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苦了,自己含着,痛了,自己忍着,累了,自己受着,想放下了,就默默转身,所有的所有,一切的一切,终将逝去的
淡忘一个人,最好的方法就是不断的怀念她!
“晚安”,下午五点二十分。以为他依然不会回复,刚准备丢下手机入睡,“怎么了”,五点三十五分。我激动的拿起手机敲击着键盘,“没事,你还在忙么?”五点三十六分。时间滴答滴答一秒一分的过去,我看着屏幕却再也没有等到回复,直到天黑之前我也许已经入梦,梦你有你,有你在身边,有你,而我不愿醒在这又一个黑夜里。
1、死了的人比活着的人有用!
2、黄四郎:黛玉、晴雯给我出来。师爷:怎么只出来一只女子?黄四郎:我给她起了个日本名字—-黛玉晴雯子!
3、师爷:你带着老婆,出了城,吃着火锅还唱着歌,突然就被麻匪劫了……
4、张麻子给师爷一分钟时间,让他说出钱在哪儿。师爷吓得直哭。张麻子说:“哭也算时间哦!”
5、我要做的有三件事:公平,公平,还是他妈的公平!
6、谁是穷人?谁穷,谁就是穷人!
7、不好色的县长不一定是好县长。
8、我演砸了吗?我怎么觉着才刚刚开始啊!
9、老三:她们是!是穷人吗?老二:是穷人,是穷人卖掉的女儿!
10、这他妈的税都收到公元2010年啦!
11、四爷,他们打我的屁股就等于打您的脸啊!
12、姜文摸着刘嘉玲的胸说:说好了,咱们是同床,但不入身。我若有不 规,手枪在此,你随时可以干掉我!
13、张麻子:这是穆扎的曲子。()他们叫穆扎,咱们这里叫莫扎特。儿子:你还能听出是穆扎来?张麻子:有时候能。儿子:什么时候?张麻子:唱片上写着他名字的时候。
14、师爷:六个人,还当着人家男人的面,还开着灯。我都关着灯…太不要脸了,太不要脸了,呸!或者你花点钱,花不了多少钱,姑娘有的是…
15、师爷:我话到嘴边了,你让我再咽回去?张麻子:咽回去----你是个骗子,反正说出来也是假的!
16、师爷作深情状,回忆道:那年她十七,我也十七……
17、师爷在临死前对张麻子说:树上的屁股兜里有五张委任书…
18、张麻子:汤师爷是我的至爱,您可不能夺我所爱啊!
19、黄四郎对手下胡万说:如果你活着,早晚都会死;如果你死了,你就永远活着。
20、张麻子:你给我他妈的翻译一下他妈的到底什么是他妈的惊喜!
21、酒要一口一口地喝,路要一步一步地走—-步子迈大了,容易扯着蛋!
22、何止是愚蠢?简直就是愚蠢!
23、做夫妻最要紧的是什么?恩爱;做县长最要紧的是什么?忍耐!
24、师爷:寡妇不能碰啊!必有大灾!张麻子:她已经成了寡妇了,我不能让她再守活寡!
25、要有风,要有肉;要有火锅,要有雾;要有美女,要有驴!
26、黄四郎:I”m sorry!胡万坚定而又颤抖的回答:My pleasure,sir!
27、城里的女人就是白啊!
28、黄四郎:师爷高!县长硬!师爷、张麻子:黄老爷又高又硬!
29、大哥,我讨厌吗?你要是觉得我不讨厌,我就继续欺负他。你要是觉得我讨厌,我立马消失!
30、花姐一把枪指着自己一把枪对着张麻子说:老二已经走了,现在老三也要离开了,我们三个就这样被你拆散了!
31、老三:她们是!是穷人吗? 老二:是穷人,是穷人卖掉的女儿!
32、世界上本没有路,有了腿便有了路。
33、连小凤仙是谁都不知道还当?那是誉满全城的鸡!
目前,洛米欧在虎门的办公室已经空无一人,一片狼藉。
最近几天,数百名全国各地的买家都在追讨被“洛米欧”骗走的货款。这个位于虎门的电商企业,从两个月前以“盖楼免单”诱惑,自建QQ群吸引上千买家,双11当天通过活动高价拍下“货不对板”的服装。老板魏某随后卷款走佬并解散QQ群。
经阿里巴巴统计,截至昨日已有超300名消费者表示联系不上商家,涉及被骗总金额超400万元。12月2日,警方已以“诈骗案”立案调查。南都记者调查发现,“洛米欧”老板魏某去年开始已债务缠身,其公司在虎门的办公地点也已大门紧锁。“失联”前,他还欠下快递公司及服装加工厂的债务。
两个月前开始“放饵钓鱼”
“lorrmio洛米欧”旗舰店是天猫上一家主营欧美女装的店铺。受骗的买家们表示,洛米欧在微淘里举行“盖楼免单”活动,主要从9月份开始。
微淘,是手机淘宝APP里商家促进粉丝粘性和粉丝互动的栏目,目前每天有超过100万条信息在微淘里滚动。商家会与粉丝(买家)进行许多互动和正常促销,比如“盖楼盖到某层”可以获得一定数额优惠,“盖楼盖到某层”拍下宝贝(货物)好评可全额返现等。
“这都是正常的促销手段,很多商家经营早期都曾举行过,主要是吸引人气。”曾举办过类似活动的商家向南都记者表示,正常情况下商家只会在某个时间段拿出小部分的商品进行这样的互动。
“双十一”当天,洛米欧在自建QQ群里的活动,几乎是全员参与。广州的买家张先生说,他从今年9月份开始参加洛米欧的免单活动。以往规则是,每小时的每10分钟第一个对商品发表评论的人可以免单,即买家拍一件衣服、付款,卖家会在15天以后发货,等买家收到货给个五星好评,卖家会返还货款。
“每次参加活动,确实都能收到全额返款。”张先生表示,几次互动下来,越来越多的买家增加了对洛米欧信任,“等到双11,活动群里的人已经超过1000人,商家说店铺里挂的每件服装都可以参加活动。”
高价拍下衣服“货不对板”
