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动画电影市场分析精选(九篇)

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动画电影市场分析

第1篇:动画电影市场分析范文

梦工厂动画公司目前已经制作发行了24部动画长片。此前其作品发行权一直归派拉蒙公司所有,后者从梦工厂动画电影和家庭影音产品发行中可获取8%的利润分配额度。自2006年来,双方成功合作发行了《怪物史莱克》系列、《马达加斯加》系列、《功夫熊猫》系列以及《驯龙高手》等影片,在全球创造了超过65亿美元的票房收入。

今年7月,梦工厂动画刚以1.55亿美元的价格收购了著名动画制作及角色版权运营公司Classic Media。该公司耳熟能详的作品包括《威利在哪里》(Where's Wally?)、《鬼马小精灵》(Casper the Friendly Ghost)、《独行侠》(The Lone Ranger)等知名动画系列,旗下总共拥有450部各类电视作品,总集数达到6100集。此外还拥有众多漫画作品的版权,漫画书刊的累计发行量超过20亿册。

8月,梦工厂动画的第二财季营收报告显示,公司营收从2.183亿美元下降到1.628亿美元,跌幅达25%;而1280万美元的盈利与去年同期的3410万美元相比也下跌了63%。梦工厂总裁杰弗瑞·卡森伯格(Jeffrey Katzenberg)在营收报告中指出,梦工厂动画第二财季利润主要来自于《马达加斯加3:欧洲大围捕》(Madagascar 3: Europe's Most Wanted)——该片全球票房收入截至目前超过5亿美元,在年度票房榜上排名第七。家庭娱乐方面,两部2011年上映的影片继续发力:《穿靴子的猫》(Puss in Boots)在第二财季收入中贡献了2280万美元;《功夫熊猫2》(Kung Fu Panda 2)收入4640万美元,主要源于本土付费电视点播。

梦工厂动画与派拉蒙此前曾为延续发行协议进行过谈判,派拉蒙方面提出提高发行分成,但这个提议没有得到卡森伯格的同意。另一方面,派拉蒙现在已经有了自己的动画公司——派拉蒙动画(Paramount Animation),其动画片《兰戈》(Rango)不仅票房优异,还获得了奥斯卡最佳动画电影奖。此种情形下,双方似乎早已先去了继续合作的意愿。而对于下一个合作伙伴,梦工厂动画曾希望将利润分配额度压到7%左右。除福克斯外,梦工场动画此前曾经与索尼公司进行了数次洽谈,但未能达成一致。

在新的合作协议中,福克斯将从发行梦工厂动画电影和家庭影音产品的利润中提取8%作为发行费用,此外福克斯还允许梦工厂动画在美国本土的电视窗口(包括付费电视、有线电视和Netflix在内)发行其动画作品,而不再额外收取发行费用;而对于梦工厂动画的新媒体发行收入(包括线上销售、在线视频点播和线上租赁),福克斯只能提成6%。分析认为,梦工厂动画和福克斯签订的新发行协议对梦工厂一方较为有利。卡森伯格坚信新媒体发行将在未来大放异彩,虽然现在这部分收入所占比例还很低,但他显然准备牢牢握住这部分利益。

对于新的发行合作伙伴,卡森伯格表示梦工厂动画曾考虑过多家公司,甚至包括自主发行影片,但他最终选择了具有“压倒性优势”的福克斯公司:“福克斯拥有广泛的发行平台,在全球范围内的影院和家庭影音行业都位于领先地位。福克斯建立了拥有专业力量和资源的世界级发行团队,我们相信在接下来的五年内,梦工厂动画可借此充分发挥其作品的市场潜力。”

尽管20世纪福克斯旗下拥有自己的动画公司——蓝天工作室(Blue Sky),但分析人士认为,梦工厂未来几年与蓝天工作室可能会形成有益的竞争态势。以“慢工出细活”著称的蓝天工作室短期内不会因为与梦工厂动画争抢档期而产生内耗。前者出品的《树叶人艾匹克》(Epic)和《里约大冒险2》(Rio 2)将分别在2013年5月24日和2014年4月11日上映。

市场分析师们纷纷对福克斯在全球票房的影响力持肯定态度。Cowen&Company公司分析师道格·克鲁兹(Doug Creutz)说:“福克斯在海外发行业务方面的规模和经验将对梦工厂动画拓展国际市场发挥重要作用。”证券评级机构Janney Montgomery Scott分析师托尼·韦伯(Tony Wible)则认为这番合作的战略意义远重于经济效益:“新闻集团可能助力梦工厂动画发展新的动画频道,这对梦工厂动画本身以及Classic Media的内容推广都将起到积极作用。”

