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三峡库区消落带湿地治理一直是国内外关注的焦点,三峡库区正常运行后,在海拔145米到175米的库区两岸,形成水位涨落幅度高达30米、面积400多平方公里的水库消落带湿地。消落带内种植的植物,由于受到三峡发电站储水发电的控制,在每年的六月水位才回落到145米,九月就要开始淹水没顶,上涨到175米高程,因此植物生长的时间有限,只有短短的2到3个月的时间,因此消落带生态治理的成败不仅在于选择科学的防护治理模式,更在于选择合适的耐水淹植物。
耐水淹植物选择原则
根据库区水位涨落规律,要求植物在短期内生长迅速旺盛,能迎接每年8月底就开始涨水淹没,要求植物在短期内能生长成熟迎接没顶淹水考验。
要求根系发达,茎叶强劲,在淹水缺氧的条件下能承受高达30米的水压。
自我修复能力强,一旦路出水面能迅速发芽返青。
分蘖繁殖能力强,覆盖迅速,在短期内能有效的对消落带进行生态防护。
试验植物的选择
三峡库区为发挥其应有的实际功能,库区内水位在一年中变化多次,同时又具有一定的水位规律,由此形成了在库区两岸及多条支流的水位消落变化带。该区域的防护直接影响到库区内两岸的水土保持影响,为研究该区域有效的防护方式,并达到生态防护目的,特在秭归县香溪马槽岭消落带区域进行科研试验,开展消落带生态防护工程研究。
试验区施工范围为长江消落水位145~175m河岸边坡,消落带垂直落差30m,涉及长江水位变化范围的全过程,生态治理面积达3.4万平方米。试验选择了多个品种的耐水淹植物进行消落带边坡生态防护试验研究,这次较大规模的试验研究,其技术特点就是以生态防护为主,改变了传统的以工程防护手段治理的特点,力争在耐水淹植物应用及生态防护形式的研究方面有新的突破。
主要品种的确定
香根草、狗牙根、百喜草、耐水淹灌木疏花水柏枝等品种,为主要选择品种,辅以其他品种高洋茅作为先锋防护品种,达到快速防护与长期防护效果结合的目地。
香根草在水下淹没长达3个多月后可恢复生长,具有优异的耐水淹性能。百喜草具有较强的耐寒性与耐水性能,耐阴性也较强强;狗牙根匍匐茎发达,生命力极强;疏花水柏枝等品种本生就是水生植物品种,耐水性能也较强。本次试验项目所选植物品种均具有较强的耐水淹性能。
2、乡土植物的选择
为扩大耐水淹植物的筛选范围,为消落带生态治理提供简便易得、适合当地土质、气候条件的植物品种,消落带综合治理小组在长江沿线及长江支流香溪河沿线查寻了当地的水生植物分布与生长情况,在原有综合治理方案的基础上有选择性的增加了当地植物节节草、水草、龙须草,并选取了三峡地区十分丰富的植物品种巴王草进行耐水淹种植试验,一旦获得成功,将为库区消落带的治理提供十分丰富的植物支持。
四、植物生长特性(1)
香根草
(1)优异的耐水淹性能
香根草在水下淹没长达3个多月后可恢复生长,具有优异的耐水淹性能。
(2)适应温度范围广,气温-10°C~45°C均能正常生长。
(3)香根草耐瘠性极强,根草耐酸耐碱耐盐,可适应pH3.5~11的土壤环境。
(4)巨大的水土保持功能
香根草分蘖性强,一般每丛分蘖30~50株,最多达117株。而且其根颈位于表土下,分蘖后从地面就十分密集;叶片又十分坚韧挺拔,不易被水冲倒。
(5)优异的生物锚固功能
香根草根系十分发达,以须根状深扎于土中,根长一般2~3米,最长可达到5.2米。
(6)生长迅速是香根草又一特点,可以及时发挥其保持水土作用。
