前言:一篇好文章的诞生,需要你不断地搜集资料、整理思路,本站小编为你收集了丰富的冰箱使用注意事项主题范文,仅供参考,欢迎阅读并收藏。
1.干扰素:包括普通干扰素a和长效干扰素(聚乙二醇干扰素),只能用于转氨酶升高的慢性乙肝和丙肝患者,不能用于高黄疸和严重肝硬化(失代偿期)的乙肝或丙肝患者。2.核苷类抗病毒药物:包括拉米夫定、阿德福韦和恩替卡韦,只能用于成年乙肝患者,不能用于儿童。这类药物适应症是用于治疗乙肝病毒处于复制状态的慢性乙肝患者,不能用于非活动性的病毒复制指标阴性的乙肝患者。这类药物基本疗程需1年以上时间,用药期间决不能擅自停药,否则有可能导致病情突然加剧。3.胸腺肽制剂:包括胸腺五肽、日达仙、迈普新等,这些药物具有增强机体免疫功能的作用,但不能用于儿童乙肝患者。胸腺肽制剂极有可能影响和干扰儿童胸腺的正常发育,使其发生萎缩,日后带来严重的免疫障碍。4.人血白蛋白:静脉滴注速度不要超过每分钟2毫升,尤其是刚开始的10分钟内,应该特别注意缓慢滴注,逐渐加至每分钟2毫升,以防过敏反应发生。5.各种丹参制剂:包括香丹注射液、丹参注射液、复方丹参注射液等,使用时必须使用5%~10%的葡萄糖注射液稀释,不能用生理盐水稀释。该类制剂不宜与其它药物在同一容器内混合使用。6.还原型谷胱甘肽:老年患者使用时需要减少剂量。7.各种甘草酸制剂:包括甘利欣、美能、复方甘草酸苷等等,低血钾、高血压、心衰和肾衰患者禁用这类药物。这类药物与利尿剂同时使用时,容易造成低血钾,应特别注意。
8.含硫类保肝药物:包括甲硫氨酸、蛋氨酸、胱氨酸等,不能用于血氨升高的肝硬化患者或肝昏迷患者。 9.复合氨基酸制剂:富含芳香族氨基酸(酪氨酸、苯丙氨酸等)的复合氨基酸制剂,不能用于血氨升高的肝硬化患者或肝昏迷患者,否则可以导致或加重肝昏迷。血氨升高的肝硬化患者或肝昏迷患者,只能选用富含支链氨基酸(亮氨酸、异亮氨酸等)的六合氨基酸制剂。
10.多烯磷脂胆碱注射液:严禁用电解质溶液(生理盐水、林格氏液等)稀释,只能用5%~10%的葡萄糖注射液稀释。
11.双环醇:商品名百赛诺,用于治疗各种慢性肝炎所致的转氨酶升高,但是严重的肝病,如肝硬化腹水、重症肝炎等慎用。
12.丁二磺酸腺苷蛋氨酸:商品名思美泰,用于肝硬化前和肝硬化所致的肝内胆汁郁积。只有胆汁郁积情况存在,才能使用该药。思美泰并非降黄的通用药物。血氨升高或肝昏迷的肝硬化患者禁用该药。
13.以下肝病常用药物在输液时需要缓慢点滴,控制滴速:氨基酸、甘草酸、多烯磷脂胆碱注射液、丁二磺酸腺苷蛋氨酸、复方丹参注射液、门冬氨酸钾镁、甘乐等。
14.注射用促肝细胞生长素:可用于各种重型肝炎的辅助治疗,但是不适合用于轻度或中度的慢性肝炎。
15.茵栀黄和苦黄注射液:需要用5%~10%的葡萄糖注射液稀释,不能用生理盐水稀释,否则会降低药物有效的降黄成分。
16.注射用门冬氨酸尿氨酸:适合于治疗各类肝病引起的高血氨症及肝昏迷,但是肾功衰竭者禁用。该药每天用量不能超过40克。
17.如果肝病患者同时患糖尿病,以下药物禁用或慎用:亮菌口服液、注射用核糖核酸。
小儿发热首选对乙酰氨基酚,对乙酰氨基酚解热作用强,镇痛作用较弱,作用缓和而持久,对肠胃刺激小。用法是1次10~15 mg/kg,一日分4~6次服用;或用阿司匹林,按儿童体表面积1.5 mg/m2,分4~6次服用,或1次5~10 mg/kg。阿司匹林吸收迅速而安全,解热作用强,降低发热者体温,对正常体温无影响;布洛芬具解热镇痛作用,抗炎作用,是此类药物中对肠胃刺激最小的,用法是每次5~10 mg/kg,3次/d;5岁以下小儿高热时可用20%安乃近溶液滴鼻,婴儿每侧鼻孔1~2滴,2岁以上儿童每侧鼻孔2~3滴。使用退热药物需注意的是:退热药治标不治本,可能掩盖病情,应密切观察。发热是人体一种保护性反应,体内抗体增多有利于炎症修复,但发热消耗体力,体温骤降容易引起虚脱,应严格掌握用量。注意两次用药间隔时间(4~6 h),多饮水,为避免胃肠刺激,宜在饭后服用。不能同时服用两种以上药物,避免对肝、肾刺激。用药时间不超过3 d,发热时控制饮食,多喝水、果汁,高热患儿用冰袋或凉毛巾冷敷,或用50%酒精擦拭四肢、胸背、头颈部,注意休息,保证睡眠,室内空气保持通畅。
小儿感冒初始阶段,如流涕、咽痛、声音嘶哑,服用美扑伪麻、酚麻伪敏、氨酚伪麻等制剂。伴有咳嗽服用美酚伪麻、双酚伪麻、美息伪麻等。流感一般高热,服用退热药外,还要服用金刚烷胺制剂抗病毒药物,如复方氨酚烷胺咖敏胶囊、复方氨酚烷胺胶囊。缓解鼻塞症状,用奈甲唑啉滴鼻剂。服用感冒药注意事项:抗生素对感冒和流感病毒无作用,但感冒时,病毒在咽部繁殖引起咽炎,在肺部繁殖引起肺炎,并发细菌感染时服用抗生素,如氨苄西林、头孢氨苄、红霉素、阿奇霉素等。感冒病程多在1周左右,无严重症状者可不用或少用药物,多喝水,注意休息。感冒药物连服不得超过7 d,服用剂量不得超过推荐量,一周后未缓解,应去看医生。
