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得到驳壳枪后,猪娃可没少下工夫,经常去龙王寺中悄悄练枪,虽然还无法百发百中,但眼急手快开枪杀人还是做得相当到位。你知道有哪些百发百中的可以知道摘抄的好句子呢?这里给大家分享一些关于百发百中的造句，供大家参考。
一、百发百中含义百：形容多;发：发射，也指射箭;中：正对上，恰恰合上。形容射箭或射击非常准，每次都命中目标。也比喻做事有充分把握，办事成功，决不落空。
二、百发百中典故苏厉是战国时期从事政治外交活动的谋士。有一次，他听说秦国大将白起将要带兵攻打魏国都城大梁，而大梁一旦被秦占领，附近的西周王室就有危险。于是，苏厉对周王说：“白起这几年打败过韩、赵等国，夺取了许多土地。现在他将要带兵攻打大梁，大梁一旦被白起攻下，周王室就危险了!您应当想办法阻止白起出兵。”于是周王派苏厉前往秦国。
苏厉对白起说：“从前，楚国有一个人名叫养由基，是一个射箭能手，他距离柳树一百步放箭射击，每箭都射中柳叶的中心，百发百中，左右看的人都说射得很好，可是一个过路的人却说：“这个人，可以教他该怎样射了。”养由基听了这话，心里很不舒服，就说：“大家都说我射得好，你竟说可以教我射了，你为什么不来替我射那柳叶呢!”那个人说：“我不能教你伸直左臂持弓，弯曲右臂引弓持箭，不过你有没有想过，你射柳叶百发百中，但是却不善于调养气息，等一会疲倦了，一箭射不中，就会前功尽弃。”
讲完这段故事，苏厉把话题拉回来说：“你已经打败了韩、赵等国，取得了许多土地，功劳很大。现在，又要派你带兵出关，经过西周王室的所在地去进攻大梁，如果这一仗不能取胜，就会前功尽弃。你不如说自己生病，不要出兵为好。”白起听了，笑着说：“我所向披靡， 百战百胜，怎么会不能取胜呢?”于是，他没有被苏厉说动，率兵攻打魏国，果然又大获全胜，夺取了魏国的几十座城池。
三、百发百中造句1.林强是校篮球队队长，他投篮几乎是百发百中。
2.连长刻苦训练,练就了百发百中的好枪法。
3.他是我军有名的神,在战场百发百中,弹无虚发。
4.她手持双枪，左右开弓，百发百中，人称神。
5.喝蜂蜜浸泡萝卜的汁来治咳嗽，听说有百发百中的效果。
6.上帝，愿我们百发百中防守紧密无缝。
7.他偷偷学习射箭，终于练成了百发百中的神箭手。
8.在奥运会的射箭比赛中，一位中国选手百发百中，成绩遥遥领先。
9.古时候魏国有个著名的射手叫更羸，他射箭百发百中，大家都管他叫"神箭手"。
10.如果把射箭练到熟能生巧的程度，那你射箭准是百发百中。
11.我参加了射箭比赛，我聚精会神地瞄准箭靶，结果百发百中。
12.包你百用百灵，百发百中。
13.我急了，拿出小时候的本领，用石头打小五弟，我还是百发百中，打的他上窜下跳的。
14.他屡获射击金牌，是个百发百中的神。
15.他料事如神，经常是百发百中。
16.鼠标操作，光头警官，可是百发百中的神，现在由你来冒充他，看你够格吗?
17.只见他反身跳投，又进了，真是百发百中!
18.他能有百发百中的功夫，是靠他每天练投一千次篮得来的。
19.他是个百发百中的神。
20.乔丹投篮百发百中，真令人叫绝。
21.百发百中：他打靶百发百中，赢得了大家的喝彩。
22.要想在奥运拿射箭金牌，非得练成百发百中的功夫不可。
23.当两位情场高手遇上，要一决高下，之前本是百发百中的追女捕男本领，现在都未必够用，究竟民俊与之愿，谁能首先战胜心魔，成为情场至尊?
24.他射箭百发百中!每一次开枪都打中了匪徒。
25.军师妙计向来百发百中，不必怀疑。
26.看这些高手射飞鏢，几乎都是百发百中，真令人佩服。
27.我射箭百发百中，经常一箭双雕。
28.他的射箭技术一流，百发百中。
29.他打枪百发百中,这说明他很行.