(7)适用于高陡边坡,45~60°的陡坡和大于40m的长坡的花岗岩侵蚀裸地,种植香根草篱16个月就已郁郁葱葱,可使侵蚀稳定下来。
百喜草
形态特征:多年生草本植物,自然高度30~60cm,修剪高度4~8cm。质感粗,生长速度中。
生长习性:生性粗放,对土壤选择性不严,分蘖旺盛,地下茎粗壮,根系发达。种子表面有蜡质,播种前宜先浸水一夜再播种,以提高发芽率。密度疏,耐旱性、耐暑性极强,耐寒性尚可,耐阴性强,耐踏性强
狗牙根
狗牙根具发达的根状茎和细长的匍匐茎,匍匐茎扩展能力极强,长可达1-2m,每茎节着地生根,可繁殖成新株;叶披针形或线形,长2-1Ocm,宽1-7mm,叶短;穗状花序,长2-5cm,生长速度、密度均中等,耐荫性很差,耐践踏。
狗牙根较耐淹,水淹下生长变慢;耐盐性也较好。要求土壤PH值为5.5-7.5。
疏花水柏枝
疏花水柏枝,落叶灌木,高1.5m,叶小,无柄,花粉红色,落叶灌木,高1.5m。叶小,无柄。花粉红色。 仅分布于湖北巴东、秭归和四川巫山,生于低山河岸边及路旁。山峡库区特有植物,现已濒危灭绝,但经过科学家的抢救与移栽,现已在旱地培育成功。
其他品种:节节草、水草、龙须草,巴王草等品种为当地乡土植物,适宜当地气候,生长迅速,但耐水淹性能有待试验来验证。
项目实施情况
项目于2012年4月开工实施,2012年6月初长江水位降至145米高程,2012年6月底完成了全部生态防护项目, 2012年8月底三峡水库开始储水,在这有限又十分宝贵的两个月时间范围内加强了植物的养护管理,特别是水肥管理,使植物生长健康迅速,根系发达,以增强植物的耐水淹能力。8月底水位由146米高程连续上涨,到十月下旬水位上涨到174—175米高程,上涨水位高度落差为30米。植物处于长江175水位、最大水压为达30米的消落环境中考验。
五、植物培育
香根草的培育:香根草部分采取预先培育的方法种植,在现场建立培育苗床,培育香根草的容器苗,以提高植物成活率,加速植物生长,为后续出来的消落区提前准备好生长健康的香根草容器苗,提高植物耐水淹的能力。
这一技术的应用解决了植物生长所需较长时间与消落区水位消落晚路出的坡面提供给植物生长时间短的矛盾,为植物生长提供了有力保障,使植物根系及早生长与发育,在有限的时间内尽可能地提高植物的耐水淹能力。
养护与观察
现场施工完毕,进入养护管理与科研观察阶段,安排专人在现场养护与观察记录,注意温度、湿度、风力以及浪力对消落带的影响,特别是水位涨落次数对植被的影响,观察植物生长与周围环境的关系。
试验效果与结论
2013年4月水位下降到160米,随着4月份温度上升、水位下降,消落区逐步露出水面,植物开始复苏成活。水位163米以上植物成活的较好的是香根草与狗牙根,163水位以下为狗牙根复活的较好,在水下浸泡半年之久的香根草与狗牙根依然有着旺盛的生命力,其它物种耐水淹性能差,成活率不高,防冲刷能力也不强。
消落带生态防护试验区内香根草双层加筋复合植被柔性板块中的香根草、狗牙根植物,在经受近半年多江水淹没后又萌发新芽,成活率较高,显示其优异的耐淹性与防护整体性,通过试验发现:香根草、狗牙根为消落带防护的优秀品种。
通过耐水淹植物的应用研究,课题组筛选出了适宜三峡库区生态防护的部分植物品种,如何充分用好耐水淹植物、发现更多更好的品种,采取更适宜更灵活的生态防护形式,充分发挥耐水淹植物的特性,降低工程造价,破解消落带治理的世界性难题,还有待工程建设者去做进一步的研究与探索.
上游水质总体良好
记者:三峡大坝上游水质情况如何?三峡库区蓄水后水环境情况怎样?