腹泻是小儿常见病,痢疾、大肠埃希菌感染的急性腹泻,症状是脓血便,里急后重,腹痛,首选黄连素。1岁以下1次0.05 g,1~3岁1次0.05~0.1 g,4~6岁1次0.1~0.15 g,7~9岁1次0.15~0.2 g,10~12岁1次0.2~0.5 g,3次/d。由于外界刺激引起激惹性腹泻,症状多为水便,伴有粪便颗粒,下泻急促,伴有肠鸣音,腹痛剧烈,选用思密达、蒙脱石,1岁以下每日1袋,2~3岁每日2~3袋,3岁以上每日3袋,分3次服用。消化不良引起的腹泻证见黄绿色,婴儿粪便混有奶瓣,服用胰酶制剂。服用腹泻药物注意事项:腹泻可致钾离子丢失,注意补充钾盐、水、电解质;药用炭(思密达、蒙脱石)可影响儿童营养吸收,3岁以下儿童长期腹泻或腹胀禁用,药用炭不易与维生素、抗生素、生物碱、乳酶生及各种消化酶同时服用。
便秘也是小儿常见病,低张力性便秘(肠肌、腹壁、膈肌张力无力,通常是软便,大便时间较长),用开塞露1次5~10 ml,注入,深度距口3~6 cm。急性便秘,用硫酸镁,可单独使用,或配伍山梨酸和甘油,1次每周岁 1 g,同时大量饮水。便秘用药注意事项:儿童不易用缓泻药,可造成缓泻药依赖性便秘,一旦缓解,应停用,一般用药不超过7日。硫酸镁应在清晨空腹服用,需大量饮水,排便反射减弱引起腹胀时,应停止使用。
小儿生长发育阶段,用药遵循以下几点:
①用药及时,用量宜轻。小儿得病急,变化快,因此用药要及时,由于小儿脏腑娇嫩,用量宜轻;
②宜用清轻之品。对大辛、大寒、大热及攻伐药物、猛烈药物要慎用,如必须使用,量要少,中病即止;
③小儿脾气不足,消化能力差,宜用健脾和胃药物;
【关键词】 细胞株
Effect of Aminopeptidase Inhibitor on Differentiation Induction Activity of All-trans Retinoic Acid in Human Acute Promyelocytic Leukemia NB4 Cells and Its Mechanism
Abstract
This study was purposed to investigate whether aminopeptidase inhibitor,bestatin,can potentiate all-trans retinoic acid (ATRA)-inducing differentiation in NB4 cells,and to explore its mechanism. The NB4 cells were exposed to either bestatin and ATRA alone or in combination,the morphological changes of NB4 cells were observed by optical microscopy,the CD11b expression was measured by flow cytometry,the function of defferentiation cells was analyzed by nitroblue-tetrazolium (NBT) reduction assay,the mRNA expressions of c-myc and c-EBPε in NB4 cells were detected by RT-PCR,the c-Myc protein expression was determined by Western blot. The results showed that treatment with bestatin alone induced no significant changes in morphology,NBT reduction activity and CD11b expression in NB4 cells. NB4 cells incubated with 10 nmol/L ATRA plus 100 μg/ml bestatin showed more morphologic feature of metamyelocyte and band neutrophil than ATRA alone treated cells. 100 μg/ml bestatin enhanced the NBT reduction activity in NB4 cells induced by various concentrations of ATRA (10,20,40 nmol/L). The effects of various concentrations of ATRA in combination with 100μg/ml bestatin were statistically different from the effect of ATRA alone (P
Key words bestatin; ATRA; cell line,NB4; differentiation
氨肽酶抑制剂乌苯美司(bestatin)能抑制氨肽酶N/CD13和亮氨酸氨基肽酶活性,通过增强宿主免疫功能及诱导肿瘤细胞凋亡等发挥抗肿瘤作用[1,2]。有研究提示,bestatin能够诱导U937细胞的分化[1],国内未见报道。我们以NB4细胞为研究对象,通过形态、功能和表面分化抗原等多层次实验研究,了解bestatin是否能诱导NB4细胞分化及(或)对ATRA的诱导分化作用的增强效应,并初步探讨其可能的机理。
