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学习企业文化心得感悟 200x年是我们天元发展有限职责公司的“企业文化建设年”,锐意创新的时代要求鞭策着我们发奋培植先进的企业文化。我们对企业文化塑造就应报一种什么样的期望,企业文化究竟能够给企业带来什么成果?我认为:企业文化建设的目的在于保证企业在不断变化的环境中持续发展。
首先,企业文化塑造是为了使企业适应不断变化的环境。在企业文化塑造中,主要透过共同价值观及理念的贯彻落实来增强对内部的凝聚力。在天元,你总觉得自己是受尊重的,你不用担心自己学不到东西,得不到重用。做大做强做优企业的追求不断地昭示着我们进取不息、追求卓越。追求卓越的核心思想就是创新。追求卓越表现了天元人永不自满、永远进取、永远创新的生生不息的精神境界。作为天元的一员,企业的利益高于一切。
其次,企业文化是为了企业经营绩效的提高。企业文化要能够“看得见”,我们要让天元企业文化出此刻全公司的各个角落。不但要有能够体现公司文化的办公环境、建筑和设施,在办公区、会议室、板报、内刊等传播媒介和公众场合,更要注意时时宣传和阐释我们公司的文化,尤其是企业文化理念;企业文化还要让员工“感受到”,员工的感受来自于切身的工作,与其相关的因素有领导风格、绩效考核、激励机制、团队关联、培训体系、制度和规范等。对企业管理者来说,培养学习的文化,构成学习的氛围,提倡团队合作,经常与下属沟通和交流,定期进行反思和感悟,这样才能真正领会到文化的真谛;企业文化更要让员工“自己做”,务必让员工行动起来,即使是带必须强制性的,但务必按照要求做,也就是进行“文化体验”。在体验时,是否思考能够给员工一些利益,如简单的沟通环境、更加灵活的激励机制。这些细节能够让员工在实际工作中感受到文化的力量,好比我们在促销中的“尝一尝”。
第三,企业文化是为了将企业的生命周期延长。我们要在狠抓公司各项管理的进程中,始终将企业文化建设贯穿其中,开展职工演唱会、诗歌朗诵、体育比赛等系列活动,帮忙职工陶冶情操、娱乐身心。商战无情,随着外来超市的不断进入,零售业竞争硝烟弥漫。我们天元连锁要在挑战面前审时度势,要迎难而上、稳扎稳打、步步推进,力求从商品、企业,服务三个方面做大自己的品牌。以“高品质,多品种、低价位”为经营宗旨,以“创石家庄人自己的连锁品牌,做石家庄人自己的低价卖场”为己任,打造连锁超市的核心竞争优势,行业创优、区域创优。同时构建科学管理机制,成功的把打造学习型团队、培育现代的企业文化、提升员工素质作为企业创新发展的不竭之源。这样既增强了企业的团队精神和文化品位,构成了天元特有的向心力,凝聚力,又激发了员工以企业为荣的学习力,创造力。
在新的一年中,我们就应更加关注员工在企业中的成长,经常举办业务培训,将经营中总结的经验和学习心得与他们分享,并采用外出参观、跟班学习、组织文化活动等多种形式,提高员工的综合素质,为他们发展带给平台。同时透过培训和企业文化的熏陶,使他们严格自律、刻苦学习、踏实苦干,在平凡的岗位上实现自身价值。正因只有具备智慧和激情才能让我们的员工魅力持久。没有文化支持的企业干不成大事,不去建立学习型组织的企业很可能被时代所淘汰。因此,把建立学习型组织与企业文化建设很好结合起来有着十分重要的好处。将培育进步的企业文化和发挥人的主体作用作为企业管理的主导环节,在这样一种企业文化的氛围中,我们天元人相互学习、相互信任、相互支持,发奋“学习新知识、创造新业绩、倡扬新风尚、建设新生活”,使大家充分发挥个人的潜力,情绪舒畅地得到发展、得以创新,提升自己生命的价值,将企业规模做大、实力做强、形象做优。
学习企业文化心得感悟
企业文化的作用在哪儿?说到底,恐怕在于提高企业的品位、提升员工的素养。这就要求企业文化要重“三品”,即品质、品格与品行。
企业文化的品质,主要体现在企业的价值理念。价值理念即价值观。价值观是个“总开关”。它不仅反映一个企业立身处事的信念、倾向、主张与态度,而且对企业起着行为取向、评价标准、评价原则和尺度的作用。企业的这种价值理念,用通俗的话讲,就是企业要奔向哪儿、目标是什么?员工要成为一支什么样的队伍、愿景是什么?这是一个企业发展的“纲”。只有纲举,才能目张;只有企业品质好,才能经得起风吹浪打,耐得住时光磨砺。
企业文化的品格,主要反映在企业的精神支撑。精神支撑即企业的精神。精神是一种意识。意识不仅能反映客观世界,而且能反作用于客观世界。所以,精神具有能动性,其表现在于有活力,即“龙马精神海鹤姿”;其本质在于能超越,即“今胜于古,后胜于今”;其境界在于“与天地合一”,即人与自然和谐共处,企业发展与“绿色”共行。企业的这种精神,源于企业走过的路,发展于企业正在走着的路,同时,又激励着企业将要走的路。这种精神,是一个企业的品性风格,体现着一个企业的精气神,预示着一个企业的明日兴衰。
企业文化的品行,主要彰显在企业的行为规范。行为规范即企业员工行为的准则或原则。无疑,作为企业的一名员工,既有其传统的行为或遗传的行为,又有其情感的行为或即时的行为,更应有其目标的理性行为或价值的理性行为。要保证企业既定目标的实现,就应该制定并遵循目标的理性行为规范;要保证企业价值理念的实现,就应该规定并执行价值的理性行为规范。这种目标与价值的理性行为规范,既表现在立身处事上,又表现在行动举止上,还表现在姿态风度上。这种行为规范,是企业价值的心灵取向,是企业心灵的外在表现,是企业要达目标的理性选择。
要使企业文化的品质、品格、品行得以实现,仅仅靠知晓并提出企业的价值理念、精神支撑、行为规范还不够,必须要有相应的方式方法。这个方式方法,不是靠让广大员工死记硬背某些提炼出来的概念、条文,而是要让广大员工理解并能自觉执行这些理念、精神与行为要求。要做到这一点,员工最喜闻乐见的是靠大家“化”大家,即从员工中挖掘出典型案例、提炼出典型格言,从而用讲故事的方法、用员工格言的方式使价值理念形象化、精神支撑口语化、行为规范具体化,以达到用身边的事教育身边的人、用身边的人提升身边的事的效果。
企业文化的品质、品格、品行,一言以蔽之,是企业的品位。企业是一个经济组织,同时,作为社会上的一个单位,又可以说是一个社会组织。是经济组织,就要赚钱。赚钱要有道。黑心钱、昧心钱不仅不能赚,还要与之作斗争。是社会组织,就要负责。不仅对企业内的员工负责,还要对与之关联的供货商、分销商、社区负责,更要对养育自己的消费者和使自己安身立命的国家负责,做到既要承担好公认的职责,又要勇挑各方期待的职责,从而使企业“不摇香已乱,无风花自飞”。也就是说,通过重企业文化的“三品”,不仅使企业强,更使企业“香”,且香“飞”千里,行得远、走得久。
学习企业文化心得感悟 全新的企业文化公布了,作为一名网新人,我更加清楚地了解了公司定位、目标、方向和发展思路。一个人创造不了文化,一件事不能形成文化,网新文化关切每一个人,每一件事。学习企业文化的同时,我对当中的管理和团队有所感触。
但是在实际工作中也有一些不符合企业文化精神的做法,在此想谈谈我的看法。
关于部门间协调工作的问题。
我们客服部经常接触运管、财务、资质组,我发现在部门协调性的工作中经常会遇到经办人态度不好、速度慢、流程复杂多变、各自为政等等情况,导致不同的部门之间有一堵无形的墙。例如又一次在客户临时要办理续费,我去财务开发票,但是开票的前提是订单已审,客户总公司的财务一个月来报一次推广费用,错过了就要到下个月。在hi上沟通无效的情况下我就去运管部说明情况,但是他们讲我每次都上去催订单,很不理解。
建议建立一套应急机制,将此类情况列入应急流程,保障客户利益。跨部门工作是正常的事情,如果不打破交流障碍会影响整个公司工作效率和运营速度。
关于岗位职责范围界定的问题。
上次公司客户答谢会,我有客户同意会场续费领礼品,当时签了续费合同。我把合同拿给财务,申请拿礼品,但是财务坚持认为我的合同金额是自己临时写上去的,不像真的。拒绝给我礼品,导致我的工作很被动,后来花了一番周折才解决了。我认为财务的工作职责是看到合同当即确认,如果合同是假,导致的后果应该是我来承担。如果我交了合同他不给确认,那是他没有搞清自己的工作职责。
建议公司明确各个岗位的职责范围,在岗人员应当十分清楚自己该做什么,不能以自己的主观判断影响各个部门的正常工作。
关于公司政策的连续性和稳定性问题。
公司续费的礼品政策经常无故中断,或者变更礼品档次。礼品作为我们客服做好客户关系的有效方法,有的客户很看重。经常我们与客户是在续费前就与客户确认好礼品事宜,但是客户打完款后政策又变了,我们不好跟客户交代。一方面影响客服在客户心中的形象,另外也阻碍我们的工作进度。
学习企业文化心得感悟 公司企业就好比像一艘行驶在大海之中的扁舟,只有大伙齐心协力、共谋划策、凝成一股神,心往一处想、力往一处使,才能稳步快速地达到胜利辉煌的彼岸。
只有公司企业在不断茁壮成长、公司企业获得辉煌的成绩时,才有自己稳步向前发展的机会和平台。公司是我家,要做到厂兴我荣、厂衰我耻。要以集体利益为重,要会舍小家为大家。要与企业的兴旺壮大共同成长进步。与公司企业共命运,共谋更大的发展。要学之所用,充分发挥自己的专业技能专长。
