一周学习计划精选(九篇)
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第1篇：一周学习计划范文
关键词：益气活血药；毛细血管密度；周细胞计数；心肌梗死；大鼠
DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2013.07.015
中图分类号：R285.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2013）07-0038-05
Change of Capillary Pericapillary Cells in Rats with Myocardial Infarction and Effect of Supplementing Qi and Activating Blood Circulation Herbs HUANG Kun， YANG Dan-dan， GUO Shu-wen， SUN Qing， ZHANG Lu， QI Xin， WAN Ting， ZHENG Cheng-long （Beijing University of Chinese Medicine， Beijing 100029 ， China）
Abstract：Objective To observe the change of capillary pericapillary cells in rats with myocardial infarction and the influence of supplementing qi and activating blood circulation herbs， and explore its mechanism of improving myocardial perfusion. Methods The rat model was established by ligaturing the left anterior descending coronary artery. On the base of ECG evaluation， successfully modeled rats were randomly divided into the model group， group treated with supplementing qi and activating blood circulation Chinese medicine （activating blood and supplementing qi group）， group treated with Perindopril （Perindopril group）， group treated with Tongxinluo Capsules （Tongxinluo group）. The sham-operation group was taken as the control. There were totally 5 groups. The model group and the sham-operation group were treated with normal saline. The changes of myocardial capillary density （MCD） and number of pericapillary cells on the 7th， 28th day after medicinal administration were observed. Results On the 7th and 28th day， the MCD decreased significantly and the number of capillary pericapillary cells increased significantly in the model group compared with the sham-operation group （P
Key words：supplementing qi and activating blood circulation herbs；myocardial capillary density；number of pericapillary cells；myocardial infarction；rats
研究显示，心肌梗死患者虽然经过搭桥或支架置入术后使梗死相关冠脉再通，或经冠脉造影证实已达TMI3级血流的梗
基金项目：国家自然科学基金（81173142）
通讯作者：郭书文，E-mail：
死相关血管，有超过25%的患者心肌组织水平的血流灌注并未恢复[1]。因此，减少缺血心肌再灌注损伤、保持心肌微血管的完整性、改善缺血心肌血供状态、恢复心肌细胞功能，是目前研究的热点问题。
前期的系列研究结果显示，益气活血方能明显促进大鼠缺血心肌微血管生成而改善心肌缺血，并能抑制心肌细胞凋亡，对相关蛋白及细胞因子有显著调节作用[2-4]。本研究采用结扎冠状动脉的方法建立大鼠急性心肌梗死后心衰模型，利用免疫组织化学方法观察模型大鼠心肌毛细血管周细胞的变化，以及益气活血中药对其的影响，进一步探讨益气活血中药改善心肌血流灌注的作用机制。
1 实验材料
1.1 动物
健康雄性SD大鼠，体质量（200±20）g，清洁级，8周龄，中国科学院动物研究所提供，许可证号：SCXK（京）2012-0001。
1.2 药物
益气活血药由黄芪、人参、当归、川芎、三七粉等组成。根据前期研究结果[5-6]选择益气活血药（2∶1）的剂量组合[5-6]。依口服剂工艺制备，按处方比例称取中药材，加9倍量水，煎煮2次，每次2.5 h，共5 h，水煎液过滤，浓缩，加乙醇调含醇量至50%，过滤，回收乙醇，过滤，调整浓度为相当原药材2 g/mL，北京中医药大学药厂提供。
对照药物选用通心络胶囊，石家庄以岭药业股份有限公司生产，批号110723-120116；培哚普利片，施维雅（天津）制药有限公司，批号P2009971052951。
1.3 试剂与仪器
BA3414 兔抗鼠CD34抗体（武汉博士德生物工程有限公司产品），BM0002小鼠抗α-SMA抗体（武汉博士德生物工程有限公司产品），血清内皮素-1（ET-1）、一氧化氮（NO），南京建成生物工程公司提供。RSP1002型小动物呼吸机（Kent Scientific Corporation）。
2 实验方法
2.1 造模
采用左冠状动脉前降支结扎方法[7]。用1%戊巴比妥钠腹腔注射（40 mg/kg）麻醉后，背位固定，行气管插管，连接小动物呼吸机，在左侧第3、4肋间切开皮肤，钝性分离肌层，打开胸腔，用开胸器推开胸腺扩大手术视野，充分暴露心脏，用带线缝合针在左心耳与肺动脉圆锥之间于左心耳下约2 mm处，无张力的状态下将左前降支连同少量的心肌组织一起结扎，然后迅速将心脏复位，关闭胸腔。全部手术过程在30 min内完成，严格无菌操作。术后连续3 d肌肉注射青霉素预防感染。以结扎部位以下心肌变灰白、搏动减弱、心电图肢体导联出现ST段弓背向上明显抬高为造模成功的标志。假手术组手术过程相同，仅绕过左冠状动脉，打松结。
