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【中图分类号】R122.1+2【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009)12-0066-01
长期以来,尿液有形成分检验是否离心,文献报道不一[1]~[6]。丛玉隆等认为尿液离心检查法不适合红细胞等有形成分定量[5],马俊龙等研究发现离心镜检法与不离心镜检比较,红细胞检测结果仅是不离心镜检法的一半[7]。但上述研究都是在尿液红细胞中高浓度(≥100/μl)以上时得出的。本文使用离心和不离心两种方法对低浓度红细胞(≤100/μl)尿液进行红细胞镜检计数,结果报告如下。
1材料与方法
1.1材料①标本来源:本院门诊病人正常尿液;正常人全血。②仪器器材:Olympus显微镜(日本);LDZ5-2低速自动平衡离心机(北京医用离心机厂);FAST-READ10一次性尿沉渣计数板(意大利)。
1.2方法
1.2.1不同浓度红细胞成分的尿液标本的制备选择EDTA-K2抗凝的新鲜正常的全血样本1份,用血细胞分析仪(使用校准品校准)测量红细胞数值,使用正常人混合尿液(收集多人尿液,用高速离心方法去除细胞等有形成分,留取上清夜)将红细胞含量配制成10/μl、25/μl、50 /μl、100/μl四个浓度。配制好的含红细胞的尿液标本分别由三位熟练检验人员用离心镜检法和不离心镜检法计数红细胞数量。
1.2.2离心镜检法按全国临床检验操作规程方法[8]进行,取混匀的尿液标本10ml于一次性尿沉渣专用离心管内,以1500r/min,离心5分钟,吸掉上清夜,留取管底0.2ml沉渣,充分混匀后用一次性塑料吸管滴入FAST-READ10一次性尿沉渣计数板的计数池内,稍待片刻,首先用低倍镜观察细胞分布情况,再用高倍镜计数全池9个大方格内的红细胞数。红细胞含量(细胞数/μl) =(9个大方格的红细胞数/9)×10÷50。
1.2.3不离心镜检法将配制好的红细胞尿液充分混匀,用一次性塑料吸管吸取滴入FAST-READ10一次性尿沉渣计数板的计数池内,稍待片刻,首先用低倍镜观察细胞分布情况,再用高倍镜计数全池9个大方格内的红细胞数。红细胞含量(细胞数/μl) =(9个大方格的红细胞数/9)×10
以上两种方法,每管都重复充液计数6次,取平均值。所有检测均在样本配制后2h内完成。
1.3统计学方法用配对t检验。
2结果
不离心镜检计数与理论定值比较接近,平均偏差-5.82%;但离心法镜检计数结果是理论定值的一半左右,平均偏差达-46.15%。见表1。两法相比,t=2.52,P
3讨论
尿沉渣的显微镜检查是识别尿有形成分的“金标准”,主要有离心镜检法和不离心镜检法两种,我国多建议采用离心法[9]。在实际工作中,当尿液红细胞较多时,离心沉淀反而不利镜检计数,尿沉渣检验实际无需离心,这已为检验人员所公认[4,6,7]。况且,许多研究显示,在尿红细胞中高浓度时,离心法结果与真实结果存在明显的差异,离心法结果明显低于不离心法,不离心直接计数与真实值更加接近[5,7 ,0]。离心的目的是浓缩有形成分,防止漏检,在尿有形成分浓度较低时,比如在正常参考值的上限9/μl[11]以上,到100/μl这个浓度范围内,将尿液离心,浓缩有形成分后再镜检计数似乎理所当然,但本研究显示即使在低浓度下离心法的计数结果仍然明显低于真实值,而不离心法与真实值较为接近,与丛玉隆等[5]在高浓度下的研究结果一致。
离心使红细胞计数偏低的原因主要可能有以下几个方面:①离心后红细胞沉淀不完全,上清夜还有红细胞;②离心过程中部分红细胞受到破坏;③离心管管壁有细胞的粘附;④计算时除于50这个浓缩倍数,放大了上述效应。本研究方法参考丛玉隆等的研究方法是在没有干扰物的情况下进行的,在实际工作中是否适用,马俊龙等通过研究已经得到了肯定,认为采用新鲜尿液直接计数(扩大计数范围)是尿液有形成分计数的理想方法,而离心镜检法不适合有形成分定量分析[7]。综上所述,可以认为,不离心法尿液直接镜检计数红细胞(扩大计数范围)在决定性水平上(高于参考值上限的低浓度)比离心镜检法更为敏感,更为准确,检出率更高;且该法操作简便,结果快速,无须昂贵仪器,值得基层医院推广。至于数到多少细胞的数量接近泊松分析能够达到准确定量计数的标准,尚需探讨。
参考文献
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[5]丛玉隆,马骏龙,张时民,等.尿液细胞成分定量分析方法学研究[J].中华医学检验杂志,2006,29(3):211-214.
[6]吴润香,何英,刘玢.离心对尿沉渣镜检细胞计数结果的影响[J].广东医学,2006,27(4):573-574.
[7]马骏龙,陆玉静,黎晓晖,等.尿液红、白细胞定量不同方法学探讨[J].临床检验杂志,2006,24(5):348-350.
[8]中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程[M].第3版.南京:东南大学出版社,2006:293-294.