30.屡试屡验,百发百中,愿以此法,共诸同人。
31.二龙剑——广寒仙子:二龙缠绕,投掷攻击,百发百中。
32.青蛙不光吃蚊子、苍蝇和水里的孑孓，还大量捕食蛾子、稻飞虱等农业害虫。
只要一遇见害虫，青蛙的舌头就迅速翻射出口外，粘住小虫，卷入口中，常常是百发百中，它是有名的捉虫能手。
33.在此次专访中，杰克师兄除了侃侃而谈自己对灵修的认识与体悟之外，并与大家分享箭无虚发百发百中的秘诀。
34.他一只手背在后面都能把任何人打倒。
他要是拿起那把紫杉木弓，一英里半开外就能射中一角钱的分币，百发百中。
35.没过几天小朋友们就都尝到了滋味儿，他们还是打完我就跑，可我用石头想砸他们哪就砸哪，因为他们跑的时候有声音，只要能听到声音，我就能百发百中。
36.我不能把实情告诉姥姥，我想她肯定不会答应我这么做。
真是功夫不负有心人，我终于练就了百发百中。
2、将线一头长一头短的对折
3、用针的针眼这头插入对折的圈里拉紧。
4、拉紧的针和线保持住放在两个手指头中间捏紧，手指头不要松开抽出针。
5、小小的张开两个捏紧的手指头看一下线在什么位置，将针眼对着线，手指头再捏紧，把针穿下去。
6、张开手指头，拉着穿出来的一头把线短的那头完全拉出就好了。
2.土地要求 选择2-3年未种植过十字花科作物的田地。要求地势平坦，背风向阳，阳光充足，排灌方便，土质肥沃，最好为中性沙壤土。
3.育苗
苗床准备 选背风向阳处做阳畦。阳畦北墙高40-50厘米，南墙高10-15厘米，宽1.5米，东西两墙依南北墙高度打成斜坡。北墙每隔2米长设―个通风口。―般每667米2制种田需10米长、1.5米宽的标准育苗畦2个。每畦中施入优质腐熟过筛的土粪300千克、过磷酸钙5千克、尿素1千克，充分拌匀。播种前5天将畦面整平。再撒入复合肥1千克，与床土混合均匀后用脚踏实整平，浇水渗透。再覆盖薄膜烤畦，提高床温。有条件的可以在温室育苗，只需做成育苗畦即可。
播种期确定 华北地区适播期为12月中旬―翌年1月中旬。由于播种早，可以控制幼苗的生长发育。但是，应该注意的是，对于个别冬性较弱的白菜亲本，不宜播种过早。播种过早，苗龄长，幼苗在苗床内即可抽薹，不利于定植。定植后也会生长不旺，过早衰老，影响种子产量。
播种方法 可采用撒播或点播。撒播前，先把育苗畦整平并用脚踏实，然后灌大水，每标准畦撒复合肥0.5千克，待水渗下后，上面撒很少一层“稳土”，将种子与适量的细土混匀、撒种，播种后覆0.5-1厘米过筛细土。点播常用土坨育苗，方法是待水渗下后，先划成8厘米×8厘米的方块，再单粒播种，也可以采用营养钵或纸筒育苗。点播法虽然费工，但出苗后不必间苗。同时，单粒播种用种量少，出苗整齐，营养面积大，不易徒长，定植带土坨缓苗轻，成苗率高。
苗床管理 ①播种后的苗床管理。温度保持20℃- 25℃，晚上覆盖草帘，白天揭开，保持薄膜干净，以接受更多阳光。当幼苗2片子叶展平、心叶露出时，适当通风，将床温降至5℃-6℃，持续4-6天，进行低温炼苗，可防止高脚苗，增加抗寒能力。随后适当控制通风。晴天白天床温保持 18℃左右，夜间床温保持10℃-12℃。可促进幼苗生长。阴天床温可比晴天降低3℃-5℃。3-4叶期，开始放风炼苗，风口由小到大，逐渐增加，夜间最低温度掌握在2℃以上，白天可逐渐揭开苗床薄膜，加强低温锻炼，保证幼苗通过春化。②分苗和分苗后的管理。撒播育苗时，如果密度太大，就要分苗，―般在幼苗长至2片真叶时进行。