2.2 分组与给药
将大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组、中药组、培哚普利组、通心络组。
各组于造模的第1日开始分别灌胃相应药物，每日1次。通心络组每日给予通心络胶囊30 mg/kg体质量，培哚普利组每日给予培哚普利片0.72 mg/kg体质量，益气活血组每日给予益气活血中药21 g/kg体质量[5-6]。各干预药物均溶于无菌蒸馏水中，在保证药物剂量的前提下，调整浓度使每只动物给药容积均为10 mL/（kg・d）。假手术组和模型组每日以相同容积无菌蒸馏水灌胃。连续灌胃28 d。
2.3 标本采集
称取大鼠体质量，用1%戊巴比妥钠麻醉，剪开腹腔，从腹主动脉取血，分离出血清待测。然后剪断肋骨和胸肌，暴露胸腔取出心脏，用生理盐水洗去血污，剔除血管、脂肪等非心肌组织，从左心室最大横径处切开，将切好的下半部分心脏放入预先准备的4%多聚甲醛液中固定备用，进行常规组织学方法处理，制作石蜡切片。据各组大鼠在实验过程中的成活数量分别观察第7、28日2个时间点指标的变化情况。
2.4 心肌病理形态学观察
将心肌组织用不同浓度酒精梯度脱水，二甲苯透明，浸蜡、包埋、切片，脱腊，二甲苯透明，HE常规染色，梯度酒精脱水，二甲苯透明，树胶封固，光学显微镜观察。
2.5 心肌毛细血管密度
石蜡切片脱蜡至水；3%过氧化氢室温孵育8 min，以消除内源性过氧化物酶的活性；蒸馏水冲洗3次（每次2 min），电炉加热沸腾后断电，间隔7 min，反复2次，冷却后PBS（pH 7.2～7.6）洗涤2次，滴加5%牛血清白蛋白封闭液，室温20 min，甩去多余液体，滴加CD34一抗（浓度为1∶100），4 ℃过夜，第2日早晨滴加生物素山羊抗小鼠IgG，室温20 min，PBS洗3次（每次2 min），滴加SABC，室温20 min，PBS洗4次（每次5 min），DAB显色，取1 mL蒸馏水，A、B、C试剂各加1滴，混匀后加至切片，室温显色，镜下控制时间，蒸馏水冲洗，苏木素轻度复染，1～2 s即可，梯度酒精脱水干燥，二甲苯透明，中性树胶封固。
2.6 免疫组化染色法检测周细胞
石蜡包埋，切片（厚度4 ?m，每只鼠各取3张切片），脱蜡，高温高压抗原修复，喷气后计时2 min，自然冷却，水洗。4 ℃下于1∶300 α-SMA单克隆抗体孵育24 h，每张切片滴加50 ?L EnVisionTM试剂，室温下孵育30 min。滴加新鲜配制的显色剂（DAB），苏木素复染。显微镜下观察，胞浆显棕黄色者为阳性细胞。按下法计数：先在100×视野下随机选择血管密度高的5个区和血管密度低的5个区作为计数部位，后在400×视野下计数微血管旁胞质出现棕黄色颗粒的周细胞数，每只大鼠计数20个视野，最后以平均每个视野（400×）的周细胞数表示。小动脉平滑肌细胞亦为α-SMA阳性表达，根据血管壁厚度及结构可与周细胞相区别，此类阳性细胞不在计数范围内。
2.7 血清内皮素-1、一氧化氮测定
采用双抗体夹心ELISA法测定各组大鼠血清ET-1、NO的变化，具体方法严格按试剂盒说明操作。根据各组大鼠在实验过程中的成活数量分别观察第7、28日2个时间点指标的变化情况。
3 统计学方法
用SPSS16.0统计软件进行分析。一般资料采用描述性分析，计量资料以―x±s表示，计数资料以频数及百分数描述；多个样本计数资料用χ2检验，计量资料符合正态性分布采用t检验，如不符合正态性分布采用非参数检验，比较各项指标在治疗前后之间的差异，多组间差异性统计采用方差分析，若方差不齐，则用Games-Howell分析，双侧检验。P
4 结果
4.1 模型建立情况
采用冠状动脉结扎法致大鼠急性心肌梗死后，肢导Ⅱ导联心电图ST段呈弓背向上抬高，缺血心肌很快变苍白色。共手术100只，造模成功81只，死亡19只，其中手术中死亡8只，急性心肌梗死造模成功后24 h内死亡3只，给予药物治疗后死亡3只，注射麻药后行心脏超声检查后死亡5只，死亡原因为呼吸停止、室颤和大出血，造模成功率81.0%。第7日观察大鼠42只，第28日观察大鼠39只。
4.2 各组大鼠心肌形态学观察
第7日：假手术组大鼠心外膜未见纤维素渗出及未见炎细胞浸润；模型组心肌梗死区炎症反应明显，有泡沫状组织细胞聚集，大量中性粒细胞浸润，心肌纤维断裂、排列紊乱，坏死的心肌组织由新生的肉芽组织取代；梗死区边缘有充血、出血及炎细胞带，心外膜有炎性及纤维素性渗出物。培哚普利组病理改变与模型组相似，但病变范围较模型组明显减小。通心络组病理改变与模型组相似，但病变范围较模型组明显减小，较培哚普利组病变范围小。益气活血组病理改变与模型组相似，但病变范围较模型组明显减小，较培哚普利组及通心络组病变范围较小。见图1。
第28日：假手术组大鼠心外膜未见纤维素渗出及未见炎细胞浸润。模型组大鼠心肌梗死区由纤维母细胞、纤维细胞及致密的胶原纤维束组成，呈束状或平行排列，胶原纤维束之间有极少残存的心肌组织，炎性细胞浸润明显减少，地图状瘢痕组织形成；心室腔扩大，室壁变薄。培哚普利组大鼠病理改变与模型组相似，但病变范围较模型组明显减小，且梗死区有岛状或细带状的心肌组织。通心络组大鼠病理改变与模型组相似，但病变范围较模型组明显减小，且梗死区有岛状或细带状的心肌组织，但较培哚普利组病变范围大。益气活血组大鼠病理改变与模型组相似，但病变范围较模型组明显减小，且梗死区有岛状或细带状的心肌组织，但较培哚普利组病变范围大。见图2。
假手术组 模型组
益气活血组 培哚普利组 通心络组
图1 第7日HE染色大鼠心肌病理形态（×50）
假手术组 模型组
益气活血组 培哚普利组 通心络组
图2 第28日HE染色大鼠心肌病理形态（×100）
4.3 益气活血中药对心肌梗死大鼠血清内皮素-1、一氧化氮水平的影响
与假手术组比较，模型组大鼠血清ET-1含量明显升高，NO水平下降（P
表1 各组大鼠血清ET-1、NO水平比较（―x±s，pg/mL）
组别 术后第7日 术后第28日
只数 ET1 NO 只数 ET1 NO
假手术组 10 5.37±1.06 31.12±2.57 9 6.38±1.73 30.38±4.00
模型组 7 13.67±1.68## 19.41±3.24## 7 14.60±2.38## 16.23±3.05##
益气活血组 9 8.06±1.21** 41.71±4.43** 8 8.97±1.07** 40.11±5.51**
培哚普利组 8 10.65±1.12** 33.02±2.68** 8 7.30±1.37** 45.26±6.60**
通心络组 8 9.87±0.73** 37.76±3.34** 7 9.57±1.57** 35.06±5.20**
注：与假手术组比较，##P
4.4 益气活血中药对心肌梗死大鼠毛细血管密度的影响
在病理图像分析系统下测定各组大鼠心肌梗死边缘区平均毛细血管密度（MCD）。第7日：模型组较假手术组心肌梗死边缘区MCD明显降低（P
表2 各组大鼠心肌MCD比较（―x±s）
组别 n 第7日 第28日
假手术组 20 612.79±33.35 611.11±25.67
模型组 20 533.67±20.27## 493.27±19.38##
益气活血组 20 1178.50±33.27** 1051.30±30.12**