曹广晶:三峡工程完工后,水库将蓄水至正常蓄水位175米。随着水库内的水深增加,水面加宽,流速减缓,是否会影响污染物的稀释?这是公众关心的话题。
从上个世纪70年代起,长江水资源保护局就开始着手研究三峡工程对生态和环境的影响。三峡库区蓄水后,库区换水速度比较高,很难形成富营养化。但是在三峡库区局部地区,如三峡库湾地区、开县的小江、万州的龙宝河等支流易发生富营养化。
为了保证未来的三峡库区是一库清水,2001年11月,国务院批准了国家环保总局组织编制的《三峡库区及其上游水污染防治规划》,三峡库区及其上游的经济建设活动必须符合《规划》的要求。
按照《规划》要求,到2010年,库区将建成城市污水处理厂151座,建成沿江城镇污水处理设施113座,使库区、影响区和上游区的生活污水处理率分别达到95%、85%和70%。在工业污染防治方面,要通过关闭重污染企业、实施清洁生产等措施,到2005年库区已削减工业污染负荷30%,影响区削减工业污染负荷20%。生态环境保护的重点是控制水土流失,减少泥沙入库量。库区和影响区内25度以上的坡耕地全部还林还草,建立岸边生态保护带,严禁在该区域进行任何有碍生态保护的活动。
三峡工程蓄水两年多来,三峡水库水质总体良好,以三类水质为主。这说明三峡工程蓄水以来,长江上游水质没有明显变化。
“蓄清排浑”解决泥沙问题
记者:三峡大坝建成后,泥沙会对水库形成淤积吗?
曹广晶:泥沙问题一直是三峡工程论证过程中最主要的问题之一。从上世纪50年代开始,我国专家就开始了针对三峡工程泥沙问题的研究。随后,长江水利委员会组织专家,对全国范围内的水库泥沙问题进行调查,并于70年代在武汉建立了三峡坝区泥沙模型。另外,上个世纪60年代对三门峡工程泥沙处理问题的研究,以及随后对葛洲坝枢纽工程泥沙问题的研究和处理,都为三峡泥沙问题的研究和解决提供了实践经验。1983年后,全国泥沙专家对三峡工程的泥沙问题展开了全面研究。
专家们总结出用“蓄清排浑”的科学方法来解决三峡水库的泥沙问题,就是通过对水库的合理调度,尽可能地把大量的泥沙排放出去,等到每年11月份枯水期后,泥沙量也减少了,再把清水蓄在水库里。三峡水库采取“蓄清排浑”的措施,在泥沙多的汛期一般不蓄水,在泥沙少的季节蓄水用于发电和航运。但三峡工程的主要目的是防洪,一旦碰上大洪水,就要拦截洪峰,这样就会把一些泥沙留在水库内。科学试验证明,三峡水库运行100年后,水库防洪库容还会保留86%,水库达到新的平衡。所以,三峡水库可长期运用。
最近10年多的监测成果表明,长江泥沙含量已呈逐年下降之势,三峡库区的水土流失近年也有减少趋势。三峡坝址的输沙量,近年也有减少的趋势。
200个垃圾处理场缓解“清漂”压力
记者:长江汛期出现过大量的“漂浮物”。三峡大坝建成后,怎么解决这个问题?
曹广晶:三峡库区分布着县级以上城市20多个,居住着城乡人口3000多万。按照国家总体规划,三峡库区将建设近200个垃圾处理场,这能够在一定程度上缓解未来的“清漂”工作压力。
但由于没有相应的垃圾处理站点,降大雨时垃圾难免顺流入库。
按照《三峡经济社会发展规划》和《三峡库区库岸绿化带规划》,在三峡库区生态建设项目投入资金数百亿元。
为了及时清理坝前漂浮物,近两年来,三峡总公司在大坝前投入的清漂投资已经达到1300万元。2005年,三峡总公司投巨资购买了一条可称得上当前世界上最大的清漂船(300m3),已于5月份投入使用。根据有关文件精神,干流清漂由总公司负责,支流由各省市负责。干流清漂三峡总公司已分别委托重庆和湖北的有关单位进行沿途打捞。
三千余万元用于中华鲟研究
记者:三峡大坝对长江水生生物有什么影响?对中华鲟采取了什么保护措施?