材料和方法
主要试剂
Bestatin、ATRA均购于Sigma公司。bestatin以无菌去离子水溶解为1 mg/ml,分装之后-20℃保存;ATRA以无水乙醇溶解成10-5 mol/L的储存液,4℃避光保存,使用时用RPMI 1640细胞培养液将其稀释为相应工作浓度。NBT为BBI公司产品,以PBS配成0.1%溶液,过滤除菌后4℃避光保存,使用前1周内配制。RPMI 1640为Gibco公司产品。胎牛血清为JRH公司产品。CD11b-FITC标记单克隆抗体为Teotech公司产品。CD13-PE标记单克隆抗体为Becton Dickinson公司产品。TRIzoL试剂为Gibco公司产品,M-MLV逆转录酶和Taq DNA合成酶为Promega公司产品。鼠抗人c-Myc单克隆抗体(c-33)及羊抗人β-Actin多克隆抗体(I-19)均为Santa Cruz公司产品,使用时以TBST液分别按1∶500和1∶1 000稀释。ECL显色液为Santa Cruz公司产品。
细胞培养及药物处理
人APL细胞株NB4细胞(浙江大学肿瘤研究所惠赠)及人髓细胞白血病细胞株HL-60细胞培养于含10%胎牛血清的RPMI 1640细胞培养液中,置37℃、5% CO2培养箱中培养,2-3天传代1次。实验时取对数生长期的细胞,调整细胞密度为7×104/ml,以不同浓度ATRA和bestatin单独或联合处理,于不同时间收集细胞进行实验。
细胞形态学观察
取空白对照组及药物处理各组细胞悬液,离心,制备涂片,瑞氏-姬姆萨染色,用光学显微镜(Leica,40×10)观察细胞形态。
四氮唑蓝(nitroblue-tetrazolium,NBT)还原实验
按文献[3]报道的方法进行。空白对照组及药物处理各组细胞与NBT共孵育后,制备涂片,瑞氏-姬姆萨染色,光学显微镜下(100×10)观察,胞浆内含有蓝黑色颗粒者为阳性细胞,随机计数200个细胞,计算阳性细胞百分率。
细胞表面分化抗原CD11b和CD13的检测
取对数生长期HL-60细胞和NB4细胞或药物处理后各组NB4细胞离心,用PBS(pH 7.4)洗涤,调整细胞数为2×105/50 μl,加CD13-PE标记单克隆抗体8 μl或CD11b-FITC标记单克隆抗体5 μl,避光孵育30分钟,用PBS洗涤,上流式细胞仪检测。以Cellquest 1.2软件进行分析。
细胞总RNA提取和RT-PCR反应
总RNA提取 用TRIzoL一步法抽提细胞总RNA,按试剂说明书操作。甲醛变性凝胶电泳证实为完整RNA,紫外分光光度仪定量,A260 nm/280 nm比值均在1.8-2.0之间。
逆转录反应
样品总RNA 4 μg及随机引物0.5 μg,70℃ 5分钟,立即冰浴,离心。依次加5×逆转录酶缓冲液5 μl、10 mmol/L dNTP 1.25 μl、M-MLV 200 U,RNase抑制剂0.6 μl,DEPC水补至反应体积为25 μl,于27℃10分钟,37℃ 60分钟,72℃ 10分钟灭活逆转录酶,冰浴1分钟,结束反应。
PCR反应
PCR引物为上海Sangon公司合成。引物序列、反应条件及产物大小见表1。反应体系包括逆转录产物2 μl、10×PCR缓冲液2.5 μl、25 mmol/L MgCl2 1.5 μl、10 mmol/L dNTP 0.5 μl、25 μmol/L(c-myc与c-EBPε)或2.5 μmol/L(β-actin)上游及下游引物各0.5 μl、Taq DNA聚合酶1U,用灭菌去离子水补至终体积为25 μl。预实验确定产物与循环之间呈线性关系范围。取5 μl反应产物在15 g/L琼脂糖凝胶(含0.5 μg/ml溴化乙锭)电泳,电场强度5 V/cm,紫外灯下观察电泳结果,用凝胶成像系统(BIO-RAD公司)扫描分析条带灰度,以目的基因与β-actin的灰度比做半定量分析。Table 1. Sequences of primers,condition of PCR and sizes of PCR products(略)
Western blot
收集药物处理各组细胞(细胞数为2×106/ml),预冷的PBS漂洗2次,重悬于100 μl Lammiulis上样缓冲液(0.125 mmol/L Tris-HCl,pH 6.8,4%SDS,5%甘油)中,超声波裂解,于4℃离心13 000×g)15分钟,收集上清,蛋白样品保存于-80℃。按蛋白定量试剂盒(Bio-Rad公司)操作说明书进行蛋白定量,在10%聚丙烯酰胺凝胶电泳、转膜,转移后的硝酸纤维素膜以5%脱脂奶粉封闭1小时,分别与抗人c-Myc和抗人β-actin抗体及辣根过氧化酶标记的二抗孵育。ECL显色,显影于胶片。图像分析处理系统(Image Station 2000R)扫描,测定条带的面积和灰度,以二者之乘积进行半定量比较分析。
统计学分析处理
各项实验重复3次以上,以X±D表示,多组间比较F检验后采用方差分析及Tukey检验。相关分析采用Pearson相关。应用SPSS 10.0统计软件进行统计分析。
结果
NB4细胞表面有CD13的表达
