无动情周期,动情间期有白细胞,可见上皮细胞相混杂。中药治疗组表现为动情周期紊乱,动情间期明显延长。预防组仍有动情周期性变化,但动情期角化细胞数减少,动情周期延长8~10 d。
2.2 卵巢形态学变化 光镜下模型组见发育卵泡及成熟卵泡数明显减少,颗粒细胞排列紊乱,卵巢间质可见淋巴细胞浸润。中药治疗组发育卵泡数较之略多,而预防组可见到较多的生长卵泡及成熟卵泡。见图1。
2.3 补肾活血方对POF小鼠FSH、LH和E2含量的影响 模型组小鼠E2含量明显低于正常组,差异有统计学意义(P
图1 卵巢组织形态学特征(光学显微镜,×40)(略)
Figure 1 Morphology characteristics of ovarian tissue (Light microscope, ×40)
A: Normal group; B: Untreated group; C: Prevention group; D: BSHXRtreated group.
表1 各组小鼠FSH、LH和E2含量(略)
Table 1 Levels of FSH, LH and E2 in mice in different groups
*P
3 讨论
POF究其临床症状与“月水先闭”、“经水早断”等相类,归属于中医闭经、早发绝经、经断前后诸症及不孕症等范畴。中医辨证属于肾亏血瘀。故本研究采用补肾活血作为治疗原则,仙灵脾、巴戟天、蛇床子取其温补肾阳之效,覆盆子、菟丝子、枸杞子取其补肾填精之义,党参、黄芪、川芎、当归、石楠叶共奏健脾养血活血之功。现代药理研究表明,温肾阳中药有类雌激素样作用,通过调节下丘脑垂体卵巢轴,促进卵泡、子宫发育,使子宫、卵巢重量增加。仙灵脾、巴戟天等均有促卵泡发育,提高雌激素水平,增加子宫内膜雌、孕激素受体含量等作用。而当归、枸杞子、党参含有多糖、多种氨基酸及人体必须的多种微量元素,可增强机体免疫力。菟丝子、覆盆子等补肾中药能使不孕大鼠垂体降低过高的LH含量,提高垂体的反应性[57]。
本研究采用BALB/c雌性小鼠卵巢组织制备卵巢抗原,皮下和两后脚掌多点注射免疫同种雌性小鼠建立POF模型。我们分别在建模过程中(第1次免疫后)灌服中药,以及建模后(第3次免疫后)给予中药,旨在观察中药对POF小鼠的预防及治疗作用。我们发现中药治疗后,小鼠动情周期紊乱,动情间期明显延长,预防组动情周期延长,动情期角化细胞数减少,但仍有动情周期性变化。卵巢形态学显示预防组卵巢大体正常,可见到较多的生长卵泡及成熟卵泡,而中药治疗组卵巢稍有萎缩,卵巢间质可见淋巴细胞浸润。从生殖内分泌激素来看,预防组血清E2含量增高(P
参考文献
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【关键词】 黄芪 肝损伤 小鼠
Abstract:Objective To investigate the protective effects of Compound Astragalus Extract (CAE) on liver injury in mice. Methods The acute liver injury models were induced by D-galactosamine (D-GalN, 800 mg/kg, ip) and Bacillus Calmette Guerin (BCG,1×107/0.2 mL, iv) plus Lipopolysaccharide (LPS 7.5 μg/0.2 mL, iv) in mice. ALT, AST, MDA content in liver homogenate were assayed by sepctrophotometry. IL-1 activity and ConA-induced splenocytes proliferation were detected by [3H] TdR incorporation assay. TNF-α activity was determined by assay of cytotoxicity against L929 cell. Results CAE (60, 120, 240 mg/kg) could obviously lower the elevated liver index, ALT level in serum and MDA content in liver homogenate in D-GalN mice and in the immunological liver injury mice. It also decreased ALT, AST level in serum, recovered ConA-induced splenocytes proliferation. It had inhibitory effect on inflammatory factors TNF, IL-1 secreted by PMφs. Conclusion CAE showed significant protective effects on chemical and immunological liver injury in mice.