河南郑州的陈小姐,跟张先生一样在双十一前已经参加过洛米欧多次“免单”活动,不但能收到衣服,还获得免单。双十一当天,洛米欧的“免单”活动力度开始加大,但是买家们发现衣服标价越来越贵,原来只要100多元/件的衣服涨到了500多元/件,而且是“全天疯狂免单”,先是“双11”开始前10分钟拍下的衣服全部免单,然后又增加多个免单时段。
“疯狂”过后,张先生花了17000多元拍下多件衣服。与他一样,群里不少买家都参与了活动,花费在数百元至上万元不等。按照以往的约定,买家们拍下衣服后15天,卖家发货;买家收货后给予好评,通过淘宝平台确认收货并用支付宝付款,卖家收到钱后将买家的免单信息登记,然后返款给买家。
但是,买家们很快就发现问题。他们花高价拍下的衣服陆续到货,但很多不是双11期间挑中的,而是一些质量低廉的衣服。买家们在QQ群里发问,卖家客服则表示,“双十一拍的衣服太多,厂家生产不过来,先暂时发一批货,不对的登记下来后再调换,返款还是可以进行。”
11月27日,原本是约定返款的日子。当天凌晨3点,洛米欧店主魏某突然在QQ群里一段“告白”,称自己因家庭原因被高利贷逼其还钱,迫不得已要离开一段时间……。
买家被骗金额超过400万元
“告白”完毕后,QQ群的管理人员将里面的买家成员逐一踢出,并最终解散了整个Q群。这个突如其来的“变故”,让来自全国各地的买家们慌成一团,他们边向阿里巴巴淘宝方面举报,并各自向当地的派出所报警。11月30日,在淘宝天猫上搜索“洛米欧”时,已显示“店铺不存在或者店铺状态异常”。
截至昨日,阿里巴巴汇总发现,已有超300名消费者表示联系不上商家,涉及被骗总金额超400万元。买家们表示,双十一的盖楼活动的信息主要是在洛米欧自建的QQ群里,按照正常程序在天猫上进行购物、确认收货、付款,现在钱已经全部打到卖家账户内,卖家仅有5万元押金留在天猫,“5万押金,相比超400万的诈骗金额,根本起不到什么作用。”
南都记者了解到,经过阿里巴巴方面的协助,12月2日当天,警方已以“诈骗”对洛米欧事件进行立案侦查。
记者调查
洛米欧在虎门已欠债累累
阿里巴巴及买家们提供的信息显示,lorrmio洛米欧旗舰店是东莞市格丝服饰有限公司旗下品牌。营业执照显示,格丝属自然人独资企业,成立于2014年4月,地址位于东莞市虎门镇一家电商产业园内。
11月30日,南都记者实地走访发现,格丝服饰有限公司在电商园区内的办公区域已是铁锁加挂、大门紧闭,里面一片狼藉,衣物乱堆。门口还不时有退换的快递包裹,上面留下的发货人联系电话,已处于停机状态。
园区的知情人士表示,自从2014年进驻后,魏某及其公司就债务缠身,除了拖欠湖北老家的贷款外,魏某还欠虎门当地加工厂和快递公司的货款,经常有债权人前往公司要账。目前,魏某已彻底处于失联状态。
而园区内一家快递公司的员工也表示,格丝服饰有限公司的员工一共只有3个人,最近几个月的快递费还算正常,但从10月份开始就经常拖欠。魏某当时还承诺,公司正在忙着“双十一”的活动,等到11月底会一并结清。谁11月27日事态爆发后,快递公司找上门时才发现该公司已人去楼空,除了快递公司被拖欠3万元快递费,多家加工厂也被魏某拖欠数额不等的加工费。
消费提醒
阿里:别用第三方聊天工具进行交易
阿里巴巴方面表示,洛米欧此前在天猫上的经营一切都正常,顾客也是通过正常的渠道去购物、确认付款,但是他们双方私自在QQ群里所的消息,已经超出了阿里的监管,单从表象很难察觉。若非消费者本次集中反映,难以发现他们私下进行如此高风险的活动。事发后,阿里已积极协助警方展开调查。
阿里巴巴安全部的最新数据显示,自2015年1月起至今,据不完全统计,类似的既遂、未遂案件共计逾10万起。阿里安全小二已经协助上海、武汉等地警方破获多起因此发生的诈骗案。
阿里安全再次提醒:上网购物时,旺旺是阿里巴巴官方认可的唯一安全的聊天工具,发生纠纷时只以旺旺聊天记录为最有力凭证。其他第三方聊天工具均无法成为强有力的维权工具。
骗局揭秘
“盖楼免单”蓄积客户
洛米欧开展“盖楼优惠”或“盖楼免单“等促销活动,即一定时段第一个对商品发表评论的人可以免单,即买家拍一件衣服付款,买家收到货给好评,卖家会返还货款,以此吸引越来越多的买家成为洛米欧的粉丝。
“双十一”疯狂促销
“双十一”当天,洛米欧自建QQ群里活动,群里买家超过1000人,衣服标价翻倍,但“免单”活动力度加大,增加多个免单时段,吸引大量买家疯狂下单。
目的:分析临床护理路径在电视腹腔镜胆囊切除术中的护理效果。方法:选取2010年6月~2013年3月于我院进行电视腹腔镜胆囊切除术患者共118例,随机分为实验组和对照组各59例进行对比,在进行电视腹腔镜胆囊切除术中,对照组实施传统护理模式,实验组实施临床护理路径模式。后将两组术中手术持续时间、患者首次下床时间以及住院天数进行比较。结果:经研究比较,实验组其手术持续时间、住院天数与对照组比较,P均0.05,无统计学差异。结论:电视腹腔镜胆囊切除术中临床护理路径应用优于传统护理模式,流程合理,利于规范医疗护理行为,提高医疗护理质量,值得应用于临床。
关键词: 临床护理路径;传统护理模式;电视腹腔镜胆囊切除术
【中图分类号】
R453 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763(2014)08-0108-01