NB4细胞CD13阳性表达率为94.79%(平均荧光强度为1739.59),对照组HL-60细胞CD13阳性表达率为95.49%(平均荧光强度为3107.49)。两者的CD13平均荧光强度有一定的差异,但阳性百分率差异不明显。
Bestatin与ATRA联合处理后NB4细胞形态改变明显
100 μg/ml bestatin单独作用72小时后,NB4细胞形态无明显改变。10 nmol/L ATRA单独作用72小时后,NB4细胞呈现部分分化的形态,细胞核/浆比例减小,核变小有凹陷。100 μg/ml bestatin与10 nmol/L ATRA联合处理72小时后,NB4细胞形态分化更加明显,细胞浆内空泡增多,核凹陷、扭曲更加明显,形态似晚幼粒及杆状核粒细胞的细胞增多(图1)。
Bestatin与ATRA联合应用后NB4细胞NBT还原能力明显增加
以一定浓度(50、75和100 μg/ml)bestatin单独处理72小时后,NB4细胞的NBT还原能力无明显改变(与空白对照组相比较,P>0.05);不同浓度(10、20和40 nmol/L)ATRA作用72小时后,NB4细胞的NBT还原能力呈浓度依赖性增加,与空白对照组相比,差异明显。100 μg/ml bestatin与不同浓度ATRA联合处理72小时后,NB4细胞的NBT阳性率明显地提高,与单用相应浓度ATRA组相比,差异显著(表2)。Table 2. Effect of bestatin on the NBT reduction activity of NB4 cells induced by ATRA. (略)
100 μg/ml bestatin单独处理细胞不同时间(48小时-96小时),NB4细胞的NBT还原能力改变不明显(与相应时间点空白对照组相比,P>0.05);10 nmol/L ATRA处理细胞至72小时,开始出现NB4细胞NBT还原能力的增强,并呈时间依赖性,与相应时间点对照组相比,有明显差异;而10 nmol/L ATRA与100 μg/ml bestatin联合处理48小时,就出现NB4细胞NBT还原能力的明显增强,且此作用随时间延长而明显增强,与相应时间点单用10 nmol/L ATRA组相比,差异显著(图2)。
Bestatin与ATRA联合处理后NB4细胞CD11b表达明显增强
100 μg/ml bestatin单独处理72小时后,NB4细胞CD11b阳性表达率(MFI为13.4±0.6)稍有增加,但与对照组(MFI为12.3±0.9)相比,差异不显著(P>0.05)。10 nmol/L ATRA单独处理72小时之后,NB4细胞CD11b阳性表达率(MFI为19.2±4.2)明显提高,与对照组相比,差异显著(P
Bestatin和ATRA单独及联合处理后NB4细胞c-EBPε mRNA表达的变化
NB4细胞低表达c-EBPε mRNA。10 nmol/L ATRA处理12小时之后,NB4细胞c-EBPε mRNA表达水平明显提高,与对照组相比较,差异显著(P
Bestatin和ATRA单独及联合处理后NB4细胞c-myc表达的变化
NB4细胞c-myc mRNA呈高水平表达。10 nmol/L ATRA单独处理4小时后,NB4细胞c-myc mRNA表达下降,与空白对照组相比较,差异明显(P
Figure 4. Effect of bestatin and ATRA on the expression of c-myc mRNA of NB4 cells after treatment for 4 hours. M: marker; Lane 1: control. Lane 2: bestatin (100 μg/ml). Lane 3: ATRA (10 nmol/L). Lane 4: bestatin (100 μg/ml) +ATRA (10 nmol/L).
NB4细胞c-Myc蛋白呈高表达。10 nmol/L ATRA单独处理8小时后,NB4细胞c-Myc蛋白表达水平明显下降(P
讨 论
ATRA对APL的有效治疗是白血病诱导分化治疗的成功典范。但单用ATRA治疗易复发及产生耐药,与其他化疗药物联用时疗效有一定的提高,但毒副反应增加。因此,寻找能够增强ATRA诱导分化作用而毒副反应轻的药物,成为临床治疗中的关注问题之一[7,8]。最近,Hirano等[7]根据NBT还原实验结果提出,bestatin可能增强ATRA对NB4细胞的诱导分化作用,但未做进一步的研究。本研究通过对细胞形态、功能和表面分化抗原等多层次的检测及分析对比,表明一定浓度范围的bestatin本身不能诱导NB4细胞分化,但确能增强ATRA对NB4细胞的诱导分化作用。