曹广晶:三峡大坝的修建影响到6种国家珍稀濒危水生生物。它们是:白鳍豚、白鲟、中华鲟、长江鲟、江豚和胭脂鱼。近年来,三峡建委组织农业部和中国科学院对影响区的水生生物进行了严密监测。
为了保护中华鲟,国家明令禁止商业性捕捞,并在宜昌建立了中华鲟人工繁殖研究所。自1984年以来,共向长江放流幼体中华鲟已近453万尾。
二十几年来,中华鲟研究所在没有可借鉴资料的情况下,从零起步,积极探索。从最初的网捕中华鲟过坝自然繁殖、葛洲坝坝下中华鲟性腺发育调查到人工繁殖试验性研究,仅用两年时间就成功繁殖出中华鲟幼苗,并于1984年首次向长江放流中华鲟6000尾。1988年,向长江放流中华鲟幼鲟12万尾、9至12厘米大规格中华鲟5000尾。1995年,中华鲟研究所攻克幼鲟培育技术难关,形成稳定的大规格中华鲟放流能力;1999年,中华鲟研究所达到年度向长江放流大规格幼鲟5万尾以上的能力。截至2004年,中华鲟研究所共向长江、珠江放流多种规格中华鲟4537309尾,为保护并繁殖中华鲟做出了巨大的贡献。2005年4月,中华鲟研究所再向长江放流幼鲟10万尾及胭脂鱼科3000尾。中国三峡总公司对中华鲟研究所累计投资3734万元。
蓄水不会造成物种灭绝
记者:三峡大坝对陆生植物有何影响?有哪些保护措施?
[关键词] 膝骨性关节炎;基质金属蛋白酶(MMP)-9;基质金属蛋白酶(MMP)-12;基质金属蛋白酶(MMP)-13
[中图分类号] R684;R285.5 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701(2017)06-0116-03
[Abstract] Objective To investigate the changes of serum levels of matrix metalloproteinases (MMPs) -9, 12 and 13 in patients with knee osteoarthritis (KOA) before and after treatment. Methods 45 cases of KOA (case group) were treated with diclofenac sodium enteric-coated capsules 75 mg, once/d for 14 d. The changes of serum MMP-9, 12 and 13 levels were observed and compared before and after 14 days of treatment. 30 healthy subjects in the same period were taken as health group. Results Before treatment, the levels of serum MMP-9, 12 and 13 in the case group were significantly higher than those in the control group(P
[Key words] Knee osteoarthritis; Matrix metalloproteinase(MMP)-9; Matrix metalloproteinase(MMP)-11; matrix metalloproteinase(MMP)-13
膝骨性P节炎(knee osteoarthritis,KOA)是一种发生于中老年膝关节的退行性关节疾病,常以膝关节肿痛及功能受限为主要表现,严重者可引起关节畸形[1,2]。KOA的发病机制十分复杂,近年来研究发现细胞外基质的合成与降解平衡失调是引起KOA的重要原因,而基质金属蛋白酶家族(matrix metalloproteinase,MMPs),尤其是MMP-9、12和13参与细胞外基质的合成与降解过程中,在KOA的发生、发展和病情判断中扮演重要作用[3-5]。本研究观察了血清MMP-9、12和13水平在KOA患者治疗前后的变化,现报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料