培哚普利组 20 1010.10±33.27** 1099.30±33.98**
通心络组 20 1094.30±33.12** 974.75±35.41**
4.5 益气活血中药对心肌梗死大鼠毛细血管周细胞计数影响
第7日：模型组较假手术组心肌梗死边缘区周细胞计数明显增加，益气活血中药组、培哚普利组、通心络组与模型组比较，梗死边缘区的周细胞计数减少（P
表3 各组大鼠心肌周细胞计数比较（―x±s，个）
组别 n 第7日 第28日
假手术组 20 0.8±0.84 1.2±0.84
模型组 20 8.2±1.30## 14.0±1.58##
益气活血组 20 4.2±0.84* 4.4±1.14**
培哚普利组 20 5.8±0.84** 3.6±1.14**
通心络组 20 4.4±0.55** 5.8±1.30**
注：与益气活血组比较，P
P
5 讨论
临床研究表明，急性心肌梗死患者多存在“气虚血瘀”的中医病理[8]。实验的中药组方中，生晒参、黄芪大补元气、广益五脏，针对气虚的主要病机；三七、川芎、当归为臣，活血通络、止血消瘀。诸药相合，气行则血行，血行则气实，诸药合用，标本兼治，相得益彰，共奏益气活血、化瘀通络之功效。
冠脉微血管结构完整性与功能正常，是确保心肌收缩力储备和局部功能恢复的先决条件，是心肌存活的必备条件，当发生微小动脉和阻力血管的功能及结构变化时，冠脉血流速率和血流储备的变化可引起心肌缺血。低灌注梗死区和正常心肌之间的慢复流区域毛细血管内皮肿胀、突出甚至脱落，受周边的坏死组织压迫，毛细血管内皮细胞功能和结构完整性受损，心肌毛细血管周细胞功能失调。血管壁在结构上由血管内皮细胞和血管周围细胞组成，它们分别构成血管的内外壁。周细胞又叫壁细胞，可以分化为巨噬细胞、脂肪细胞、软骨细胞、平滑肌细胞等，具有收缩能力，从而调节微循环的灌流量和通透性[9-10]。
有研究显示，早期心肌缺血缺氧性坏死中周细胞数量在4 h后明显增多，12 h后开始下降，48 h后显著低于正常水平，推测周细胞作为心肌中的间质细胞可能是心肌纤维化发生发展中的主要效应细胞[11]。本实验结果表明，使用益气活血中药后，毛细血管周细胞的计数减少，与模型组比较差异有统计学意义（P
本实验结果显示，益气活血组较模型组心肌梗死边缘区域MCD明显增加，可见周细胞对毛细血管生长起到调控的作用。研究发现新生血管的生长和维持主要由周细胞的募集和分化所推动[12-13]。周细胞募集并伴随发生基底膜重塑[14-15]。可见，周细胞的募集对血管新生是必不可少的。
此外，益气活血中药可提升内皮分泌NO水平，并相应降低ET-1水平。NO和ET-1是由血管内皮细胞分泌的一对作用相反的血管活性分子，NO的含量与生物活性的变化能够反映内皮功能的状态。与益气活血组模型组比较，ET-1下降，NO升高，说明益气活血中药具有保护血管内皮功能的作用。
总之，益气活血中药可以通过降低心肌梗死大鼠毛细血管周细胞计数，维持血管的相对完整性，改善局部微循环的血流，减少梗死面积，并促进血管新生，调节NO/ET-1的平衡，从而达到改善局部心肌血供的目的。
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第2篇：一周学习计划范文
【摘要】 目的对亚洲带绦虫膜联蛋白B2(Annexins B2)进行克隆表达及免疫学初步研究。方法利用在线生物信息学工具从亚洲带绦虫成虫cDNA文库中筛选出Annexins B2基因，并将该基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中，在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达，表达产物通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定，重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化，纯化的重组蛋白用Western blotting进行免疫学分析。结果PCR、双酶切及重组质粒DNA测序均显示重组体构建成功，并得到高纯度的蛋白，且该重组蛋白可被亚洲带绦虫、猪带绦虫及牛带绦虫患者的血清识别。结论亚洲带绦虫成虫Annexins B2基因可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达。
【关键词】 亚洲带绦虫;膜联蛋白B2;基因克隆;免疫反应性
ABSTRACT: ObjectiveTo clone and express the gene named as Annexins B2 of Taenia saginata asitica so as to analyze the immunogenicity of its recombinant protein.MethodsBy online analysis of the gene at bioinfomatics websites to identify the gene from the Taenia saginata asiatica full-length cDNA plasmid library， the gene was cloned into prokaryotic expression vector pET-28a(+) and then transformed to E.coli BL21 with IPTG induction. Thereafter， the gene product was analyzed by SDS-PAGE and purified by Ni-NTA affinity chromatography. In addition， the immunoreactivity of the purified recombinant proteins was analyzed by Western blotting.ResultsAs demonstrated by PCR， double enzyme digestion and DNA sequencing indicated that the recombinant plasmid was successfully constructed and highly expressed. The recombinant protein tested with Western blotting analysis could react with Taenia asiatica and Taeniarhynchus saginatus infected patient serum.ConclusionThe Annexins B2 of Taenia saginata asitica has been cloned and expressed in the prokaryotic expression system and the purified protein has been confirmed with immunogenicity.