在皮克斯的动画电影出现疲态的情况下,手握蓝天工作室,又与梦工厂动画联姻的20世纪福克斯公司,在与皮克斯、迪士尼阵营抗衡中无疑有了更重的砝码。业内预估此项合作将为新闻集团带来每年7500万美元的收益。

梦工厂动画未来的动画电影项目

2012年(派拉蒙发行)

《守护者的崛起》(Rise of the Guardians) 11月21日上映

2013年(福克斯发行)

《克鲁德一家》(The Croods) 3月22日 上映

《蜗牛》(Turbo) 7月19日上映

《眼镜狗和眼镜男孩》(Mr. Peabody & Sherman) 11月8日上映

2014年

《我和我的影子》(Me and My Shadow) 3月14日上映

《驯龙记2》(Dragons) 6月20日上映

《斯麦克节快乐》(Happy Smekday!) 第四季度上映

2016年

《功夫熊猫3》(Kung Fu Panda 3)

梦工厂动画发行业务合约比较

合作方 合约要点 合约期限

派拉蒙 从梦工厂动画电影及家庭影音产品利润中提成8%。 7年

从梦工厂动画电影及家庭影音产品利润中提成8%,

第2篇:动画电影市场分析范文

[关键词] 头颈癌; 量子点; 表皮生长因子受体; 成像; 体内分布

[中图分类号] R 739.8 [文献标志码] A [doi] 10.3969/j.issn.1000-1182.2012.06.003

对活体内癌细胞可视化实时成像观察在研究癌症的发生发展和个体化治疗中具有重要作用,同时也是抗癌领域里研究的难点和热点。近年来发展起来的量子点(quantum dots,QDs)在该领域显示出巨

大的发展前景[1-2]。

QDs是一种由Ⅱ~Ⅵ族元素或Ⅲ~Ⅴ族元素组成的纳米微晶体,与目前传统的有机荧光染料和荧光蛋白相比,QDs具有如下独特的光学特性:QDs激发光谱宽且连续分布,发射光谱窄而对称,荧光度强,光化学稳定性好,不易发生光漂白,通过改变粒子的尺寸和组成可获得从紫外到近红外范围内任意点的光谱[1-3]。QDs的这些光学特征是目前所有荧光探

针都不具备的。特别是近年来发展起来的发射波长在700~900 nm范围内的近红外荧光量子点(near-infrared fluorescent quantum dots,NIRF-QDs),其不仅可以避免组织自发荧光(400~600 nm)的干扰,同时对组织具有强的穿透力,因而特别适合于体内可视化成像研究[4-5]。

目前研究表明:头颈部鳞状细胞癌细胞高表达表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,

EGFR)[6-7]。本研究将人颊鳞状细胞癌BcaCD885细胞植入裸鼠的颏-颈交界部皮下,建立颏-颈部鳞癌模型,用最大发射波长为800 nm的QDs与EGFR单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)连接,制备QD800-EGFR mAb探针,通过静脉注射QD800-EGFR mAb对头颈部鳞状细胞癌进行原位可视化成像观察,并观察其体内分布特征,为进一步探索基于抗体靶向性的NIRF-QDs对头颈部鳞状细胞癌的可视化成像和个体化诊治提供依据。

1 材料和方法

1.1 主要材料

1.1.1 试剂和仪器 QD800抗体偶联试剂盒(Invitro-

gen公司,美国),EGFR mAb(Abcam公司,英国),人颊鳞状细胞癌细胞株BcaCD885(四川大学口腔疾

病研究国家重点实验室),紫外分光光度计(DU600,Beckman公司,美国),冷冻离心机(Z233MK-2,

HERMLE公司,德国),激光扫描共聚焦显微镜(la-ser scanning confocal microscope,LSCM)(TCS-SP5,Leica公司,德国),Maestro活体成像系统(Maestro EX,Cri公司,美国)。

1.1.2 实验动物 选取重庆医科大学实验动物中心提供的SPF级BALB/c nu/nu裸鼠12只为研究对象,鼠龄6~8周,体重20~25 g。恒温恒湿条件下饲养,垫料、饲料和饮水均经灭菌处理。所有实验操作程序均经过重庆医科大学实验动物研究所实验动物使用管理委员会批准。