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【关键词】 黄芪多糖;力竭游泳;红细胞数;血红蛋白
文章编号:1004-7484(2013)-12-7071-02
疲劳是一种常见的有损于身体健康的生命现象,可独立引发临床疾病及慢性疲劳综合症等,因此已成为国内外关注的病症和研究的热点。多种中药具有抗疲劳及耐缺氧作用,现代药理学研究表明传统补益中药黄芪具有增强机体免疫功能、耐缺氧及应激能力,促进机体代谢,强心,降低血压,保护肝脏,调节血糖等药理作用[1-4]。其中有效成分即是黄芪多糖。因此,应用现代科学技术探讨黄芪作用机制,可使其更好地为人类服务。黄芪多糖是否具有增强机体运动负荷能力、抵抗疲劳产生的作用目前尚不明确。本研究即探讨黄芪多糖对小鼠的抗疲劳作用,测定小鼠血红细胞数及红蛋白含量的变化。
1 资料与方法
1.1 材料
1.1.1 主要试剂和仪器 黄芪多糖(纯度70%,批号:20130310,长沙骏宏生物科技有限公司);血红蛋白试剂盒(南京建成生物研究所);Morris水迷宫(西班牙Panlap公司生产,产自上海光谱仪器有限公司);722型分光光度计(上海光谱仪器有限公司);红细胞计数板;光学显微镜;电子恒温不锈钢水浴锅(上海市南阳仪器有限公司);压力蒸汽灭菌器(上海博迅实业有限公司医疗设备厂);101-1AB型电热鼓风干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司);单道手动可调移液器(苏州百得实验室仪器有限公司);JB760-68比色皿(江苏新力科技实业有限公司)。
1.1.2 动物 40只SPF级昆明小鼠,雄性,体重(22±2)g,由湖南斯莱克景达实验动物有限公司提供,批号43004700000750,长沙医学院湖南省重点建设学科标准动物室饲养。
1.2 方法
1.2.1 动物给药及游泳力竭实验 40只SPF级昆明小鼠分两次实验,每次取小鼠20只,随机分为4个组,即对照空白组、黄芪多糖高、中、低剂量组,每组各为5只。空白组小鼠灌胃给予5ml/kg蒸馏水,黄芪多糖高、中、低剂量组小鼠分别灌胃给予0.2,0.05,0.0125g/kg黄芪多糖。每天一次,连灌28天,第28天给药后3h,在小鼠尾部缚大约为体重5%的铁丝,然后放入水深50cm、直径为50cm的Morris水迷宫内,水温维持在(35±1)℃,直至游泳力竭,力竭的时间根据从游泳实验开始直至沉入箱底后10s不浮出水面进行计算。第29天,无负重游泳30min,捞出小鼠擦干,30min后,摘眼球(并挤压心脏区域)取血,放入EP管中。测定运动后小鼠血中红细胞数和血红蛋白的含量。
1.2.2 红细胞计数 迅速吸取全血10ul,0.95g/100ml生理盐水稀释10000倍至100ml,取1至2滴在于盖好干燥盖玻片的红细胞计数板一端,在光学显微镜下记录红细胞数目,再根据以下公式计算红细胞总数。
红细胞数/mm3=4个大方格总数/4×100×稀释倍数
1.2.3 血红蛋白测定 迅速吸取全血10ul,蒸馏水稀释1000倍,按照试剂盒说明进行处置,于510nm光径下测定各管OD值。
血红蛋白(mg/ml)=126.03×(测定OD值-空白OD值)+3.5041。
1.3 统计学方法 采用SPSS19软件进行数据分析处理,数据以χ±s表示。多组间比较采用单因素方差分析,组间两两比较方法采用LSD法,P
2 结 果
2.1 游泳力竭实验 由表1可知,低剂量组与高剂量组小鼠的游泳力竭时间较对照空白组小鼠的游泳力竭时间明显延长(P
2.2 黄芪多糖对小鼠红细胞数的影响 由表1可知,实验组小鼠的红细胞数量均数较对照空白组小鼠的红细胞数量有增多趋势,但无统计学意义。
2.3 黄芪多糖对血红蛋白量的影响 由表1可知,中剂量组与高剂量小鼠的血红蛋白含量较对照空白组小鼠的血红蛋白含量有明显升高趋势(P
3 讨 论
疲劳的最直接和最客观的表现是运动耐力的下降,而力竭游泳时间是反映运动耐力的重要指标[5]。实验结果表明,黄芪多糖可以延长大鼠负重游泳至力竭的时间,其中以低剂量组和高剂量组最为明显,与对照组比较有差异。实验证明,黄芪多糖可以提高小鼠的运动持久力。
用黄芪提取的有效成分黄芪多糖(≥70%),按不同剂量给小鼠连续灌胃4周,测量小鼠血红蛋白的含量和红细胞数目。结果表明,灌胃黄芪多糖可增加小白鼠血红蛋白的含量和红细胞数目,血红蛋白的含量有明显升高的趋势,以中剂量组最为明显,因而能显著增加小鼠每次呼吸对氧的利用程度[6]。由于黄芪多糖能增加Hb含量和红细胞数目,而血红蛋白是运输O2和CO2的主要分子,血红蛋白含量增高既有利于在剧烈运动中向肌组织提供更多的氧,加强有氧代谢供能,乳酸产生减少,同时加速乳酸的清除,还能及时将肌组织中产生的CO2转运到肺排出,避免由于pH下降造成的肌肉疲劳。这对延缓运动性疲劳的发生和加速疲劳的消除有积极作用[7]。
有关疲劳的研究已经不断深入,黄芪抗疲劳作用的机制也将被全面揭示,在临床应用等各领域也将有广阔的发展前景。
参考文献
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[5] 何来英,严卫星,楼密密,等.保健食品抗疲劳作用试验方法研究[J].中国食品卫生杂志,1997,9(4):1.6.
【关键词】 巨幼细胞贫血;骨髓增生异常综合征;红细胞参数;病态巨核细胞
巨幼细胞贫血(MA)是由于维生素B12和(或)叶酸缺乏, 细胞DNA合成障碍, 导致细胞发育障碍所致的骨髓三系细胞核浆发育不平衡及无效造血性贫血。骨髓增生异常综合征(MDS)是一组获得性的、造血功能严重紊乱的造血干细胞克隆性疾病。两者在实验室检查和血细胞形态学上有许多相似之处, 如均表现为不同程度贫血, 同时伴有血小板和(或)白细胞减少, 两者的骨髓粒、红、巨三系均可见病态造血等形态学改变等。为了提高对MA和MDS的诊断和鉴别诊断, 作者对辽宁省朝阳市第二医院确诊的66例MA及30例MDS的红细胞参数和骨髓病态巨核细胞计数和分类分别作了对比观察, 结果总结如下。
1 资料与方法
1. 1 一般资料 收集本院2011年1月~2012年12月收治的66例MA患者, 其中男性35例, 女性31例, 年龄14~78岁, 中位年龄58岁, 设为MA组, 选取2009年1月~2012年12月确诊的MDS患者30例, 其中男性17例, 女性13例, 年龄28~72岁, 中位年龄53岁, 设为MDS组, 全部符合MA和MDS诊断标准[1]。
1. 2 仪器和试剂 HMX全自动血细胞分析仪及其配套试剂和质控物, OLYMPUS公司双目显微镜, 瑞氏姬姆萨复合染色液, EDTA-K2抗凝真空采血管。
1. 3 方法
1. 3. 1 红细胞参数检测 EDTA—K2真空采血管静脉采血2 ml, BECKMAN COULTER HMX全自动血细胞分析仪在使用前用厂家提供的质控品进行校正, 严格按照仪器操作规程, 于2 h内对样本进行检测。