Key words:CAE;liver injury;mice
黄芪始载于《神农本草经》,具有补气升阳、固表止汗等功效[1]。现代临床研究认为,黄芪粗制剂对慢性肝炎均有较好的疗效,使大鼠肝纤维化程度明显减轻[2]。我们多年的研究还发现,黄芪总苷有抗炎、抗氧化、免疫调节、诱导肝癌细胞凋亡以及抗肝纤维化等作用[3-6]。由此,根据临床经验并结合中医理论,提取与分离了黄芪有效部位群(黄芪多糖、皂苷、酮及酚),再依据体外正交实验结果首次组成黄芪多部位组合(compound astragalus extract,CAE)。本实验进一步对其抗小鼠肝损伤进行研究。
1 实验材料
1.1 动物与细胞株
昆明种小鼠,雄性,6~8周,体重(18±2)g;C57BL/6J小鼠,雄性,6~8 周,体重(20±2)g;均购于安徽医科大学实验动物中心(合格证号:皖医实动准字01号)。小鼠成纤维细胞瘤(L929)细胞株:南京军事医学研究所朱敏生教授惠赠。
1.2 药物与试剂
CAE,合肥恒星医药研究所提供,批号20030508;研钵碾为细粉,0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC-Na)混悬。护肝片,黑龙江五常葵花药业有限公司产品,批号20041016;卡介苗(BCG),上海生物制品有限公司产品,用前以灭菌生理盐水配成所需浓度;D-氨基半乳糖胺(D-GalN)重庆医科大学生物医学工程研究室,批号020327;硫代巴比妥酸(TBA),上海化学试剂公司;谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒,上海荣盛生物技术有限公司产品;[3H]TdR比放射性为37 MBq/mL,中国原子能研究院同位素研究所产品;新生小牛血清(NBS),杭州四季清生物制品公司产品;RPMI-1640培养粉,美国Gibco公司产品;脂多糖(LPS)、Hepes、刀豆蛋白A(ConA)均为美国Sigma公司产品。
1.3 仪器
Napco-6100型CO2培养箱,美国杜邦公司产品;YJ-1450型医用净化工作台,苏净集团安泰公司制造;LDR4-8.4低温离心机,北京医用离心机厂生产;XSZ-D倒置显微镜,重庆光学仪器厂产品;GL20A全自动高速冷冻离心机,湖南仪器仪表总厂离心机厂;LS-6500型液体闪烁计数仪,美国Beckman公司产品;内切式组织匀浆机,浙江机械厂产品。
2 实验方法
2.1 D氨基半乳糖胺诱导小鼠急性肝损伤模型的建立及处理[7]
昆明种小鼠60只,随机平均分组:正常组、模型组、CAE 3个剂量组(60,120,240 mg/kg)和护肝片组(800 mg/kg)。灌胃给药或溶媒,1次/d,共7 d,腹腔注射D-GalN 800 mg/kg,给药容积0.1 mL/10 g,正常对照组腹腔注射等量的生理盐水。造模后24 h眼眶采血、摘取肝脏,进行血清ALT、肝匀浆丙二醛(MDA)的测定。
2.2 卡介苗+脂多糖诱导小鼠免疫性肝损伤模型的建立及处理[8]
昆明种小鼠60只,随机平均分组(同上)。造模第1天每鼠尾静脉注射给予BCG 2.5 mg/0.2 mL(5×107菌体)。正常鼠尾静脉注射0.2 mL生理盐水,2 h后灌胃给药或溶媒,连续12 d。第12天每鼠静脉注射LPS 7.5 μg/0.2 mL,禁食12 h。眼眶采血供ALT、AST的测定;同时进行ConA诱导的脾细胞增殖反应检测及腹腔巨噬细胞的培养,收上清供肿瘤坏死因子-α(TNF-α)与白细胞介素-1(IL-1)的检测。
2.3 指标检测
2.3.1 血清ALT、AST检测
采用赖氏法,按试剂盒说明书步骤操作。
2.3.2 肝匀浆MDA测定[9]
采用TBA比色法。由标准曲线计算样本含量,结果以nmol/g表示。
2.3.3 ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖反应的测定[10]
采用[3H]TdR掺入法。常规制备1×1010/L C57BL/6J小鼠脾细胞悬液,加入96孔板,每孔100 μL;再加含ConA(终浓度5 mg/L)的10%小牛血清RPMI 1640培养液100 μL。设3个复孔,37 ℃、5% CO2培养48 h。终止培养前6 h,加[3H]TdR 20 μL(终浓度370 bq/mL),培养结束后,收集细胞,液闪计数仪测dpm值。
2.3.4 小鼠腹腔巨噬细胞(PMΦs)分泌TNF-α及IL-1活性的检测
参照文献[11-12]方法,分别采用小鼠L929杀伤法和小鼠[3H]TdR掺入法。
2.4 统计学方法
各组数据均以—x±s表示,组间比较用SPSS11.5软件进行t检验。
3 结果
(见表1~表3)表1 CAE对D-GalN诱导的小鼠肝损伤血清ALT、肝匀浆MDA及肝指数的影响(略)注:与正常组比较,##P
4 讨论