KEY WORDS: Taenia saginata asiatica; Annexins B2; gene cloning; immunoreactivity
鉴于亚洲带绦虫与猪带绦虫及牛带绦虫在起源、分类学地位存在的差异[1-2]，本课题组率先构建亚洲带绦虫成虫全长cDNA质粒文库，并对该虫进行功能基因组的研究工作[3]。本文利用生物信息学工具从文库中筛选到了一个膜联蛋白B2(Annexins B2)的同源基因，构建了原核表达载体，并对其原核表达产物进行免疫学方面的初步研究。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1血清、载体与菌株3种人体带绦虫患者血清取自粪检阳性的带绦虫患者。原核表达质粒pET-28a(+)及大肠埃希菌BL-21/DE3由中山大学热带病防治教育部重点实验室惠赠。
1.1.2主要试剂和工具酶Ex Taq酶(含dNTP)，BamHⅠ，XhoⅠ，T4 DNA连接酶 (大连宝生物工程公司);异丙硫代-β-D半乳糖苷(IPTG)(美国Promega公司);质粒纯化试剂盒(广州东盛科技公司);辣根过氧化物酶标记的山羊抗猪IgG二抗、兔抗人二抗、3，3二氨基联苯胺(DAB)显色试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司);氯化钙、氯化钠等为国产分析纯试剂。
1.2方法
1.2.1Annexins B2基因的识别及扩增将获得的亚洲带绦虫Annexins B2基因进行BLASTX分析。并根据已获得的该基因全长编码序列的开放阅读框，利用软件设计引物(引物由上海联合基因公司合成)，分别带上BamHⅠ和XhoⅠ的酶切位点进行PCR反应。
1.2.2重组原核表达质粒的构建及鉴定PCR产物和pET-28a(+)载体分别用BamHⅠ和XhoⅠ双酶切，回收、连接后转入大肠埃希菌BL-21/DE3感受态细胞，对阳性克隆依次进行质粒的提取、双酶切和PCR鉴定，并进行重组质粒DNA测序鉴定(测序由英俊科技股份有限公司完成)。
1.2.3重组蛋白的表达及纯化按照常规方法进行蛋白诱导表达，考马斯亮兰蛋白染色液染色观察蛋白表达情况。确定蛋白表达后，进行大量的诱导表达，并判断重组蛋白的可溶性，再将样品加入预先处理好的Ni-IDA His.Bind树脂亲和层析纯化柱中，最后再用PBS 24h透析以去掉过柱时留下的咪唑。
1.2.4Western blotting分析重组蛋白的免疫反应性用3种人体带绦虫患者及正常人血清与辣根过氧化物酶(HRP)标记的兔抗人IgG进行Western blotting鉴定。
2结果
2.1Annexins B2基因的识别和序列分析该基因全长922bp，编码区为224～686bp。其最大ORF为其完整编码区。
2.2原核重组质粒的鉴定将重组质粒进行PCR和双酶切鉴定，产物行0.8g/L琼脂糖凝胶电泳。结果显示在500bp左右有一清晰条带，与目的基因大小基本相符。此外，重组质粒的测序报告表明插入序列与理论序列一致，证明重组质粒构建成功(图1)。
2.2蛋白表达及纯化结果将构建好的重组质粒转化到E.coli BL/DE3中，超声裂解后SDS-PAGE电泳分析结果显示在大约25ku处出现高效表达条带(图2)，与目的蛋白基本相符。测得纯化产物的蛋白浓度为0.526g/L。
2.3Western blotting鉴定纯化蛋白的免疫反应性
用感染亚洲带绦虫、猪带绦虫、感染牛带绦虫的患者血清以及亚洲带绦虫感染猪的血清与纯化蛋白反应的结果均显示出较清晰的条带，而阴性对照血清在相应位置未识别出该蛋白条带(图3)，表明该表达产物具有良好的免疫反应性。图1重组质粒的PCR和双酶切鉴定
Fig.1 The identification of the pET-28a(+)-Ta Annexins B2 by PCR amplification and digestion with restriction enzymesM1：DNA标准(DL2000);1：PCR产物;2：pET-28a(+)质粒双酶切;3：pET-28a(+)-Annexins B2重组质粒双酶切;M2：DNA标准(DL 15000)。图2100g/L SDS-PAGE分析pET-28a(+)-Ta Annexins B2在大肠埃希菌中的表达产物及其纯化产物Fig.2 100g/L SDS-PAGE analysis of the prokaryotic expression product and purified product
M：蛋白Marker;1：pET-28a(+)IPTG未诱导;2：pET-28a(+)IPTG诱导;3：pET-28a(+)-Annexins B2 IPTG未诱导;4：pET-28a(+)-Annexins B2 IPTG诱导;5：pET-28a(+)-Annexins B2上清;6：pET-28a(+)-Annexins B2沉淀;7：pET-28a(+)-Annexins B2纯化蛋白。