1.2 方法

1.2.1 QD800-EGFR mAb探针的制备和纯化 根据QD800抗体偶联试剂盒中实验手册所提供的实验步

骤来进行QD800-EGFR mAb探针的制备,本实验分为4步,具体如下。1)QDs的活化和洗脱:将浓度为

10 mmol·L-1的双功能SMCC溶液14 μL以及浓度为

4 μmol·L-1的QD800液125 μL混合,在室温下活化1 h后用脱盐柱洗脱,收集有色洗脱液500 μL备用。2)抗体还原和分离:将浓度为1 mol·L-1的二硫苏糖醇液体6.1 μL加入到300 μL浓度为1 mg·mL-1的EGFR单抗PBS液中,室温下还原反应30 min后加入染料指示液,用脱盐柱洗脱,收集着色液500 μL备用。3)偶联和灭活:将收集的以上两种洗脱液混合,室温下偶联反应1 h后加入3 μL浓度为10 mmol·L-1的2-巯基乙醇,室温下灭活反应30 min。4)浓缩和纯化:将以上偶联灭活后的液体加入超滤装置管中7 000 r·min-1离心15 min,收集超滤离心膜内侧偶联溶液,然后用Pierce柱行色谱分离,得纯化的QD800-EGFR mAb探针。最后根据产品说明书提供的消光系数和测量波长两个参数,以及以此波长作为激发光在紫外分光光度计中测出相对应的吸光度和比色杯的光程,计算出QD800-EGFR mAb探针的浓度。计算公式为:A=εcl,其中A为吸光度值,ε为消光系数,c为分子浓度,l为光程。

1.2.2 QD800-EGFR mAb探针体外标记BcaCD885活细胞 将生长良好的BcaCD885细胞以每毫升5×104个的浓度接种到9个35 mm玻璃底培养皿(直径为15 mm)中,每个1 mL,培养24 h后,弃去培养基,PBS清洗3次。然后分为3组,每组3个培养皿。实验组加入浓度为100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探针100 μL;对照组Ⅰ加入100 μL浓度为100 nmol·L-1的QD800;对照组Ⅱ先加入浓度为1 μg·mL-1的EGFR mAb 200 μL以封闭EGFR,2 h后用PBS清洗3次,然后加入浓度为100 nmol·L-1的QD800-EGFR mAb探针100 μL。以上各组在37 ℃下孵育30 min后用PBS冲洗3次,然后在LSCM下观察QD800-EGFR mAb探针标记BcaCD885细胞的情况。

1.2.3 裸鼠头颈鳞状细胞癌模型的建立 取对数生长期的BcaCD885细胞,采用0.5%胰蛋白酶进行消化,在4 ℃下,800 r·min-1离心4 min,然后将BcaCD885细胞悬于PBS液中,将含有2×106个BcaCD885细胞的PBS悬液0.2 mL注射于12只裸鼠的颏-颈交界部皮下,从而建立了头颈部鳞状细胞癌模型,每日观察肿瘤的生长情况,待肿瘤的最大径达到0.8~1.0 cm时开始实验。

1.2.4 肿瘤活体可视化成像观察 将头颈部鳞状细胞癌模型裸鼠分为实验组和对照组,每组6只,用2%戊巴比妥钠(40 mg·kg-1)行腹腔注射麻醉后,实验组通过尾静脉注射100 μL的QD800-EGFR mAb探针

(含100 pmol当量的QD800)。对照组通过尾静脉注射250 μL浓度为1 mg·mL-1的EGFR mAb,24 h后再注射100 pmol当量的QD800-EGFR mAb探针100 μL。所

有动物于注射QD800-EGFR mAb探针之后15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、9 h、24 h的7个不同时间点用Maestro活体成像系统进行可视化成像检测,激发光/发射光为630 nm/800 nm,曝光时间为50 ms,像素为1 024×1 024。将采集的图像用Maestro 2.10.0软件进行处理和数据分析,分别显示自发荧光和目标荧光信号,然后测量其荧光值,并且计算荧光信噪比,即肿瘤荧光强度与背景自发荧光强度之比。将每种信号添加伪色彩,本研究将自发荧光设置为绿色,目标荧光信号设置为红色,最后将两种色彩相叠加。