选取2015年1月~2016年6月在我院门诊就诊的KOA患者45例(病例组)。纳入标准:均符合《骨关节炎诊断及治疗指南(2010版)》中的诊断及分度标准[6],且具有典型的KOA关节肿痛及功能受限等症状;排除标准:(1)结核性、化脓性和风湿性膝关节炎;(2)内分泌风湿疾病、恶性肿瘤和免疫性疾病等。其中男17例,女28例;年龄45~84岁,平均(68.4±7.1)岁;左侧24例,右侧19例,两侧3例;病程12个月~10年,平均(4.8±0.9)年。另取同期我院体检的健康者30例作为健康组,其中男12例,女18例;年龄41~80岁,平均(67.5±6.4)岁。两组性别和年龄等比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2 治疗方法
病例组予以双氯芬酸钠肠溶胶囊75 mg,1次/d,连用14 d。观察治疗前后血清MMP-9、12和13水平的变化。而健康组仅在纳入前测定血清MMP-9、12和13水平1次。
1.3 观察指标
1.3.1 标本采集 分别取治疗前和治疗14 d后患者的空腹肘静脉血约3~5 mL,于非抗凝试管中室温放置15~20 min待其逐渐自行凝固,常规2500 r/mim低温离心分离出并提取出血清,将血清进行分装置于-80℃恒温冰箱保存待检。
1.3.2 血清MMP-9、12和13水平的测定 均采用双抗夹心酶联免疫吸附法测定,试剂盒由上海富众生物科技公司提供。
1.4 统计学处理
应用SPSS18.0软件对数据进行处理,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,比较采用t检验,检验水准α定为0.05,P
2 结果
2.1两组患者血清MMP-9、12和13水平的比较
病例组患者血清MMP-9、12和13水平较对照组更高(P
2.2 病例组患者治疗前后血清MMP-9、12和13水平的比较
治疗14 d后,病例组患者血清MMP-9、12和13水平明显下降,低于治疗前水平(P
3 讨论
随着老龄化社会的到来,KOA的发病率也呈一定幅度的上升且患者年龄逐渐年轻,严重危害中老年患者身心健康,需积极予以干预治疗[7-9]。KOA的发病机制较复杂,迄今国内外尚未完全研究透彻,大多数学者认为其与外伤、运动磨损、脂质过氧化、软骨代谢异常、氧自由基紊乱、炎症因子、免疫、钙超载、遗传和酶对软骨基质的破坏等多种因素密切有关,其中酶对软骨基质的破坏在其中扮演及其重要的角色[10-12]。MMPs是一类含锌离子或钙离子,且结构相类似的多肽蛋白酶家族,目前国内外的研究认为其是降解细胞外基质的主要活性蛋白,主要通过抑制胶原及蛋白聚糖的合成,破坏软骨细胞与软骨基质的正常的解剖结构,拮抗并阻止软骨基质的修复,使得关节软骨的抗应能力明显下调,破坏其正常的拱形结构,使得关节软骨弹性减弱结构破坏,是 KOA整个发病过程中促进软骨基质降解和关节软骨破坏的最重要的核心因子,与KOA的成因及发病机制关系密切[13-15]。
MMP-9、12和13均是MMPs家族中参与KOA的成因及发病机制的重要成员,可切断组成关节软骨的主要成分――Ⅱ型胶原和蛋白聚糖,使得细胞外基质的结构无法正常形成而发生降解破坏,使软骨细胞在炎症因子及氧自由基的攻击之下抗应能力明显下调,使得关节软骨发生明显破坏,破坏其正常的拱形结构,导致受累关节肿痛,引起关节软骨的退行性病变,参与KOA 发病过程[16-18]。因此,纠正膝关节OA患者MMP-9、12和13紊乱,保护关节软骨的细胞外基质成分避免发生降解是膝关节OA治疗的新方向[19-22]。本研究示病例M血清MMP-9、12和13水平较健康组更高。表明KOA患者存在血清MMP-9、12和13水平的异常升高,提示KOA患者体内存在MMPs水平紊乱,表现为MMP-9、12和13释放增加,加剧了软骨细胞和软骨基质的破坏,参与KOA的发病过程,MMP-9、12和13在KOA诊断和治疗中起及其重要作用。同时本研究结果发现治疗14 d后,血清MMP-9、12和13较前明显下降。表明MMP-9、12和13水平的变化可作为KOA患者疗效评价及预后评估的敏感血清学指标。