降低医疗成本与提高医疗服务质量是各医院追求的目标,如何解决这两方面的之间的矛盾,近年来,各地医院纷纷采用临床护理路径作为解决该问题的途径。临床护理路径(CNP)是医生、护士和其他专业人员共同协作,针对某个诊断或手术所做的最适当有顺序性和时间性的照顾计划以减少康复的延迟与资源的浪费,使服务对象获得最佳的照顾质量[1]。旨在提高护理质量的同时降低医疗成本。电视腹腔镜胆囊切除术(LC),是利用电视腹腔镜治疗胆囊疾病的一种新方法,为探讨临床护理路径在电视腹腔镜胆囊切除术中的护理效果,笔者对我院2010年6月~2013年3月将临床护理路径运用于电视腹腔镜胆囊切除术中疗效满意,现报告如下:
1 资料与方法
1.1 临床资料:
选取2010年6月~2013年3月于我院进行电视腹腔镜胆囊切除术患者共118例为研究对象,全部病例均经B超、口服和静脉胆道双重造影。将其随机分为实验组59例和对照组59例。对照组59例患者中,女性34例,男性25例,年龄24 ~ 68岁,平均(45.3 ± 5.3)岁,确诊为胆囊息肉14例,单纯胆囊结石45例;观察组59例患者中,女性35例,男性24例,年龄24 ~ 69岁,平均(45.5 ± 5.4)岁。确诊为胆囊息肉15例,单纯胆囊结石44例。两组患者在年龄、性别构成比、疾病分型等基本资料方面进行比较,差异无统计学意义(P均>0.05),说明两组患者具有可比性。
1.2 方法:
两组患者均接受电视腹腔镜胆囊切除术,对照组59例患者在术中按照传统的护理模式进行护理。实验组59例患者根据院内制定的临床护理路径表, 由主管医生和责任护士按照临床路径表实施标准化的治疗护理流程, 使电视腹腔镜胆囊切除术有序进行。临床护理路径的主要内容为:术前访视:患者实施手术前,由责任护士对患者进行访视,了解患者的情绪状况,向患者讲解手术流程,注意事项,耐心回答患者的提问,针对患者的实际情况,采取针对性的心理疏导,打消患者对手术的担忧、恐惧,缓解患者的紧张情绪,对患者进行手术术野的清洁、消毒,向患者讲解饮食注意、个人卫生的保持事项;患者由护理人员陪同进入手术室,手术护士和患者核对患者个人信息,手术信息,降低差错事故;术中护理人员应加强对患者的生命体征、各项指标的观察,术后护送患者到达病房,向患者家属讲解自我护理的注意事项,耐心解答家属的提问,必要时应进行示范操作,确保家属充分理解自护操作,确保自我护理质量,根据术后护理规范,对患者的、各项生命指征观察、患者伤口护理、给药等方面的护理。护理人员的所有护理行为均以表格化呈现,每完成一项均需进行确认,需要家属或者患者确认的应有患者或家属的确认记录。每个单元的护理完成,应仔细检查核对有无遗漏,确保护理完整规范。
1.3 观察指标:
观察两组在术中不同护理模式下,记录每次手术持续时间、患者首次下床时间以及患者的住院天数。
1.4 统计学处理:
对文中所得数据进行相关的统计学处理,软件选用SPSS 15.0,计量资料采用t检验,计数资料采用χ2检验,采用P
2 结果
2.1 两种术中护理模式下,手术持续时间、患者首次下床时间以及住院天数结果的比较。
两组术中护理模式情况的比较,实验组手术持续时间、住院天数明显低于对照组,P均
3 讨论
电视腹腔镜胆囊切除术在临床上已广泛应用,与传统的胆囊切除术相比,其具有创口小、出血少、患者的顺应性好、术后并发症少、住院时间短等优点。保证手术的成功,术中的护理尤为重要。临床护理路径是一种医护规范,对特定的病种或病例进行标准化医护计划,是临床管理的重要工具,能够指导护士有预见性地、主动地工作,也使患者自觉参与护理过程中。临床护理路径通过程序化的模式,便于患者自行检查护理过程中是否出现疏漏,如果出现了疏漏也能及时发现,降低了护理差错事件的发生率。降低了住院时间和住院费用,使患者获得最佳服务,减少康复延迟和医疗资源浪费[2]。临床护理途径与传统的护理模式相比,具有以下优点:首先,应用临床护理途径能够缩短患者的住院时间降低医疗成本。其次,应用临床护理途径能够提升临床护理的质量,使得临床护理工作顺利进行进而提高医疗服务质量。第三,应用临床护理途径,护士可按照路径表应用护理程序有预见性、主动性开展护理工作,不再机械性的执行医嘱[3-4]。提高护士的专业自主性。通过本研究的结果,通过以上实验组和对照组的结果比较,我们可以得出类似的结论,将临床护理路径应用于电视腹腔镜胆囊切除术中,使患者对疾病相关知识有了进一步的认识和理解,降低患者对手术的恐惧,从而提高患者在手术过程中的自觉性,便于手术的开展。临床护理路径规范了规范了护理服务流程,使护士充分做好术特殊仪器的准备,护士了解了手术的流程,使得巡回护士的配合得当,器械护士的配合得体[5-6]。为手术的顺畅奠定了基础。
综上所述,电视腹腔镜胆囊切除术中临床护理路径应用使得手术的持续时间、患者首次下床时间以及住院天数明显缩短。因此临床护理路径应用于电视腹腔镜胆囊切除术中设计流程合理,利于规范医疗护理行为,提高医疗护理质量,值得临床推广应用。
参考文献
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[3] 王媛,梁萍,等.临床护理路径应用评价的研究进展[J].护理研究,2013,27(12):3841-3843.
[4] 崔恒,何宁宁.应用临床护理路径对ERCP治疗患者健康教育的探讨[J].护士进修杂志,2013,28(3):215-216.