1.2.5 QD800-EGFR mAb荧光探针的体内分布和器官的组织检查 实验组和对照组分别在3 h成像完毕后断颈处死裸鼠3只,24 h成像后处死裸鼠3只,解剖取出裸鼠的肿瘤、心、肝、脾、肺、左肾、右肾、脑、肠、胃,各器官用PBS冲洗后切分为2块,一块器官组织称重后剪成小碎片,放入玻璃匀浆器内匀浆,取各器官匀浆液100 μL放入96孔培养板内,用Maestro活体成像系统进行成像,根据各器官匀浆液的平均荧光和各器官重量对各器官内QD800荧光行半定量分析。同时将各器官另一块组织用冰冻切片包埋剂包埋并速冻,在-20 ℃下连续切割为7 μm厚的组织切片,每两张连续的冰冻切片中,一张行常规HE染色,另一张冰冻组织切片在LSCM下观察QD800在组织中的分布情况。

1.3 统计学分析

采用SPSS 13.0软件对实验数据进行分析,实验结果以x±s表示,对两均数间比较采用t检验,对3个均数以上间的比较采用方差分析,P

2 结果

2.1 QD800-EGFR mAb探针的制备和纯化

收集纯化的QD800-EGFR mAb探针样本,按照产品说明书上提供的在550 nm下的消光系数ε550=1.7×106(mol·L-1)-1cm-1,以及在550 nm下测得的A为

3.442,l=1 cm,计算得到最终纯化的QD800-EGFR mAb探针浓度为2.025 μmol·L-1。

2.2 QD800-EGFR mAb探针体外标记BcaCD885活

细胞

在LSCM下,实验组BcaCD885细胞膜上可见明显的QD800红色荧光,对照组Ⅰ和对照组Ⅱ的BcaCD885细胞均未观察到QD800的荧光(图1)。

2.3 肿瘤活体可视化成像

裸鼠颏-颈交界处皮下接种BcaCD885细胞1周后即可见明显的肿瘤生长,12只裸鼠全部成瘤。3周后肿瘤最大直径达到0.8~1.0 cm时开始实验。实验组在尾静脉注射QD800-EGFR mAb探针15 min后肿瘤部位出现明显的荧光信号,30 min~6 h时肿瘤的荧光信号最完整,与肿瘤大小对应,在9 h时观察到肿瘤的荧光成像明显变小,24 h时只有很小的荧光成像(图2)。30 min~6 h时实验组荧光信噪比较高,9 h时荧光信噪比明显降低,24 h时荧光信噪比接近基线水平(图3)。对照组只在15 min时肿瘤部位可检测到微弱荧光信号,可能是BcaCD885癌细胞对QD800-EGFR mAb非特异性吞噬所导致,但30 min~24 h时未检测到明显区别于背景荧光的荧光信号(图2、3)。实验组和对照组裸鼠肝脾相对应的部位在静脉注射QD800-EGFR mAb探针后15 min可见明显的荧光信号,一直持续到24 h(图2)。

2.4 QD800-EGFR mAb探针的体内分布和器官的组

织检查

在3 h和24 h实验组和对照组成像完毕后,在光镜下观察肿瘤的HE染色切片均可见大量癌细胞,显示肿瘤生长良好(图4)。在LSCM下观察肿瘤和各器官的冰冻组织切片可见:3 h时实验组和对照组的肝、脾组织以及实验组肿瘤中均有大量QD800聚集,左右肾组织中可见有散在QD800。在24 h时实验组和对照组的肝、脾组织中有大量QD800聚集,左右肾组

织和实验组肿瘤中可见有散在QD800(图5)。在3 h和24 h时实验组和对照组的心、脑、肠、肺、胃和对照组肿瘤中均未见有明显的QD800(图5)。

cinoma

在3 h和24 h各器官组织匀浆的荧光半定量分析结果见图6。由图6可见,在3 h和24 h时实验组和对照组肝中QD800的平均荧光均最高,显著高于其他器官(P

均荧光在实验组和对照组中差异无统计学意义(P>

0.05)。

3 讨论

目前对癌症成像检测较好的方法如CT、MRI等传统方法均不适合临床医师在术中对癌细胞进行实时可视化检查。近年来基于纳米技术发展起来的NIRF-QDs在对体内癌细胞的直接可视化成像检测显示出巨大的发展前景[1-5]。表面生物功能化的QDs标记活