1. 3. 2 骨髓病态巨型细胞计数和分类 在用药前对患者进行骨髓穿刺, 取出骨髓液常规制作骨髓涂片(血膜面积不小于1.5×2.0 cm2), 干后经瑞氏姬姆萨复合染色液染色, 用低倍镜以“弓”字形依次来回不重复不遗漏计数全片病态巨核细胞, 并用高倍显微镜或油镜将所有病态巨核细胞按淋巴样小巨核细胞、单圆核巨核细胞、多圆核巨核细胞、多分叶巨核细胞以及其它畸形巨核细胞进行分类并进行形态学观察。
1. 4 统计学方法 应用SPSS13.0软件对数据整理和分析, 计量数据采用均数±标准差( x-±s)表示, 组间比较采用t检验, P
表2 MA与MDS病态巨核细胞检出率及其形态类型的比较
项目 MA(n=66) MDS(n=30)
病态巨核细胞[n(%)] 30(59.2%) 20(66.6%)
淋巴样小巨核细胞[n(%)] 0a 16(53.3%)
单圆核巨核细胞[n(%)] 11(16.8%)ab 17(56.3%)
多圆核巨核细胞[n(%)] 30(42.3%) 15(50%)
多分叶巨核细胞[n(%)] 31(48.5%) 12(40.0%)
其他畸形巨核细胞[n(%)] 10(15.2%) 5(16.6%)
注:a与MDS比较 P
2 结果
2. 1 MA与MDS红细胞参数比较 由表1可见, MA除MCV高于MDS, 差异有统计学意义外(P0.05)。
2. 2 MA与MDS病态巨核细胞检出率及其形态类型的比较由表2可见, MA病态巨核细胞阳性检出率低于MDS, 但差异无统计学意义。MA与MDS主要差异为淋巴样小巨核细胞(P
3 讨论
3. 1 综合MA和MDS红细胞参数检查结果, 两者除MCV有意义增高外, 其他参数比较差异均无统计学意义。因此, 在大红细胞高色素贫血的类型中, 红细胞参数具有明显的重叠性[2], 虽然MCV有一定差异, 但此差异并不具有特异性, 不能作为鉴定依据, 只有结合临床, 才具有重要参考价值。
3. 2 MA和MDS骨髓象都有异常造血的形态变化, 常会带来两者鉴别上的困难[3]。MDS骨髓可见各种类型病态巨核细胞, 但以淋巴样小巨核细胞和单圆核巨核细胞为主。 MA中淋巴样小巨核细胞未检出, 单圆核巨核细胞明显低于MDS, 这对于MA与MDS的诊断与鉴别诊断具有十分重要的意义。MA中, 病态巨核细胞主要为多圆核巨核细胞及多分叶巨核细胞, 是由于缺乏叶酸和(或)维生素B12引起细胞DNA合成障碍, 造成部分血细胞核肿大结果。淋巴样小巨核细胞与单圆核巨核细胞是MDS的主要病态巨核细胞, 这两种病态细胞的形成与巨核细胞本身不能进行胞核的复制或复制次数减少有关。单圆核巨核细胞的形态标准是:直径>20 μm, 胞体圆形或不规则形, 胞浆较丰富, 核圆或椭圆, 核膜光滑无切迹, 核染色质粗, 可见核仁。淋巴样小巨核细胞在恶性血液病中阳性率最高, 除偶见于良性血液病外, 都出现于恶性血液病, 因此, 特异性极高, 是MDS和AML病态巨核细胞的主要类型, 也是巨核细胞无效造血的主要形态学类型。淋巴样小巨核分化极差, 倍体数较低, 其形态特征主要为:大小、外观与成熟淋巴细胞相似, 核浆比大, 核圆形或凹陷, 染色质致密粗糙, 结构模糊, 无核仁或偶见1~2个模糊的小核仁, 胞浆强嗜碱, 不透明而呈云雾状, 周边不整齐或有泡状突起, 可有血小板形成现象。由于淋巴样小巨核细胞光学显微镜下查找相对较为困难, 必要时要借助小巨核酶标或流式细胞仪进行免疫表型检测, 以提高其检出率。
综上所述, MCV只能作为MA与MDS的辅助筛查指标, 淋巴样小巨核与单圆核巨核细胞的检出是MA与MDS等其他恶性血液病临床诊断与鉴别诊断的重要依据之一, 同时对判断疾病的预后也有一定的临床意义。
参考文献
[1] 张之南,沈悌.血液病诊断及疗效标准.第3版.北京:科学出版社, 2007:12.
为探讨环状红细胞(RBC)对UF-100全自动尿沉渣分析仪检测尿RBC的影响以及仪器相关参数的变化,采用UF-100尿沉渣分析仪、US-2100R尿干化学仪对随机留取新鲜尿液检测后离心作显微镜检查,对RBC平均荧光强度(RBC-MFI)、RBC荧光强度分布宽度(RBC-FI-DWSD)这两种相关参数进行研究。结果,UF-100检测血尿的结果受环状RBC的影响,当RBC-MFI、RBC-FI-DWSD降低到某一阈值(<18ch),会产生假阴性结果。认为环状RBC可以使UF-100检测血尿结果产生假阴性;显微镜检查可弥补UF-100的这一检测盲区,有必要根据显示的相关参数选择显微镜进行镜检校正。
【关键词】 尿分析;血尿;RBC计数
血尿是某些疾病病理变化的初始信号,因此无症状血尿的检测对疾病的早期诊断显得十分重要。目前临床主要采用干化学法、UF-100尿沉渣联合分析的方法对尿液进行筛选,然后进行显微镜检查,而在实践中发现,当尿液中存在环状红细胞(RBC)时,干化学法与UF-100尿沉渣分析法的检查结果往往不一致,为进一步提高检验质量,用US-2100R干化学仪、UF-100全自动尿沉渣分析仪、显微镜三者交叉互检观察潜血、RBC计数、RBC-MFI、RBC-FI-DWSD等相关指标,通过对这些指标的研究,提高尿液检测的准确性。
1 资料与方法
1.1 标本来源
用一次性尿杯留取701例住院患者的新鲜晨尿标本。
1.2 仪器和试剂
UF-100全自动尿沉渣分析仪及配套试剂(日本Sysmex公司生产),US-2100R尿干化学分析仪及配套试纸条(日本Sysmex公司生产),Olympus相差显微镜。
1.3 方法
1.3.1 仪器法
先用UF-100作尿沉渣分析,然后用US-2100R作干化学分析。
1.3.2 显微镜法
根据尿沉渣和干化学分析结果,选取干化学分析潜血试验阳性的尿样并根据尿沉渣红细胞计数<25个/μL和红细胞计数>25个/μL将这些患者的剩余尿液分为两组,再按《全国临床检验操作规程》以1500r/min离心5min,留取0.2mL沉渣混匀涂片镜检,根据镜检结果将潜血阳性、RBC计数<25个/μL且含环状RBC的尿液设为环状RBC血尿I组;将潜血阳性、RBC计数>25个/μL且镜下所见RBC形态正常的血尿设为正常RBC血尿组;将潜血阳性、RBC计数>25个/μL且镜下未见环状RBC的混和型血尿设为混合血尿组;将潜血阳性、RBC计数>25个/μL且经镜检确认以大量环状RBC为主的血尿设为环状RBC血尿II组,环状RBC血尿I组和环状RBC血尿II组视为环状RBC血尿组。UF—100检测尿沉渣与镜检之间以双盲方式判读。标本不染色,不作防腐及其他处理,尿样所有实验均在2h内完成。每天用Sysmex公司提供的尿沉渣质控物进行质控。
1.4 统计学方法
组间比较用两样本的均数t检验。
2 结果
2.1 潜血呈阳性标本镜检结果
382例干化学测定潜血呈阳性,且UF-100检测RBC<25个/μL者63例,经显微镜检查含环状RBC者有48例(环状红细胞血尿I组,假阴性),15例镜下未见RBC。潜血阳性并且UF-100检测RBC>25个/μL者319例,其中22例含环状RBC(环状红细胞血尿II组),剩余297例为无环状RBC血尿(124例为正常形态RBC血尿,173例为混合型RBC血尿组)。