关键词神经通路;神经植入探针;传感后单集成芯片;微型生物可穿戴设备
1引言
谷氨酸(Glutamate,Glu)是神经内关键的兴奋性神经递质之一,其代谢与大神经认知、记忆、运动、神经元可塑性等功能相关[1]。神经信息传导具有神经电生理和神经递质两种方式。对神经内谷氨酸和神经电生理并行检测有利于全面研究神经系统功能。目前,针对谷氨酸和电生理信号的文献报道都是利用单模手段,而在体双模检测报道很少。如2015年Kanamori结合EEG电极和微透析的双模检测法,在体研究大鼠神经内谷氨酸浓度增加的现象[2]。2014年Tani等[3]在神经片中分离出海马CA3区和皮层的谷氨酸能神经突触,通过的功能特别依赖于谷氨酸信号转运,因此熟悉海马生理结构,并从神经电生理、谷氨酸递质传导等方面分析海马区的神经传导通路,是海马区相关神经疾病研究的重要方法。他们采用膜片钳记录电刺激后的离子通道信号,并使用荧光共振能量转移技术测量谷氨酸释放。不论基于神经调控进行病理、药理研究,还是研究某特定神经区神经回路的作用机制,在体实时获得相关神经区电生理和谷氨酸化学递质信号的双模并行变化具有重要意义[4]。谷氨酸与相关化合物通过延长兴奋性突触传递作用导致神经元破坏,引发兴奋性毒性,从而引发癫痫、神经创伤、神经缺血等急性神经元损伤。通常情况下,释放到突触间隙的谷氨酸浓度可达1mmol/L,时间维持10
3s,在突触间隙的谷氨酸长期累积,引起谷氨酸受体受到过分刺激,从而导致神经元损害甚至死亡。海马(Hippocampus)是脊椎动物(包括人类)大脑神经的重要组成,在记忆形成和空间感知中具有非常关键的地位。海马区结构和功能的改变与癫痫、阿尔茨海默病、精神分裂症等神经疾病关系密切,是病理研究的重要神经区之一[5]。长期增强效应作为神经可塑性重要形式即在海马区被第一次发现[6]。海马区神经电信号分类和特征分析在神经疾病研究中具有重要意义,而海马区的功能特别依赖于谷氨酸信号转运,因此熟悉海马生理结构,并从神经电生理、谷氨酸递质传导等方面分析海马区的神经传导通路,是海马区相关神经疾病研究的重要方法。
本研究运用纳米材料修饰技术、微纳加工制造技术、酶生物传感技术、神经调控技术,设计了一款双模(电生理电位与谷氨酸化学递质)并行检测的植入式、8通道神经信息检测器件,并进行在体测试研究。同时,神经器件检测的动作电压信号被后续后端电路进行放大、滤波、去噪、模拟到数字信号转换、功耗优化、并且电路模块高度集成,图1为本研究设计的神经信号处理传感芯片系统整体,并且该微型可穿戴系统[7]可以移植到手机及其它便携生物信号检测终端。
2SOIMEMS谷氨酸检测神经植入传感器和信号处理集成单芯片制备
2.1MEMS植入神经探针制备
本实验采用SOI自停止技术形成硅基底,SOI硅片中间二氧化硅氧化层可作为背面基底湿法腐蚀的自停止层。MEMS神经信息传感探针基于三层光刻工艺,利用了3块掩膜版,如图2所示,探针关键制备流程:(1)为了使硅基底与微电极阵列之间完全绝缘,热氧化制备硅底绝缘层(图2A);(2)利用第一块掩膜版光刻显影将图形转移到光刻胶上,在其上溅射Ti层后溅射Pt薄膜层,增强粘附性,再剥离光刻胶层与多余的Ti/Pt薄膜层,留下记录位点、导线和焊盘的金属导电层图形,以形成金属导电层(图2B);(3)采用等离子化学气相沉积(PECVD)方法沉积氮化硅(Si3N4)绝缘层,利用第二块掩膜版进行光刻显影,对氮化硅进行等离子刻蚀,暴露出电极及焊盘,保留引线表面覆盖的绝缘层,以形成氮化硅绝缘层(图2C);(4)利用第三块掩膜版进行光刻显影,通过深刻蚀形成硅针基底外形;通过湿法腐蚀去除SOI底层硅,使硅针以外的二氧化硅薄层下脱落,形成微电极阵列针体(图2D)。电极针体通过压焊工艺与尾端接口电路进行焊接封装,形成完整的微电极阵列芯片。MEMS传感探针整体,后端正方形焊盘通过压焊连接到外部接口电路,与斩波放大接口电路进行匹配集成(图3A为传感探针的后端尾端焊盘),而尖端则修饰纳米材料酶敏感膜为传感探针的尖端检测位点部分(图3B为2个同样的Pt铂探针),以形成特异选择性的生物识别点。该MEMS探针芯片在硅针基底上集成了电化学微电极阵列、电生理微电极阵列、引线、焊盘以及氮化硅绝缘层。其中,硅探针1(以棱形分布着通道1,2,3和4,为电生理信号检测通道)淀积铂黑纳米材料,用于电生理信号检测;而硅探针2(以棱形排部着通道1,2,3和4,为电化学信号检测通道)则修饰PtmPDGluOx固定敏感复膜,用于神经化学递质信号检测。电生理和电化学位点距离尽量近,便于检测微米范围内同一脑区微h境的电生理/电化学信息。为了防止互相干扰,电极之间距离不能太近。探针前端可植入部分长8mm,探针体宽90μm,相邻探针1与2的间隔是180μm,4个圆形检测位点为一组,分布在每个硅探针尖端,圆形位点直径12μm,形成具有高时空分辨率、生理与化学递质信息互不干扰的微米级检测精度的神经信息检测双探针。
2.2神经电生理检测位点铂纳米颗粒
为了提高微弱神经信号的检测灵敏度,在MEMS探针表面修饰纳米材料,其纳米结构能够有效增大比表面积[8],以加快表面的电子转运,提高电流响应灵敏度。电化学铂沉积使用阴极沉积机制,在基体电极上直接外延生长纳米铂颗粒层,铂黑的电沉积镀液使用H2PtCl4,再加少量硝酸铅、醋酸铅,铅离子均匀化铂镀层晶粒,同时减少析出的氢的数量,提高了沉积电流效率。通过改变沉积电压及时间,可以形成多种不同形貌的电极表面。沉积电位电位过小不会发生氧化还原反应,电位过大则会引起颗粒簇集问题;沉积时间会影响铂黑层的致密均匀性与厚度,沉积具体操作为:将45mmol/L氯铂酸和4.0mmol/L醋酸铅溶液按体积比1〖KG-3∶〖KG-51配制成电解液,取15mL备用。实验采用两电极体系,将需要电镀的4个位点与电化学工作站工作电极相连,电生理检测的铂丝电极与工作站的对电极(与参比电极短接)相连。将铂丝电极和电极尖端浸入电解液中,在