在工作中要安份守纪、勤勤恳恳做人、踏踏实实做事。要有积极向上奋发进取乐观的心。对待工作事情要有军人般的气质与气魄,要学习遵照军人般的纪律和习性。忠心乐观高兴的服从领导安排的工作任务,交代的事情要按质按量按时认认真真的完成好。爱岗敬业、团队意识时刻牢记于心。多与领导、同事沟通交流学习,虚心学习。要不断地学习新知识新技术,电子电器技术产品是在不断飞速的发展,唯有给自己不停不断地充电,以求完善自己学到更多的知识本领,才能让自己立于社会不败之地。在生活工作中多多地问自己做得怎么样,多站在公司立场想想,扪心自问。
对有利于公司企业健康良好稳步发展的好的意见建议要及时勇于提出来,严谨对待工作,在工作上要认认真真、一丝不苟。工作之中要有豪放的气概、畅所欲言、性格可热情活泼开朗,做到与全公司领导同事和睦融洽相处、共同进步。
企业文化是一个包含企业行为准则、企业信念、企业价值观的复合体。企业文化建设是实施企业发展战略和提高企业经营管理水平的有效途径,是激励员工积极性和创造性的内在动力,是提高企业市场竞争力的重要法宝,是保证企业长盛不衰的核心力量,是塑造企业形象的有效手段。每个成功的企业,都有自己的企业文化,一个企业如果想发展壮大,就必须依靠企业文化来增强员工的凝聚力。良好的企业文化,既有利于公司的发展,也有利于员工个人的发展,好的企业文化,能限度的激发员工的潜能,创造的经济效益和社会效益。
不洒汗水的人就不可能收获,既然选择了自己的事业,那么你就必须准备为之付出代价---大量的心血和汗水。创业是很难的,它不属于那些贪图安逸享乐的人,一步一个深深的脚印好好的努力吧。抓住今天,你就会拥有明天。把自己的兴趣和爱好带到工作之中来。
学习企业文化心得感悟
俗话说得好:“女怕嫁错郎,男怕入错行”,找一份工作容易,而找一份好的、适合自己发展前途的好工作却并不那么容易,而认真务实坚持做好一份工作也不是一朝一夕的事情。因此务必认真对待、珍惜自己发奋争取得来的工作机会。这天不发奋工作,而就意味着明天要发奋找工作了。
公司企业就好比像一艘行驶在大海之中的扁舟,只有大伙齐心协力、共谋划策、凝成一股神,心往一处想、力往一处使,才能稳步快速地到达胜利辉煌的彼岸。
只有公司企业在不断茁壮成长、公司企业获得辉煌的成绩时,才有自己稳步向前发展的机会和平台。公司是我家,要做到厂兴我荣、厂衰我耻。要以群众利益为重,要会舍小家为大家。要与企业的兴旺壮大共同成长进步。与公司企业共命运,共谋更大最大的发展。要学之所用,充分发挥自己的专业技能专长。
在工作中要安份守纪、勤勤恳恳做人、踏踏实实做事。要有用心向上奋发进取乐观的心。对待工作事情要有军人般的气质与气魄,要学习遵照军人般的纪律和习性。忠心乐观高兴的服从领导安排的工作任务,交代的事情要按质按量按时认认真真的完成好。爱岗敬业、团队意识时刻牢记于心。多与领导、同事沟通交流学习,虚心学习。要不断地学习新知识新技术,电子电器技术产品是在不断飞速的发展,唯有给自己不停不断地充电,以求完善自己学到更多的知识本领,才能让自己立于社会不败之地。在生活工作中多多地问自己做得怎样样,多站在公司立场想想,扪心自问。
对有利于公司企业健康良好稳步发展的好的意见推荐要及时勇于提出来,严谨对待工作,在工作上要认认真真、一丝不苟。工作之中要有豪放的气概、畅所欲言、性格可热情活泼开朗,做到与全公司领导同事和睦融洽相处、共同进步。
企业文化是一个包含企业行为准则、企业信念、企业价值观的复合体。企业文化建设是实施企业发展方法和提高企业经营管理水平的有效途径,是激励员工用心性和创造性的内在动力,是提高企业市场竞争力的重要法宝,是保证企业长盛不衰的核心力量,是塑造企业形象的有效手段。每个成功的企业,都有自己的企业文化,一个企业如果想发展壮大,就务必依靠企业文化来增强员工的凝聚力。良好的企业文化,既有利于公司的发展,也有利于员工个人的发展,好的企业文化,能最大限度的激发员工的潜能,创造最大的经济效益和社会效益。
不洒汗水的人就不可能收获,既然选取了自己的事业,那么你就务必准备为之付出代价---超多的心血和汗水。创业是很难的,它不属于那些贪图安逸享乐的人,一步一个深深的脚印好好的发奋吧。抓住这天,你就会拥有明天。把自己的兴趣和爱好带到工作之中来。
学习企业文化心得感悟
前不久,我在某报上读到这样一则消息:海尔人在接待参观者的整个过程中,主人总是坚持面朝着参观者边倒行边介绍情况,许多参观者对这种倒行工作法费解,时常有人问:你们这样做是不是有点难受 但听到的回答却总是一样的,面对你们是一种尊重。大家知道,海尔集团是在海内外享有盛誉的大型国际化企业,海尔之所以能快速成长为企业巨人,关键因素就是因为它锤炼形成了富有自身特色的企业文化,并且使之在职工心中深深地扎了根,不断开出芬芳的花朵,结出丰硕的果实,焕发出源源不断的生机和活力。海尔现象及其培育的企业文化已成为许多专家、企业关注和研究的焦点,成为人们前进的路标和旗帜。
说到这里也许就会有人问:企业文化真的有那么神奇吗 到底什么是企业文化呢 专家已经给出了定义:企业文化是企业在长期的生产经营活动中创造的具有企业特色的物质财富和精神财富的总和,它对外是一面旗帜,对内是一种向心力,是企业的灵魂和持久动力。企业文化包括精神文化、制度文化和物质文化。其中,精神文化又称企业理念,是企业文化的精髓,处于核心地位。
近期我有幸参加了在xx市举办的 “全国中小学德育管理与班主任工作技能提升高级研修班”的学习。在这次学习中,我们聆听了华林飞老师的《关爱学生需要教育智慧》、田丽霞老师的《班级管理中的辩证法》、李凤遐老师的《用班主任所有的爱去成就学生精彩的未来》、郑学志老师的《班级自主教育管理解读》精彩报告。通过这两天的学习,我感触很深,同是战斗在教育战线上的同仁,我们做的远远不够,对教育的理解还处于较浅的层次,有很多的做法过于简单,没能从长远的发展眼光看教育。下面就谈谈我的一点学习感受。
一、以善致善,让学生心灵接受洗礼
华老师讲了这样一个教育案例:在与家长的接触中,我了解到很多学生对家长不尊重家长,而且动辄以离家出走相威胁。结合学校的“感恩教育”我准备召开一次以“关爱父母”为主题的班会。班会前我正好听到几个女生围在一起谈论说,某一女生削铅笔把手指削了一个深口子,流了很多血,可她妈比她哭得还厉害。班会课时,我就以此事入题问那女生:你手指削破了,感到疼吗?(生:肯定疼)你妈妈为什么哭?(生:肯定是为我的痛而痛)。我问全班同学如果你们的妈妈切菜时手指被切了,你们会感到同样的疼痛吗?(生不语)是啊!我们每个同学受伤都会感到疼痛,那么,别人受伤,你会感到疼痛吗?知道自己的痛就要知道别人的痛,悲悯自己的苦难就要同情他人的苦难,关爱自己,同时要关爱他人。这就是孟子所说的“老吾老以及人之老”。今天就以此为话题,讨论一下如何处理亲子关系。然后,我在屏幕上打出下列画面和文字:故事一 撒哈拉沙漠中,母骆驼为了使即将渴死的小骆驼喝到够不着的深潭里的水,而纵身跳入潭中,让水涨起来,以母死来换取子生。故事二一条鳝鱼在油锅中被煎时始终弓起身子,是为了保护腹中的小鳝鱼。故事三 在十几层楼高的电梯上劳动的一男一女两个建筑工人,在电梯铁链断裂的瞬间同时抓住一根木条,而这根木条不能承受两个人的重量,眼看就要断裂,那女人对男人说她是两个孩子的母亲,这个男人毅然松了手,用生命换取那母亲的存活。听完故事,让学生谈感想,这一节班会下来,学生的心灵受到了洗礼,灵魂得到了升华。我趁机倡议开展短信献恩师、贺卡送双亲等竞赛活动,从中评出最有人情味的短信发给师长并予以奖励。并要求学生在家要帮爸爸妈妈做几件家务事。还要求每一位同学每一周要为班级做一件好事,而且要在周末的班会上汇报,并记入每个人的成长档案。
华老师还讲了一个案例: 我一直认为,90后群体不缺乏爱,他们是被爱包围了的一群,他们缺乏的是如何把爱心传递给别人。我在班上持续开展爱心传递活动,确实收到了一些好的效果。如我班上的门轴响声大,有同学把机油带来注入其中;黑板擦擦黑板灰多,有同学用毛巾擦;进门脚步轻轻,不会惊扰他人等蔚成风气。在日常生活中,我又积极倡导师生关系的和谐与温馨,我要求每天老师上课有人帮她倒水,有人帮她抹讲台,有人帮她拿教具。见了老师要问好,离开老师要再见,老师上课有绿茶,节日讲台放鲜花。为了给学生树立榜样,我还主动承诺在校内见到学生向我问好,我一定双脚并拢向学生一鞠躬并答谢。有学生故意逗我,一见我就问好,看见我一本正经地答礼,便偷着乐,我也跟着乐。有一次,一位值日老师老师惊奇的对我说:“你有什么高招?你们班的朱某某以前见了老师理都不理,今天居然在走廊里对我喊老师好。”
【摘要】 目的: 探讨新生儿外周血及胃液HBeAg, HBsAg等标志物与乙型肝炎病毒宫内感染的关系. 方法: 连续收集母亲外周血标本和新生儿外周血及胃液标本,ELISA检测HBeAg, HBsAg, PCR方法检测HBV DNA;以ABBOTT试剂检测新生儿HBsAg. 采用χ2检验等统计学方法对结果进行统计分析. 结果: 共收集133例母亲、新生儿血标本和胃液标本. 58例胃液HBsAg阳性,9例胃液HBeAg阳性. HBV DNA均阴性,其中发生宫内感染5例. 统计学检验显示新生儿外周血HBeAg、胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关系,而胃液HBeAg阳性与乙肝病毒宫内感染没有关系 (P=0.415). 结论: 新生儿外周血HBeAg与胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关;但是由于所有标本HBV DNA均阴性,尚不支持乙肝病毒宫内感染的胃液途径.