2.2 正常形态RBC血尿、环状RBC血尿和混合血尿相关参数的比较结果,见表1。表1 正常形态RBC血尿、环状RBC血尿和混合血尿相关参数的比较(略)
3 讨论
环状RBC又称面包圈样RBC,因血红蛋白大量丢失或胞浆向四周集中形成,多见于肾小球肾炎和烧伤病人。当血尿中无环状RBC时,基本不会出现假阴性误报;血尿中含有环状RBC时,会出现假阴性误报,可能由于环状RBC所含的血红蛋白量不同,对荧光染料的亲和力也就不同,当血红蛋白低到一定程度,其对荧光染料着色减弱或几乎不着色,当与荧光染料结合后的荧光强度弱到不足以被仪器检测到时,其BC-MFI、BC-FL-DWSD为低于18ch,会出现红细胞计数错误,产生误报[1]。本文RBC形态正常的血尿BC-MFI为(20.5±2.07)ch,BC-FL-DWSD为(18.82±1.58)ch;环状RBC BC-MFI为(14.90±1.47)ch,BC-FL-DWSD为(15.26±1.79)ch。当标本为无环状RBC的血尿时,UF-100显示的相关参数RBC-MFI、RBC-FI-DWSD均大于18ch;而当标本为含有环状RBC血尿时,无论UF-100分析结果大于或小于25个/μL,其相关参数均低于18ch。因此,要注意尿沉渣中环状RBC对结果影响,潜血阳性时用UF-100检测RBC<25个/μL,RBC BC-MFI<18ch或RBC BC-FL-DWSD<18ch时,务必离心镜检,以达到提高尿液标本检验质量的目的。此外,尿路感染时某些细菌产生过氧化酶可致尿干化学假阳性,也应加以注意[2]。
参考文献
[摘要] 目的 探讨塌渍照射法对肝硬化腹水患者血清腹水白蛋白梯度(SAAG)、血小板参数及红细胞参数的影响。 方法 选取2011年10月~2012年5月60例肝硬化腹水患者为研究对象,将其随机分为对照组(常规治疗组)和观察组(塌渍照射法组),每组各30例;对照组给予常规治疗,观察组在常规治疗基础上给予塌渍照射法治疗,对两组患者治疗前及治疗后5、10、20 d的SAAG、血小板参数及红细胞参数水平进行比较。 结果 治疗后5、10、20 d观察组SAAG值和≥11 g/L者比例均低于对照组,差异均有统计学意义(均P < 0.05);治疗后5、10、20 d观察组血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)及血小板分布宽度(PDW)均高于对照组,差异均有统计学意义(均P < 0.05);治疗后5、10、20 d观察组平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度(RDW)及平均红细胞容积(MCV)均低于对照组,血细胞比容(HCT)高于对照组,差异均有统计学意义(均P < 0.05)。 结论 塌渍照射法在改善肝硬化腹水患者SAAG、血小板参数及红细胞参数方面的效果较佳,对于改善患者的疾病状态发挥着积极的临床作用。
[关键词] 塌渍照射法;肝硬化腹水;血清腹水白蛋白梯度;血小板参数;红细胞参数
[中图分类号] R657.31 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210(2013)02(c)-0004-03
肝硬化腹水是由于肝脏疾病导致肝脏反复炎症,纤维化及肝硬化形成后由于多种病理因素引起的腹腔内积液,其在发生发展的过程中机体较多指标随之波动,临床认为血清腹水白蛋白梯度(SAAG)是较为有效地反映疾病状态及严重程度的有效指标[1],另外较多血液指标也有较高的临床检测价值,对于监测疾病的发展转归有较高的临床价值[2]。本文采用塌渍照射法对肝硬化腹水患者SAAG、血小板参数及红细胞参数的影响进行研究,以了解其在本病治疗中的应用价值,现将结果分析如下:
1 资料与方法
1.1 一般资料
选择2011年10月~2012年5月治疗的60例肝硬化腹水患者为研究对象,将其随机分为对照组(常规治疗)和观察组(常规治疗+塌渍照射法治疗),每组各30例。对照组的30例患者中,男19例,女11例;年龄39~69岁,平均(48.7±4.3)岁;病程5.5~42.5个月,平均(12.7±2.1)个月;乙肝后肝硬化腹水21例,酒精性肝硬化腹水9例。观察组的30例患者中,男20例,女10例;年龄39~68岁,平均(48.8±4.1)岁;病程6.0~43.0个月,平均(12.8±1.9)个月;其中乙肝后肝硬化腹水22例,酒精性肝硬化腹水8例。两组患者的年龄、性别构成、病程及种类构成等一般资料比较,差异均无统计学意义(P > 0.05),具有可比性。本研究经医院伦理委员会批准,两组患者均签署知情同意书。
1.2 方法
1.2.1 治疗方法 两组患者均进行常规治疗,主要为给予患者低盐高蛋白饮食,并给予复方氨基酸15AA注射液250 mL/次,1次/d,静脉滴注,螺内酯片100 mg口服,2次/d,呋塞米片40 mg口服,1次/d。对照组在此基础上以面粉10 g加食用色素10 g温水调成糊状,进行备用。观察组则以大腹皮、车前子、桑白皮、茯苓、猪苓各15 g,丹红、桃仁、红花及赤芍各5 g,将其研成细末,以蜂蜜食醋调成糊状,再加入桂氮唑酮透皮促进剂。两组均以制成药膏纱布,嘱患者排尿平卧后,将药膏纱布置于脐中央的神阙穴,以CQ-B电磁波治疗器置于神阙穴上方大约30 cm处,20 min/次,连续治疗20 d。后将两组患者治疗前及治疗后5、10、20 d的SAAG值、血小板参数及红细胞参数水平进行比较。
1.2.2 检测方法 取患者治疗前1、5、10、20 d的晨起空腹外周静脉血5.0 mL及腹水送检,其中SAAG采用M305593全自动生化分析仪进行检测,统计其≥11 g/L者比例;血小板参数及红细胞参数则采用XFA6000Intelligent智能化全自动血液细胞分析仪进行检测,其中血小板参数检测项目包括血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、平均血小板体积(MPV)及血小板分布宽度(PDW),红细胞参数检测项目包括平均红细胞血红蛋白(MCH)、平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、红细胞体积分布宽度(RDW)、红细胞压积(HCT)及平均红细胞容积(MCV),后将统计结果进行分析及比较。
1.3 统计学方法
采用统计软件SPSS 17.0对数据进行分析,计量资料数据以均数±标准差(x±s)表示,两组间比较采用t检验。计数资料以率表示,采用χ2检验。以P < 0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组患者治疗前及治疗后5、10、20 d的SAAG情况比较
两组患者治疗前SAAG水平和≥11 g/L者比例比较,差异均无统计学意义(均P >0.05),而治疗后5、10、20 d观察组均低于对照组,差异均有统计学意义(均P < 0.05)。见表1。
2.2 两组患者治疗前及治疗后5、10、20 d血小板参数比较