总之,KOA患者体内存在MMP-9、12和13水平紊乱,在其诊断和治疗中起重要作用。血清MMP-9、12和13水平的变化可作为KOA患者疗效评价及预后评估的敏感血清学间接指标。但血液中MMP-9、12和13水平与关节液中MMP-9、12和13水平可能并不完全一致,有关KOA患者关节液中MMP-9、12和13水平是否存在异常的变化及变化特点有待进一步进行深入研究探讨[23-25]。
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关键词:糖尿病;非酒精性脂肪肝;黄芪注射液;脂肪分化相关蛋白
中图分类号:R587.1 R256.2 文献标识码:A
doi:10.3969/j.issn.1672-1349.2014.04.042
文章编号:1672-1349(2014)04-0464-02
非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种以肝细胞脂肪变性为主,与酒精性肝病类似而无过量饮酒史的临床病理综合征。2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者由于肥胖、高脂血症等因素,因而更易发生NAFLD[1]。黄芪为中药益气药,有补益脾肺,益气补阳之功效,已广泛用于临床。据报道,黄芪可使高脂血症小鼠血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)水平降低,还具有抗脂质过氧化、抗氧自由基等作用[2,3]。本研究旨在观察黄芪注射液对糖尿病合并NAFLD大鼠血糖、血脂、肝脏形态学变化及脂肪分化相关蛋白的影响。
1 材料与方法
1.1 动物模型制备 雄性清洁级Wistar大鼠48只,体质量180 g~200 g,购自山西医科大学实验动物中心,实验经伦理委员会审查通过。将Wistar大鼠随机选择16只作为正常对照组,喂以普通饲料,其余30只用于制备糖尿病非酒精性脂肪肝模型,饲养环境控制在22 ℃~25 ℃。造模方法:高糖高脂饲料饲养(普通饲料66.5%、蔗糖20%、猪油10%、胆固醇2.5%、胆酸盐1%)。饲养4周后以50 mg/kg的剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素,继续高糖高脂饲料喂养4周。空腹尾静脉采血测空腹血糖(FBG),以3次FBG>11.1 mmol/L作为成模标准。将32只造模成功大鼠随机选择16只作为干预组,余16只作为模型组。干预组大鼠每日给予黄芪注射液3 mL/kg腹腔注射,对照组及模型组给予同体积生理盐水。
1.2 标本采集及检测 于干预后4周、8周(实验12周、16周)分批颈椎脱臼处死大鼠,心脏采血6 mL~8 mL,放于消毒干燥的EP管中,待血液凝固后1 000 r/min离心15 min,分离血清,-20 ℃保存待检。取大鼠肝脏右叶中部标本,一份置于-80 ℃冰箱保存,一份置于10%甲醛溶液中固定。血糖测定采用葡萄糖氧化酶法。血TG、TC采用全自动生化分析仪检测,试剂盒购自北京中杉试剂公司。
1.3 肝脏HE染色标本制备 梯度浓度的乙醇脱水,二甲苯透明,浸蜡,石蜡包埋,制成厚度为3 μm切片,行苏木素-伊红染色,中性树胶封片。
1.4 免疫印迹检测肝脏ADRP的表达水平 称取肝脏组织各0.1 g,按1∶1比例加入组织裂解液,4 ℃离心机,10 000 r/min,离心10 min,取上清,紫外分光光度计上测OD值,计算蛋白含量。配制8%和5%SDS-聚丙烯酰胺分离胶和浓缩胶,电泳槽中加入Tris-甘氨酸电泳缓冲液,60 V预电泳40 min,100 V电泳1 h。湿转膜法将蛋白转至NC膜上,设定参数100 V、350 mA转膜30 min。蛋白干粉封闭,按照1∶1 000浓度稀释ADRP一抗(santa cruz,sc-32888),将膜置于其中,4 ℃冰箱过夜,TBST缓冲液洗膜3次后置于二抗中室温轻摇反应1 h,TBST洗膜3次,ECL发光液显色,凝胶成像仪曝光显色。Bandscan图像分析软件对显影条带进行灰度分析,以平均灰度值作为蛋白的相对表达水平。