3讨论
带绦虫病的流行在我国西部一直是一个严重的公共卫生问题。每年由带绦虫病造成的健康和畜牧业经济损失上百亿，严重影响西部欠发达地区的社会发展。目前，亚洲带绦虫病的防治研究的重点集中在诊断和疫苗候选抗原、药物靶标、致病的分子机制研究。图3重组蛋白的Western blotting 鉴定Fig.3 Western blotting analysis of the recombinantsM：蛋白Marker;1：纯化蛋白与亚洲带绦虫患者血清的反应结果;2：纯化蛋白与牛带绦虫患者血清的反应结果;3：纯化蛋白与猪带患者血清的反应结果;4：纯化蛋白与亚洲带绦虫感染猪血清的反应结果;5：纯化蛋白与正常人血清的反应结果。
本实验通过生物信息学方法从已经构建好的亚洲带绦虫成虫cDNA质粒文库中筛选出了一个膜联蛋白(Annexins B2)的同源基因，并且预测出该基因位于胞浆，无跨膜区，二级结构基本上是以α螺旋为主。这些都符合膜联蛋白家族的共同特征[4]。根据膜联蛋白家族分布广泛，表达丰富且稳定的特性，可以推测其在绦虫的生理活动中可能起着重要的作用。
膜联蛋白是一个广泛存在的蛋白家族，在所有真核基因组中广泛表达。具有内部重复单位和“G-X-G-T-(38residues)-D/E”基序[5]，即Ca2+结合区域的特征，用以结合带有负电的脂质。虽然它为钙结合蛋白，但是在结构上却没有EF手，而且在和Ca2+结合后，还可以与磷脂再次结合而发挥生物学效应。例如，细胞的胞吞胞吐，离子通道的形成，调节磷脂酶A2的活性及细胞内外Ca2+浓度、抗炎症反应等。在长期的生物进化过程中，膜联蛋白家族各成员在生物学特性和生理功能方面表现出非常复杂的关系，且在研究过程中发现，annexins没有信号肽，没有跨膜结构，是一个典型的细胞内蛋白。但是，却有学者发现它可以与细胞外基质发生作用。例如，抗炎[6]、抗凝[7]、抑制肿瘤[8]等。最新的研究报道，当将其作为疫苗的候选因子时，可以消除一些寄生于哺乳动物体内的寄生虫。此外，学者们认为膜联蛋白是维持细胞膜表面结构和信号转导功能的重要蛋白。并可能具有激活纤维蛋白酶原的功能，有助于破坏宿主的结缔组织，使虫体抗原更加容易进入宿主机体，诱发免疫应答。因此，对该基因的研究有助于进一步了解它的生物学功能及开辟预防治疗寄生虫病的新途径[9-10]。
目前，Annexins B2已经在猪囊尾蚴的研究被发现并命名，但是具体的生理功能还不清楚，且在亚洲带绦虫研究领域还是空白。因此，本研究将亚洲带绦虫成虫annexins克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中，构建重组质粒，在大肠埃希菌BL-21/DE3中用IPTG诱导表达，表达产物通过SDS-PAGE电泳进行鉴定。SDS-PAGE结果表明，该蛋白在全菌和沉淀中都有表达，上清中有微量的表达，说明annexins主要表达在包涵体中。因此，进一步溶解包涵体[11]，经变性处理并亲和层析纯化后，得到了大量较纯的重组蛋白。此外，还尝试性的用上清过柱纯化并用蔗糖进行蛋白浓缩，也得到部分有活性的蛋白。Western blotting就是以抗体-抗原沉淀反应为基础的，可用于不同抗原的比较和定量。其检测结果表明所获得的重组蛋白与猪带绦虫、牛带绦虫及亚洲带绦虫有较强的交叉反应且在绦虫中的诊断特异性不高，推测其不能作为免疫诊断抗原的合适候选分子。但是，其具有免疫活性的高效表达。由此可推测它是一个具有开发潜力的基因。总之，本项研究填补了该蛋白在亚洲带绦虫研究领域的空白，也为进一步研究该基因的生物学功能及在诊断尤其是疫苗研究方面奠定了基础。
参考文献
\[1\]包怀恩. 我国亚洲带绦虫研究的现状和展望 \[J\]. 热带医学杂志， 2002， 2(3):215-219.
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\[6\]高奋堂，曹云山，徐义先，等. 氟伐他汀对人外周血单个核细胞膜联蛋白A1表达水平的影响 \[J\]. 临床心血管病杂志， 2006， 22(4):209-211.
\[7\]王义会，闫强，王平，等. 膜联蛋白B2基因的克隆及其真核表达载体的构建 \[J\]. 动物医学进展， 2007， 28(3):31-33.
\[8\]朱逢佳，曾苏，曹江. 膜联蛋白-1与肿瘤\[J\]. 细胞生物学杂志， 2008， 30(5):581-585.
\[9\]ZHANG Y， WANG KH， GUO YJ， et al. Annexin B1 from Taenia solium metacestodes is a newly characterized member of the annexin family \[J\]. Biol Chem， 2007， 388(6):601-610.