【关键词】 肝炎表面抗原,乙型;宫内传播;肝炎,乙型
【Abstract】 AIM: To estimate the relationship of hepatitis B virus (HBV) intrauterine trarsmission to HBeAg or HBsAg in neonatal peripheral serum or gastric aspirates. METHODS: Gastric samples from neonates and serum samples from both mothers and neonates were consecutively collected and detected with ELISA for HBsAg or HBeAg and with PCR for HBV DNA in gastric samples. Chi square test and Fishers exact test were employed to find out the significance. RESULTS: A total of 133 neonatal gastric aspirates were collected and 58 of them were detected positive for HBsAg, 9 positive for HBeAg. All were detected negative for HBV DNA, 5 had intrauterine infection. Statistical analysis indicated that association of HBsAg in gastric aspirates, HBeAg in peripheral serum with HBV intrauterine transmission was significant, but HBeAg in gastric aspirates was not. CONCLUSION: Although HBsAg in gastric aspirates and HBeAg in peripheral serum are associated with HBV intrauterine transmission, HBV DNA was not found in gastric aspirates. Therefore, neonatal acquired HBV by gastric fluid routine is not conclusive.
【Keywords】 hepatitis B surface antigens; intrauterine transmission; hepatitis B
0引言
乙型肝炎(hepatitis B, HB)是一种严重危害人类健康的传染病. 我国是乙肝高发区,人群感染率高达60%. 乙肝表面抗原(Hepatitis B virus surface antigen, HBsAg)携带者亦高达10%~15%. 乙型肝炎年病毒(Hepatitis B virus, HBV)携带者超过1.2亿,其中大多数为母婴传播所致[1]. 目前的危险因素研究都是以母亲为核心进行的,而新生儿的乙肝标志物还没有进行过深入研究. Chen等[2]首次探讨了新生儿胃液HBsAg与HBV宫内感染的关系,他们发现发生宫内感染新生儿其胃液HBsAg均阳性,但其联系的强度、意义尚待深入研究.
1对象和方法
1.1对象
200210/200407陕西省妇幼保健院待产的、HBsAg阳性孕妇及其新生儿为研究对象. 采集孕妇肘静脉血和新生儿股静脉血,离心分离血清,低温保存. 新生儿出生后、进食前立即收取胃液,低温保存备用.
1.2方法
新生儿胃液HBeAg, HBsAg检测均采用ELISA方法进行;诊断试剂盒购于科华生物工程有限公司(上海);胃液标本HBV DNA检测采用PCR方法,引物及扩增方法参见文献[3]. 新生儿股静脉血HBsAg采用Abbott 公司的HBsAg诊断试剂进行检测,检测程序及结果阅读在Abbott System上自动完成,以S/N≥5为宫内感染诊断标准.
2结果
2.1一般情况共收集临床检验HBsAg阳性孕妇133例及其所产新生儿135例. 新生儿血清或胃液不足或已不适于ELISA检测2例,故实际检测的病例数为133例.
2.2新生儿胃液检测结果和外周血ELISA检测结果依据我们的诊断标准,共有5例新生儿发生宫内感染. 133例新生儿中有58例胃液HBsAg阳性,75例胃液HBeAg, HBsAg均阴性. 胃液HBeAg阳性9例,胃液HBsAg和HBeAg同时阳性7例,新生儿胃液HBV DNA PCR检测均为阴性.
2.3胃液HBsAg阳性新生儿外周血及其母亲外周血HBeAg检测我们对58例胃液HBsAg阳性新生儿外周血及其母亲外周血也检测了HBeAg. 共检测到15例HBeAg阳性孕妇. 这15例HBeAg阳性孕妇所产的16例新生儿有11例HBeAg阳性(68.75%,11/16). 精确检验显示新生儿胃液HBsAg与乙肝病毒宫内感染有关系(P=0.015,表1),而HBeAg阳性与乙肝病毒宫内感染没有关系 (P=0.415,表2). 本次调查的57名孕妇中,HBeAg阳性孕妇15例(26.31%),发生宫内感染3例. 精确检验显示母亲、新生儿HBeAg都与乙肝病毒宫内感染有关(表3). 表1新生儿胃液HBsAg与宫内感染的关系(略)表2新生儿胃液HBeAg与宫内感染的关系(略)表3外周血HBeAg阳性对乙肝病毒宫内感染的关系(略)
2.4新生儿外周血、胃液HBsAg, HBeAg分布差异比较 新生儿外周血标本HBeAg的传播率为68.75%(11/16),HBsAg宫内传播率为5.17%(3/58);而在胃液标本中HBeAg的传播率为31.03%(9/29),HBsAg的阳性率为43.61%(58/133). χ2检验显示HBeAg在新生儿外周血、胃液中的分布相一致(P=0.62);而HBsAg在新生儿外周血、胃液中的分布是不一致(P
3讨论
Wang等[3]在7例HBeAg阳性母亲的新生儿静脉血检测到HBeAg,且新生儿HBeAg滴度都低于他们的母亲,本研究对部分新生儿股静脉血血清HBeAg和母亲血清HBeAg进行检测,共检出16例阳性母亲,其所产新生儿有11例HBeAg阳性. 新生儿外周血HBeAg阳性率明显高于外周血HBsAg阳性率,提示HBeAg和HBsAg跨越胎盘的机制可能不同.
胎儿发育过程中如果在宫内暴露于一些免疫源性物质则易引起免疫耐受. Chen等[4]用HBeAg决定多肽表位p120131刺激HBeAg转基因雌性小鼠的子代(F1)和正常小鼠,发现HBeAg转基因小鼠的子代小鼠抗原刺激后淋巴细胞增生能力明显低于正常小鼠,提示宫内暴露于HBeAg可引起免疫耐受[5]. 本次研究发现不仅验证了母亲HBeAg阳性仍然是HBV宫内感染的危险因素[1];同时也发现新生儿HBeAg与HBV宫内传播也有关. HBeAg是否是通过影响胎儿免疫系统,进而增加感染的风险,有待于深入研究.
Chen等[6]对新生儿胃液进行HBsAg检测,发现宫内感染新生儿其胃液HBsAg均阳性. 本次研究结果显示新生儿胃液HBsAg与HBV宫内感染有关系(P=0.015),而胃液HBeAg阳性与HBV宫内感染没有关系 (P=0.415). 同时,本次研究结果显示胃液标本HBV DNA全阴性,而单一的HBsAg阳性还不足以说明完整的HBV病毒颗粒的存在. 因此,尚不支持HBV宫内感染的消化道途径,新生儿胃液HBsAg阳性与HBV宫内感染的关系也有待于深入的研究.
【参考文献】
[1]Xu DZ, Men K, Choi BC, et al. Risk factors and mechanism of transplacental transmission of hepatitis B virus: A casecontrol study [J]. J Med Virol 2002;67:20-26.
[2]Chen WH, Yin CS, Chang Y K, et al. Neonatal gastric aspirates as a predictor of perinatal hepatitis B virus infections[J]. Int J Gyn Obst, 1998,60(1): 15-21.
[3]邵中军,徐德忠,徐剑秋,等. 孕期性行为与乙型肝炎病毒宫内感染关系的病例对照研究[J].中华流行病学杂志,2005,26(4):232-235.