分苗前去杂去劣。分苗应选择晴天进行，分苗株行距为8厘米x8厘米。分苗时注意随栽随盖薄膜。缓苗期白天床温保持20%-25%。缓苗后，晴天保持18℃左右，阴天保持10℃-12℃。定植前20天开始炼苗，主要是采取逐渐加大通风量、降低床温的措施。使幼苗逐渐适应定植后的外界环境条件。定植前1周在苗床内浇大水。待水渗下后，用刀按株行距将苗床土割成深 10-12厘米土坨，以利于定植后缓苗。温室育苗一般在幼苗长至4-5片叶时，将幼苗移至室外，采用白天揭膜、夜间盖膜的方法管理，经过6-7天的低温处理，保证幼苗通过春化。
4.定植 ①定植时期。一般定植适期为2月底―3月上旬。定植时幼苗以6-8片叶为好，少于6片的秧苗，缓苗慢，分枝数少，产量低；多于8片叶的秧苗，叶片生长旺盛，抽蓬推迟，影响产量。②定植方法。采用地膜覆盖栽培。具体做法是：2月底前把大田浇透水，待墒情合适时施足基肥，整地做畦，畦做成高10厘米、宽1米的半高垄。定植前7-10天覆盖地膜，提高地温，定植时用手或铲按株行距戳破地膜开穴定植。
5.田间管理
灌水 种株全生长期不能缺水，前期缺水会影响生长发育，后期缺水则影响种子饱满度。开春后，气温比较低，为使种株快速生长，应设法提高土壤温度。一般在种株开花之前不浇水，如果明显缺水，也要小水浇灌。开花初期浇1次透水，直到结荚期，可以不浇水。结荚到角果开始变黄以前，控制浇水，一般不旱不浇。角果开始变黄后，一般不再浇水。
施肥 定植前，结合整地，每667平米施农家肥5000千克，并适当增施磷钾肥。现苗抽薹时，结合灌水每667平米追施尿素10-15千克，肥力较好的地块不必追肥。
打顶摘心 当主花茎长至5-6厘米高时，把顶芽摘掉。这样可促进种株基部萌发新枝，增加种株的分枝数量及结荚数。
调节花期 首先通过播种期调节花期，当出现一个亲本或单株开花较早时，要及时将已开的花摘除或将主花茎打顶。直到2个亲本的花期一致。当一亲本花期结束后，另一亲本继续开花时，也应打掉迟开的花朵。
人工放蜂 大白菜是异花授粉虫媒花植物，利用蜜蜂授粉可以提高一代杂种的纯度和产量，应保证每667平米制种田放1箱蜂。放蜂前要关箱净身1周，以防蜂身上存留有其他可串花的十字花科花粉对制种田造成污染。
中学生美白牙齿的方法
1、酵母美白牙齿
有些美眉会通过医学美容的手法来达到美白牙齿的目的，但是，通过医学美容手法来美白牙齿并非是所有的美眉都能够接受的，还是从日常的生活中来寻找合适的方法吧!酵母是我们生活中非常常见的一种食物，通常我们要吃面食都会用到它，酵母中含有蛋白质，且有分解的作用，美眉们可以在刷牙的时候，在牙刷上挤上牙膏之后，再沾一点酵母粉，再进行刷牙，这样长期检查，会有令牙齿变白的效果。
2、小苏打美白牙齿
用小苏打来美白牙齿是美眉们常用的一种方法，在牙刷上沾上一点小苏打，然后再正常的进行刷牙，坚持使用，会让牙齿变得洁白光亮。为什么很多美眉说用小苏打刷牙来美白牙齿并没有理想中的效果呢，那就因为你没有坚持，想要令牙齿由黄变白，不是一朝一夕的，需要长期坚持哦!
3、食醋美白牙齿
食醋也可以帮助美眉们来美白牙齿，如何使用呢?首先在刷牙之前做好准备，先用食醋来漱漱口，让食醋在牙齿的部位停留一两分钟的时间，然后将食醋吐出来，再继续刷牙，你便会发现坚持一段时间，牙齿自然就变白了。虽然食醋漱口之后，再来刷牙能够有效美白牙齿，但是此方法不宜长时间使用，否则牙龈会感觉非常不舒服，偶尔试一次还是不错的哦!