治疗前两组患者的PLT、PCT、MPV及PDW比较,差异均无统计学意义(均P > 0.05),而治疗后5、10、20 d观察组均高于对照组,差异均有统计学意义(均P < 0.05)。见表2。
2.3 两组患者治疗前及治疗后5、10、20 d红细胞参数比较
治疗前两组患者的MCH、MCHC、RDW、HCT及MCV比较,差异均无统计学意义(均P >0.05),而治疗后5、10、20 d观察组MCH、MCHC、RDW及MCV均低于对照组,HCT高于对照组,差异均有统计学意义(均P < 0.05)。见表3。
论文关键词 福田红树林;功能;资源保护;生态系统;广东深圳
论文摘要 红树林是具有独特结构与功能的生态系统,在各方面发挥着重要的功能。福田红树林自然保护区是深圳市得天独厚的一块生态资源宝地,对其基本状况、环境变化及其资源保护进行探讨与分析得出,为了维护红树林湿地的生态平衡,保护宝贵的生态资源,必须做到开发建设与生态保护的有机结合。
红树林是热带、亚热带滨海泥滩上特有的常绿灌木或乔木的植物群落,其大部分树种属于红树科,生态学上统称为红树林。“红树”的名称主要来源于红树科植物,由于这些植物多富含丹宁,树皮韧皮部和木材显红褐色而得名。红树林的根系十分发达,从树干或枝干各部位呈放射状,悬垂向下插入软泥中,形成一个稳固的支架,使红树林在沿海滩涂中固定下来。红树林的叶子具有脱盐的功能,能将多余的盐分排除体外,使红树林能适应在盐分较多的海潮中生存。
1红树林的功能
红树林全身是宝,按人类对红树林湿地的利用现状,可把红树林湿地的功能分为物质生产功能、景观美学功能和环境生态功能。
1.1物质生产功能
所谓的物质生产功能其实就是指红树林湿地的经济价值。实际上,红树林的经济价值是不可忽视的。大多数种类的红树植物树皮含有丰富的丹宁,可用做染料和提炼栲胶,是制革、墨水、电工器材、照相材料、医疗制剂的原料;木材纹理细微,颜色鲜艳美观,抗虫蛀,易加工,可供为建材、柱材、家具用材及薪炭材;红树四季开花,果实丰硕,果实富含淀粉,是酿造啤酒的重要原料;红树林内的海鲜比海滩的更肥美,而且无污染,故在红树林下进行合理的海产养殖具有很高的经济效益;同时如果能充分利用红树林的枯枝落叶作为食物来源还可以节省饲养成本。
1.2景观美学功能
景观美学功能则侧重于红树林湿地的旅游功能的开发。红树林是重要的旅游资源,素有“海上森林”之称,为热带海岸独有的地理景观,与其他海岸风光比较具有截然不同的别致风情。另外,红树林湿地生物多样,景观亦多样,潮涨潮落,红树林湿地展示不同的色彩美与动态美,鸟类在其间飞翔与栖息。其旅游功能主要体现在新、奇、旷、野等特点上。红树林的旅游功能有助于把红树林湿地内从事水产养殖业、加工业、林业等人员转化安置为保护和管理湿地的工作人员,减轻人类对红树林湿地的开发、利用、污染、破坏的压力。
1.3环境生态功能
红树林湿地在维护海岸带水生生物物种多样性方面具有举足轻重的作用。国内外的大量研究表明,与其他生态系统相比,红树林湿地生态系统中的动植物种类更加丰富,水生生物的物种多样性远远高于其他海岸带水域生态系统。红树林内部产生的凋落物不仅为近海海洋动物提供了丰富的饵食,而且经微生物分解后又变成红树林植物的营养物质,促进红树林群落的良性发展;再加上河口、海湾近岸富含营养的水体,为大量的藻类、无脊椎海洋动物和鱼类等提供了理想的生境。
红树林还是海洋鸟类最理想的天然栖息地,凡红树林分布的区域,均保持了较高的鸟类种群和其他生物物种的多样性。尤其对于候鸟,红树林广阔的滩涂和丰富的底栖动物为迁徙鸟类提供了落脚歇息、觅食、恢复体力的一切优厚条件。
另外,红树植物能产生胎生幼苗,它们从母树上脱落下来,在红树林带的前沿定植生长、成熟,胎生苗再定植,逐渐扩大林区的面积;红树植物的根系不断向海延伸,淤泥不断增加,土壤逐渐形成,使沼泽不断升高,于是林区的土壤逐渐变干,土质变淡,最终成为陆地。红树林所具备的这一使沧海变陆地的生态功能,使人类从难以抵御全球温室效应带来的海平面上升和海水吞噬陆地的困惑中看到了希望。
红树林湿地又被誉为“地球之肾”,其在净化水源、保护环境中的作用非常大。红树植物抗污染机制是多方面的,其中很重要的一个方面就是其体内富含丹宁,使得红树林在较严重污染的环境下仍能生存。当红树吸收重金属离子后,体内大量的丹宁分子能与其发生化学反应,使其失去毒性。红树林生态系统是一个红树林-细菌-藻类-浮游动物-鱼类等生物群落构成的兼有厌氧-需氧的多级净化系统,红树林通过吸附沉降、植物的吸收等作用降解和转化污染物从而使水体质量得到改善;而林下的多种微生物能分解林内污水中的有机物和吸收有毒的重金属,释放出来的营养物质可供给红树林生态系统内的各种生物,从而起到净化环境的作用。
2福田红树林保护区基本状况
深圳福田红树林自然保护区,位于东经113°45′,北纬22°32′,地处深圳湾东北岸,茂密的红树林东起深圳河口,西至车公庙,呈带状分布,长约9km,直线距离约为7km。1984年4月29日广东省批准由深圳市创建,1988年5月晋升为国家级自然保护区,成为全国5个国家级红树林自然保护区之一;1993年加入我国人与生物圈保护区网络,成为全国唯一加入该网络的红树林自然保护区。经1986年、1989年和1997年先后3次对保护区进行红线范围界定,最后确定为现在的红线范围,面积为367.64hm2,其中陆域面积139.92 hm2,滩涂面积227.72hm2。
福田红树林保护区是我国惟一地处城市腹地的国家级自然保护区,这里是重要的国际候鸟停歇站,每年有100多种10万只以上从西伯利亚至澳大利亚南北迁徙的候鸟在此停歇或过冬。此外,位于南亚热带海岸水陆交错地带的这一红树林湿地生态系统具有极高的生物多样性,该保护区有高等植物41科98种,其中红树林植物12科22种,鸟类18目44科189 种,列入我国重点保护的鸟类有23种。两栖爬行动物31种,哺乳动物15种,大型底栖动物86种,昆虫96种,藻类117种。因此,福田红树林保护区在全球生态系统中占有重要位置,被世界自然保护联盟列为国际重点保护区。
3福田红树林生态环境的变化
深圳经济特区经过20多年的建设发展,已成为一座高度人工化的现代化城市。伴随着城市的开发建设和人口的急剧增长,福田红树林及其周边生态环境发生了巨大变化。主要表现在:①人树相争,保护区面积不断缩小;②生境景观发生巨大变化;③水体受到严重污染;④红树林遭受严重破坏;⑤鸟类数量减少,生境恶化;⑥物种减少,生物多样性受到威胁。
4福田红树林资源保护对策
红树林生态环境的变化及其对红树林生态系统的影响已引起社会各界的关注,深圳的开发建设不能以牺牲环境为代价。要保护福田红树林湿地的生态资源,保持生物多样性,就要保护这些生物赖以生存的生态环境。主要采取以下措施:①引种造林,创造多样生境,扩大生态空间;②对水污染进行控制;③科学规划,依法管理。规划是保护工作的基础和依据,保护区规划必须解决好自然保护与城市开发的关系,解决好保护与资源合理利用的关系。新的保护区规划划定了保护区的核心区(占总面积46.0%)、缓冲区(占13.8%)、实验区(占38.7%)和行政管理区(占1.5%)范围;在生态环境设计中,对各种生境进行了合理分布,体现了生态效益、经济效益和社会效益的三统一。