[4]Wang JS, Zhu QR. Infection of the fetus with hepatitis B e antigen via the placenta[J]. Lancet, 2000,355(9208):989.
1.从美术作品中感悟古人对自然的消极适应
古人对大自然的关系是怎样的呢?我们无法与古人对话,但可以让学生欣赏古人的美术作品,从中感悟古人对自然的认识。
我首先让学生欣赏原始洞窟壁画的图片,从而引领他们走进原始社会。发现于19世纪的拉科洞窟壁画和阿尔塔米洞窟壁画,是迄今为止所发现的人类最早的绘画艺术作品,其中以《 受伤的野牛 》《 阿尔塔米拉野山羊 》这两幅为代表作品。这些壁画最早创作于旧石器晚期,距今已有3万年历史。这些作品多以动物形象为主,其中《 受伤的野牛 》带有某种符咒的意味,作者把受伤的野牛画在洞窟上,似乎意味着人们经过搏斗才获得了一头野牛。通过对这些作品的欣赏,学生可以认识到原始社会早期的居住和生活环境的艰苦和险恶,明白这是由于原始社会人类生产力极度低下造成的。
到了封建社会,人们认为自然灾害以及各种疫病都是神操作的结果,所以古人因敬畏大自然而创作了大量的图腾艺术和神殿神庙。对此,我展示了古希腊雅典卫城巴底农神庙的图片,还有我国一些边远山寨中图腾柱的图片给学生欣赏。让学生感悟古人因敬畏自然而对自然采取的消极适应态度。通过欣赏原始洞窟壁画、神殿神庙文化以及封建图腾艺术的图片,能让学生深切感悟到古人对自然的极度依赖心理。
2.从美术作品中感悟近代人对自然的贪婪掠夺
随着封建社会的衰落和资本主义的发展,人类社会进入了工业革命时代,人类对大自然的意识和行为相应地也发生巨大的变化。我利用多媒体,展示了收藏在德国柏林国立博物馆门采尔画的油画《 轧钢厂 》,为学生推开了工业革命的大门。这幅画画的是轧钢车间繁忙的生产景象。我先让学生回顾工业革命的历程再结合这幅画谈感想。结果学生认识到这幅作品既是19世纪末欧洲工业发展的颂歌,也是劳动者沦为劳动机器的写照。在此基础上,我又根据画面内容,引导学生思考工厂的原料消耗及排泄污染的情况。学生透过油画,仿佛看到了一方面人类在对自然资源进行疯狂地开采和掠夺,另一方面大自然又被人类排放的废气废物无情地污染。于是他们认识到,工业革命是一把双刃剑,它在创造物质文明的同时,又在不断地破坏周围的生态环境。
接着,我又用多媒体给学生展示了我国杰出画家蒋兆和的国画《 流民图 》,让学生思考这幅画反映的历史背景。造型朴素、表情逼真的《 流民图 》所营造的悲伤气氛一下子把学生带入了深沉的思索中。结合这幅画的创作年代,学生明白了整幅画描绘的是在日本侵略者铁蹄下背井离乡、流离失所的中国难民的悲惨处境。我让学生结合历史知识,分析日本侵华的原因。学生经过讨论,认为侵华的原因主要有三点:首先,,称霸太平洋是日本帝国主义的既定国策;其次,受世界性资本主义经济危机的影响,当时日本经济陷入低谷,侵华是其转移国内矛盾的措施之一;再次,日本是一个岛国,自然资源匮乏,它渴望掠夺中国乃至整个亚洲的自然资源。通过分析,学生明白了为了掠夺自然资源,人类竟然会以强凌弱发动侵略战争。
通过欣赏和评述《 轧钢厂 》《 流民图 》,学生认识到人类在向大自然索取资源的同时还在疯狂地破坏自然;认识到人类为了掠夺自然资源可以不惜发动战争,从而暴露出自己贪婪的本性。
3.从美术作品中感悟当代人与自然的和谐发展
翻过古代和近代这一页,我又用图画把学生带进了当代生活。先用多媒体展示我国漫画家杨昆原的漫画《 大买主 》。这幅作品把地球塑造成一个巨大的秃发人,通过拟人的手法让地球和普通人在一起排队购买“101毛发再生精”。原来地球也想用药物来刺激毛发的生长,而它的毛发就是地球的绿色植被。这幅画的表现方法可谓生动有趣。在此基础上,我又给学生展示了一系列提倡节能减排的环保美术作品,让学生明白保护自然环境的重要性。
接着,我又给学生欣赏美术作品《 热带伊甸园 》。这幅画描绘了英国的一座大型植物展览馆的情形。展览馆建在英格兰西南部一座曾被疯狂开采过而废弃的矿区上,如今它已成为世界最大的温室,种植了来自世界各地的数万种植物。我告诉学生,这个展览馆是园林建设和环保理念的完美结合,体现了人与自然和谐相处的关系,因此它也被称为“通往植物与人类世界的大门”。
国外有体现环保理念的展览馆,我们国内有没有类似的地方呢?通过展示上海世博会的会徽以及“海宝”吉祥物的图片,又把学生领进了2010年上海世博园。通过视频,我先让学生感受上海世博园的宏大与精彩,再让学生领悟到这不仅是一次经济、科技、文化、艺术的世界盛会,更是一件把环保理念变成现实的典范之作。因为这次世博会,从建筑到展品、从展览内容到布展方式都充分体现了节能、减排、绿色、低碳的环保理念。通过上海世博会的相关照片和美术作品,学生接受了当代人应该与自然和谐发展的观念。
【关键词】 骨髓细胞;成骨细胞;生长物质;组织工程
0引言
骨骼损伤、肿瘤等导致的骨缺损是骨科每天都要面临的问题,临床医生通常是通过自体或异体骨移植方法来解决缺损问题,但这种方法存在着来源有限、增加创伤、排斥反应及疾病传播等问题. 由于利用组织工程学原理与方法再生的骨组织植入体内无免疫排斥的危险且来源充足,因此它的优势逐渐得到认同[1] . 近年来,组织工程迅猛发展并且是目前公认的最有可能在临床取得实际效益的研究领域之一[2]. 但是要真正广泛应用于临床,还必须解决好组织工程的三大关键问题即种子细胞、可降解的生物支架及生长因子. 骨髓来源的骨髓基质干细胞(marrow stromal stem cells, MSCs)由于取材容易,易于体外培养和诱导,是目前最有前途成为组织工程种子细胞来源的细胞[3-4]. 组织工程是将细胞与材料复合,从而构建植入人体的活材料. 在此过程中,目的细胞的生长调控是十分重要的一环,因此对生长因子的作用及其机制的研究是组织工程的重要内容. 生长因子是通过细胞间信号传递影响细胞活动的一类多肽因子,它对细胞具有促进或抑制其分裂增殖、迁移和基因表达的作用. 生长因子对目的细胞作用有利于在体外构建与体内更为相似的模拟环境,从而为体内试验奠定基础.
1骨髓基质干细胞及成骨诱导
目前,骨组织工程种子细胞的分离主要有三种来源:骨髓来源、骨膜来源和松质骨来源[5]. 种子细胞的培养是骨组织工程的前提与基础. MSCs 由于其强大的增殖能力与多向分化潜能成为骨组织工程的种子细胞之一[6].
骨髓是由造血系统和基质系统组成的复合组织,它除了是造血干细胞的主要来源外,同时成人的骨髓组织中还存在着骨髓间质干细胞. 20世纪70年代中期,Friedenstein等[7]报道,骨髓标本中小部分贴附细胞在培养过程中能够分化形成类似骨或软骨的集落,这部分贴壁的细胞就是骨髓基质干细胞,也叫间质干细胞. 这种间质干细胞具有多方向的分化潜能,可以分化成为骨、软骨、肌肉、韧带、肌腱和脂肪等组织[8-9]. 间质干细胞的多向分化特性使之成为组织工程的理想细胞来源,是目前骨组织工程普遍选用的细胞. 近年来的许多组织工程研究均采用了人或动物的骨髓间质干细胞,其结果十分令人满意[10-11].
现有的MSCs培养方法主要为应用诱导剂 (地塞米松、β甘油磷酸钠、抗坏血酸) 和生长因子进行诱导,但诱导效果均不甚理想. 国内外研究者发现, MSCs的分化具有位点特异性,即在何种微环境中培养MSCs,就倾向于向这类环境中的细胞分化. 根据MSCs分化的位点特异性,在骨组织工程中欲把MSCs诱导分化为成骨细胞,采用模拟成骨微环境来诱导MSCs的增殖与成骨分化可能也是一种有效的诱导方法[12-13].
2骨组织工程相关因子
生长因子的合理应用对构建骨组织工程起着关键的作用. 骨组织拥有一个庞大的生长因子库,目前在骨组织中发现了十几种生长因子,已经发现有多种细胞因子对成骨过程具有重要的调节作用,可以诱导成骨、促进细胞增殖和胶原合成、促进成骨和血管生长以及在骨吸收改建方面发挥作用,因此在构建组织工程骨时对成骨因子合理使用或调控成骨细胞的适时适量表达十分重要.