我们前期体外研究结果表明,黄芪多糖、皂苷、酮及酚等4个有效部位均能不同程度的抑制LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生IL-1、TNF-α及NO的水平。依据体外实验(正交设计)组成的CAE在11.3~90 mg/L浓度范围内同样对LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生上述炎症因子有明显的抑制作用[13]。但CAE对急性肝损伤小鼠有无作用?本实验首先采用了类似人类病毒性肝炎的D-GalN化学性肝损伤模型[7],结果表明,口服不同剂量CAE(60、120、240 mg/kg)均能明显降低D-GalN升高的血清ALT的水平、肝脏指数及肝匀浆MDA的含量,表明CAE对D-GalN性肝损伤有保护作用,提示CAE的抗氧化和抗炎作用可能是其抗肝损伤作用的机制之一。
早期的研究发现,许多慢性肝炎患者存在诸多抗体,从而认为病变迁延不愈的本质可能与免疫有关,于是人们采取了多种方法建立了免疫性肝损伤模型[14]。BCG+LPS是常用的免疫性肝损伤模型。BCG可使多形核中性细胞、单核巨噬细胞聚集于肝脏,其后用低剂量LPS攻击,可激发这些细胞释放一些对肝细胞有毒性作用的炎症介质如氧自由基、白三烯和细胞因子TNF-α、IL-1等,从而造成类似人类肝病免疫性肝损伤[8,15]。它是筛选保肝药物的一种可靠的免疫性肝损伤模型。本实验成功地复制了BCG+LPS免疫性肝损伤模型。研究表明,CAE使小鼠升高的血清ALT、AST水平降低,而且明显上调脾淋巴细胞增殖反应,恢复低下的免疫功能,表明CAE对小鼠免疫性肝损伤有明显的保护作用和免疫调节作用,并提示CAE对小鼠免疫性肝损伤的保护作用可能与其免疫调节作用有关。
TNF-α主要是由激活的单核巨噬细胞产生的一种内源性细胞因子,具有广泛而重要的生物学作用,肝脏中大量枯否细胞(KC)的增生活跃是TNF-α水平增加的基础。国内外学者认为,TNF-α与病毒性肝炎关系密切,是引发急性肝坏死的重要介质[16]。TNF-α又可作为肝损伤的第一介质,引起许多与肝损伤有关的第二介质的出现,如IL-1、IL-6、IL-8及蛋白酶的产生[17]。而IL-1也是由激活的单核巨噬细胞产生的另一种内源性细胞因子,它加强TNF-α的肝损伤程度[18],因此,本实验检测了PMΦs分泌TNF-α和IL-1的含量。结果表明CAE对BCG+LPS过度激活的小鼠PMΦs产生TNF-α、IL-1有明显的下调作用。结合体外CAE直接抑制PMΦs分泌TNF-α、IL-1研究结果,推测CAE抗免疫性肝损伤作用可能与其抑制TNF-α、IL-1等炎症因子有关。但CAE是否直接抑制肝中的KC分泌TNF-α、IL-1等炎性因子,值得进一步深入研究。
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【关键词】 免疫 肝损伤 淋巴细胞亚群 大蒜多糖C 流式细胞术
Abstract:ObjectiveTo observe the changes of lymphocyte subsets in the peripheral blood of mice with immunological liver injury and intervention of Garlic Polysaccharide C. MethodsThe animal immunological liver damage model was reproduced by injection via the tail vein of BCG (Bacilli Calmette Guein)and lipopolysaccharide(LPS) into mice.The peripheral-blood lymphocyte subsets' percentages and the CD4+/CD8+ ratio was measured by the flow cytometry.ResultsCompared with normal control group, the percentages of the T lymphocyte and the CD8+ T lymphocyte in the peripheral-blood in immunological liver damage mice siginificantly increased(P< 0.01),however, the percentages of the B lymphocyte, CD4+T lymphocyte and the ratio of CD4+/CD8+ decreased(P
Key words:Immunity; Liver injury; Lymphocyte subset; Garlic polysaccharide C; Flow cytometry