第3篇：一周学习计划范文
关键词：慢性乙型肝炎；外周血；T淋巴细胞；共刺激分子；表达变化
慢性乙型肝炎源于机体细胞免疫功能紊乱，不能有效清除体内病毒，其中T淋巴细胞在主导机体免疫功能方面发挥着重要的作用[1]。笔者主要探讨慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞表面共刺激分子的表达变化及临床意义，将结果报告如下：
1 资料与方法
1.1一般资料 本次选取的40例研究对象均为南昌大学第一附属医院于2013年4月～2015年1月收治的慢性乙型肝炎患者作为观察组，所有患者均知情同意，其中男29例，女11例，年龄37～68岁，平均年龄（45.3±5.6）岁；职业：教师16例、农民工4例、企业高管8例、退休在家12例。所有患者经检查，均符合慢性乙型肝炎的诊断标准，排除神经系统障碍、严重心脑血管疾病、全身免疫系统疾病、凝血及造血功能障碍、甲型肝炎、丙型肝炎、丁型肝炎等患者。同时选取健康患者39例作为对照组，其中男30例，女9例，年龄36～69岁，平均年龄（45.8±5.7）岁；职业：教师15例、农民工5例、企业高管9例、退休在家11例。两组患者在性别、年龄等资料方面无显著差异（P>0.05），具有可比性。
1.2方法
1.2.1试剂 在测定过程中，需要用到的试剂：鼠抗人CD3-APC、CD8-FIT、CTLA-4-PE、PD-1-PE荧光素标记单克隆抗体，LgG-FITC、lgG-PE、lgG-APC同型对照融血剂，由美国BD公司提供；另外需要乙型肝炎病毒及耐药突变检测试剂盒、HBV标志物检测试剂盒、ALT检测试剂盒。
1.2.2仪器 流式细胞仪、扩增仪、高速冷冻离心机、全自动生化分析仪、全自动酶免分析仪、低温冰箱。
1.2.3测定 外周血T淋巴细胞表面共刺激分子检测具体方法：患者晨起空腹抽取外周静脉血3 ml，抗凝混匀后分别置于5支不同的测定管中：其中第一管加入CD3、CD8、CD28，第二管中加入单抗CD3、CD8、CTLA-4，第三管中加入CD3、CD8、PD-1，第四管中加入单抗CD3、CD8、Tim-3，第五管中加入lgG-FTTC lgG-PE lgG-APC作为同型对照管，所有试管中均加入单抗20 μl，摇匀后在常温下状态下放置30 min，然后加入新鲜配置的溶血剂摇匀，在光线暗处放置15 min并离心5 min，使用磷酸盐缓冲液进行3次洗涤，并且每管中加入0.3 ml PBS，在4°C中放置后在1 d内检测。为了使结果更加精准，辅助测定方法：并采用定时荧光定量PCR检测技术测定血清中HBV（乙型肝炎病毒）、DNA（脱氧核糖核酸）含量；采用双抗体夹心时间分辨荧光免疫分析法检测乙型肝炎病毒；采用全自动生化分析仪监测丙氨酸转氨酶含量。
1.3观察指标 将观察组分为为治疗组、治疗无效组、治疗有效组，与对照组作比较。分析两组患者外周血T淋巴细胞亚群相对表达量[2]。分析两组患者外周血T淋巴细胞亚群绝对表达量[3]。
1.4统计学方法 采用SSPS 20.0软件进行数据的处理与分析，表示计量数据资料，采用t检验，（%）表示计数资料，并进行χ2检验，P
2 结果
2.1患者外周血T淋巴细胞亚群相对表达量分析 观察组三组CD4*、CD8*T淋巴细胞亚群绝对表达量均明显下降，低于对照组 （P
2.2患者外周血T淋巴细胞亚群绝对表达量分析 CD8*T淋巴细胞亚群绝对表达量明显高于对照组。另外未治疗组、治疗无效组CD4*/CD8*比值明显高于治疗有效组、对照组（P
3 讨论
与对照组相比较，观察组CD4*、CD8*等表达量出现明显下降，另外未治疗组CD4*、PD-1*表达量明显高于对照组、治疗有效组、治疗无效组。总体而言，观察组CD4*T淋巴细胞亚群相对表达量、绝对表达量均明显低于对照组，但是CD8*T淋巴细胞亚群相对表达量升高，绝对表达量下降。研究表明，共刺激分子的绝对表达量更能反应患者的免疫功能状态[4]。
综上所述，进行共刺激分子表达变化研究可以为慢性乙型肝炎治疗提供一定的依据，为深入评价细胞免疫功能提供了新的研究角度。
参考文献：
[1]宋华峰.负性共刺激分子BTLA/HVEM在慢性乙肝患者外周血T细胞上的表达特性及其临床意义[D].江苏：苏州大学，2014.
[2]王琳.外周血T细胞免疫功能与乙肝慢性化的相关性研究[D].江苏：苏州大学，2014.
[3]曹丽娟.负性共刺激分子在慢性乙肝患者外周血Treg的表达特性及其临床意义[D].江苏：苏州大学，2013.