2.1血管内皮生长因子VEGF又称血管通透因子(VPF)或(VAS),是近年来发现的一种高度特异性的促血管内皮细胞生长因子,对胚胎发育及切口修复等生理功能有重要意义. VEGF是一种糖蛋白,其相对分子量为34~45 ku由两个相对分子量各为17 ~22 ku的不同亚单位组成的二聚体,VEGF就是由于该基因的剪切方式不同所形成的系列产物. 人至少有4种VEGF,分别为VEGF121, VEGF165, VEGF189和VEGF206. 近年来研究表明,血管内皮生长因子对中胚层细胞分化有作用,可以使骨髓基质干细胞向成骨分化. Midy等[14]发现,外源性VEGF能使体外培养的成骨细胞碱性磷酸酶(ALP) 活性及cAMP浓度提高4倍. VEGF诱导成骨细胞迁移,增加ALP活性,同时成骨细胞自身合成VEGF. PGE1, PGE2, 1, 25(OH)维生素D3及IGFⅠ能增加成骨细胞VEGF mRNA的表达.
2.2肿瘤坏死因子TNF是一种糖蛋白的低聚物,分子量为39~70 ku,是多功能的细胞因子,主要由活化的巨噬细胞和T细胞产生. TNF是迄今为止所发现的直接杀伤肿瘤细胞作用最强的生物活性因子之一. TNF分两大类:由活化的巨噬细胞产生的称为TNFα,由活化的T细胞产生的TNF称为TNFβ,它们共同作用于同一受体. TNF可刺激培养的成骨细胞和骨器官合成RNA和PGE2,TNF可以抑制胶原和骨钙素的合成以及1, 25(OH)维生素D3刺激的ALP活性,但它可刺激Ι型胶原mRNA表达,这说明TNF的这种胶原合成抑制作用受翻译后产物的调节[15].
2.3骨形成蛋白BMP是广泛存在于骨基质中的一种酸性糖蛋白,是目前唯一被确认具有异位成骨能力的生长因子,它能在体内、外诱导骨髓基质细胞转化为成骨细胞,使高分化的骨细胞群体数量保持稳定. Okubo等[16]用支架材料与不同剂量的BMP复合后植入兔下颌骨的骨缺损中,3 wk后ALP和组织学检查发现新骨形成,证实BMP诱导成骨系软骨内化骨形成过程,且成骨量随BMP剂量增加而增加,有明显的剂量依赖性. 陈克明等[17]认为: BMP与纤维蛋白制成的复合物,具有良好的骨诱导活性. 载体包容BMP等诱导因子可有效缓慢的释放,以发挥其诱导作用. 余家阔等[18]认为,在BMP诱导下,无论是幼稚软骨细胞还是成熟软骨细胞都有表达成骨细胞表型的趋势. 目前认为BMP是骨组织工程中促进成骨作用最重要的一种,近年来BMP作为一种有价值的生长因子越来越受到人们的重视,然而其诱导成骨的机制目前却并不完全清楚. 但由于BMP在骨组织中含量极少且在体内扩散很快,容易被蛋白酶所分解,因而不能在局部发挥持续刺激和诱导成骨作用,其诱导活性难以得到充分的发挥[19].
2.4转移生长因子TGFβ是一种有多种功能的单链多肽,分子量为25ku,具有对骨组织、结缔组织及免疫系统等细胞的调节功能,其调节作用包括细胞生长调节和分化诱导两方面. 目前发现有5种亚型,分别为TGFβ1~TGFβ5. TGFβ广泛存在于多种组织及转化细胞中,其中以骨组织、血小板、软骨组织中含量最丰富,而TGFβ受体在成骨细胞表达最多,表明TGFβ的主要作用是调节骨代谢. 有实验表明TGFβ对胶原基因表达和胶原的合成具有促进作用. TGFβ可促进细胞增殖与分化,促进细胞外基质合成,也是多种免疫细胞的自分泌或旁分泌的调节因子[20].
TGFβ为主要成骨因子之一,它诱导间充质细胞合成软骨特异性蛋白聚糖和Ⅱ型胶原,刺激成骨细胞的增殖及胶原合成. TGFβ在体外对成骨细胞的作用很复杂,部分取决于TGFβ的浓度、细胞密度、种系和成骨细胞的分化阶段. 多数研究认为TGFβ能抑制成骨细胞游离钙的合成、增加成骨细胞分化以及成骨细胞胶原和ALP的表达. TGFβ对成骨细胞生长有调控作用,这种作用在一定程度上表现为双相性. 研究表明,含血清培养的成骨细胞,低浓度的TGFβ可以刺激细胞DNA和胶原合成,抑制ALP活性,刺激细胞生长;而高浓度则抑制胶原合成,对DNA合成无作用. 无血清培养的成骨细胞,高浓度TGFβ抑制ALP生成. 此外,也有研究表明,TGFβ促进骨髓源性和骨膜源性骨前体细胞趋化到骨软骨损伤部位,进而增生、分化形成成骨细胞和软骨细胞 [21].
2.5成纤维细胞生长因子FGF是一种对中胚层和神经外胚层细胞具有促有丝分裂作用的多肽生长因子. 它对成骨细胞具有促增殖作用,并且通过增殖骨细胞数目促进骨形成. FGF分为酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)和碱性成纤维细胞生长因(bFGF)两种. aFGF存在于骨细胞浸出物中,bFGF存在于牛和人的骨骼中,前者较后者低10倍. FGF是毛细血管增殖刺激剂,能够促进毛细血管向断端内以及骨移植物中长入,使骨修复早期的组织中软骨岛数量增加,并使骨折断端骨痂血管重建的时间提前,而且可以增加BMP的成骨量. 目前虽然FGF的作用机制还不是很清楚,但是可以肯定的是局部和全身应用FGF可以促进骨形成. bFGF是一种内源性多肽生长因子,有试验表明它能有促进中胚层和神经外胚层细胞有丝分裂的作用 [22].
2.6血小板源性生长因子PDGF 首先在血小板中发现,分子量为28~35 ku,由两个多肽键A和B组成异二聚体,在体外具有促进纤维细胞生长的作用,对所有起源于间叶细胞包括成骨细胞既能促进骨形成,又能刺激骨吸收,起双向调节作用[23]. PDGF还对中胚层细胞有促有丝分裂作用,它对人和鼠成骨细胞及其细胞系均有促有丝分裂作用. 同时它还是一个强力趋化因子,对人和鼠组织中的成骨细胞有强烈的趋化作用. PDGF 是由血小板、巨噬细胞和骨细胞合成,贮存于骨基质中. 它在创伤愈合中起重要作用,称为“创伤因子”. 其主要功能是诱导成骨细胞和骨祖细胞分裂,对于培养的成骨细胞有强烈的趋化作用,能刺激胶原合成. Canalis等[24]发现: PDGF有与IGFⅠ同样的作用,能刺激鼠骨DNA及胶原合成,但是PDGF也具有促使胶原降解的性能.
2.7类胰岛素生长因子IGF家族由两种相关多肽组成,即IGFⅠ和IGFⅡ. 它们是骨基质中最富含的生长因子,两者有相似的结构和体外作用,但在体内生物学效应不同. IGFI 在细胞增殖及细胞外基质合成代谢中具有重要作用. Throp等[25]研究证实了IGFⅠ和TGFβ具有相互作用以促进细胞增殖、胶原及蛋白聚糖合成的作用.
IGFⅡ是重要的细胞内调节剂,能刺激骨细胞的增生、增加骨细胞的分化和I型胶原合成. Strong等[26]发现IGFⅡ能在正常人骨细胞培养中24 h 内增加原胶原mRNA 2~4 倍.
综上所述,细胞因子不过是众多因子中研究较为成熟的几个,如何把这些因子的作用应用于组织工程中,才是我们研究生长因子的目的. 什么样的方法才能使细胞因子的活性在组织工程中发挥最好的作用还要进一步探讨.