另外,福田红树林保护区地处城市腹地,紧靠城市生活区。因此,建议深圳市有关部门对该保护区必须加大管理力度,充分搞好协调合作,制定专门法律和规章,依法管理;或对保护区实行封闭或半封闭的管理, 避免和减少人类活动对红树林整个生态环境及其中生物的干扰,以实现红树林湿地生态保护的的科学化、法制化、规范化,确保保护区规划的执行和实现。
参考文献
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[关键词] 新生儿;红细胞;血红蛋白;疾病
中图分类号:R457 文献标识码:B 文章编号:2055-5200(2014)02-079-04
输血是临床医疗工作中非常重要的治疗措施,也是抢救和治疗新生儿和某些疾病的一种特殊、基本手段。及时、合理的血液输入可延长或挽救一些垂危生命,有着药物不可替代的作用,输血效果较为肯定,但不是输注后都能达到临床效果和预期临床期望值,应注意疾病本身对输血效果的影响,及时检测Hb,避免盲目输注,既浪费血液资源又担当输血风险甚至担误病情。本研究对新生儿疾病对输血效果的影响进行研究,报告如下。
1 资料和方法
1.1 一般资料
本院2011年1~9月住院日龄一个月内输注悬浮红细胞并于输注后24h内检测Hb值的新生儿共160人次(不含术中输血及出血性疾病患儿)。男101例,女59例。伴败血病贫血病例24例,伴肺炎贫血病例28例,ABO溶血病28例,单纯新生儿贫血72例,血小板减少性紫癜,双胎输血综合征,缺血缺氧性脑病,肺透等其它疾病共8例
1.2 试剂及仪器
抗-A、抗-B,抗-D,ABO标准红细胞、抗筛Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型细胞等由上海血液生物医药有限责任公司生产;低离子/抗人球蛋白卡、孵育器及卡式离心机、由达亚美公司生产;久保田配血专用离心机。贝克曼全自动分析仪及其配套试剂检测Hb值。
1.3 方法
1.3.1 分组 按疾病主要诊断分为败血病组,肺炎组,ABO溶血病组,单纯新生儿贫血病组共152例,其他病种因病例少,本文不讨论。
1.3.2 配血及相关的血液检测 采用EDTA(乙二胺四乙酸)24h内抗凝静脉血进行血型鉴定(盐水试管法或微柱凝胶法)、抗体筛选(微柱凝胶法)、配血(盐水试管法和达亚美微柱凝胶法)。 实验操作均严格按试剂说明书和《临床输血技术规范》操作。
1.3.3 血液选择及输注 同型配血主、次侧无凝集、无溶血相合者或次侧有凝集时,再做直接抗人球蛋白试验,选用较其直接抗人球蛋白试验凝集弱的血液进行输注;ABO溶血病患者选用同型配血相合红细胞或选用‘O’型红细胞配血主侧无凝集无溶血相合者,其他同型配血主侧凝集时选用‘O’型红细胞配血主侧无凝集无溶血相合者。剂量按20mL/kg,血液离开储存冰箱0.5h内输注。输前轻摇血袋使血液均匀后用注射器抽取所需的血液,接上专用输血管,用输液泵泵进,速度为0.25-0.75mL/min。
1.3.4 观察指标 新生儿输注红细胞后在24h检测Hb值,Hb值大于输血前的为上升,小于或等于的为红细胞输注无效。检测Hb值允许误差为3%-4%。
1.4 统计学处理
PEMS 3.1软件包两样品均数及两样品率两两比较,P
2 结果
所有患儿盐水和微柱凝胶法交叉配血相合,抗体筛选阴性,输注红细胞后无输血不良反应。输血后24h内检测Hb,结果152例患儿输血后Hb均值111.0329±20.7557,较输血前Hb均值97.2105±18.5232提高14.22%,P
3 讨论
新生儿输血有许多独特性,如新生儿各器官发育不成熟,不能耐受过多的液体,对缺氧敏感,不能耐受冷,机体调节能力差,因此新生儿输血应严格掌握临床输血指征。目前新生儿需要输血指征为 [1]:(1)新生儿出生24 h内静脉血Hb
本组病例输血前Hb均值为97.2105±18.5232,并有相应贫血症状出现,符合上述临床输血指征。多数(107/152)患儿输注红细胞后Hb值得到不同程度提高,平均提升27.47g/L,较张长虹等[2]报道的平均提升35.56g/L低。败血病、ABO溶血病,肺炎等均可不同情度影响红细胞输注效果,以败血病、ABO溶血病影响较大,肺炎较小。严重感染,由于毒素的作用红细胞被破坏[3],肝脾肿大,血液重新分配,故败血病组输血后Hb上升不理想或反降;ABO溶血病组Hb升幅较小,可能与患儿从母体带来的血型抗体有关,血型抗体继续破坏红细胞,使Hb升幅不理想。红细胞输注无效率比较,以败血病组最高。文献报道:输血次数达到6次以上者,其抗体产生率高达87.9%[4],红细胞无效输注率为50%[5],败血病红细胞输注无效与输血次数无关,本文败血病无效输血共13例,10例第一次输血即发生无效输血,也说明败血病可影响红细胞输注效果。这与文献报道相符。但是新生儿红细胞抗原点位少(为成人1/4)早产儿更少,其产生抗体相对也少,不易检测,本人在实践工作中,新生儿多次输血甚至10次以上,但很少发现因输血次数多而检出抗体阳性的病例,即使是主次侧配血不合,抗体筛选也是阴性,很少因为配血不合[6]抗筛阳性,新生儿配血不合,最多出现的是次侧不合且多是用微柱凝胶技术才能发现。因此新生儿输注红细胞出现免疫破坏也不易被发现。本文输注红细胞后Hb不升的病例输血前Hb均值(121.4±33.4361)较上升病例(92.2523±14.5486)高,输血后反而下降,说明输入的红细胞破坏迅速,自身的红细胞也加速破坏。刘凌等[7]报道,无效组与有效组输血后,两组均无输血不良反应,但输血后间接胆红素两组相比无效组明显增高,也说明输入的红细胞或自身的红细胞破坏明显。
红细胞主要功能是携带氧、释放氧和运输二氧化碳,以供机体需要,因此输注红细胞主要是利用其Hb携氧,如果输注红细胞后循环血液中Hb值得不到提高,输血就达不到目的。文献报道输注红细胞无效见于各科,占总用血量14.10%[5]~15.47 %[8],较本文病例低(30.63%)。刘金菊[9]、夏荣[10]报道红细胞输注无效多与多次输血、患有自身免疫系统疾病及红细胞制品的贮存时间长等因素相关,郑萍等[11]报道红细胞输注效果与患儿有无输血反应、输血次数、既往输血量有密切关系,特别是有输血反应史、输血次数≥3次、既往输血量≥8U的无效输注病例明显高于其他组别。经常合并有感染发热肝睥肿大,需要使用抗生素或进行造血肝细胞移植,红细胞无效输注的发生率更高,这与本文严重感染性病例败血病相符,败血病患儿多有发热,应用抗生素;吕运来等[12-13]报道输血无效与输血次数、原发病症以及妊娠次数有关,其中儿科输注无效达36.4%,本文红细胞输注无效病例见于肺炎、败血病、单纯新生儿贫血病、血小板减少性紫癜,双胎输血综合征,缺血缺氧性脑病,肺透等多个病种,虽然样本量小,无法进行统计学分析,但红细胞输注无效或效果欠佳确实存在。
综上所述影响红细胞输注效果有多种原因,如疾病、妊娠次数、输血次数、输血不良反应、抗筛阳性、红细胞贮存时间、感染等都可影响红细胞输注效果。本文影响红细胞输注效果主要是败血病、ABO溶血病。因此新生儿贫血伴败血病及ABO溶血病输注红细胞时更应注意检测Hb,及时调整治疗方案,以提高治疗效果。