第4篇：一周学习计划范文
胞、Th1/Th2比值、IL17+Th17细胞的量及平均荧光强度、培养上清中IL17水平均低于治疗前， 而与健康对照组相比无统计学意义(P>0.05)， 且联合治疗组降低的幅度均大于MTX治疗组; 治疗前后Th17细胞的量与C反应蛋白(CRP)、 疾病活动指数(DAS28)的消长呈正相关(P
【关键词】 关节炎 类风湿 流式细胞术 依那西普 Th亚群 Th17细胞
依那西普(etanercept)是II型肿瘤坏死因子(tumer necrosis factor， TNF)受体P75的细胞外部分和人IgG1的Fc段基因工程融合的蛋白二聚体(rhTNFR: Fc)， 可特异性阻断TNFα与其细胞表面受体的相互作用， 实验证实抗TNFα治疗可明显改善类风湿关节炎(rheumatoid
arthritis， RA)患者的病情［1］。TNFα除了在RA免疫发病及炎症过程中发挥重要作用外， 尚促进IL2、 集落刺激因子(colonystimulating factor， CSF)和INFα等细胞因子的产生， 增加高亲和力IL2受体的表达， 促进T细胞增殖［2］， 推测抑制TNFα可能对T细胞及其亚群有下调作用。本研究中分离依那西普治疗前后RA患者及健康人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells， PBMC)， 用细胞内细胞因子染色流式细胞术(FCM)测定Th1、 Th2及Th17细胞的表达和ELISA法测定培养上清中相应的细胞因子水平并与患者病情进行相关性分析， 旨在探讨依那西普治疗RA对Th细胞亚群的影响， 进一步探讨此疗法的免疫机制。
1 材料和方法
1.1 材料
依那西普冻干粉针剂(etanercept， 商品名益赛普) 由上海中信国健药业有限公司生产。PerCP小鼠抗人CD4单克隆抗体(mAb)IgG1、FITC抗人IFNγmAb IgG1/PE抗人IL4 mAb IgG1及同型对照IgG1、Cytofix/ Cytoperm液及Perm/Wash液、流式细胞仪均购自美国BD公
司。FITC抗人IL17mAb IgG1及同型对照IgG1购自美国Ebioscience公司。淋巴细胞分离液购自天津TBD生物技术发展中心。佛波酯(phorbol 12myristate13acetate， PMA)、 离子霉素(Ionomycin)、 莫能菌素(Monensin)购自美国Sigma公司， RPMI1640培养液购自美国Gibco公司。抗人IL4 ELISA试剂盒、 抗人IFNγ ELISA试剂盒购于美国R&D公司。抗人IL17 ELISA试剂盒购于美国Ebioscience公司。
1.2 方法
1.2.1 RA患者的分组及处理方法
20例RA患者(男6例， 女14例， 年龄25～67岁， 平均42岁)， 为200611/200705在西京医院门诊或住院RA
患者， 均符合美国风湿病协会(ACR)1987年RA分类标准， 病程为2～20年(平均9年)。20例患者均为活动期中重度患者， 表现为6个或6个以上的关节肿胀; 6个或6个以上的关节触痛; 并有以下3条标准中的任意2条: (1)晨僵持续时间≥45 min; (2)血沉≥28 mm/h; (3)C反应蛋白(CRP)≥20 mg/dL。患者均已服用稳定剂量的甲氨蝶呤(MTX， 每周7.5～15 mg)4周， 且未使用MTX以外其他病情缓解抗风湿药(DMARDs)。患者随机分为2个治疗组， 每组10例。联合治疗组， 给予MTX 7.5～15 mg口服， 每周1次， 同时给予皮下注射依那西普， 每次25 mg， 每周2次; MTX治疗组， 为单用等量MTX治疗; 疗程均为12周。另设年龄、 性别匹配的健康献血员10名作为正常对照。
1.2.2 RA患者病情活动性及疗效评价指标
记录晨僵时间， 采用目测模拟标尺评价休息痛(VAS)， 计数压痛关节数、 肿胀关节数(包括双手近端指间关节、 掌指关节、 腕关节、 肘关节、 肩关节及膝关节， 共28个关节)， 记录健康评估指数(HAQ)平均分， 魏氏法测ESR， 免疫比浊法测C反应蛋白(CRP)， 并计算疾病活动指数(DAS28)。
1.2.3 标本采集及细胞分离
分别抽取治疗前、治疗12周后RA患者和健康对照组外周静脉血5 mL， 采用肝素钠抗凝， Ficol1密度梯度离心法分离PBMC， 调整PBMC密度为1×109/L， 悬浮于含100 mL/L胎牛血清的RPMI1640培养液中， 同步取1 mL细胞悬液， 进行细胞内细胞因子染色FCM测定Th细胞亚群; 取2 mL细胞悬液加入PMA(50 μg/L)、离子霉素(1 μmol/L)置于37℃孵箱中培养过夜， 收集上清置于-70℃冻存待ELISA检测。
1.2.4 细胞内细胞因子染色FCM测定Th细胞亚群 取上述PBMC悬液(1×109/L)置于48孔培养板内， 每孔1 mL， 并加PMA (50 μg/L)、离子霉素(1 μmol/L)和蛋白转运抑制剂莫能菌素(2 μmol/L)以阻止细胞因子向细胞外分泌， 在37℃孵箱中培养5 h。收集细胞分为对照管和实验管， 分别加入PercP小鼠抗人CD4 mAb IgG1 10 μL， 混匀， 室温放置20 min对细胞表面抗原进行染色。加入Cytofix/Cytoperm液200 μL， 4℃放置20 min， 通透和固定细胞并洗涤后， 进行胞内细胞因子染色， 实验管分别加入IFNγ mAb IgG1/PE抗人IL4mAb IgG1或FITC抗人FITC抗人IL17 mAb IgG1各10 uL， 对照管加入同型对照抗体， 4℃避光孵育30 min后。用Perm/Wash液1 mL洗涤2次， 最后以300 μL洗涤液重悬细胞， 24 h内采用FCM检测分析。以CD4直方图设门区分Th细胞(CD4+)， 最终以散点图IFNγ、 IL4和IL17染色阳性表示Th1细胞、 Th2细胞和Th17细胞， 用Cellsquest软件获取并分析数据。