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关键词 高中物理教学 情感认知 价值观
中图分类号:G633.7
文献标识码:A
文章编号:1002-7661(2011)08-0084-02
在学生成长与发展的进程中,决定学生命运的不仅仅是具体的知识技能,还包括科学的情感态度与正确的价值观,只有将两者通过合理的教学激发转化为学生切实的学习动力,才能彻底改变学生对学习的惧怕感、厌恶感,使他们变被动为主动地倾向于自主学习、实践学习,用充分的学习热情、积极的生活态度、正确的价值观看待人生的奋斗与进取,并最终成为一名德才兼备的创新型人才。
一、情感认知与价值观培养的深刻内涵
在新课程改革体系的发展进程中,高中物理教学的最根本任务便是切实提高学生的综合学习素养。而作为形成科学学习素养核心要素的情感态度与价值观则成为高中物理教师首要的培养目标。受应试教育制度的深远影响,我国的传统物理教学更注重对基础知识的传授,没能用生动的情境教学、丰富的教学手段使来源于实践的教学活动激发学生学习物理的热情,而是以机械式的教学方式将物理知识固定于狭隘的知识体系框架中,体现了传统教育方式的弊端。例如,学生在刚刚升入中学阶段,无不对物理学科充满了好奇心理,他们被丰富的实验器材、与生活贴近的物理现象所吸引,因此在课堂中积极活跃、兴趣十足。随着物理课程教学的深入开展,学生们的学习热情则被纷繁复杂、抽象客观的物理原理与公式所牵绊,一旦考试成绩欠佳,便会逐步丧失学习物理的积极性,久而久之则产生了厌学的情绪。由此不难看出,学生的积极情感是需要培养与激励的,一旦缺乏精神食粮,便会使学生的学习过程充满了枯燥、充满了懊恼与恐惧。因此,新时期的高中物理教学唯有注重学生认知能力与情感发展的协调统一,用一体化的教学方式将情感教育与价值观培养作为物理教学的重要内容之一,才能真正使学生在良好的情感教育规范之下形成科学学习的价值观并以求实创新的自主学习热情促进自我的终身发展。
二、高中物理教学开展情感态度与价值观培养的科学策略
情感态度及价值观的培养并不是独立的教学环节,更不能抛开专业学科的教育内容,因此高中物理教学只有将其与每一次的教学实践活动充分融合,使科学的思想教育指导理论教学,通过对学生内心活动的调节培养他们自主创新的学习态度、科学求实的探究精神才能最终使学生形成表里如一、内外一致的综合学习素养。
1.从认知培养入手,强化学生形成积极的认知态度
认知态度是人们基于评价思维形成的观点与信念,具体的表现形式为赞成认知与反对认知。在高中物理教学中教师应通过科学的认知培养促进学生形成正面的、积极的、热情的认知态度,从而使之在物理学习中转变固有观念、提升学习信心,以敬仰与信服之情感认可教师的教学与引导。例如在学习实践中,学生常常出现学得容易、做得难;记得容易、忘得快的现象,久而久之他们面对困难的物理学习失去了继续探究的勇气与信心,产生了消极的抵触情绪。这时,高中教师应通过敏锐的洞察思维,深刻认识到学生学习情绪的变化,及时发现学生认知态度的差别变换,从而有目的、有针对性的用科学的教学方案设计,通过答疑解惑、排忧解难的创新教学手段与课程教学的紧密对接,树立学生学习物理的信心并形成积极向上的学习认知态度。
2.从情感培养入手,塑造学生自我监控与调节意识的形成
情感培养是人们基于认知对象在认识态度基础上通过评价产生的一种内心体验,例如赞同、喜欢、反对、厌恶等。在高中物理教学实践中,教师应从情感培养教育入手,使学生掌握对学习态度的自我掌控与调节能力,从而最终形成化被动为主动的自主探究与创新学习能力。例如,学生在进行物理动力学知识的学习中,容易将牛顿定律混淆,在受力分析与外力计算的问题上由于掌握不好求解要领而无法得出正确的计算结果,长此以往容易导致消极学习情绪的产生。这时物理教师应针对学生的学习情感偏差有针对性的开展辅导,使学生参与到共同分析之中,促进其理清头绪,弄清楚解题的难点在哪里,是什么因素混淆了解题思路。接下来教师可有针对性的选择一些动力学题型,循序渐进地锻炼学生加强解题能力,针对不同的问题选择合理的解题方案并最终掌握万变不离其宗的解题要点。学生在教师耐心的鼓励、引导与互动教学之下,逐步找回了学习物理的信心,并充分意识到焦躁的情感不利于学习水平的提升。在面临学习困境之时,只有有意识的自我调节,耐心地找到问题所在,与教师形成积极的良性沟通才能正确树立在学习活动中的自我监控与调节意识,并促进自身在良好情感教育之下健康成长与快速提升。
3.从行为倾向引导入手,促进学生形成正确的认知态度与良好的学习行为
为了探讨浆样树突状细胞(PDC)在单倍体相合造血干细胞移植术后重建的特点及其与慢性移植物抗宿主病(cGVHD)和患者复发的关系,采用流式细胞术对19例白血病患者移植后外周血树突状细胞(DC)亚群晚期重建进行动态监测,并将其与患者cGVHD 和复发的关系进行分析。结果显示: 白血病患者髓样树突状细胞(MDC)、MDC1和DC百分比和绝对细胞数以及MDC/PDC比率均低于正常对照(P0.05);MDC/PDC于移植后120天时已达到正常对照组水平(P=0.602)。发生cGVHD 患者移植后120天PDC比例高于未发生组 ;患者复发后MDC1比例及数值下降,而MDC2和PDC比例及数值略回升。结论:白血病患者单倍体相合造血干细胞移植前外周血DC比例、绝对数及MDC/PDC比率均减少;移植后MDC/PDC比率恢复较快 ;各亚群比例和数量在移植后9月后基本恢复正常;且恢复情况与慢性移植物抗宿主病发生和患者复发相关。
【关键词】 单倍体相合造血干细胞移植; 浆样树突状细胞; 慢性移植物抗宿主病; 白血病复发
Investigation of Plasmacytoid Dendritic Cell Reconstitution and Its Relationship with cGVHD and Relapse after Haploidentical Hematopoietic Stem Cell Transplantation
Abstract
To investigate the characteristics and significance of reconstitution of peripheral blood plasmacytoid dendritic cell (PDC) precursors after allogeneic human leukocyte antigen mismatched/ haploidentical hematopoietic stem cell transplantation, and its relationship with chronic graft versus host disease(cGVHD)and relapse, 19 patients with leukemia were enrolled for this study. Peripheral blood dendritic cell (DC) subsets of patients and healthy controls were detected by flow cytometry, and the correlations between reconstitution of DC and cGVHD, relapse were analyzed. The results showed that compared with healthy subjects, patients with leukemia had a significantly decreased proportion and absolute number of myeloid dendritic cell (MDC) , MDC1 , DC and the ratio of MDC/PDC (P0.05), besides the proportion of PDC which reached to healthy controls levels at 1 year(P =0.494). Compared with levels before relapse, the proportions of MDC1, MDC, DC and the ratio of MDC/PDC were lower, but proportions of MDC2 and PDC were slightly higher after relapse. Patients with a 'high' PDC recovery profile had an improved cumulative incidence of cGVHD in contrast to patients with a 'low' PDC recovery profile on day 120 after transplantation (P=0.007). It is concluded that compared with healthy subjects, de novo leukemia patients have a significantly decreased proportion and absolute number of DC and the ratio of MDC/PDC before haploidentical hematopoietic stem cell transplantation; while ratio of MDC/PDC can be normalized with relative rapidity, the proportions of all DC subsets reached to normal levels on the whole at 9 months after transplantation, and also recovery level of DCs is correlated with occurrence of cGVHD and relapse.
Key words
haploidentical hematopoietic stem cell transplantation; plasmacytoid dendritic cell; chronic graft versus host disease; leukemia relapse