Hirano等[7]认为,bestatin增强ATRA诱导分化作用可能与其抑制细胞表面CD13活性有关。本研究结果显示,与HL-60细胞相似,NB4细胞表面CD13阳性表达率高达94.79%,该药是否通过抑制CD13表达从而增强ATRA诱导NB4细胞分化的作用,尚待进一步研究证实。髓系祖细胞定向分化受转录因子活性的调节。ATRA调节与髓细胞定向分化有关转录因子的表达诱导APL细胞向中性粒细胞分化。氨基肽酶N/CD13为Ⅱ型跨膜蛋白,胞内端只有8-10个氨基酸,但最近研究报道,CD13分子能够直接参与细胞内信号转导的过程[9]。因此,本研究从药物对转录因子影响的角度对氨肽酶、抑制剂bestatin增强ATRA诱导分化作用的可能机制进行了初步探索。c-EBPε为C-EBP家族转录因子之一,ATRA诱导NB4细胞向中性粒细胞方向分化时,药物作用2小时,c-EBPε mRNA表达水平即开始增高,并持续增高至细胞终末分化[10]。而酪氨酸激酶抑制剂STI571增强ATRA诱导NB4细胞向中性粒细胞分化时,c-EBPε基因及蛋白的表达水平均未进一步增高[8]。本研究结果显示,10 nmol/L ATRA处理12小时后,NB4细胞c-EBPε mRNA表达水平明显上升,而100 μg/ml bestatin与ATRA联合处理NB4细胞时,c-EBPε mRNA表达却未进一步增强。这提示bestatin可能与STI571相似,其增强ATRA对NB4细胞的诱导分化作用可能不是通过调节c-EBPε表达。
原癌基因c-myc表达异常与髓细胞性白血病的发生有关,抑制c-myc表达可以促使白血病细胞分化及诱导细胞终末分化后的凋亡。本研究结果显示,10 nmol/L ATRA单独作用能够使NB4细胞c-myc的表达下调,这与文献报道相似[11]。同时,bestatin与ATRA联合应用时c-myc表达水平的下调作用较单用ATRA时更加明显,且药物联合应用各组细胞的c-myc蛋白表达水平与药物诱导的NBT还原能力之间呈明显的负相关。这提示bestatin可能通过与ATRA协同下调c-myc表达,从而增强ATRA诱导NB4细胞分化的作用。1,25-(OH)2 D3在诱导HL-60细胞分化时,激活蛋白激酶C,引起c-myc表达下调[12]。bestatin是否也通过激活蛋白激酶C增强ATRA下调c-myc的表达,这有待进一步研究证实。
【参考文献】
1Murata M,Kubota Y,Tanaka T,et al. Effect of ubenimex on the proliferation and differentiation of U937 human histiocytic lymphoma cells. Leukemia,1994; 8: 2188-2193
2林茂芳,何静松,蔡真等. 氨肽酶抑制剂Bestatin 通过激活半胱天冬酶3诱导HL-60细胞凋亡. 中华血液学杂志,2001; 22: 348-350
3韩锐. 抗癌药物研究与实验技术. 北京: 北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社,1997: 329-330
4Zhuang WJ,Fong CC,Cao J,et al. Involvement of NF-kappaB and c-myc signaling pathways in the apoptosis of HL-60 cells induced by alkaloids of Tripterygium hypoglaucum (levl.) Hutch. Phytomedicine,2004; 11: 295-302
5谭映霞,章圣辉,尹丽慧等. 三氧化二砷和全反式维甲酸联合用药诱导NB4细胞C/EBPε mRNA和CD11b表达的初步研究. 临床血液学杂志,2004; 17: 108-110
6林茂芳,俞静,严力行. 可溶性抗CD47单抗对人树突细胞分化与功能的影响. 中华血液学杂志,2004; 25: 709-712
7Hirano T,Kizaki M,Kato K,et al. Enhancement of sensitivity by bestatin of acute promyelocytic leukemia NB4 cells to all-trans retinoic acid. Leuk Res,2002; 26:1097-1103
8Gianni M,Kalac Y,Ponzanelli I,et al. Tyrosine kinase inhibitor STI571 potentiates the pharmacologic activity of retinoic acid in acute promyelocytic leukemia cells: effects on the degradation of RAR alpha and PML-RAR alpha. Blood,2001; 97: 3234-3243
9Santos AN,Langner J,Herrmann M,et al. Aminopeptidase N/CD13 is directly linked to signal transduction pathways in monocytes. Cell Immunol,2000; 201: 22-32
10Morosetti R,Park DJ,Chumakov AM,et al. A novel,myeloid transcription factor,C/EBP epsilon,is upregulated during granulocytic,but not monocytic,differentiation. Blood,1997; 90: 2591-2600