病毒性肝炎的损害与机体的免疫应答有密切的关系[1]。卡介苗联合脂多糖(BCG+LPS)诱导的免疫性肝损伤是研究病毒性肝炎发病机制及药物防治的有效实验模型[2,3],此模型中小鼠外周血淋巴细胞亚群的变化特征尚无定论。 大蒜药食同源,近来我们从大蒜球根中提取分离出新的安全低毒有效成分大蒜多糖C,并证实大蒜多糖C在体外有抗乙型肝炎病毒作用,对四氯化碳所致化学性及BCG+ LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠肝功能均具保护性作用[3~5]。为此,本研究则进一步观察BCG+LPS免疫性肝损伤小鼠外周血淋巴细胞亚群变化并研究大蒜多糖C的干预作用,以探讨大蒜多糖C护肝作用的相关免疫机制,寻求有效的抗病毒性肝炎药物。
1 材料和方法
1.1 主要药品及试剂大蒜多糖C:参照文献方法提取及纯化,纯度为92.3%[3~5]。卡介苗(BCG)活菌:兰州生物制品研究所产品,冻干粉剂,批号:20020501,使用前用灭菌生理盐水配制成1%的溶液。脂多糖(LPS): SIGMA公司产品。小鼠单克隆抗体: FITC标记CD3试剂、PE标记CD19试剂、PE标记CD4试剂、PE标记CD8试剂以及相应同型对照,均为Caltag公司产品。流式鞘液及溶血剂(Immuno-Prep)均由Beckman Coulter公司提供。
1.2 动物与仪器健康雄性昆明小鼠,体重22~25g,由湖北医学科学院提供,适应1周后开始实验。主要仪器:美国Beckman Coulter公司 EPACS XL流式细胞仪。
1.3 动物模型、分组、标本采集及制备采用卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱发的小鼠免疫性肝损伤模型,即小鼠先尾静脉注射1% BCG活菌2 mg/只致敏,12 d后再尾静脉注射微量LPS(4μg/只)诱导肝损伤。小鼠随机分为正常对照组、免疫性肝损伤模型组、大蒜多糖C治疗组(800 mg/kg ig,qd×12),每组20只。实验第1天,模型组及大蒜多糖C治疗组每只小鼠尾静脉注射1% BCG溶液2 mg即0.2 ml,正常对照组尾静脉注射生理盐水(0.2 ml/只)。次日起,正常组和模型组ig生理盐水qd×12;大蒜多糖C组 ig 800 mg/kg qd×12。末次给药后,模型组、大蒜多糖C治疗组每只小鼠尾静脉注射LPS 4 μg,正常对照组给予等容积无菌生理盐水。12 h后,小鼠摘眼球取血,收集于肝素抗凝管中备测。
1.4 外周血淋巴细胞亚群比值测定应用流式细胞术检测。采用淋巴细胞亚群双色分析方案,按照仪器和检测试剂说明书进行。取待测肝素抗凝血样本100 μl,分别加入相应抗小鼠抗体或同型IgG对照10 μl,室温避光孵育20 min,加入溶血素溶解红细胞后,1 000 r/min,离心5 min,弃上清液,用1ml 0.001M的PBS重新悬浮细胞,200目过滤网过滤样本后上机检测。
1.5 统计学分析实验数据以均数±标准差( ±s)表示,两组间比较用t检验。
2 结果
结果见表1。与正常对照组相比,模型组T淋巴细胞、CD8+T细胞百分比值明显升高(P< 0.01),B淋巴细胞百分比值、CD4+/CD8+比值明显下降(P< 0.01),CD4+T细胞百分比值也有减少(P< 0.05),NK1.1+T细胞百分比值无显著变化。大蒜多糖C治疗组T,B,CD4+T,CD8+T淋巴细胞百分比较模型组均明显下降(P< 0.01),甚至低于正常组水平(P< 0.05或P
表1 大蒜多糖C对小鼠外周血淋巴细胞亚群的影响(略)
与对照组比较,*P< 0.05, **P< 0.01; 与模型组比较,##P< 0.01;n=10
3 讨论
淋巴细胞是存在于体内的一种单核细胞,是机体免疫系统的主要构成成分之一。根据细胞功能不同,淋巴细胞主要分为T淋巴细胞(CD+3)和B淋巴细胞(CD+19)两大类,T淋巴细胞主要介导细胞免疫,B淋巴细胞主要介导体液免疫。其中T淋巴细胞又可分为CD4+、CD8+和NK1.1+ T淋巴细胞。CD4+T淋巴细胞主要由辅T淋巴细胞(Th)构成,其功能在于协助T、B淋巴细胞、MΦ分泌细胞因子、产生免疫应答。CD8+T淋巴细胞主要由细胞毒性T淋巴细胞(CTL)构成,作为效应细胞分泌细胞因子产生细胞毒性作用杀伤靶细胞。NK1.1+ T淋巴细胞是新近发现的一群细胞,现认为,NK1.1+ T淋巴细胞在防止自身免疫性疾病、控制感染及抗肿瘤免疫等方面均可发挥作用。各种T淋巴细胞之间相互影响、相互调节,保持CD4+/CD8+比值相对稳定,维持机体正常的免疫功能。淋巴细胞亚群的比例上升或下降,反映机体免疫功能发生相应变化。CD4+/CD8+比值发生变化说明机体的免疫状态失衡。