目前同种异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplantation, AlloHSCT)供者主要为HLA完全相合的同胞或非亲缘供者(HLAmatched sibling donor, MSD or HLAmatched unrelated donor, MUD),在一些应用HLA不完全相合供者的移植中,供者的T淋巴细胞绝大部分已在体外去除[1-4]。我们的研究已证实,GIAC体系(即G:粒细胞集落刺激因子, I: 强免疫抑制剂, A:抗胸腺球蛋白, C: 外周血与骨髓联合)不需要进行体外T淋巴细胞去除,急慢性GVHD发生率、移植相关死亡率、复发率,以及两年无病生存率和总生存率均与同期配型完全相合患者相似,从而使HLA不完全相合亲缘供者(HLAmismatched family donor, MFD)移植/单倍体相合造血干细胞移植(haploidentical hematopoietic stem cell transplantation)的方法得到改进,成功跨越HLA屏障,但我们这一体系成功的机制还未完全清楚[5-8]。树突状细胞(dendritic cells, DC)是专职的抗原呈递细胞(antigen presenting cells, APC),不仅能够显著刺激初始型T细胞(naive T cells)进行增殖, 充当机体免疫反应的始动者,而且可以通过调节T细胞的类型使机体产生免疫激活或免疫耐受[9];慢性GVHD的发生需要供受者APC共同参与[10-13]。此外,宿主APC是运输已致敏的供者T细胞和NK至靶组织所必需的。HLA完全相合造血干细胞移植后DC的重建可影响cGVHD和复发,HLA不合/单倍体相合造血干细胞移植后DC的晚期重建目前很少报道;未去T淋巴细胞模式下DC重建研究未见报告。对此我们进行研究,以了解DC重建与cGVHD、复发是否相关。
中国实验血液学杂志 J Exp Hematol 2007; 15(2)浆样树突状细胞重建与人类白细胞抗原不合/单倍体相合造血干细胞移植慢性移植物抗宿主病/复发关系初探
材料和方法
对象
患者 从2005年2月至2006年4月间,对在北京大学人民医院血液病研究所行HLA不完全相合单倍体移植的19位患者和12例健康亲缘供者进行研究。患者男性14例,女性5例,中位年龄21(12-51)岁。19例患者中急性髓性白血病5例,急性B淋巴细胞白血病6例,慢性髓性白血病7例,骨髓增生异常综合症/急性髓性白血病1例。 所有患者在进入研究前均签署知情同意书,供者标本在获取前均得到本人同意,本研究经医院伦理委员会审核通过。
供者 所有供者均为亲缘供者,移植前进行HLA配型,HLAA、B位点检测方法为低分辨方法,Ⅱ类抗原采用高分辨方法。依据HLA配型相合程度、年龄、性别以及健康状况选择供者。其中3/6个位点不合10例,2/6个位点不合7例,1/6个位点不合2例。
预处理方案
阿糖胞苷(cytarabine, AraC)4 g/(m2·d)×2天,马利兰(busulfan, Bu) 4 mg/(kg·d)×3天,环磷酰胺(cyclophosphamide, Cy)1.8 g/(m2·d)×2天,甲基环己亚硝脲(simustine, MeCCNU) 250 mg/(m2·d)×1天,抗人胸腺球蛋白(antihuman thymus globulin, ATG) 2.5 mg/(kg·d)×4天。
供者动员及造血干细胞采集
所有患者均接受供者经GCSF动员后采集的骨髓和外周血干细胞联合移植。所有供者接受重组人粒细胞集落刺激因子(rhGCSF)5 μg/(kg·d),连续皮下注射5-6天。第4天采集骨髓, 有核细胞要求达(3-4)×108/kg;第5-6天应用COBE血细胞分离机采集同一供者外周血干细胞,循环总量10 L,总单个核细胞达(3-4)×108/kg。
移植物抗宿主病预防和治疗
应用环孢菌素A+霉酚酸酯+短程甲氨喋呤方案。环孢菌素A 2.5 mg/(kg·d)静脉滴注,移植前9天至肠道功能恢复正常后改为口服,一般用至移植后9-12月;霉酚酸酯0.5 g每12小时1次,口服,移植前10天至植活后减半,后渐停药;甲氨喋呤移植后1天15 mg/m2,移植后3、6、11天10 mg/m2。cGVHD根据受累器官和广泛程度分为局限型和广泛型。局限型cGVHD 包括局限的皮肤损害和(或) 本病所致的肝脏损害。广泛型cGVHD 有下述二者之一加上另外4 项中任意3 项:①皮肤全身广泛受损; ②病理证实局部皮肤病变并兼有cGVHD 的肝损害。另外4 项包括:肝脏病理呈慢性重症肝炎或肝硬化,眼部干燥(Schirmer 试验湿度仅5 mm) ,唾液腺或口腔粘膜有本病病理,任何其他的靶器官受损 。发生cGVHD后根据情况加用皮质激素、CsA、MMF、FK506、依木兰等治疗。
植活监测
所有患者均于移植后6天始接受rhGCSF 5 μg/(kg·d),连续皮下注射至嗜中性粒细胞绝对计数(absolute neutrophil count, ANC)≥2.0×109/L。连续3天 ANC≥0.5×109/L被认为白细胞植入;脱离血小板输注7天,血小板≥20×109/L被认为血小板植入。移植后行骨髓形态学、遗传学检查、HLA DNA分型及DNA指纹图(北京市公安局物证所进行)检查证实供者植入情况,每例患者均采用2种或以上指标。
流式细胞术检测分析
单克隆抗体及其他试剂 抗CD14,CD19PerCP及阴性对照单克隆抗体,溶血素均购自美国Becton Dickinson公司;抗BDCA1PE( Mouse IgG2a, clone: AD58E71)、抗BDCA2FITC (Mouse IgG1, clone: AC1441)、抗BDCA3APC(Mouse IgG1, clone: AD514H121 )单克隆抗体均购自德国美天旎公司。
细胞表面标记 每管取新鲜抽取的EDTA抗凝血至少100 μl,分别加入各种抗体及阴性对照抗体10 μl ,4℃避光孵育15分钟;加溶血素2 ml室温避光10分钟,溶解红细胞;然后300×g离心5分钟,弃上清,用PBS将标记细胞洗涤2次;加入含1%多聚甲醛PBS 200 μl, 固定后24小时内上流式细胞仪检测。
流式细胞仪检测 流式细胞仪为FACSort型(Becton Dickinson 公司产品,装备双激光管),应用Cellquest 软件进行数据分析。采用四色荧光标记活细胞膜,每份标本获取(1-2.5)×105个细胞,用FSC/SSC设门画出有核细胞群R1,以去除细胞碎片和死细胞;二维点图显示R1内细胞,设CD14、CD19 PerCP阴性细胞群为R2,显示R2群细胞,分析BDCA2 FITC阳性及BDCA1PE, BDCA3APC阳性细胞,即分别为PDC和MDC1、MDC2 ,并计算DC、MDC1、MDC2以及PDC占有核细胞的百分比。
统计学处理
实验数据应用统计软件SPSS 10.0进行分析,连续变量采用非参数MannWhitney U检验,cGVHD的发生率评估应用KaplanMeier曲线,P
结
果
病人特点
19位患者和12例健康亲缘供者纳入本研究,HLA配型3/6不合10例,2/6不合7例,1/6不合2例。发生cGVHD 11例,其中局限型7例,广泛型4例;复发2例,死亡5例,余无病生存。具体情况见表1。
外周血DC前体细胞晚期重建
正常对照组和患者移植前的DC及其亚群 12例来源于健康供者的外周血标本被作为对照组。白血病患者预处理前MDC1、MDC及DC在白细胞中所占百分比较正常对照组明显减低,分别为MDC1 0.03% vs 0.435%; MDC 0.045% vs 0.645%和DC 0.125% vs 0.76% (P均0.05,无统计学差异。各DC亚群的绝对值与百分比相类似,分别为MDC1 1.33/μl vs 26.7/μl; MDC 1.52/μl vs 35.56/μl 和 DC 7.89/μl vs 42.66/μl, 均较正常对照组明显减低,差异具有显著性(P0.05); MDC/PDC比率为0.50 vs 4.21, 差异具有显著性(P=0.001)。
患者移植后DC亚群晚期重建 患者移植后晚期(移植后>100天)外周血DC各亚群的重建基本同步,各亚群在白细胞中所占比例随移植后时间推移逐渐恢复正常。如表2所示除移植后9月时PDC在白细胞所占比例为0.08%(0.04%-0.11%),仍略低于正常对照组,两者有统计学差异(P=0.016)外,余各亚群所占比例均于移植后9月时恢复到正常对照水平,无统计学差异(P>0.05)。患者移植后晚期(移植后>100天)外周血DC各亚群数量的重建与比例重建基本相似,各亚群重建亦基本同步且亚群的数量与比例随时间推移逐渐恢复正常。如表3所示DC各亚群数量均于移植后9月时恢复到正常对照水平,与正常对照组无统计学差异(P>0.05)。MDC/PDC比率如前所述已于移植后30天时达到正常对照组水平,移植后晚期此趋势未出现改变,各时间点与正常对照组相比均无统计学差异(P>0.05)。
DC前体细胞晚期重建与cGVHD的关系
我们的研究显示,移植100天后所有患者的 cGVHD的累计发生率为57.89%(11/19)。移植后120天患者PDC中位绝对值为1.142/μl,我们以此值为分界点将患者分为高PDC组和低PDC组。高PDC组(PDC >1.142/μl) 9例患者中8例曾经发生 cGVHD,cGVHD的累计发生率为89.89% (8/9);低PDC组(PDC ≤1.142/μl)10例患者中仅有3例发生cGVHD,cGVHD的累计发生率为30 %( 3/10),明显低于高PDC组。应用KaplanMeier曲线进行分析,两组之间差异显著(P=0.007)(附图)。
我们对移植后120天的MDC/PDC也做了分组分析,结论和PDC相似,低MDC/PDC组cGVHD的累计发生率为明显低于高MDC/PDC组,但无统计学差异(P=0.068)。
Figure KaplanMeier plot of cumulative incidence of cGVHD by DC group at day 120 after transplantation. Log rank P=0.007.