4、花生米美白牙齿
还有一种方法可以美白牙齿，那就是利用花生米，美眉们可以拿四五粒花生，将花生粒搅碎成碎末状，混合入少量的食盐，然后充当牙膏来刷牙，过不了多长时间，你便会发现你对大黄牙变得洁白了哦!有些美眉也会试着用花生米搅碎在嘴巴里，然后立刻刷牙，为什么这样的方式不能够充分起到美白牙齿的效果呢?原因在于花生并没有完全地搅碎，应该把花生搅碎成末状，让花生中的美白成分充分接触牙齿，这样使用起来，美白牙齿的效果会更加明显哦!同时，配合少量的食盐，可以有效帮助牙齿的牙缝中消炎杀菌，令牙齿更加健康。
有助于中学生美白牙齿的蔬菜水果
1、草莓。坚固牙齿,并且其中还含有漂白和清洁牙齿的成分,对于除掉牙齿表面的茶垢和咖啡污垢十分有用。因此,饭后不要忘了吃些草莓。花菜。它可以作为“磨砂膏”,美白牙齿。同时,花菜可以刺激唾液的产生,有助于阻止牙斑的形成。
2、两杯西瓜汁可以补充人体每天所需维生素C的25%。维生素C对于牙齿和牙龈健康非常关键,它有助于铁元素的吸收,还具有抗氧化功效,防止“自由基”分子氧化导致的牙齿老化。而且维c也是美白的一个要点3、橙子中的维生素C同样会促进牙齿和牙龈健康,其中的纤维还可以使牙斑脱落。
4、嚼苹果可以刺激口腔分泌唾液,清理和坚固牙齿,还可以减少身体对糖的吸收。
5、深色蔬菜,暗绿色叶子的蔬菜富含胡萝卜素,它可以转化成维生素A,有助于保持牙床坚固。
6、奶制品,酸奶中的蛋白质可以附着在牙齿上,从而保护其免受有害酸性物质的侵袭,增强牙齿健康。另外,咀嚼较硬的干酪可以促进唾液产生,从而去除食物残渣。
7、水可以减少口腔中的污垢,让人免受牙齿腐蚀的痛苦,使得牙齿长期坚固。平时要做到,饭间抿少量的水,饭后漱口。
8、葡萄中的清洁酶——苹果酸,会使牙齿亮白。
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1、白地瓜种子种皮坚实，播前用30℃温水浸3～4小时，置于25～30℃的条件下催芽。待芽初出即进行播种。
2、播种时，按50行距开沟，沟深5～6厘米，沟内撒复合肥，每公顷150～225千克，将土肥混匀后，沟内浇水。待水渗下，在沟内每隔3～4厘米播1粒种子。播后覆土3～4厘米。有条件时凉薯覆盖地膜。
（来源：文章屋网 ）
主动的“阿甘”
相信绝大多数陌生人在与李嘉诚接触之初，都会诧异于其简单的一面。他拥有着儿童式的灿烂笑容，言语也如不加雕琢般简洁跳跃，谈起一些热衷的游戏，如在高尔夫球场上战胜友人，他会像任何一个在游戏中获得成就感的少年一样，流露出发自内心的喜悦。与那些极为在意饮食健康的年长企业家不同，李嘉诚至今仍喜爱吃薯片这样“不健康”的食品。
据说，李嘉诚曾因电影《阿甘正传》而潸然泪下，虽然比起命运如羽毛般随风飘荡的阿甘，世情练达的李嘉诚选择命运的意识和能力都强出太多，但其成功的基础，也是对于一系列朴素价值观的反复实践，这与阿甘在懵懂之间履行单纯的价值观倒颇有类似。
李嘉诚做事的基本准则是认真、投入，1957年进入地产业之初，他手持一块秒表做“尽职调查”，从汽车站等热闹的地方步行到自己待购的目标，估算未来人流状况，时至今日，他仍自信于外界询问他问题，他平时有准备，可轻而易举地给出事实或数据，并自信“超过90%是对的”；受过贫苦洗炼的他崇尚节俭，对于任何能够降低成本的技术都充满兴趣，这让他在经营塑料花厂时就成为了优化流程的专家，到了今天，他也会为网络电话Skype而兴奋；他对风险高度戒备，并深知现金储备的力量，正因此，李嘉诚一生中几次重大的交易，比如1979年收购和记黄埔和1985年买下香港电灯，都是在极短时间内调动巨额现金完成的，这令任何一个竞标对手望尘莫及；李嘉诚珍视声誉与承诺，14岁其父去世时，他对父亲做出承诺：“我们一家人一定生活得好好的 ”，从此便拼尽全力工作及自学，这种一诺千金的品格，延伸到他对待商业伙伴和员工那里，从此意义上，今天拥有23万名员工的和黄就像他的家庭观念的延伸。