BCG联合LPS诱导的小鼠免疫性肝损伤模型类似于人病毒性肝炎的急性或亚急性损伤过程,是研究病毒性肝炎较理想的模型[2,3,6]。该模型是巨噬细胞(MΦ)介导的免疫性肝损伤, 激活的MΦ能释放INF-γ,IL-1α,IL-6以及IL-8等多种细胞因子,刺激T淋巴细胞增殖、分化,并增强其功能。活化的T淋巴细胞和INF-α等细胞因子一起作用于肝细胞,发挥免疫功能产生损伤。 我们在前期研究中已经发现,大蒜多糖C对免疫性肝损伤小鼠有保护性作用,在较大剂量(800 mg/kg)时更为明显[3],因而本部分实验也采用此剂量,进一步观察外周血淋巴细胞亚群的变化。 实验结果显示,BCG+LPS模型组小鼠CD8+ T淋巴细胞比例明显上升,这种变化导致了T淋巴细胞比例上升和B淋巴细胞比例相对性下降,CD4+/CD8+比值更是明显下降;表明该模型中小鼠免疫功能的平衡状态被打破,CTL大量增生,产生细胞毒性作用,杀伤大量正常肝细胞。在造模同时,连续给予大蒜多糖C 800 mg/kg灌胃12 d治疗后,小鼠各淋巴细胞亚群比例均下降,但CD4+/CD8+比值恢复正常;表明大蒜多糖C全面抑制BCG+LPS肝损伤小鼠机体免疫功能的过度激活,包括体液免疫和细胞免疫,阻止各种淋巴细胞增生,使其保持在较低水平,而且建立了新的免疫平衡。这种低水平的免疫平衡有两个好处: 一方面机体免疫功能受到抑制,减轻了免疫应答对正常肝细胞的损害,阻断肝损伤的进一步发展,发挥保护肝功能的作用;另一方面纠正了失衡的免疫状态,建立新的免疫平衡,有助于机体整体恢复,促进肝功能恢复。
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医学免疫学教学包括基础和临床免疫两部分,其中基础免疫教学主要包括免疫细胞、免疫器官、免疫分子及免疫应答等内容,在医学免疫学教学占据主干,具有较强的理论及严谨的逻辑性。但是由于免疫学知识抽象、深奥,内容繁杂,学生理解起来较困?y、枯燥,学习兴趣不能提起,致使免疫学的学习提升难度。因此,如何能提高其教学质量,使内容由深入浅、由繁化简,是每位免疫老师需要思考的问题。针对延安大学医学院对临床学专业的改革以及临床学学生的特点,我们免疫学教研室在原有基础上查阅了相关文献、视频资料,还包括一些在临床方面的应用,同时将科研汇入到教学中,激发了学生学习的兴趣,课堂气氛也得到提升,取得了良好的效果。
一、激发学生对免疫学学习的兴趣
爱因斯坦曾经说过:“兴趣是最好的老师”。也就是说一旦人们对一些事物激起了浓厚的兴趣,自然会主动去学习、去摸索、去实践,同时在此过程中产生美好的情绪、体验,因此,从第一堂课绪论开始就应引入故事,医学免疫学从发现到证实的每个知识点,都有一段感人的科学故事,比如将预防天花的“痘苗”的发现作为铺垫,将抽象的“免疫”具体化为学生们碰触过的事件,使学生们对“免疫的感念”有个初步的认知,在故事的背景下再阐明免疫的概念及免疫的功能等抽象的知识就顺理成章了。免疫学其他的概念同样有相关的故事,比如德国科学家贝林用白喉抗血清拯救白喉患儿故事,从而得出了抗体这章知识的学习。因而,在同学们学习的每一新章里,老师们都必须用心设计,耐心引导,同学们对相关章节的知识产生浓密的学习乐趣,以带动其学习主动性和积极性。[2]
二、提高学生对免疫学教学的重视
吸引学生对免疫学学习的重视,才能使学生有学好免疫学的决心,所以,将以下几点教学贯穿在整个教学过程中。
1、纳入诺贝尔奖的教学
向学生们介绍关于医学免疫学在诺贝尔奖中所取得的主要业绩,提高学生们了解免疫学的重要性及其发展趋势。例如,早在1908年,俄国科学家伊拉?伊里奇?梅契尼科夫与德国科学家保罗?埃尔利希发现的细胞吞噬作用,从而取得了诺贝尔生理医学奖。随后,奥地利的Karl Landsteiner 在1900 年发现了 A、B、O血型以及 1913 年法国的Charles Robert Richet对超敏反应的研究,分别获取了的生理学医学奖。到2000 年以后,仍然有关于医学免疫学的研究而获奖。其中艾滋病病毒的发现者Luc Montagnier 和 Francoise Barre Sinoussi两位科学家因此在2008年获得诺贝尔奖。此类科学家们的故事讲解可使原本枯燥无味的讲课格外生动,引起学生对免疫学的重视性。
2、结合实验课教学
在讲授理论教学的同时,实验课的教学可验证其基础知识,能协助学生对理论知识的深入理解,同时也锻炼了学生的实验操作能力,提升他们独立思考、解决问题的能力。[3-4]常见的免疫学试验分如凝集反应、ELISA、吞噬实验及单核细胞的分离及过敏原检测等。即可以提高学生科研操作能力,同时也进一步加深他们对理论知识的理解,通过理论教学结合实验操作及其发生原理的讲解,引起学生对医学免疫学的重视。
3、结合临床病例进行教学
关键词:免疫学;食品专业;积极性;互动
中图分类号:G622
文献标识码:A 文章编号:16749944(2017)09023402
1 引言