患者移植后复发前后DC亚群变化
本研究过程中有2例患者出现复发,监测其复发前后外周血DC各亚群的变化,结果显示复发后各亚群比例及数量向患者移植前趋势转化。MDC1、MDC、总DC的比例及数量均较移植前下降,MDC2和PDC较复发前上升趋势(表4,表5)。
讨
论
AlloHSCT是血液恶性疾病及代谢性疾病的有效乃至唯一治疗手段[5]。移植后供者造血系统、免疫系统在患者体内重建,这可使患者移植后达到完全治愈,但同时也可导致移植物抗宿主病等移植相关并发症,从而使移植的疗效受到严重影响[14]。众所周知,树突状细胞起源于骨髓CD34+造血干细胞,广泛分布于除脑之外的全身各脏器;DC在天然性和获得性免疫应答中均有重要的作用[9],但DC在移植后发生的免疫事件中的作用未完全清楚[15],关于DC的研究始终是移植免疫研究的热点,日益受到国内外学者的关注。人体内DC的研究由于其数量很少,仅占外周单个核细胞的1% 以下,且缺乏特异性表面标志而不易进行。目前,外周血前体DC的识别主要通过许多谱系抗体阴性(lin-),如CD3、CD14、CD19和CD56阴性且HLADR、CD4 或CD33 阳性来实现。许多研究已证实,DC细胞并非单一的细胞群,至少可将其分为两群细胞,CD123bright CD11c- PDC和CD123dim CD11cbright MDC。最近的研究显示,CD1c (BDCA1), BDCA2, BDCA3和BDCA4 单克隆抗体可以快速、方便、有效地分离DC[16],且其表达不被化疗及GCSF治疗下调[17]。
cGVHD 是alloHSCT后长期存活患者的主要并发症,不仅严重影响患者的生存质量,也是其非复发死亡的主要原因。在alloHSCT 后存活半年以上的病人中有60%-80%会出现cGVHD,尤其是非亲缘供者、HLA 不完全相合的亲属供者的异体外周血干细胞移植不断增加,以及非清髓移植后供者淋巴细胞的输注,使得cGVHD的发生率增加[18] 。cGVHD 的发病机理尚不完全清楚, cGVHD 可能为一种Th2 疾病, Th2 细胞可通过释放IL4、IL5、IL6和IL10等细胞因子,诱导B 细胞增殖分化产生抗体,发挥体液免疫效应, 在cGVHD 发病中都分别起主导作用[19]。Arpinati等[11]和Porta等[15]发现移植后6个月时,出现cGVHD的患者PDC数量明显减少, Clark等[10]和Lamb等[20]研究显示,cGVHD患者DC均来源于供者,而宿主来源的DC仅在无cGVHD患者中发现,这提示混合DC嵌合可能诱导耐受或无能;同时还发现移植后出现cGVHD的患者PDC数量明显增高,我们的研究结果与此相似。患者移植后cGVHD的累计发生率为57.89%(11/19),将移植后120天患者PDC中位绝对值1.142/μl作为分界点将患者分为高PDC组和低PDC组两组。高PDC组(PDC >1.142/μl) 9例患者中8例曾经发生 cGVHD,cGVHD的累计发生率为89.89% (8/9);低PDC组(PDC ≤1.142/μl)10例患者中仅有3例发生cGVHD,cGVHD的累计发生率为30%(3/10),明显低于高PDC组,应用KaplanMeier曲线进行分析,两组之间差异显著(P=0.007)。
DC是专职的抗原呈递细胞,可以呈递具有细胞遗传学异常的白血病细胞,尤其是DC1,通过诱导Th1发育促进抗肿瘤免疫。白血病患者DC数量减少,尤其是DC1数量减少,导致肿瘤细胞获得免疫逃逸。Reddy等[21]发现植入时低DC数量与清髓和非清髓移植后复发相关;我们的研究显示,患者移植前DC各亚群在白细胞中所占比例及数量较正常对照组减低,尤其以MDC1减少明显;复发后患者各亚群在白细胞中所占比例及数量向患者移植前趋势转化——MDC1、MDC、DC及MDC/PDC较复发前下降,而MDC2及PDC较复发前略有上升,这提示复发可能与DC诱导抗肿瘤免疫减弱有关。
总之,随着HLA 不合/单倍体相合HSCT不断增加, 深入探讨各种移植合并症发生机制,将有助于新的预防及治疗方案的发现。
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关键词:领域性原则艺术教育应用
谈到艺术,最为大众所熟悉的无疑是音乐、美术、戏剧等,关于如何进行艺术教育,这当中涉及到很多原则,例如情景原则、媒介原则、领悟原则等。学习了解一门艺术,可以从两个层面来对其进行学习理解,其一就是从艺术的表明手法来去理解,其二指艺术中所含有的一种意境。如何去做好艺术教育工作,需要能够根据这两方面来探讨。艺术是一种人的内心情感的表达,每一个人对于艺术具有不同的感受,这就体现了个人的领悟感的区别,被称之为领悟性原则,其是艺术教育的一种原则。在艺术教育中,每个人对于同一种艺术中所看到的、所听到的都与每个人个体有一定的关联,对此,在进行艺术教育中,可以利用好领悟性原则这一特点,对个人进行好的引导。本文就关于领域性原则,关于领悟性原则在艺术教育中的应用进行简要分析。
一、关于领悟性的原则
关于艺术教育,主要是个人对艺术的感悟和转化,从而完成对艺术的自我学习掌握。在进行艺术教育的教学过程中,教育者要有目的的去向学习者们传递艺术中的感悟类信息,让学习者能够领会到艺术中的独特的涵义,这是学习艺术的一个重要前提。艺术分很多类别,诸如音乐、美术、戏剧舞台表演等,首先可以从音乐艺术的角度来谈起中所包含的领悟性原则,音乐能够用来传递个人的情感表达,对于学习者来说首先必须具备接受的能力和水平,这是保证学好音乐的前提,这就是领悟性原则。在进行艺术教育中,教师需要通过艺术向学习者们阐明清楚其中所包含的各种情感信息,引发学生进一步学习的主观兴趣,同时提高学生对艺术教育的掌握和领悟。艺术能够陶冶人的情操,这同样需要一个人通过自身的感悟知觉去体会艺术中所包含的感情,这也同样涉及到领悟性原则。因此,领悟性原则对提高学生学习艺术的兴趣和能力具有非常重要的作用,同时是达到好的艺术教育教学效果的关键一步。
二、艺术教育与领悟性原则的联系
每个人都有自己对外部事物的感受,艺术源于生活,同样能够引发每个人独特的感悟感受,艺术教育是领悟性教育。对于音乐,我们可以发现,刚出生的小朋友,当听到出现的音乐时都会表现一定的兴奋,生活中的个人当在节日中听到一些喜庆的歌曲时,会受到音乐的感染感受到节日的节日的喜悦,又当个人听到悲哀的音乐时,会情不自禁的受到悲伤情绪的感染,这些都是个人的内心情感感触与音乐艺术作品的碰撞。又有对于美术类作品,当看到一些大师的作品时,每个人都会有其自己的感受和对作品的想法,这就涉及到个人的自我领悟性区别。又或者对一些戏剧舞台的表演,当看到一些戏剧作品,每个人会有发自内心的开心的感受,当看到一些悲剧性表演时,又会有悲伤的感觉,这同样是个人的领悟性机制感受的不同。对于以上这些,就源于每个个人所天生具有的内部自我感悟特性,每个人都具有自我对艺术的领悟性,因而使得在面对艺术时,能够感受到艺术中所包含的独特的意义,同时引发个人的共鸣。以上,这也就是艺术教育同领悟性原则的所具有的联系。在进行艺术教育中,最为重要的任务就是需要让学习者能够首先对艺术有一定的感悟,能够感受到艺术背后所蕴涵的基本意义,从这就可以发现领悟性原则同艺术教育之间的联系。
三、领悟性教育在艺术教育中的应用
艺术是一种情感方式的表达,通过一定的媒介方式将所想的感情表达出来,达到一种情感的认同。艺术主要通过感受来进行交流表达,也就是通过个人对艺术的自我领悟性来展现对艺术的理解。创造艺术的人通过把其内心对生活的感受通过艺术的手法表现出来,这其中包含了艺术创作者的内心感受。每个人在学习或欣赏这些艺术作品时,能够通过其个人的领悟力来对这些作品进行把握,通过自身的感受来对艺术作品进行理解和感受,感受艺术创作者们赋予艺术中的深深地细腻的情感,来引起人们的共鸣,从而真正达到懂得艺术作品的真正内涵。艺术教育不同于别的教育,它没有一个公式的套式去学习它,而是通过一种非常自由的方式让每一个人去学习它。就艺术教育的本质来说,学习者首先要对艺术教育中的作品能够有所感悟,能够通过艺术作品来体会到其中所要表达的内涵,能够从中获得共鸣。首先要做到这一步,也是最为关键的一步,就需要领悟性原则来达到这关键的一步,只有能够感受到作品中的情感方式,能够理解通过何种手法来表现何种情感,才能够自己通过运用艺术语言表达自己的感受和情感。
四、如何更好发挥领悟性原则对艺术教育的作用
1.重视关于艺术教育中的个人感悟和个人领悟关于艺术教育,需要掌握教育的方法,正如前面所说,关于艺术教育,不能同传统的教育方式等同,而是要采用其独特的教育方式。关于艺术教育,首先第一步是要让学习者能够进行到艺术的世界中来,通过播放或者展现一些艺术作品,让学习者们自己去感受它,通过个人的感受去领会艺术的内涵,这就需要发挥领悟性原则的价值。领悟性原则比较抽象,不过这对于艺术教育是必不可少的一步。艺术创作者通过把其内心的感受通过艺术的手法表现出来,从而形成了多种多样的艺术世界,供观者欣赏,学习者首先通过对这些艺术作品中的情感进行感受,然后再逐渐发现通过采用何种方式来对对何种感情进行表达,从而转换为自己的个人领悟,这样才能真正理解艺术的内涵以及艺术的创造方式手法。领悟性原则每个人都有其独特的感悟,它与个人经历等有关,很难通过某种客观的方式去解释,同样很难通过某种客观标准评价,但好的艺术作品正是通过其所传递的意蕴,为人所感知,这也正是艺术教育取得成功效果的重要标志。通过学习者对其所含的意蕴进行领会,然后转而学习通过一定的方式来对自己的感受进行艺术性的表达,通过作为艺术教育者对其进行一定的指导和纠正,这样才能真正地创作出好的艺术作品来。2.加强对艺术性教育中技巧的运用和重视在艺术教育中,领悟性原则非常重要,同时也要重视学习者对艺术技巧的掌握和手法的理解。领悟性原则是首要原则,同时也正是借助艺术技巧的表达,才能把个人的感悟通过艺术手法表现出来,从而创造好的艺术作品。在艺术教育中,不同艺术有着其独特的技巧和手法,通过一定的媒介方式将个人情感感悟表现出来,完成艺术的创作性表达。对此,要将技巧同领悟性原则结合起来,这样对达到好的艺术教育更有效果。
五、结束语
终上所述,需要明白艺术教育中领悟性原则的重要性,在教育者进行艺术教育中,首先需要让学习者们感悟艺术作品中的情感表达,领悟到整个作品的风格和情调,同时加以艺术表达的方式,将自己的情感通过一定的艺术方式表现出来,这就是艺术教育的成功。
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