.1V恒电位下沉积1min,电镀结束后,用去离子水洗掉电极表面的残留离子,即得到疏松的铂黑颗粒薄层。在1kHz处,对修饰后的微电极表面进行电化学阻抗扫描,修饰后的电极阻抗约为34.0kΩ,比未修饰纳米材料的裸电极阻抗下降了一个数量级。图4A为探针修饰铂黑纳米后的表面扫描电子显微镜(Scanningelectronmicroscope,SEM)照片,图4B为化学递质探针尖端表面的铂黑形貌,显示出明显的黑色颗粒层。
2.3电化学检测位点选择性酶膜修饰
制备的MEMS铂探针电极表面固定的谷氨酸氧化酶(LGlutamateoxidase,GluOx)可氧化为谷氨酸,生成氨、H2O2和α酮戊二酸,通过间接测量H2O2发生氧化还原反应的产生电流,再进行电流与谷氨酸浓度的换算,即可得到谷氨酸浓度变化曲线。如图5所示,本研究使用交联法酶固定技术,并加入牛血清蛋白BSA惰性蛋白质作为基质,以防止酶分子交联过程中因密度过大可能导致酶活性中心不能接近底物问题。
在谷氨酸检测位点上固定PtmPDGluOx复膜结构,其中沉积的间苯二胺(1,3Phenylenediamine,mPD)层可与酶层形成有效大分子过滤抗干扰层,阻止尺寸比较大的分子(抗坏血酸AA、多巴胺DA、3/4二羟基苯乙酸DOPAC)通过,而小分子(H2O2等)则可以穿过,膜层接触电极表面发生反应,生成牢固的复膜结构,即形成有效的谷氨酸神经化学递质识别位点。修饰好的电极在室温固化后,形成的酶层稳固性极佳,用水进行冲洗不会脱落。通过对3个电化学位点进行谷氨酸标准溶液标定,在PBS缓冲液中,+0.7V电位作用下,神经化学递质检测电极mPDGluOx微电极对6~35μmol/L不同浓度谷氨酸进行标定,结果显示线性度为0.98,单位面积灵敏度为0.0069pA/μmol,电流响应误差低于3.0pA,线性相关系数(R)为0.97;如图6A所示,mPDGluOx微电极响应电流随谷氨酸浓度的增加而增大;如图6B所示,谷氨酸在电极表面氧化电流与浓度呈线性关系,灵敏度为24.6pA/(μmol/L)。证明设计的电化学检测探针可以实现特异性选择功能。实验结果表明,微电极位点一致性良好、电化学性能可靠,化学递质检测硅针2上以棱形分布着通道5,6,7和8,可用于化学递质谷氨酸的检测。
2.4MEMS传感后端信号处理集成单芯片制备
如图7所示,神经电生理传感后端信号处理集成单芯片包括:带宽/增益可调的低噪声神经电(动作/局部场电位)微弱信号斩波稳定放大器、SARADC与ASK/FSK调制的射频发射器。传感后端的小信号放大器进行前端传感器感知的微弱神经电生理信号的放大与直流失调/低频闪烁噪声的抑制,然后送到低功耗中速SARADC模块进行模拟到数字信号的转换,最终SARADC输出的数字信号被数字编码器模块进行无线信道传输编码并打包成帧,然后帧码流对射频电路物理层进行基于ISM(Industrialscientificmedical)2.4GHz波段的射频上频谱调制,最终经过天线辐射到远处接收基站。芯片能耗进行了降低优化,以提高设备续航时间。本研究设计的传感后端数模混合信号调理单芯片,具有神经电传感后端处理的普适应用价值,构建了可穿戴场合应用的微型神经信号采集与无线传输设备。该模块可以集成到生物智能检测手持终端设备,以构建智慧神经电传感检测设备。
2.4.1神经电生理信号的斩波稳定放大使用调制/解调斩波去噪技术[9],开发了具有普适应用价值的神经电生理电压信号斩波小信号放大电路。斩波稳定电路利用纹波抑制环路消除位于单级放大器输出端的纹波电压,以避免纹波电压导致后续电路的饱和问题[10]。斩波电路使用正反馈环路技术以提高输入阻抗,提高后端斩波放大器与传感器的分压比,并且负反馈环路用于稳定中频增益。斩波放大器主体核后级联的基于采样/保持原理的部分用于消除由于非理想的MOS开关引起的毛刺噪声,并且斩波放大系统的增益/带宽可以用数字方式进行调整。斩波放大电路基于功耗节省效率提高的电流复用单级放大主体核,并且放大主体单级核增益足够大,有利于抑制后续电路噪声[11]。设计的斩波放大电路,配合双模并行SOIMEMS神经信息检测器件,进行了放大电路关键指标的测试:等效输入噪声电压≤0.7μVrms(rootmeansquare)、数字可调增益范围71~82dB(4200~11200倍)、功耗是8.0μW/单通道、共模抑制比>110dB、电源抑制比>100dB等。
2.4.2SARADC模/数转换SARADC电路采用多级放大器级联自动归零去噪声、锁存去回踢噪声、最高位MSB电容拆分、电容阵列失配消除等技术,研发了一款转换速度适中的SARADC核,其关键参数是:等效量化位数(Effectivenumberofbits,ENOB)为12bits,当最大转换速度为1Msps时,芯片功耗为1.2mW,最大转换速度为1Msps,信噪比SNR为60.9dB、无杂散动态范围(Spuriousnoisefreedynamicrange,SFDR)73.7dB。SARADC使用了深N阱工艺,并且SAR数字控制部分进行单独隔离,防止数字抖动对模拟部分的干扰。最后,对流片后的ADC模块进行测试。结果表明,SARADC可完成放大后模拟神经电压的数字转换。
2.4.3ASK/FSK调制的射频发射利用直接上变频的ASK/FSK调制的射频电路结构,主要模块包括基于锁相环的频率综合器(Phaselockedloopfrequencysynthesizer,PLLFS)与E类的功率放大器(Etypepoweramplifier,PA)。设计的神经电可穿戴设备的感知节点需要布置在人体头部表面,需要使用电池供电;考虑系统复杂度与硬件成本,低功耗、高速率、高集成度是射频电路设计的目标。VCO(Voltagecontroloscillator)通过频率控制字进行频带的选择;此外,分频字进行分频器分频比的控制。PAE的输出功率通过功率控制字进行PAE输出幅度的控制,具有频谱纯净、易于集成、功耗低等特点。FSK调制通过关断锁相环内的开环VCO电容阵列,VCO的变容管电容随着控制电压改变而改变,进而改变输出信号的频率与相位。VCO通过增加电容阵列的数目来扩大VCO的调频范围,从而避免控制电压控制变容器引起的非线性问题。