中图分类号:R969.3 文献标识码:B 文章编号:1005-0515(2011)4-242-02
胰岛素是治疗糖尿病的主要药物之一,正确应用胰岛素对糖尿病病人病情治疗的转归非常关键,护理人员应指导患者正规使用胰岛素。现将使用胰岛素的注意事项介绍如下:
1 胰岛素的贮存
1.1 未开始使用的胰岛素应放在2℃-8℃冰箱冷藏,可保存2年半。
1.2 已开始使用的可在室温≤25℃最长保存4周。诺和锐可在30℃保存4周。建议胰岛素开始使用后放在清洁,干燥2℃-8℃的冰箱避光保存。
1.3. 胰岛素开启使用至4周不能使用。
2 胰岛素注射注意事项
2.1 抽吸胰岛素应先抽吸短效,再抽长效,然后轻轻摇匀,不可反向操作。
2.2 注射时应接近室温,以免过低温度造成注射时的不适感。
2.3 用酒精消毒注射部位,应等完全挥发后注射,否则会引起注射部位疼痛。
2.4 应用正确方法注射,用左拇指和示指捏起皮肤,右手持注射器与皮肤45°~60°角方向,迅速刺入,抽无回血后注射。
2.5 使用胰岛素笔完成注射时,应等待15秒后再将针头拔出,以免漏液。
2.6 注射完成后应立即将针头从注射笔上取下,以免空气进入药液造成细菌进入笔芯污染药物。
2.7 注射完胰岛素的部位应避免激烈运动,防止胰岛素过快吸收至低血糖。
2.8 针头每次更换,以减轻疼痛,防止折断。避免皮下组织增生,硬块形成。
2.9 每次注射时,应先评估注射部位,如果感觉有肿块或表皮凹陷,应避免注射。
2.10 注射完毕,用棉签轻压穿刺点,切勿按摩局部。
3 胰岛素的不良反应及处理
3.1 低血糖反应:(1)原因:注射后未及时进食或进食量不足;注射剂量过大;运动不规则。(2)症状:心慌,颤抖,出汗,饥饿,心率加快等。(3)处理:立即测血糖;补充碳水化合物:5-6块硬糖,2汤勺蜜糖,1/3杯果汁,一片面包,一杯脱脂奶或其它含糖小食品;尽量避免低血糖发生。
3.2 胰岛素过敏:局部表现为注射后半小时~1小时,出现局部肿胀,发热发痒,硬结甚至水疱,一般24小时消退。处理:应用安尔典局部消毒,严禁热敷。
全身过敏反应:多见于使用动物胰岛素。处理:更换纯度高制剂。
3.3 注射部位皮下脂肪萎缩或纤维组织增生:由于胰岛素长期刺激皮下脂肪增生肥大或萎缩引起,影响胰岛素的正常吸收和疗效发挥。处理:注射部位轮换,同一部位2周内不得注射2次,每个注射点相隔至少2厘米。注射后局部运动可促进吸收。
设备使用注意事项:1、烤箱使用完要及时清洁,以免设备产生异味,可以使用专用清洁剂操作,可以延长使用寿命。
2、烤箱工作时不要移动它,不要徒手拿出食物,以免烫伤,烤箱需要放置在平整的桌面上使用,以免影响设备使用体验。
3、烤箱无法使用,可能是没有通电,可以检查电源连接状态;可能是设备硬件故障,建议断电后请专业人员维修。
4、烤箱有不同的功率,可以根据使用需求选购。
【摘要】:通过对医院血液化验前的提取准备工作,化验过程中的注意事项以及化验完成后的化验单管理进行探讨,提出一些有效的办法,希望能帮助血液化验工作者解决一些问题。
【关键词】:血液 化验 问题 探讨
1 前言
一些病人在诊断病情时往往要进行血液化验。人体的各个部位都充满着血液,血液流通与人体组织的各个器官,可以说,没有血液的循环,人的生命将停止。一些血液细胞的增殖或变异使得血液的循环不在正常,人体的某个器官会出现这样那样的症状。因此血液不仅反映人体系统本身的生理、病理变化,更能反映全身有关脏器的病理改变。随着医学技术的进步与发展,病人通过对自身血液化验,不仅可以有效的诊断出血液是否正常,并且还可帮助诊断其他器官的一些疾病。血液化验的范围包括血细胞数量的检验和形态观察、贫血化验、出血性疾病化验、血型及配血试验等。我国的医学化验工作目前取得很大进步,血液检验逐步实现了自动化,各种检验仪器与电脑设备逐步替代了传统的化验手段。通过对医院血液化验前的提取准备工作,化验过程中的注意事项以及化验完成后的化验单管理进行探讨,提出一些有效的办法,希望对医学化验工作者有所帮助。
2 血液样本提取时注意的事项
血液化验工作的前提是保证血样标本的质量。因此,在进行血样采集前,应让血样检验者做好准备工作,要注意采血前空腹,穿宽松的衣服以避免采血后血管膨胀,采血前避免做剧烈的运动等。医护人员要选择恰当的采血部位,一般在取样时都选取静脉血,对于新生儿或烧伤患者可采取末梢毛细血管采取血样。血样采集完后加入的抗凝剂要严格科学的控制比例,降低环境因素对血样质量的影响。血样存储的时间不能太长,要注意采取科学的储存措施。对于一些疾病患者,在采样时要采取保护措施,防止病毒的传播等。
3 化验过程中注意事项
为了节省化验时间,提高化验的效率,我国大部分医院已经普及使用了血细胞分析仪,新仪器的使用固然大大提高了工作效率,但也会产生一些新的问题,下面将对新问题进行探讨并提出解决方案。
3.1 保持化验室环境卫生
血液化验工作要求十分严格,细菌等杂质的渗入将严重影响化验结果。因此化验室应始终保持整洁卫生;为了保证血样不变质,还要保持充足的照明和恒定的室温;各项检验区应划分明确,并且应标有明确的标识,以区分各区的功能和化验项目;水浴箱应保持恒定的实际温度,同时还必须满足血液化验所需的反应温度;试剂储存冰箱、血液标本储存冰箱的温度计应为校准合格的记录计,每天上午应检查和记录冰箱的温度各一次;化验用水必须使用符合标准要求的蒸馏水。