参 考 文 献
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【摘要】
摘要:目的研究芎汤不同提取部位对小鼠急性心肌缺血的保护作用。方法分别制备芎汤乙醇提取液过大孔吸附树脂柱的20%,40%,60%,95%乙醇洗脱部位(EE20,EE40,EE60,EE95部位)。用腹腔注射异丙肾上腺素造成小鼠急性心肌缺血模型,观察不同洗脱部位对心电图、红细胞膜流动性的影响。 结果EE20,EE40,EE60部位对异丙肾上腺素引起的心肌损伤小鼠,可拮抗S-T段异常变化;EE20,EE40部位可显著性降低荧光探剂DPH标记的小鼠红细胞膜荧光偏振度,增强红细胞膜流动性。 结论芎汤EE20和EE40部位对实验性心肌缺血有明显的保护作用。
【关键词】 芎汤 急性心肌缺血 心电图 红细胞膜流动性
Abstract:ObjectiveTo explore the protective effect on acute experimental ischemic myocardium in mice by different elutes from macroporous resin for separation of Xiongqiong decoction. MethodsThe ethanol extract from Xiongqiong Decoction was obtained firstly. Then 20, 40, 60 and 95 percent ethanol elute (EE20, EE40, EE60 and EE95) were prepared by using the column stuffed with absorbent macroporous resin. Acute myocardial ischemic model induced by intraperitoneal administration of isoproteronol (ISO) in mice was adopted to observe the effects of the different elutes on the electrocardiogram and the membrane fluidity of erythrocytes. ResultsCompared with the model group, EE40 and EE60 could reduce the elevation of ST segment induced by ISO. EE20 and EE40 could decrease the fluorescence polarization which demonstrated the effect of increasing the cell membrane fluidity in the inactive state. ConclusionThe extracts of EE20 and EE40 have protective effect against ISO-induced acute myocardial ischemia in mice.
Key words: Xiongqiong decoction; Acute myocardial ischemia;
Eelectrocardiogram; Membrane fluidity of akaryocyte
中药复方芎汤出自《千金方》,由当归Angelica sinensis (Oliv.) Diels.和川芎Ligusticum chuanxiong Hort.等份组成,具有养荣活血的功效。现代药理研究证明,川芎、当归可以抗血栓形成,抑制血管平滑肌细胞增生,显著增加脑血液流动性,保护、减轻脑缺血造成的脑部病理损害,缓解由此引起的行为障碍[1~3]。本课题采用大孔吸附树脂柱对芎汤乙醇提取物分离纯化,制备不同浓度乙醇洗脱部位,考察其对急性心肌缺血小鼠心电图及红细胞膜流动性的影响,评价芎汤不同提取部位在活血方面的活性。
1 仪器与试药
1.1 动物昆明种小鼠,SPF级,体质量18~22 g,雌雄各半,购于山东中医药大学实验动物中心,许可证号SCXK(鲁)20070004。
1.2 仪器BL-420E+生物机能实验系统(成都泰盟),RF-540型荧光分光光度计(日本岛津公司);RE-52C型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
1.3 药材和试剂当归、川芎药材(购自济南市建联药店);大孔吸附树脂HP20(日本三菱化学公司);盐酸异丙肾上腺素(Isoproterenol, ISO)注射液(上海禾丰制药有限公司,批号6E20003,规格0.5 mg·ml-1);荧光探剂DPH(1,6-二苯基-1,3,5-己三烯;Sigma公司,批号109F3518);PBS磷酸盐缓冲溶液(北京中杉金桥生物技术有限公司,批号ZLI-9062);生理盐水(山东长富洁晶药业有限公司);戊巴比妥钠(中国医药集团上海化学试剂公司,批号F20021216);肝素钠注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司,批号0512104)。
2 方法与结果
2.1 芎汤大孔树脂柱洗脱物灌胃溶液的制备当归、川芎药材粉碎,过20目筛,分别取500g,混合,加12倍量70%的乙醇回流提取3次,1.5h/次,合并提取液,回收乙醇,浓缩至2 000 ml。以1∶3的比例(药材质量与树脂体积比)过HP20大孔树脂柱,分别用10倍量的水、20%,40%,60%和95%的乙醇洗脱,收集不同浓度的醇洗脱部位,减压回收乙醇,浓缩至每毫升溶液相当于1 g当归、川芎的生药量。分别取各醇洗脱部位提取液200 ml,水浴60℃浓缩至近干,加少许吐温80使成混悬液,转移至50ml量瓶中,加水定容至刻度(分别简称EE20,EE40,EE60和EE95)。
2.2 盐酸异丙肾上腺素剂量的选择取36只小鼠,随机分为4组,每组9只,分别为空白对照组及腹腔注射异丙肾上腺素4 ml·kg-1组,6 ml·kg-1组和8 ml·kg-1组。给小鼠称重,0.05%戊巴比妥钠(8 ml·kg-1)麻醉,用BL-420E+生物机能实验系统分别记录空白对照组和腹腔注射盐酸异丙肾上腺素不同剂量组的小鼠S-T段在30 s、1,5,10,20 min的偏移值,从预试结果来看,注射盐酸异丙肾上腺素6 ml·kg-1的剂量在5,10,20 min时间点有显著性差异,注射8 ml·kg-1的剂量虽然也有显著性差异,但容易导致小鼠死亡,故选择盐酸异丙肾上腺素的剂量为小鼠体重注射6 ml/kg,连续注射2 d,监测的时间点为5,10,20 min。
2.3 对异丙肾上腺素致小鼠急性心肌缺血心电图的影响