2.4.4集成后的传感芯片系统、与商用设备&旧系统的对比本研究研发的神经电生理(动作/场电位)信号采集传感后端IC芯片与前端神经电生理探针匹配后集成,具有很小的体积,可以构建微型可穿戴神经检测设备[12]。与商用的Cerebus公司多通道神经电生理信号记录系统进行比较,此多通道神经电检测仪器对电生理信号检测的准确度为95%。由于本电路模块高度集成化,可用于构建神经信息可穿戴微型终端,并且芯片内部对数字逻辑部分进行基于单独隔离环的保护,以及利用深N阱工艺,以降低电路内部噪声。此传感芯片系统体积大大减小,具有便携可穿戴实际应用价值。
3实验部分
3.1实验动物、仪器与试剂
实验动物:健康野生型小鼠;实验试剂:0.9%生理盐水(石家庄四药公司),0.7%趵坦(国药集团化学试剂有限公司);实验仪器:脑立体定位仪,液压微推进器,BSA124S型电子天平(德国赛多利斯公司);MWD20型超纯水器(美诚公司,中国);数据分析软件:OfflineSorter动作电位分类软件(PlexonInC.美国)、NeuroExplorer神经信息分析软件(NexTechnologies,美国)。
3.2实验方法
对麻醉小鼠进行0.75%戊巴比妥钠腹腔注射,去掉头皮后在小鼠颅骨上开1.5mm×1.5mm窗口,并挑破电极进入处的硬神经膜。电极植入时通过大神经皮层进入海马区域,水平定位是(ML:2.01mm,AP:2.04mm)。将微电极阵列垂直固定在微推进器上,通过液压推进器以1.1μm/s的速度缓慢匀速推进微电极,分别到达3个植入深度后暂停120s,等待电流稳定后继续匀速推进。整个实验过程中电极尖端垂直行程为2.2mm,并停留记录在4个不同深度处,包含皮层到海马区不同深度的神经区结构。采用Ag|AgCl丝植入到小鼠神经皮层作为电化学参比电极(AP:2.0mm,ML:
2.01mm,DV:
.01mm)。MEA上的一个电化学位点连接Gamry电化学工作站,采用计时电流法检测神经内化学递质谷氨酸,施加恒电位+0.70V,采样频率为2Hz(采样间隔为0.50s)。
4结果与讨论
4.1皮层至海马区谷氨酸浓度变化
本实验电极覆盖皮层到海马区不同脑区深度的4个停留记录位置如图8所示。电极由皮层植入海马区过程中,使用计时电流法实时记录电流变化[13],并从立体定位仪上读取植入深度Z(图8)。
在植入初期,电极在皮层表面Z=0.20mm处停留足够长时间(90s),直至电流稳定在约15.19pA。图9A显示400s内电极由皮层(Z=0.70mm)植入到海马区(Z=1.80mm)过程中的电流变化,电极在每个标定深度处停留约40s,并在下降过程中保持匀速。植入过程中电流曲线出现两个明显的浓度台阶,说明谷氨酸在不同神经区分布的自然浓度差异。图9B显示4个不同深度神经区对应的谷氨酸浓度
变化趋势。为了减小计时电流法中非法拉第电流的影响,取Z=0.20mm处最后10s的扫描电流均值为神经颅内‘0′谷氨酸浓度对应的基底电流,电极稳定在某一具体深度后,计算氧化电流均值与该基底电流的差值,通过标定曲线灵敏度换算为该深度神经区的谷氨酸浓度。深度1对应神经区位于视觉皮层,谷氨酸浓度分别为(35.50±0.03)μmol/L、(37.80±0.27)μmol/L。深度3对应神经区位于海马CA1区,谷氨酸浓度分别为(84.50±0.31)μmol/L。深度4处的浓度谷值分别对应皮层与CA1区、CA1区与齿状回交接处的神经区。
4.2皮层至海马区电生理信号分析
利用OfflineSorter软件聚类分析记录到的神经动作电位(Spikes),得到单神经元的放电序列。图10A显示了神经皮层区和海马区典型通道1和3记录到的电生理信号。4个通道在皮层区记录到5种典型Spike,第3通道同时检测到两种不同类型的动作电位;而4个通道在海马区记录到3种典型Spike,其中第4通道同时检测到两种不同的动作电位。记录到的皮层区动作电位发放频率均值为2.10~10.67spikes/s,远大于海马区动作电位发放频率均值0.03~0.15spikes/s。目前,传统微透析法检测的海马区谷氨酸浓度为110~200μmol/L,略高于此微探针电极测量结果。神经电生理实验表明,该微电极上的多测量点可同时记录神经元不同层次的场电位[14],并很好地记录单个神经元的胞外神经动作Spike电位。微电极记录的皮层动作电位波形种类、发放频率均大于海马区细胞发放水平,说明皮层细胞活跃性和通讯复杂度大于海马区。对海马区的神经电生理记录中,现有文献报道采用膜片钳记录到的海马神经元自发放电主要分为5种类型,分别为不规则发放型、单波规则发放型、紧张发放型、阵发排放型及周期排放型[15],图10B为通道1记录到的同一种放电波形具有锥体细胞的簇状放电特性。
5结论
针对在体神经信息检测的实际需求,使用SOI衬底的MEMS技术制备了一种双通道植入式神经信息检测8通道微电极阵列芯片。此芯片在硅针基底上集成了铂金电化学微电极、电生理微电极、焊盘与引线等。采用纳米修饰、酶固定技术分别进行电生理位点、谷氨酸检测位点定向修饰。铂黑修饰后电生理检测位点阻抗比裸电极下降了一个数量级;谷氨酸位点在标准谷氨酸溶液内的线性度与单位面积灵敏度、反应时间、选择性均满足要求。基于研发的微电极阵列芯片对皮层至海马区的神经电生理与谷氨酸在体双模检测,实时测量到从皮层至海马区的谷氨酸动态释放和神经动作Spike发放,验证了植入式微电极阵列可实现谷氨酸递质、动作电位和场电位的并行在体检测,可为皮层到海马区神经通路的研究提供有效的MEMS植入神经传感探针。此外,基于传感后端处理芯片(斩波稳定神经电生理小信号放大、SARADC模数转换、编码器与射频发射)构建了一款低噪声低功耗的微型神经电生理信息可穿戴设备。