3.2 选择符合规定的血液化验试剂
进行血液化验时所使用的试剂,必须符合相关规定的要求,还必须经中国药品生物制品检定所检定合格,贴有防伪标签,按照正确的方式运输和贮存,经本单位质量管理科检验合格,并在有效期之内。从冰箱取出的检验试剂,必须放在室温(25摄氏度)下充分平衡之后才能使用。不同试剂不能混用,同种试剂不同批号不能混用。酶联免疫试剂的酶标板框架要规整,微孔条要平整,微孔内不能有塑料屑、泡沫渣、干燥剂颗粒等固型异物。
3.3 对血细胞分析仪校准
血细胞分析仪的检测结果是否准确对疾病的诊断和治疗监测有直接的影响。在仪器精密度良好的前提下,仪器校准是保证检测结果准确的关键步骤,所以,进行血液化验所使用的每台仪器,均必须经过校准后才能投入使用。若经校准后发现达不到使用要求,则需请维修人员及时检修并再次校准,待校准结果满足使用要求后方可投入使用。一般在下列几种情况下需对仪器进行校准:血细胞分析仪投入临床使用前;更换部件或进行维修后;室内质量控制系统的检测结果又漂移时;规定要求每6个月至少进行一次校准。
3.4 加强工作人员培训工作
在使用血细胞分析仪进行血液化验时,操作人员必须经过规范地培训,并且要了解仪器的工作原理;了解直方图或二维散点图的原理和特点;了解异常警报的含义,并能做出相应处理;了解仪器的检测系统和溯源性,掌握校准的方法;了解仪器的保养要求;熟悉使用中的注意事项并能排除小故障。
3.5 认真检查化验标本
在血液样本进行化验前,要经过认真的逐一检查,一旦发现不合格的样本,包括溶血、凝血等,不能送至化验室化验。要及时通知被检验人,重新对其按上述过程采取血样标本,经检查合格后才可继续化验,这样可以保证化验结果的准确性。
4 血液化验单的管理
4.1 化验单的保管
检验科做好血液检验工作后,要及时把化验报告单送至门诊咨询台,门诊咨询台护士负责保管与发放。由于化验结果多种多样,日期也参差不齐,因此管理人员可按照一定的管理方法进行管理,制作简易的专用的化验单保管夹子,对化验的报告单按时间顺序依次整理保管,便于查询;另外,还可根据诊断病情的相似性进行分类管理,这将大大节约血液化验单的查找时间,提高工作效率。
4.2 化验单的发放
由于化验单关系病人的隐私以及症状,发放错误很容易产生纠纷,因此在发放化验单时,病人须出示原始病历,值班医护人员要进行认真的核对,一些原始化验单的发放更为严格谨慎。发放完成后要做标记。
4.3 化验单整理
对没有领取的化验单护士要进行定期的整理,一般三个月整理一次。整理时要做好分类工作,按照时间顺利收藏好。
加强医院化验单的管理工作,对化验工作的完成起着很重要的作用。化验单的科学管理既保证了血标本的正确采集和按时送检,根据诊断病情的相似性进行分类管理,这将大大节约血液化验单的查找时间,提高工作效率。对一些特殊病例的化验保护措施,可减少不必要的交叉感染。
5 结语
总之,医院的化验工作对病情的调查起着至关重要的作用,医院的化验工作着要担负起自己肩负的责任,做好医院血液的化验工作,辅助其他医学工作者正确判断病人的症状,对病人的正确科学治疗将起到很大的作用,最终可以提高医院的信誉与效益。
参考文献
[1] 王瑞丽,阮林海.医学检验质量控制的思路与体会[J].中国医学创新,2009,6(26).
[2] 屈爱春,赵俊娟.加强医学检验与临床沟通的意义[J].现代中西医结合,2009,18(1).
[3] 蔡军.加强医学检验与临床沟通,提高医疗质量[J].检验医学杂志,2008,29(1).
(1)不规范的操作:①无菌操作意识不强,接种人员操作中不戴口罩。②接种部位消毒不规范:消毒范围小,扫把式的消毒,消毒区用手触及,容易引起医源性注射感染,发生不良后果,引发接种纠纷。③接种部位不正确和接种途径不妥:每种疫苗的接种部位和途径均有严格的要求,实施接种的护理人员,一般不得任意改变接种部位和接种途径,否则易引发接种不良反应和接种事故,如皮下注射接近肘关节处会使局部红肿反应加剧,注射部位过高,接近三角肌上方,或过于接近上臂内侧,常可引起腋下淋巴结肿胀,乙肝疫苗注射于臀部,影响药物的吸收,皮下注射于右三角肌,会引起1周内疼痛。④疫苗剂量过大:可能引起机体发生较强烈的局部反应和全身反应,甚至造成接种事故,如2人份的麻疹疫苗当1人份来注射;或选用不恰当的注射器抽取多人的疫苗,造成疫苗剂量不准确。⑤用错疫苗:错误地将一种疫苗视为另一种疫苗而使用,以致造成严重后果。⑥疫苗使用前未充分摇匀:如含有吸附的百白破疫苗在使用前未充分摇匀,可能引起接种反应或加重反应。⑦对使用中的疫苗管理不当:未用完的疫苗存放超过规定的时间,暴露在空气中容易被细菌污染,接种这种疫苗将会造成严重后果。⑧接种后未进行正确的指导:如服脊髓灰质炎糖丸后半小时内喂奶,致使疫苗无效;卡介苗接种后未告知家长出现脓疱是正常反应,致使家长认为消毒不严所致的化脓反应,将脓疱挑破。
(2)对接种儿童管理不到位:对接种儿童固定不当,有些儿童因害怕打针难以主动配合完成接种工作,在注射过程中乱动,针在体内移动或脱出,容易造成损伤或重注;接种后没按要求让接种对象在接种现场观察30分钟,若发生不良反应不能及时处理。