不可否认，坚守极为朴素的方法论在错综复杂的商业环境中运行，李嘉诚毕竟是个商业天才。最近的一个例子是，2006年时，他就在和黄系内提醒高级管理团队，要减少债务、准备好应对危险。而在2007年5月，全球次级债风波尚未爆发之际，他也数度提醒投资者需谨慎。关于为什么他能感知连诸多华尔街大亨都忽视的灾难，李嘉诚给的回答朴素却又富有玄机：“这是可以从二元对立察看出来的，举个简单的例子，烧水加温，其沸腾程度是相应的，过热的时候自然出现大问题。”―这很好地呈现了多年来外界对于李嘉诚的迷思：似乎他能像观察烧水的进度般，对抽象、复杂、变化多端的市场直观地做出读解。
此种天才很难被模仿，但略为功利地说，我们试图回答这样一个问题：如果可以相对简单地归纳李嘉诚的内心，那它或许是由两种品质构成的：一方面是深厚、广博的商业才华，另一方面则是天真烂漫的赤子之心。
又究竟是什么力量让这两者交融，不会偏倚于一端？熟悉李嘉诚的人会将这种微妙的平衡分解为两种人格：其持续58年的旅程之所以总有突破，很大程度上因为李嘉诚有着无止境的好奇心，由于平时对经济、政治、民生、市场供求、技术演变等一切尤其对他经营行业有关的最新数据和讯息全部了然于胸，故能于机会来时迅速作出决定。而他没有像绝大多数成功人士一样被接连不断的成功冲昏头脑，则因为他有着不停反思而形成的克己能力。
两元世界
在少年时期，李嘉诚便中断了正规的教育，但他却自发的通过购买、交换旧书完成了自学，养成“抢知识”的习惯和“不择细流”的阅读口味。众所周知，除了小说，李嘉诚遍读从各公司年报到科技、历史、宗教等各类书籍。
这让那些常伴他身边的人也会时常惊讶于他的新鲜感。比如，在谈及世界经济时，李会顺手拈出像“22个阿拉伯国家的GDP总和还超不过西班牙”这样的一些外人不太留意的数据，而在谈及节能建筑这样的专业问题，李能像一个材料学专家般侃侃而谈，甚至，他专门要求别人为他讲解Web2.0方面的知识。这并非因为他投资了Facebook这个全世界最热门的社区网站，而是因为，他想知道自己孙女一代以后怎么了解世界的知识。
如果可以总结李嘉诚的知识结构，至少包括两个方向。其一是他业务所涉及的种种专业知识，比如如何将油砂精炼为石油，或P2P技术将怎样影响移动通讯的未来；其二则是他的好奇心。他的好奇并不是率性的，而是认真预先设定自己看问题的好角度，然后像搜索引擎般尽可能全面了解相关信息。因此，他喜欢了解各国的文化、历史，以及这些世情如何积淀为今天还在影响人们思考的力量。
这最终让李嘉诚成为一个东西文化结合体：像西方饱受职业训练的经理人一样重视数据、依靠组织和制衡的管理法则，也像外国商人一样发自内心的乐于迎接竞争带来的压力和成就感，另一方面有着东方的谨慎谦虚，始终坚持东方企业家关心、重视员工的长远前途的传统。李拥有一群追随他多年、得力可靠的高级行政人员，令他引以为傲。
反求诸己
每年6月底，李嘉诚常出现在他所捐助创立的汕头大学，与学生们分享一些关于人生的心得，今年，他的演讲主题为“自负指数”。在这一短短10分钟的演讲中，李嘉诚将傲慢比喻为“能力的溃疡”，将时常自问是否过分自大等问题喻为其成功的秘诀。
据熟悉李嘉诚的人说，这种自问从不止息。他每天清早会自问：我的努力和蒙上天眷顾，取得今天的成功，应如何做得更好？而到晚间，又会如演讲中提及的反思：“我有否过分骄傲和自大？我有否拒绝接纳逆耳的忠言？我有否不愿意承担自己言行所带来的后果？我有否缺乏预视问题、结果和解决办法的周详计划？”或许在外界看来，这种简单的反问并没有太大的效力，但幼年时经历过巨大而绵长的苦难，让李嘉诚并不敢对未来抱有侥幸心理，这些反思就不可避免的诚实。
正如上文所提到的，没有经受过正规商业学校训练的李嘉诚坚持着一些极尽基本的商业原则，而它们或者来自于幼年的家教，或者来自于他早年做生意时的教训总结。如果说李嘉诚有什么异于常人的敏锐，其中之一，便是他对于自己犯过的错误强烈反思的能力―他不会寻找宽容自己的借口。
比如，李嘉诚或许是全世界最重视现金流的商人之一，在2007年财年结束时，和黄拥有着1110亿港元的现金及现金等值的资产。而李嘉诚对现金流的高度珍视，很大程度上与他早年的经历有关。
李嘉诚的身边一直保存着他第一块手表的包装盒。“这里面没有珍宝，也没有秘密，但它却是一个教训。”他说。
这个教训可以回溯至上世纪50年代李嘉诚创业之初。还在经营塑料花业务的李嘉诚收到塑料花买家付款的一张期票，讲求信用的他随即给原料供应商开出一张期票作结数，希望到时买家支付的款项存入自己的户口后，供货商也可兑现李嘉诚的期票。