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AbstractA8channelneuralsignal′ssimultaneoustransducerdetectionmicrosystemwasdevelopedtoresearchtheneurallooplocatedatthebrainhippocampuszone.ThecomponentsofthesystemcontainedtheneuralprobemanufacturedwiththeMicroelectromechanicalsystems(MEMS)techniquebasedonsilicononinsulator(SOI)substrate,biologicallownoisechopperstabilizationamplifier,lownoiseandintermediatespeedSARADCconverter,reducedandlowpowerASK/FSKmodulationradiotransmitter.Themicrosystemwasapplicablewiththecharactersofsmallvolume,interferencesfree,neuralelectrophysiologyandneurotransmittersimultaneousdetection,highsensitivity,highlinearity,etc.Theelectroderesistancewasoptimizedto35.0kΩafterdepositingnanometerplatinumblackonthe4electrophysiologicalsitesonthePtelectrode.Withthemodificationenzymetechnique,nanomaterialenzymemembrane(PtmPDGluOx)wasdirectlyfixedontheglutamatedetectionlocusforselectivelydetectingspecialneuralneurotransmittermatter.Inaddition,theelectrochemistrymeasurementresultsindicatedthatthelinearrangeofglutamatewas6-35μmol/Lwithcorrelationcoefficientof0.97,thesensitivitywas0.0069pA/(μmol/L).Thecurrentresponseerrorwaslessthan3.0pA,whichshowedthattheneuralneedlesatisfieddifferentialselection.Also,thelogic/analogmixedsignal180nmApplicationspecificintegratedcircuit(ASIC)technique(SmicRF180nm1Poly6M)wasusedtomanufacturethetransducerbackenddisposingICchip,andthetestresultsprovidedsomekeyparameterssuchaschopperstabilizationamplifier(equivalentinputtingnoisevoltage≤0.7μVrms@1kHz,gainof71-82dB,CMRR/PSRR>100dB),SARADC(ENOBis12bits,powerconsumptionis1.2mWwhenmaxmiumconversionspeedis1Msps,signalnoiseratiois60.9dB,etc),andASK/FSKmodulationradiotransmitter(thePA′soutputtingpowerof4-5dBm,theradiationrangeof10meters).Themicroneuraltransducerintegratedsystemwasconvenientandwirelesswearablefortheresearchofbrainhippocampusregion.
KeywordsNeuralloop;Neuralimplantableneedle;Lownoiseandlowpowerintegrationsinglechip;Biologicalwearabledevice
1、中国一直以和谐为美,而真正的和谐是什么?就是在坚持不同声音、不同观点的前提下,对于他人的一种宽容,一种融入。其实这就是君子之道。
2、孔子说,“仁者不忧,智者不惑,勇者不惧”,内心的强大可以化解生命中很多很多遗憾。
3、现在中国文化需要上课的人,比需要下课的人多。
4、寓言也是对生活的一种诠释,它告诉我们,生活中真正的快乐是心灵的快乐,它有时跟外在的物质生活不见得有紧密的联系。孔子生活的时代,是一个物质极其贫匮的时代,在那个时代真正快乐的力量,也就来自心灵的富足,来自一种教养,来自对理想的憧憬,也来自同良朋益友间的切磋交流。
5、增强把握幸福的能力,正是学习的终极目的。
6、当一个不幸降临了,最好的办法就是让它尽快过去,这样你才会腾出更多的时间去做更有价值的事情,你才会活得更有效率,更有好心情。
7、安贫乐道,在现代人眼中颇有些不思进取的味道。在如此激烈的竞争面前,每个人都在努力发展着自己的事业,收入多少、职位高低,似乎成了一个人成功与否的标志。
8、勇敢是每临大事从容不迫,找到自己的出路。
9、理想主义与现实主义就是我们的天和地。只有当天地之气凝聚在一个人心中的时候,它才能够如此的强大。