细胞后,在实验检测所需浓度范围内对细胞没有毒性,不影响活细胞的生长、增殖、凋亡和分化[3,8-10]。由于NIRF-QDs具有独特的光学性质,同时QDs作为纳米粒还具有易于表面修饰连接和易于穿透肿瘤新生血管到达癌细胞的性质,因此,QDs在癌症个体化手术治疗方面显示出独一无二的优势[3-10]。

本研究体外结果表明:QD800不能与BcaCD885细胞结合,QD800-EGFR mAb探针能与BcaCD885细胞结合,但不能够与被EGFR mAb封闭EGFR后的BcaCD885细胞结合,这就证明了mAb与QD800连接后,EGFR mAb的免疫活性没有改变,QD800-EGFR mAb探针能通过特异性免疫识别BcaCD885细胞表达

的EGFR,从而使QD800结合到细胞表面。

笔者选择高表达EGFR的BcaCD885细胞移植于头颈部进行活体可视化成像研究,主要是因为:1)纳米粒QDs进入血液后易被体内的单核吞噬系统细胞作为异物识别而吞噬,从而大量聚集于含单核吞噬系统细胞丰富的肝脾等器官,这对躯体部肿瘤的成像产生很大的干扰,但对头颈部的成像无干扰,因此头颈部是QDs可视化成像较理想的部位;2)各种靶向性探针经静脉注射后对肿瘤的靶向性本身与肿瘤的生长部位也密切相关;3)头颈部恶性肿瘤大多为鳞状细胞癌,而90%以上的头颈部鳞状细胞癌细胞高表达EGFR[6-7],以EGFR为靶点用QDs进行可视化

成像对头颈部鳞状细胞癌具有广泛的适用性。

本研究基于头颈部鳞状细胞癌高表达EGFR为靶点,用静脉途径注射QD800-EGFR mAb探针,检查表明:QD800-EGFR mAb在体内能通过EGFR mAb作为桥梁对表达EGFR的BcaCD885细胞靶向结合,即QD800的荧光能代表BcaCD885细胞的存在,QD800与细胞结合后的荧光在体外能够清楚可见。本研究中在注射QD800-EGFR mAb探针15 min后能够看到清楚的成像,但在30 min能检测到较15 min荧光度更高和更完整的肿瘤成像,这种高荧光度能完整显示肿瘤的成像,但是30 min~6 h无明显变化,在9 h时肿瘤成像明显变小,荧光度也明显减低,提示用QD800-EGFR mAb探针行头颈部鳞状细胞癌个体化成像检测的最佳时间为静脉注射QD800-EGFR mAb探针后30 min~6 h这一时间段内,随着时间的推移,在24 h时肿瘤成像进一步变小,荧光度也更低。

前期研究也表明:在皮肤屏障存在的情况下,QD800标记癌细胞后能可视化成像检测到104个癌细胞,比目前的CT和MRI对最小癌灶检测的敏感性提高了100倍,但如果在实际手术中,由于肿瘤暴露在开放的创面下,其检测的敏感性将会进一步提高[11]。Gao等[12]预测NIRF-QDs标记癌细胞后能可视化检测

到10~100个细胞的水平。随着更高质量、更强组织穿透力QDs的合成和光学成像技术的不断发展,在暴露的创面下QDs对癌细胞的可视化成像检测有望达到单个细胞水平,以后临床医师只需佩带一个很小的激发光源探头和近红外光接受器,就可在手术中对肿瘤进行真正“量体裁衣”的个体化手术切除。

目前对QD800-EGFR mAb探针进入体内后的代谢过程还不清楚,本研究结果可见:静脉注射QD800-EGFR mAb探针后15 min~24 h,肝脾相应部位均显示出清楚的成像,提示肝、脾内一直有大量QD800聚集。在注射QD800-EGFR mAb探针3 h和24 h后,QD800在肝、脾组织中分布最多,其次是肾,而心、脑、肠、肺、胃和对照组肿瘤中均未见有明显QD800分布,但在3 h时实验组肿瘤中QD800显著高于24 h时。

本研究结果表明:QD800-EGFR mAb探针静脉注射后对高表达EGFR的头颈鳞状细胞癌能进行清楚的可视化个体成像检测,在非侵入可视化成像研究头颈鳞状细胞癌的发生发展和个体化治疗等方面有着巨大的发展前景。但QD800-EGFR mAb探针进入体内后在肝、脾组织中大量聚集。如何减少QD800-EGFR mAb探针进入体内后在肝、脾组织中聚集,以及研究如何代谢和清除是今后研究的重要方向。

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