(3)冰箱的管理情况:未按要求监测冰箱温度,不能及时了解冰箱是否在正常运作,疫苗能否在规定的温度内保存;冰箱中混杂存放私人物品;违反疫苗专柜放置的原则。
(4)无菌注射器的存放情况:一次性无菌注射器与非无菌物品混放,违反无菌物品的放置原则。
(5)抢救药品管理情况:抢救药品与非抢救物品混放;抢救药品过期。
(6)对使用后的一次性注射器处理不当:手工分离使用后的注射器针头与针管,容易发生针刺伤;使用后的注射器及医疗垃圾在室内留时间过长,影响接种环境,也可能影响安全注射。
预防接种护理风险的防范措施
①严格执行消毒隔离制度:按要求严格消毒接种部位,用75%酒精由内向外螺旋式对接种部位皮肤进行消毒,涂擦直径≥5cm,待干后再接种,这样可避免消毒剂杀死活疫苗。②掌握正确的接种方法,正确合理的使用疫苗:接种人员必须明确各种疫苗的性质、接种对象、途径、部位、剂量、禁忌证及注意事项,接种前详细阅读疫苗说明书,严格遵照规定注射,以免人为因素而发生异堂反应或造成接种事故。③严格执行三查七对制度:接种前严格核对疫苗的名称,并充分摇匀,认真核对接种儿童姓名、年龄、接种单与疫苗接种证内容是否相符,接种后交代可能出现的不良反应及有关事项。④加强疫苗的管理:使用前认真检查疫苗的质量,检查外观质量。凡过期、变色、内有摇不散的凝块,标签不清、安瓶有裂缝的疫苗或冻结过的DPT、HepB,一律不得使用。对安瓶开启后未用完的疫苗盖上无菌棉球冷藏,并记录开启的时间,活疫苗超过半小时,灭活疫苗超过1小时,应将疫苗废弃。⑤做好接种儿童的管理:接种前护理人员以和蔼的语言引导儿童,减轻儿童恐惧心理和紧张情绪,以主动配合接种;对于不配合的儿童,指导家长固定儿童的正确方法,避免在注射过程中乱动,使接种顺利完成。接种后应告知家长,受种者应留在接种现场观察30分钟。如出现异常反应,及时处理和报告。⑥做好健康教育,减少医疗纠纷:耐心讲解预防接种目的和重要性,讲解预防接种的程序、注意事项以及可能发生的不良反应及处理措施,避免纠纷的发生。如注射DPT的局部红肿与发热反应的程度随着接种次数的增加而加重。个别儿童接种疫苗后,接种部位出现轻微红肿、疼痛,低热等。个别反应较重者应及时到防疫站门诊或医院就诊。⑦加强冷链设备的管理:冷链设备专物专用,专人管理,并保持清洁,每日监测冷链温度2次,每季对冰箱进行1次全面保养,每年对冰箱的性能进行1次全面检验和测试,建立冷链设备维修档案和维修记录。⑧规范抢救药品和无菌注射器的管理:抢救药品做到专柜放置,药物针剂盒内外要一致,药品标签要保持清楚,并实行专人管理,每月质控,使抢救药品在有效期内,以防偶有过敏反应发生时使用。无菌注射器存放在清洁干燥,距地20cm的柜里,专柜放置,并按日期先后顺序排列,采用先领先用的原则,确保无菌注射器在有效期内使用,保证安全接种。⑨严格执行无菌操作,做好安全注射:预防接种应在清洁、通风、宽敞的环境进行,疫苗接种室应安装空气消毒机,每天消毒2次,每次1小时,不定期进行接种环境的消毒效果监测。实行垃圾的分类管理,生活垃圾存放于黑色胶袋中,医疗垃圾存放于有标识的黄色胶袋中,使用后的锐利针头、安瓶放在利器盒内。不应手工分离使用后的注射器针头和针管,避免被针头误伤,每天把医疗垃圾和利器盒回收,严格按照《医疗废物处理条例》的规定处理。
讨 论
冰箱档位7档比1档凉。冰箱的七个档位之中,档位的数字越大,它对应的温度就越低,反之则越高,而且这个数字指的并不是具体的温度,而是一个温度范围。之所以会有这个温度档位的存在,是因为冰箱的温度要根据季节变化来调节,实质上是冰箱的工作时长与耗电程度受环境温度影响,所以需要根据环境的温度来调节不同档位。
一般来说,夏季冰箱的档位要调到2-3这个档位之间,而冬季则调整到5-7这个档位之间,至于春秋这两个季节,保持在中档位即可。这样做的目的在于尽可能的减小空调内部温度与环境温度之间的温度差,这样冰箱能更节省耗电,也不易损坏冰箱压缩机,可以很好的延长使用寿命。
另外,冰箱的使用还有着许多注意事项,如:
1、不要与热源摆放过近,影响冰箱散热的发挥;
2、其次最好不要长时间断电停用冰箱,这会损坏冰箱内部管路;
2、悬挂保存:这是很古老的一种保存方法,小时候没有冰箱;将腌好的咸肉用稻草或塑料绳穿起来,然后悬挂于通风的阳台上,能够保存一个冬天。此种方法的缺点:时间久了,咸肉的水分会大大减少,随着温度的变高,最好改为其它方式。
3、多抹盐保存:将咸肉多抹些盐,然后放于陶瓷的碗里,压紧压实,寒冷的冬季直接放于阴冷之处,天气稍热时,放于冰箱的冷藏室,能保存几个月。此种方法的缺点是:肉会变得特别咸,在吃前需提前浸泡,去除一些咸味。
4、用密封坛保存:市场上有一种专门腌制咸菜的坛子,可以买来,在底部放置一些白酒,然后放上筷子或木棒,将咸肉架于上面,再盖上盖子,在盖子周围倒些水,坛里食物便被密封,能够保存很久了。此种方法同样适合于腌制的萝卜干。注意事项:要保证水份不能干,否则空气进入坛内,肉就容易坏了,在春季转暖时,一定要将咸肉移至于冰箱内。
5、压干水份后再保存:咸肉保存时,水分要尽量地少,在腌制咸肉时,就得想办法将水分压出来,可用又大又重的石头,压在上面;腌制几天后,再拿出来晾晒一下,这样水分会变得非常少,这样再采用一些保存方法,通常能保存很久了。