2.3.1 分组及给药实验前在麻醉下记录小鼠正常心电图1次,对心电图异常者予以剔除。用于实验的小鼠随机分为6组,每组10只,各组分别为空白组,模型对照组,EE20组,EE40组,EE60组,EE95组。空白组和模型对照组均给蒸馏水,剩余组均给予药30 ml·kg -1,连续给药9 d。
2.3.2 造模及指标检测空白组在给药的第8,9天腹腔注射生理盐水6 ml·kg-1,其余组分别在给药的第8,9天注射异丙肾上腺素6 ml·kg-1,在注射之前用0.05%的戊巴比妥钠对小鼠进行麻醉,并记录肢体ECGⅡ导联心电图1次,末次注射异丙肾上腺素之后在麻醉状态下即刻记录5,10,20 min的肢体ECGⅡ导联心电图,测量S-T段的偏移值(即S-T)。
数据采用SPSS 11.0版统计软件处理数据,多组间比较用方差分析和p-LSD(最小显著差)法检验。以P
由表1可见,空白对照组与模型对照组在不同时间点相比均有非常显著性差异(P
2.4 对红细胞膜流动性的影响在“2.3”项实验完成后,小鼠摘眼球取血于0.1%的肝素抗凝的试管中,将抗凝血离心5 min(800 r·min-1);取压积红细胞0.1 ml,加入2 ml生理盐水,混匀,2 500 r·min-1离心5 min;吸去上清液,再用2 ml生理盐水洗涤红细胞一次;吸去上清液,加入0.4 ml PBS液;取上述PBS液0.1 ml,用PBS稀释至6 ml,均分为3等份,其中两只管为标记管,一只管为空白管;在标记管中加入2 ml浓度为2×10-6 mol·L-1 DPH标记液,空白管中加入2 ml PBS缓冲液,混匀;25℃恒温水浴中避光温育30 min,温育毕,离心(2 500 r·min-1)5 min后弃去上清液,再用4 ml PBS缓冲液洗涤两次,用4 ml PBS缓冲液将红细胞悬起。上机测定,激发波长(EX)364 nm,发射波长(EM)457 nm,根据公式①计算荧光偏振度P[4],激发光光轴呈垂直方向时测得的水平以及垂直方向的荧光强度为IVH和IVV。
P=IW-GIVHIW+GIVH①
式中,P为荧光偏振度;G为仪器校正因子,校正由于单色器所产生的附加偏振。
IW=IW1+IW22-IW空白
IVH=IVH1+IVH22-IVH空白
IW-起偏器和检偏器光轴均在垂直方向时的荧光强度。
IVH-起偏器光轴在垂直方向上,检偏器光轴在水平方向上时的荧光强度。根据公式 η=2P0.46-P,P为所测的荧光偏振度,计算微黏度η。
数据采用SPSS 11.0版统计软件处理数据,多组间比较用方差分析和p-LSD(最小显著差)法检验。以P
由表2可知,模型对照组与空白对照组相比,荧光偏振度P有降低的趋势,即红细胞膜流动性或变形能力增强。与模型对照组相比,EE20组和EE40组的荧光偏振度P降低,微黏度降低,有非常显著性差异(P
3 讨论
心肌持续缺血将导致心肌组织损害, 并出现S-T段缺血性改变,腹腔注射ISO诱发小鼠急性心肌缺血损伤模型是研究抗心肌缺血药物的经典模型。本课题采用该模型后发现,模型对照组小鼠ip ISO后其ECGⅡ导联S-T段出现了明显的缺血表现。EE20组、EE40组和EE60组对此异常S-T段变化具有显著抑制作用;可拮抗ISO引起的S-T段异常变化,可使小鼠异常变化的DS-T明显降低。说明芎汤抗急性心肌缺血的作用,其机制可能涉及到冠脉扩张和冠脉流量的增加。EE20组在5,10,20 min时间段都有较强的抗心肌缺血作用,EE40组在10 min、EE60组在20 min有较强的抗心肌缺血作用,这可能与各洗脱部分活性物质组成不同,在体内的吸收及代谢速度不同有关。
本实验所用荧光探剂DPH是疏水性的,用以标记膜脂双层的碳氢链区,测量这两种探针与膜结合的荧光偏振度并计算出微粘度,能定量地说明膜蛋白与膜脂分子的运动情况,从而了解膜的流动性。荧光偏振度可反映膜脂区的微黏度,P值越大,微黏度越大,膜流动性愈小;反之,值越小,微黏度越小,膜流动性愈大。实验结果显示,EE20组、EE40组可显著性降低DPH标记的小鼠红细胞膜荧光偏振度,增强红细胞膜流动性。
红细胞是主要的气体交换单元,其变形性是改善血液状态、发挥红细胞携氧功能、保证微循环灌注、完成气体交换任务的必备条件。本实验表明,小鼠ip ISO所造成的急性心肌缺血模型的心电图DS-T已有显著性改变,表明心肌细胞已经受损。而此时红细胞膜荧光偏振度P值较空白组却下降,提示红细胞膜流动性增强,亦即红细胞流动性增强。焦晓慧等[5]也发现大鼠心肌缺血时红细胞膜荧光偏振度P值下降,膜流动性也增强,故缺血时红细胞膜流动性增强可能也是代偿性反应。EE40组中抗血栓有效成分阿魏酸含量较高[6],可能也促进模型小鼠的红细胞膜流动性代偿性增高,以改善其心肌缺血症状,具体机制还有待进一步研究。
对芎汤不同部位抗急性心肌缺血实验发现,芎汤醇提物经大孔吸附树脂分离的EE20、EE40和EE60部位可拮抗ISO引起的DS-T升高,可使小鼠升高的DS-T明显降低,能够保护心肌细胞,起到抗急性心肌缺血的作用,增加细胞的抗缺血缺氧能力;通过红细胞膜流动性实验发现,EE20、EE40部位可增强红细胞膜的流动性,改善急性期缺血的能量代谢障碍的状态,防止心肌的进一步坏死。该研究对筛选芎汤活血活性部位、进一步发现其活血活性成分具有重要的指导意义。
参考文献
[1]张旭静,曹奕丰,冯春红,等. 川芎、当归萃取液对大鼠血栓形成的影响[J]. 中国临床药学杂志, 2002, 11(1): 45.
[2]李淑颖,侯永忠,葛志强. 川芎当归提取物对血管平滑肌细胞MAPK信号通路与周期蛋白的调控效应[J]. 中草药, 2006, 37(8): 1217.
[3]范柳,孙继虎,王春安,等.川芎、当归萃取液对实验性急性脑梗死大鼠行为学和脑组织损伤的影响[J]. 中国临床药学杂志, 2002, 11(2): 81.
[4]Yamamoto S, Matsui K, Sasabe M, et al. Effect of SMP-300,a new Na+/H+ exchange inhibitor, on myocardial ischemia and experimental angina models in rats[J]. Jpn J Pharmacol.2000,84(2):196.
韩国农振厅发表消息称,开发了一定比例混合气体来置换包装容器内空气的新技术,使用该技术包装的小西红柿的新鲜度可延长2倍。
该技术核心是包装小西红柿时,充填能保持新鲜度的气体,所使用气体为氮气、氧气及二氧化碳的混合气体。
具体方法是容器内装入750克小西红柿,抽出空气形成真空状态之后充填氮、氧及二氧化碳的混合气体,混合气体比例为氮气91%、氧气6%、二氧化碳3%。包装所使用塑料膜为10℃- 20℃的流通环境下气体浓度变化最小的塑料膜,其氧气透过率为25000 0TR (OxygenTransmission Rate,cc/24hr-nf)。
使用该技术,在15℃流通环境下,与普通真空包装相比小西红柿的呼吸速度降低1/3,小西红柿保持新鲜状态的时间也由3天延长到6天。
另外,使用该技术后,除了降低蔬果的呼吸速度之外,还有保持果实表面颜色与果肉硬度的效果和保持蒂部新鲜度的作用。