作为生命科学和医学的基础性、支柱性学科,免疫学非常重要。免疫学与基础医学、临床医学、微生物学、分子生物学、生物化学、营养学等学科均有一定的交叉。目前在苏州大学,免疫学也是食品系学生的必修课程之一[1,2]。然而,由于专业背景的差异,食品系学生在学习免疫学的过程中有着不同于医学专业学生的规律和特点。而且近10多年来,免疫学的发展更是日新月异,基础理论不断修正和更新,新的免疫学技术不断涌现。这就要求免疫学专业教师必须采取合适的策略和方法,才能够取得理想的教学效果。笔者同时承担着医学专业和食品专业学生的免疫学n程,在教学过程中总结了一些经验和教训,在此与大家共同分享授课过程中的一些心得与体会。
2 教学方法分析
2.1 以日常生活中的实例调动学生的学习积极性
免疫学理论知识较为抽象、内容繁杂、概念和英文缩写较多,即使对于医学背景的学生来说,学习上也存在着一定的难度,部分同学对免疫学学习兴趣低下,学习效果不理想[3~5]。因此,调动食品专业学生学习免疫学的兴趣,是提高授课效果的关键因素之一。笔者认为,可以结合日常生活中的实例,讲解背后的免疫学原理,这样有助于提高学生的学习兴趣。比如,笔者在讲授“超敏反应”时,以日常生活中的花生和鸡蛋过敏为例,先给学生介绍基本症状,再结合生理学和免疫学知识详细讲解引起超敏反应的机制。然后又拓展到花粉过敏、螨虫过敏等其它常见的过敏性疾病。这样,一方面贴近实际生活,另一方面也与食品系学生的专业背景相符合,提高了他们学习免疫学的兴趣。又如,在讲授“免疫缺陷病”章节关于“人免疫缺陷病毒导致获得性免疫缺陷综合征”时,通过讲解骨髓移植治疗HIV感染的病例,一方面复习了HIV病毒入侵T细胞的机制;另一方面鼓励学生多学习免疫学知识以及其它学科的知识,并灵活运用到工作和生活中。在讲授免疫耐受时,通过实验分组的讨论,让学生了解科学实验的构思及逻辑。通过讲述一些伟大免疫学家取得的成就及其研究过程,激发学生对免疫学的的主动学习热情和兴趣。
2.2 运用多媒体课件,使抽象的理论丰满生动
在科学技术飞速发展,知识成倍增长的信息时代,各种新式的教学手段和方法层出不穷。怎样使免疫学那些“看不见、摸不着”的概念和抽象的理论具象化、生动化,是对课件的基本要求之一,也是教学方法研究的重点之一。笔者认为,在课件中应该尽量减少文字,多以图片及动画的形式,详细、系统、精确地展示免疫学的基本理论。比如通过图片演示免疫细胞结构时,可以通过不同形状和颜色去区分不同的细胞器;讲解T细胞活化过程时,通过动画、视频的方式一步步演示T细胞活化的步骤,并且在关键步骤要有颜色深浅的区分。在讲解淋巴细胞的黏附与迁移时,则首先要通过图片讲解黏附分子的结构和相应的配体,然后通过视频一步步讲解淋巴细胞在趋化因子的驱动下,引起黏附分子构象的变化,从而将不同的淋巴细胞募集到特定的免疫器官。多媒体手段的引入,使抽象的理论变得形象具体,有利于学生对这些理论的理解及记忆,激发学生的学习热情。
2.3 重点传授免疫学的学习方法,引导学生主动学习
在免疫学知识快速更新,各种信息呈现爆发式增长的信息时代,免疫学理论不断地扩充。因此,作为教师也要不断整合新知识、更新旧理论,提高自身的知识水平。应深刻认识到,只依靠老师的讲解和传授是不可能把免疫学的全部知识教授给学生的。因此,让学生掌握学习方法,引导学生主动学习已经成为各个大学阶段学习的基本要求之一。教师不仅仅要在课堂上传授书本上的理论知识,而且还要传授给他们学习方法,培养他们自我学习的能力。苏州大学的老师都非常重视提高学生的自学能力。在笔者的授课过程中,主要从以下几个方面来培养学生的自我学习、自我管理能力。首先,从今后的学习和工作角度,强调免疫学理论知识的重要性,让学生了解到,几乎所有的疾病都与免疫系统有一定的关系。其次,摘取顶级期刊的最新的研究结果,向学生展示免疫学的重要性。再次,向学生推荐一些免疫学的经典著作,包括中文以及英文的经典教材。最后,给学生推荐一些免疫学论坛的网址和链接,让学生自己通过互联网去查阅免疫学资料。通过学习方法的传授,增强了学生的学习能力,达到了“授之以渔”的教学目的。
2.4 及时复习并增强课后互动
在每节课开始前,都要对上次课的重点内容进行复习,这样可以不断加深对免疫学知识的理解和记忆。如在讲解T细胞受体时,首先回顾B细胞受体的结构,引出T细胞受体的内容;在讲解了T细胞受体结构后,将其与B细胞受体进行比较,分析二者在结构上的相似性和差异,可以增强学生对两种受体结构的理解和记忆。在“淋巴细胞的分化发育”章节,着重讲解T细胞和B细胞在中枢发育的相似之处和不同之处,通过视频动态呈现B细胞和T细胞发育的过程。在讲授过程中,及时提出问题,如“外周淋巴结中是αβT细胞多还是γλT细胞多?为什么?”。通过这种互动,将原本比较枯燥的TCR胚系基因图以及难以理解的T细胞发育过程变得生动、形象,大大提高学生学习的效果和兴趣。在讲解理论知识时,幽默、风趣、形象的比喻,能够快速地活跃课堂气氛、吸引学生的注意力。生动的比喻带给学生对免疫学抽象概念的形象理解,比如在讲解“细胞因子的分泌方式”时,笔者将“自分泌作用方式”比喻成自己挣钱自己花;“旁分泌作用方式”比喻成自己挣钱朋友花;“内分泌作用方式”比喻成自己挣钱多了,就去做慈善,让边远地区的人民一起花。这使得免疫学课程的节奏变得生动、活泼、轻快,使学生易于接受免疫学的理论知识。课后,通过手机、电子邮件及微信、QQ等软件,进行实时互动与交流。在互动的同时,鼓励学生自主学习免疫学理论知识,并用免疫学理论知识去解释日常生活中及临床上的现象,做到学以致用。这些课中、课后的交流与互动手段,充分调动了学生的主观能动性和学习兴趣,提高了免疫学的教学与学习效果。