不巧的是，李的买家未能践诺，而并不富有的李嘉诚必须为自己的信誉东拼西凑，可惜仍未能凑足所需数目：幸好，他平时会随手把多余的硬币放在那个包装盒里，而这些无意间积攒的硬币竟凑足了不足之数。
这种由硬币付款到今天千亿现金的关联，外人很难理解。但对于李嘉诚而言，他能从5万元的积蓄和借款发展出12家总市值逾万亿港元的上市公司，根本而言，正是因为他能够从最微小的教训中学得避免犯大错误的方法―在与李嘉诚交流时，他总会将话题引向自己的青年时期，这或许说明，当年太多的事情留给他过于深沉的影响，以至于即使他管理着一个业务遍布57个国家的商业帝国，仍不可避免的从过往的教训中汲取经验。
李嘉诚说，22岁他创立长江塑胶厂时，他“知道光凭能忍、任劳任怨的毅力已是低循环过时的观念，成功也许没有既定的方程式，失败的因子却显而易见，建立减低失败的架构，是步向成功的快捷方式。”回顾早年商业生涯，李嘉诚并非没有犯过错误，而他将这些错误提炼为新的人生哲学的能力，实在令人吃惊。
1950年，在其塑料花工厂成立时，为了节省微薄的租金，李嘉诚选择了一个货仓做工厂。不久之后，因香港连降暴雨，刚刚添置的塑胶机器被逐一泡坏，结果开业后不到两个月就需另觅厂房经营。李嘉诚并未以“运气不好”为由怨天尤人，而是开始思考，未来每做一件事，需将其种种环节考虑周全，并给自己留出余地。
日后，当他有钱买下一艘游艇，已经被训练得极为谨慎的李嘉诚定制了两个引擎，两个发电机，以备不时之需。甚至，“如果两个都坏掉，我船上还有一个有马达的救生艇。”
李嘉诚论人生
基因提取及扩增方法
1单个核细胞（MNC）的分离
在无菌条件下采集骨髓液2mL，EDTA抗凝，用Ficoii淋巴细胞分离液（相对密度1．077）分离MNC，用1×PBS洗涤2～3次。－80℃冻存备用或直接提取RNA。
2总RNA的提取
用原平皓（天津）生物技术有限公司提供的RNApure超纯总RNA离心柱式试剂盒提取RNA。经紫外线分光光度计测定RNA纯度（A260／A280＞1．6），同时进行RNA定量测定。在15g／L琼脂糖凝胶上电泳可见3条清晰亮带，说明所提取RNA完整。
3cDNA合成
应用M－MVL逆转录试剂盒（Fermentas公司）合成cDNA。逆转录反应体系20mL，包括总RNA1μg，0．5g／L的OLigo（dT）primer1μL，使用DEPC水补充至12μL。快速瞬时离心，置65℃孵育5min，立即置于冰上；然后依次加入55×缓冲液4μL，RNase抑制剂1μL，10mmoL／LdNTPMix2μL，混匀，42℃2min；再加入逆转录酶（M－MLV）1μL，42℃反应30min，70℃下放置10min，冰上5min。
4PCR反应
PCR反应体系包括逆转录产物4μL，20μmol／L的FAK正、反义链引物各1μL，2×PCRMix10μL（其中包括10mmol／L的dNTPs、10×缓冲液、TaqDNA聚合酶），其余以DEPC水补足至20μL。所用引物根据GenBank提供的FAKmRNA序列，由上海生工公司设计合成。
FAK正义链为5′－TATTGGACCTGCGAGGGAT－TGG－3′，反义链为5′－GAGGCGGTTTCTTTGGT－GGAGC－3′，目的基因长度为255bp。β－actin正义链为5′－AAACACCCCAGCCATGTACGT－3′反义链为5′－GTGGTGGTGAAGCTGTAGC－3′，目的基因长度为228bp。内参照与目的基因分别扩增，PCR条件：94℃预变性2min；94℃变性30s，60℃退火30s，72℃延伸30s，40个循环；72℃再延伸5min。
5PCR产物分析
取PCR产物10μL与LoadingBuffer2μL混合，在15g／L琼脂糖凝胶中电泳，80V恒压电泳25min，EB染色。阳性结果可见228、255bp处各有一条亮带，分别为β－actin和FAK。紫外线透射仪观察并照相，照片经Meta－morphImagingSight软件进行分析并读取吸光度值，取FAK与β－actin曲线下面积的比值作为FAKmRNA的相对含量。
染色体的制备及R显带和核型分析