1.5 统计学处理 采用SPSS15.0软件进行统计学处理。计量数资料以均数±标准差(x±s)表示,采用t检验,检验水准a=0.05。
2 结 果
2.1 各组大鼠血糖及血脂的变化 8周时,模型组及干预组大鼠血糖、血TG及TC水平显著高于对照组(P0.05);16周时,干预组大鼠血糖及TG水平明显低于模型组(P
2.2 各组大鼠肝脏形态学变化 正常对照组大鼠肝小叶结构正常,肝细胞大小均匀一致,肝索及肝窦排列整齐。实验12周、16周时,模型组大鼠肝脏发生不同程度的脂肪变性,光镜下表现为肝细胞质中出现大小不等的空泡(脂滴),细胞核偏向细胞的一侧,中央静脉,汇管区及肝窦可见大量炎细胞浸润。干预组大鼠12周时肝脏脂肪变性程度与模型组大鼠基本相当,而炎细胞浸润程度较模型组程度轻。至实验16周时,干预组大鼠肝脂肪变性程度明显减轻,炎细胞浸润基本消失。
2.3 不同组别大鼠肝脏ADRP的表达水平 与对照组相比,模型组大鼠肝脏ADRP的表达水平显著增高,差异有统计学意义(P
3 讨 论
糖尿病是目前威胁人类健康的主要慢性病之一。糖尿病患者由于长期的高血糖,会出现多种并发症,其中非酒精性脂肪肝较为常见。就机制而言,由于胰岛素抵抗促进外周脂肪分解和高胰岛素血症使肝细胞发生脂肪变性,另一方面,氧化应激引起肝细胞发生炎症反应,甚至发生坏死和纤维化[4],目前临床治疗NAFLD主要以改善胰岛素抵抗,降低肝脏非酯化脂肪酸水平,改善氧化应激及内质网应激,纠正促纤维化、促炎因子与抗纤维化、抗炎因子之间的失衡为主。二甲双胍、他汀类及贝特类药物虽然可以从不同角度改善肝脏的病变程度[5-7],但副反应也较为明显,例如:二甲双胍具有一定的心脏毒性和骨折风险。黄芪是我国传统中药较常用的一种,且黄芪具有毒副反应小的特点,有研究报道黄芪对预防糖尿病并发症的发生和进展具有重要作用。
本研究首先采用高糖高脂饲料和链脲佐菌素建立糖尿病非酒精性脂肪肝大鼠模型,通过对模型组大鼠血糖、TG和TC的检测发现,模型存在明显的脂代谢紊乱,肝脏病理切片证实脂肪变性发生,表明糖尿病NAFLD模型构建成功。经过4周黄芪注射液的治疗,至实验12周时,干预组大鼠血清血糖、TG和TC水平均低于模型组,但差异无统计学意义。肝脏病理学切片检查显示,干预组大鼠12周时肝脏脂肪变性程度与模型组大鼠基本相当,而炎细胞浸润程度较模型组程度轻。至16周时,干预组大鼠血清血糖及TG水平明显低于模型组,差异有统计学意义,且干预组大鼠肝脂肪变性程度明显减轻,炎细胞浸润基本消失,提示黄芪注射液早期通过减轻炎症反应对NAFLD大鼠肝脏起到一定的保护作用,并且随着治疗的进行,可延缓肝脏的脂肪变性进程。
脂肪分化相关蛋白是一种脂滴表面蛋白,在几乎所有类型的哺乳类培养细胞中均有表达;在机体内ADRP表达于脂肪组织、肝脏、肌肉、乳腺、胰腺、小肠黏膜等,在高脂饮食诱导的脂肪肝、非酒精性脂肪肝以及酒精性脂肪肝内ADRP蛋白亦显著增加[8,9],研究表明能够诱导肝内TG增加的刺激均可增加肝细胞内ADRP蛋白的表达,且ADRP含量与肝细胞内脂质含量呈正相关,所以ADRP被认为是肝脏脂质蓄积的标记物[10]。本研究通过Western-blot检测了大鼠肝脏ADRP蛋白的表达水平,结果显示,与对照组相比,NAFLD大鼠肝脏ADRP水平显著增高,经黄芪注射液治疗后,NAFLD模型肝脏ADRP的表达水平下调,说明黄芪注射液可减少肝细胞脂质蓄积,减轻脂肪变性程度。
综上所述,黄芪注射液可改善NAFLD大鼠血糖血脂代谢紊乱,减轻肝脏的炎症反应和变性,具有一定的肝脏保护作用。而其发挥作用的具体机制以及对人NAFLD的疗效尚待进一步研究。
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