3 结语
对食品专业的学生而言,免疫学是一门相对深奥、抽象、逻辑性强的课程。这就要求我们在教学中贯彻“教师主导,学生为主体”的教育理念。运用各种新颖的教学方法与手段,在预习、复习及课堂教学的各个环节,培养和激发学生的学习兴趣。在充分调动学生的学习兴趣的同时,引导学生主动学习,形成良好的互动氛围,营造良好的课堂气氛,提高教学效果。近10年来,免疫学新理论层出不穷,许多免疫学现象有了新的、更合理的解释,甚至有的理论被重新改写。这些对于教授免疫学的教师来说是一种挑战,要求我们要与时俱进,时刻主动学习新理论、更新知识。在将新理论传授给学生的同时,也要让学生掌握免疫学的学习方法,让他们自己完成知识的整合、更新,为其进一步深入学习、研究打下一个坚实的基础。
参考文献:
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[2]杜 冰,任 华,祁 灵,等.免疫学技术实验教学改革初探[J].中国免疫学杂志,2014(30):404~405.
[3]林巧爱,薛向阳.提高医学免疫学教学效果探讨[J].基础医学教育,2011(13):407~409.
关键词 免疫学;教学方法;教学改革
中图分类号:G642.0 文献标识码:B
文章编号:1671-489X(2016)04-0129-02
Teaching Reform Exploration and Practice of Immunology Course//YUAN Zuoqing, ZHANG Jianyong, PANG Qiuxiang, DENG Hongkuan
Abstract In this paper, we discuss the reform exploration and practice during our teaching Immunology course, including the first class, theoretical contacting reality, flexible application of various teaching methods, the combination of teaching and science research, as well as modern multimedia. All of above make our classroom teaching significantly improved.
Key words immunology; teaching methods; teaching reform
1 前言
免疫学是生命科学的重要基础学科,也是生命科学的前沿学科之一,推动着生命科学和医学的不断发展。因此,免疫学不仅是医学专业的重要基础课程,也是一些高校生物科学专业的必修课。免疫学发展迅速,知识点多、概念多,前后内容不仅衔接紧密,而且比较抽象复杂,学生普遍感到枯燥难学、不容易理解和记忆,导致死记硬背,学习积极性和主动性不高,教学效果不理想[1]。本文结合笔者近几年的教学实践经验,针对免疫学课程的特点,谈谈在免疫学教学过程中进行教学改革和增强教学效果的探索与尝试。
2 注重“首因”,以精彩绪论奠定良好开端
根据“首因效应”原理,个体在社会认知过程中,通过“第一印象”最先输入的信息对人们以后的认知产生的影响作用最强,持续的时间也长,比以后得到的信息对于事物整个印象产生的作用更强[2]。因此,第一堂绪论课非常重要,力争在内容和形式上吸引学生的注意力,使学生喜欢上免疫学。
绪论除了介绍免疫学的基本概念、发展史外,还通过串联的形式介绍各章节的主要内容,突出其前后衔接和内在联系的紧密性。对免疫学发展史的讲解,应该兼具科学性与故事性,可以通过列举一些著名的传染性疾病,讲解人们如何应用免疫学方法来预防这些传染病,使学生明白很多疾病的发病机制都可以用免疫学的理论知识来进行解释,很多临床病例的诊断及治疗也涉及应用免疫学相关的技术和方法,使学生感到原来免疫学就在身边,与生活息息相关,从而激发学生学习免疫学的学习兴趣。
免疫学以及免疫学密切相关的科学成果在历年诺贝尔奖的颁发中所占的比例是任何生物医学学科所属的单一学科所不能比拟的。通过向学生介绍一些免疫学方面的诺贝尔生理学或医学奖获奖者,突出免疫学在生命科学和生物医学中的重要地位,从而进一步提高学生学习免疫学的热情和兴趣。