1染色体的制备将白血病病人骨髓细胞按（1～2）×109／L的密度接种于RPMI1640培养基中，培养24h，加入0．05mg／L秋水酰胺，37℃孵育1h。1000r／min离心10min，弃上清液，加入预温至37℃的0．075mol／LKCl溶液8mL，37℃孵育30min进行低渗。加入1mL固定液（甲酸∶乙醇＝3∶1）轻轻混匀进行预固定，离心后再进行3次固定，将最后一次固定的标本以1000r／min离心10min，弃上清液，加入适量固定液配成细胞悬液，备用。
2染色体R显带采用气干法制片，将制备好的片子晾干，放入R显带液中，87．5℃水浴70～80min。取出片子水洗，晾干，再加Giemsa液染色15min，水洗，干后镜检。
3染色体核型分析每例病人分析10～20个分裂中期细胞，观察有无染色体异常。
统计学处理
应用SPSS11．0软件进行统计学处理，两组率比较用χ2检验和精确概率检验；计量数据以x珚±s表示，组间比较采用t检验。
结果
1FAKmRNA在AL病人骨髓MNC中的表达
AL病人FAKmRNA阳性表达率为66．0％，与正常对照组（20．0％）比较差异有显著意义（χ2＝5．49，P＜0．05）。其中ALL和ANLL病人阳性表达率分别为71．4％和63．9％，二者差异无显著意义（P＞0．05），但两者均高于正常对照组（P＝0．04；χ2＝4．44，P＜0．05）。ALL和ANLL病人FAKmRNA的表达水平分别为0．75±0．12和0．65±0．17，二者差异无显著性（P＞0．05），但与正常对照组（0．31±0．15）比较，差异有显著意义（t＝7．98、5．60，P＜0．05）。部分病人电泳结果见图1。
2FAKmRNA在不同时期AL病人的表达
初诊组和复发组AL病人白血病细胞FAKmRNA的阳性表达率分别为80．0％、85．7％，两组比较差异无显著性（P＞0．05），但均高于正常对照组（χ2＝9．38，P＜0．05；P＝0．02）。初诊组和复发组AL病人白血病细胞FAKmRNA表达水平分别为0．72±0．12、0．87±0．15，两组比较差异无显著意义（P＞0．05），但均高于正常对照组（t＝8．79、7．58，P＜0．05）。缓解组病人FAKmRNA的阳性表达率为23．1％，均明显低于初诊组和复发组，差异均有显著意义（χ2＝10．26，P＜0．05；P＝0．02）；与正常对照组比较差异无显著性（P＞0．05）。缓解组病人FAKmRNA表达水平为0．27±0．17，明显低于初诊组和复发组（t＝4．44、7．82，P＜0．05），与正常对照组比较差异无显著性（P＞0．05）。
3FAKmRNA的表达与骨髓细胞染色体核型的关系
AL病人骨髓细胞染色体异常核型的检出率为64．0％（32／50）。FAKmRNA在异常核型组的阳性表达率为78．1％，明显高于异常核型未检出组的44．4％（χ2＝5．82，P＜0．05）；FAKmRNA在异常核型组的表达水平为0．75±1．17，明显高于异常核型未检出组的0．45±0．11（t＝6．72，P＜0．05）。
讨论
FAK是SCHALLER等于1992年发现的能使Src内源性蛋白酪氨酸激酶激活的主要底物，在丝氨酸转化细胞的磷酸化蛋白中发现。FAK广泛分布于成纤维细胞、血小板、表皮细胞、内皮细胞、TC、BC、中性粒细胞、单核细胞和滋养层细胞等的细胞质中。已知FAK有6个可以被磷酸化的酪氨酸位点，FAK主要通过这些位点的磷酸化并与含有SH2或SH3结构域的蛋白质相结合，通过整合素、FAK／Src／Pl30CAS／JNK、FAK／PI3激酶以及FAK－ROCK／RhoA等多条信号通路参与细胞多种生物学过程，并参与肿瘤发生、发展、侵袭与转移。
白血病是遗传学和表型上异质性疾病，为多种癌基因、抑癌基因结构或表达异常及细胞信号转导通路调节失衡等协同作用的结果。迄今，有关FAK与白血病相关性研究报道较少。
2004年RECHER等报道，在AML中发现有FAK蛋白的高表达和过度激活，并提示FAK的高表达与白血病细胞的迁移、预后及耐药性有关系。