10、我们永远也不要忘记天地给予我们的力量。什么叫天人合一?就是人在自然中的和谐。
11、童年的无知可爱,少年的无知可笑,青年的无知可怜,中年的无知可叹,老年的无知可悲。
12、人允许一个陌生人的发迹,却不能容忍一个身边人的晋升。因为同一层次的人之间存在着对比、利益的冲突,而与陌生人不存在这方面的问题。
13、现代的婚姻是情感的产物,更是竞争的结晶。
14、敌人变成战友多半是为了生存,战友变成敌人多半是为了金钱。
15、有所得是低级快乐,有所求是高级快乐。
17、世界上1%的人是吃小亏而占大便宜,而99%的人是占小便宜吃大亏。大多数成功人士都源于那1%。
18、人如果靠吃饭活着,那饭不叫饭,叫饲料。
19、中国人学美国人容易,中国人学中国人难。
20、一个人幸运的前提,其实是他有能力改变自己。
21、人的成长要接受四个方面的教育:父母、老师、书籍,社会。有趣的是,后者似乎总是与前面三种背道而驰。
22、经营自己的长处,能使你人生增值;经营你的短处,能使你人生贬值。
23、生命犹如一片绿叶,随着时间的流逝,慢慢变的枯黄,但他的叶脉还是那么清晰可见。
24、把事情变复杂很简单,把事情变简单很复杂。
25、如果是棵小草,即使在最好的企业里,你也长不成大树。果真如此,不如历经风雨,把自己培养成名贵花卉。
26、二十一世纪工作生存法则就是:建立个人品牌,把你的名字变成钱。
27、怕爹是孝顺,怕老婆是爱情。
28、没有不合格的学生,只有不合格的家长。
29、地球是运动的,一个人不会永远处在倒霉的位置。
30、我们可以躲开大家,却躲不开一只苍蝇。生活中使我们不快乐的常是一些芝麻小事。
31、有一种人只做两件事:你成功了,他妒嫉你;你失败了,他笑话你。
32、笨男人+笨女人=结婚;笨男人+聪明女人=离婚;聪明男人+笨女人=婚外情;聪明男人+聪明女人=浪漫爱情。
33、任何一个傻瓜都会引诱一个姑娘;但是知道怎样离开她只有成熟男人才能做到。
34、人有两只眼睛,全是平行的,所以应当平等看人;人的两只耳朵是分在两边的,所以不可偏听一面之词;人虽只有一颗心,然而有左右两个心房,所以做事不但要为自己想,也要为别人想。
36、失言就是一不小心说了实话。
37、真诚并不意味着要指责别人的缺点,但意味着一定不恭维别人的缺点。
38、人的本性就是贪婪,但没有贪婪社会就不会进步。
39、恋爱是想一个人的心,婚姻是拴一个人的心,爱情是吞一个人的心。
40、最好的进攻就是进攻自己。
41、人生的意义不在于拿一手好牌,而在于打好一手坏牌。
42、成功是一种观念,致富是一种义务,快乐是一种权利。
43、竞争,其实就是一种友谊,在对手的帮助下提高你的聪明度,害怕竞争的人已经输给了对手。
44、钱可以帮穷人解决问题,却帮富人制造问题。
45、把爱情投资在一个人身上,冒险;把爱情投资在许多人身上,危险。
46、世界上只有想不通的人,没有走不通的路。
47、真正的财富是一种思维方式,而不是一个月收入数字。
48、一个人想平庸,阻拦者很少;一个人想出众,阻拦者很多。不少平庸者与周围人关系融洽,不少出众者与周围人关系紧张。
49、婚后的男女莫不“喜出”“望外”。
50、三流的化妆是脸上的化妆;二流的化妆是精神的化妆;一流的化妆是生命的化妆。
51、“危机”两个字,一个意味着危险,另外一个意味着机会,不要放弃任何一次努力。
52、是英雄表现出来,是人才体现出来,是蠢才显现出来。
53、“总”要为爱人着想,“经”得起爱人唠叨,“理”应对爱人谦让,男人应当“总经理”。
54、三人行,必有我师,三剑客,必有一强,三角恋,必有一伤。
55、一个人的视力本有两种功能:一个是向外去,无限宽广地拓展世界;另一个是向内来,无限深刻地去发现内心。
56、该放下时且放下,你宽容别人,其实是给自己留下来一片海阔天空。
57、承认现实生活中的不足之处,并通过自己的努力去弥补这种不足。
58、从某种意义上说,一个人心中有什么,他看到的就是什么。
59、迷惑多是因为眼界不够大,井底之蛙怎么能知道什么叫海阔天空呢?
60、怀着乐观和积极的心态,把握好与人交往的分寸,让自己成为一个使他人快乐的人,让自己快乐的心成为阳光般的能源,去辐射他人,温暖他人,让家人朋友乃至于更广阔的社会,从自己身上获得一点欣慰的理由。
61、“神于天,圣于地”是中国人的人格理想:既有一片理想主义的天空,可以自由翱翔不妥协于现实世界上很多规则与障碍;(经典语录 )又有脚踏实地的能力,能够在这个大地上进行他行为的拓展。
62、中国哲学崇尚的是一种庄严、理性和温柔敦厚之美。
63、真正的和谐决不仅仅是一个小区邻里之间的和谐,也不仅仅是人与人之间的和谐,还包括大地上万物和谐而快乐地共同成长;人对自然万物,有一种敬畏,有一种顺应,有一种默契。
64、物质意义上的幸福生活它仅仅是个指标,而真正从内心感到安定和对于政权的认可,则来自于信仰。
65、只有真正的贤者,才能不被物质生活所累,才能始终保持心境的那份恬淡和安宁。
66、越是竞争激烈,越是需要调整心态,并且调整与他人的关系。
67、关爱别人就是仁慈,了解别人就是智慧。
68、在这个世界上最重要的人就是眼下你需要帮助的人,最重要的事就是马上去做,最重要的时间就是当下,一点不能拖延。
69、我们每一个人的一生中都难免有缺憾和不如意,也许我们无力改变这个事实,而我们可以改变的是看待这些事情的态度。用平和的态度来对待生活中的缺憾和苦难。
70、如果你因为错过太阳而哭泣,那么你也将错过星星。
71、仁者不忧,智者不惑,勇者不惧,内心的强大可以化解生命中的很多遗憾。
72、要做到内心的强大,一个前提是要看轻身外之物的得与失。
73、人最难认知的是自己的心。
74、只有自己的心清楚了,才能去善待他人。
75、不要因为世俗的标准而远离了自己的赤子之心。
76、在我们成长中一定有某种潜能从没有被开发出来。
77、心斋(审视内心、反躬自省)是认识自己、获得人生效率的好方法。
78、外在世界有多大,内心的深度就有多深。