3 案例导入,以情趣促认知
免疫学理论知识和分析技术与临床病例等实际应用紧密联系[3]。在理论教学过程中,根据各章节内容适当引入相关的临床病例和实验应用分析,将抽象的理论知识具体化,加深学生对所学理论知识的理解,避免照本宣科的讲授和枯燥的理论说教,充分调动学生的学习兴趣,使他们主动接受知识。如讲到免疫凝集时,告诉学生免疫凝集就是抗体与颗粒抗原结合形成的肉眼可见的凝集反应。学生可能还是不能理解凝集反应是什么,这时引入具体的例子分析,举例常见的免疫凝集反应,如血型鉴定试验。告诉学生血细胞凝集反应抗体识别的抗原是红细胞表明的天然抗原,红细胞在这里扮演的就是颗粒性的抗原,因此能与抗体发生肉眼可见的凝集反应,从而进行血型诊断。
这时还可以引入凝集抑制实验,凝集抑制实验可以用来进行妊娠检测和是否吸食检测。这样理论联系实践的讲授能使抽象的知识具体化,从而激发学生的学习兴趣,进一步加深学生对免疫凝集概念的认识,对以抗原抗体为理论基础的免疫分析技术在临床实验分析中的应用有更深入的了解。
4 方法驱动,提升课堂参与度
在教学过程中根据教学内容采取多种教学方法(如提问式教学、比喻教学、启发式教学和双语教学)来充分调动学生学习的积极性和主动性,让学生真正参与到教学中来,由被动接受知识向主动接受知识转变。
提问式教学 课前可以提问学生上一堂课所学的主要内容,促使学生课后复习上一堂课的教学内容。在教学过程中,可以根据教学内容随时提问,使学生在课堂上主动思考问题,增加师生之间的互动,避免长时间的讲授。学生长时间听讲容易走神,注意力不集中。如在讲授影响抗原免疫原性的因素时,可以提问:“为什么抗原的分子量越大,结构越复杂,抗原的免疫原性就越大?”讲授完补体活化的三条途径,可以提问:“补体活化三条途径的相似性和差异性如何?”
比喻教学 比喻教学法是指在课堂教学过程中,用大家熟知的物品、知识或经验来类比,进行教学的方法[5]。如在讲授免疫系统的结构和功能时,可以将人体的免疫系统与一个国家的国防系统来进行类比,通过比喻教学法可以使抽象的理论知识变得通俗易懂,加深学生对抽象概念的理解。
启发式教学 在教学过程中可以进行一些启发式的提问,使学生发散思维,积极主动思考,灵活运用已有的理论知识来回答问题,调动学生的求知欲。如在讲授抗体的类别时,可以启发学生思考:“IgM血清异性IgM水平增高,提示有近期感染;脐带血或新生儿血清中IgM水平升高,表明胎儿有宫内感染,诊断的依据是什么?”
双语教学 免疫学教学内容中英文缩写词比较多,在教学过程中可以根据教学内容适当穿行双语教学,一些专业英语词汇和句子可以用英语来进行讲授,加深学生对英语缩写词的理解记忆,提高学习免疫学的兴趣,为以后专业英语的学习和阅读英语专业期刊文献打下基础。
5 “教”“研”共进,践行“研究性教学”
在教学过程中,根据教学内容可以适当地引入一些免疫学的国际前沿动态介绍,也可以将教师的科研项目及成果图片引入课堂教学中来,不仅可以增加学生学习免疫学的兴趣,还能吸引学生申报学校的创新研究项目,课后积极主动地参与到教师的科学研究中来。如讲授抗原抗体反应时,可以结合教师承担的科研项目“全氟辛烷磺酸对涡虫神经再生毒性研究”进行讲解,全氟辛烷磺酸作为一种环境污染物,对涡虫的神经再生有影响,就可以使用酶标记或荧光素标记的抗神经突触的抗体来检测涡虫神经再生的情况。这样教学与科研相结合的讲解,不仅可以使学生更好地理解免疫荧光分析技术,还使学生知道如何将所学的免疫学知识运用到科学研究中去,培养学生的科研意识,为他们以后进行科学研究打下基础。
6 教学手段优化,多媒体呈现与板书设计相辅相成
免疫学内容比较抽象复杂,在教学过程中采取多媒体课件教学与传统的板书教学相结合进行教学。图文并茂的多媒体课件使抽象的免疫学作用通路和反应机制具体化、形象化、简单化,有利于学生理解和掌握所学内容[4]。如在讲授抗体介导的调理作用时,使用多媒体图片教学形象直观,学生就能比较容易理解,牢固掌握所学知识。免疫学知识点多,内容复杂,如果完全依靠多媒体教学,往往导致教学速度过快,学生难以短时间内接受大量教学信息。尤其是一些比较难的知识点,学生课堂上可能就没完全掌握,从而影响教学效果。在教学过程中将多媒体教学和板书教学适时结合,深入浅出地进行教学,不仅能放慢教学速度,而且有利于借助板书的即时性、互动性特征,强化学生对关键知识点的理解和掌握。
7 结束语
以上是笔者近年来在免疫学教学实践当中的一些探索与实践,今后将在教学实践中继续完善教学手段和教学方法,引导学生积极参与到课堂教学中来,使越来越多的学生喜欢免疫学,不断增强免疫学的教学效果。
参考文献
[1]张群芝.医学免疫学教学改革与探索[J].继续教育,
2014,8(10):61-62.
[2]操龙升.浅析心理学“首因效应”和“近因效应”对英语课堂教学的影响[J].基础教育课程,2014(24):8-9.