本研究结果显示，AL病人FAK基因的表达率、表达水平均明显升高，其升高的具体机制不是十分清楚。先前有研究结果表明，FAK的磷酸化受到整合素、细胞因子、致癌基因和酪氨酸激酶受体的调节。异常整合素或细胞因子的信号通路以及Ras等致癌基因产物的表达均可以导致AML细胞中FAK的磷酸化，从而进一步导致下游一系列信号通路的持续激活。另外有研究结果显示，在AML细胞中20％的病人有8q22－8q24染色体区域扩增，而这个区域正是FAK基因所在，因此，8q的扩增可能与FAK在ANLL细胞异常表达有关系。
FAK与血液系统中B细胞成熟过程也有关系，LE等研究显示，FAK是CXCL12－CXCR4轴的下游信号分子，并介导细胞的黏附作用。CXCL12诱导未成熟B细胞FAK蛋白磷酸化，通过PKC等信号共同调控细胞的成熟与运动。有关FAK基因在ALL表达增高的具体机制仍需进一步探讨。
本研究结果还显示，初诊组和复发组病人白血病细胞FAK基因的表达率和表达水平较正常对照组明显升高，而缓解组则明显降低，推测FAK基因表达与白血病的病情进展有关，是预后不良的因素之一。TARDY等最近研究显示，AML病人白血病细胞中FAK蛋白高表达则其预后相对较差。本文结果与TARDY等的研究结果一致，说明FAK是影响白血病病人生存率的重要因素之一。
LE等采用BCR－ABL－BaF3细胞系（一种BCR－ABL基因转染的前B淋巴细胞）研究显示，FAK基因沉默技术使细胞的增殖和克隆形成均减少，中位生存期延长，且伊马替尼对BCR－ABL细胞的疗效增加。这表明FAK对ALL的进展具有一定的促进作用。FAK的高表达抑制肿瘤细胞失去细胞黏附后的失巢凋亡，导致癌细胞以非锚定生长方式不断增殖，这有助于肿瘤细胞的存活和侵袭转移。
2、时间：最适合种植百合的时间为7-9月份，但每个地区的气候是不一样的，所以要根据当地气温来进行稍加调整。这个时间的气温正好处于16-24℃左右，是很利于其生长的。
3、选种：挑选健康的种球，如果说它的根部有腐烂的部分，或者是已经长出新根时，需放到杀菌溶液中。浸泡大约20分钟时间，取出后要用干净的水冲洗干净。
4、种植：种植时将处理好的种球放到土里，芽尖以上的部分都应埋进土里，要让两者充分的接触。种植后要根据土壤的情况适当浇水，应让土壤维持一个湿润状态。
2、牛奶100毫升，草莓50克，捣烂如泥，调成糊状，涂擦面部,保留20分钟后洗去。此法可防止皮肤干燥、老化，使皮肤光滑、湿润、细腻。
3、鲜牛奶50毫升，加4～5滴橄榄油及适量面粉调匀敷面，20分钟后洗净。此法长期使用，可增加皮肤的活力弹性，使皮肤变得清爽，细腻洁白。
4、酸牛奶、奶油各等份，混合调匀后敷面，保留20分钟后用清水洗净。此法具有收敛作用，长期坚持可消除面部皮肤上的皱纹，适用于中老年妇女或面部皱纹较多的孕产妇。
5、用牛奶，蛋青，还有柠檬汁，还有放点蜂蜜，还有珍珠粉，再加点VE搅拌均匀了以后，放面膜纸浸泡，泡几个小时以后敷在脸上，很配偶的脸啊，偶皮肤敏感，而且很干燥，蜂蜜牛奶都是滋润的，牛奶还美白，柠檬有VC，还有VE。
6、如果不是必须，尽量避免在夏季早上10点—下午2点出去，因为一天当中，这段时间的阳光最强、紫外线最具威力，对肌肤的伤害最大。
7、外出时尽可能戴帽子、撑阳伞、戴太阳眼镜、穿长袖衣裤，以保护肌肤。
8、每次晴天外出时，都应涂防晒品，而且应每隔2—3小时擦一次。而游泳时也应涂防晒品，并且还应使用防水且防晒指数较高的防晒品。
9、只要从事过户外活动，无论日晒程度如何，回家后都应先洗澡，并以按摩的方式轻轻擦拭全身，先用温水，再用冷水冲淋，并全身抹些护肤露。
10、暴晒后，如有条件可用毛巾包着冰块来冰镇发红的被灼伤皮肤以减缓局部燥热，并尽量少用手抓，否则将会加剧晒后斑的产生。
11、晒后还可取用家中鲜芦荟，刮出中间的芦荟物质敷在肌肤上，有镇定和美白的作用。
12、手在外出时也要搽防晒露，而手臂、脚、膝裸外露时也应涂防晒品，这样既可以防晒又可以有效减少斑点，特别是中年以后过早生成“老年斑”。
13、水是美容圣物，早晨醒来应及早空腹喝凉白开，如在水中加片柠檬，则美容效果更明显。晚上睡前30分钟也请喝一小杯水，让细胞充分吸收，可有效防止皱纹生成。
14、多吃黄瓜、草莓、西红柿、桔子等，因为其含有大量VC，能有效帮助黑色素还原，协助美白，增进免疫力。
15、充足睡眠，有效缓解生活压力，多听音乐，也是美白的好帮手。
16、少抽烟、少喝刺激性饮料，保证睡眠，可保持肌肤柔嫩光润。