1.2.5 ELISA检测PBMC培养上清中IFNγ、 IL4、 IL17的水平
取上述冻存PBMC培养上清， 采用ELISA法检测上清中IFNγ、IL4、IL17水平， 具体操作按试剂盒提供的说明书进行，每个样本和标准品均设3个复孔， 酶标测试仪450 nm处读数。
1.2.6 统计学处理
实验结果用x±s表示， 采用SPSS11.0软件分析， 各组间均数首先进行方差齐性检验， 如满足方差齐性， 采用两样本t检验， 如不满足， 则采用秩转换检验方法， Th1、 Th17细胞阳性率及Th1/Th2比值与病情活动指标的相关性采用Spearman相关性分析， 以P
2 结果
2.1 RA患者治疗前后病情变化
两组患者在治疗12周后， DAS28较治疗前降低或明显降低(MTX治疗组P
疗组患者的休息痛、 晨僵时间亦有改善(P
2.2 外周血Th细胞亚群的比较
细胞膜表面标志和胞内细胞因子染色FCM测定显示， 活动期RA患者在治疗前， 其外周血中CD4+IFNγ+Th1细
胞、 CD4+IL17+Th17细胞的数量以及Th1/Th2细胞比值均分别高于健康对照组［(27.0±2.9)% vs (23.2±1.7)%， P
2.3 PBMC培养上清中IFNγ、 IL4、 IL17的变化
ELISA法测得治疗前活动期RA患者PBMC培养上清中IFNγ、 IL4水平与健康对照相比差异均无统计学意义， IL17水平明显高于健康对照组， 差异有统计学意义［(40±3.8) ng/L vs (30±2.0) ng/L， P
治疗后IL17水平明显低于治疗前［(28±2.6) ng/L vs (40±3.8) ng/L， P
计学意义。联合治疗组治疗后的IL17水平下降幅度明显大于MTX对照组， 差异有统计学意义(P
2.4 Th细胞亚群阳性率与病情活动指标的相关性分析
对20例RA患者Th1、Th17细胞的量及Th1/Th2与CRP、 DAS28、 休息痛、 晨僵时间、HAQ平均分进行相关性分析， 结果显示RA患者Th17细胞的量与其CRP、 DAS28水平呈正相关(P
3 讨论
依那西普治疗RA的明显作用已被大量实验证明［3］， 但其治疗机制未明， 可能通过减少关节腔内炎细胞的浸润， 降低滑膜中细胞黏附因子的表达， 阻断炎性因子的相互作用而减轻炎症［4］。既往研究发现RA发生发展与Th1、Th2细胞数量和比例失衡密切相关， 鉴于Th1细胞在RA患
者炎性关节中的聚集， 曾认为RA是以Th1细胞占主导地位的疾病， 而近年发现， RA滑膜存在产生细胞因子IL17的T细胞和滑液中高水平表达的IL17， 以及CIA动物模型证实IL17促进炎性细胞因子IL6、 TNFα的合成并参与RA的炎症反应和骨质破坏， 提出以分泌IL17为主的
Th17细胞在RA发病中具有比Th1更重要的作用［5， 6］。本实验检测RA患者Th1、 Th2及Th17细胞亚群数量和比例， 试图分析依那西普对其的影响， 进一步阐述依那西普治疗机制， 为临床提供理论依据。
本研究通过胞内细胞因子染色FCM检测外周血中Th细胞数量和比例的变化， 发现治疗前活动期RA患者Th1、 Th17细胞数量及平均荧光强度均高于健康对照组， 而Th2细胞无明显差异， 导致Th1/Th2相对比例增高。进一步通过ELISA分析体外培养PBMC上清中相应细胞因子的水平， 证明IL17水平也高于健康对照组。研究结果提示， 在活动性RA患者外周血中， Th1尤其是Th17细胞亚群处于主导地位。与MTX组相比， 联合治疗组RA患者治疗12周后， 其休息痛、 晨僵时间、 CRP及DAS28水平均明显下降， 证实依那西普疗效确实［7］。IFNγ+Th1细胞阳性率下降， Th2细胞无明显改变， Th1/Th2比值相对下降， 提示依那西普可能通过影响Th1、Th2细胞亚群的平衡发挥作用， 推其可能是依那西普治疗RA的机制之一。
联合治疗后Th17细胞阳性率及单个CD4+T细胞中IL17平均荧光强度明显下降并接近健康对照， 且下降的幅度均高于MTX组。Th17细胞的量与RA患者CRP、 DAS28水平消长呈正相关， 提示Th17细胞可能参与RA发生发展。这些发现说明依那西普治疗RA的明显疗效与Th17在RA中发挥重要作用有关。推测可能通过阻断TNFα使前炎性因子释放减少或反向信号抑制细胞增殖或通过caspase3途经促进T细胞的凋亡［8］， 从而下调分泌IL17的Th17细胞合成， 但二者在体内相互作用的具体途径有待于进一步探索。
综上所述， 本实验表明活动期RA患者IL17+Th17细胞、 IFNγ+Th1细胞及Th1/Th2比值的增高， 可能参与RA发病机制; 依那西普治疗后可明显改善临床症状和下调Th1和TH17细胞亚群， 可能通过调节Th细胞亚群治疗RA。
参考文献
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第5篇：一周学习计划范文
周循环学习法如何实践？
1、第一步：周日晚上制定周学习计划。
根据自己总的学习进度，制定一周的目标。根据目标计算周一到周六的学习量，制定可行的、但又必须完成的学习计划。
2、第二步：周一至周六按计划学习。
根据计划学习量做好每日时间管理，每日结束前确认一下计划完成度，记录学习日志；
3、第三步：周日彻底完成学习计划。
把本周的学习完成情况总结一下。没有完成的部分在周日彻底解决。一周计划都完成了，就好好放松一下，然后做下周计划。
一个相对完善的时间表，既要涵盖每月的整体安排，又要包括每月以及每天、每
时的细节规划。
复习计划要留有余地，不要“满打满算”。比如，晚上7点到8点复习数学，8点开始复习英语，这样安排就太紧了，当中应该有一个缓冲:7点到8点是数学时间，8点15分以后留给英语。这样，数学复习完后喝口水，稍作休息，不要“连轴转”。
而且，留有余地也可以确保上一段计划的完成。还是以7点到8点复习数学为例，万一时间到了，却还差一道题没做完怎么办?留有15分钟的余地，孩子就可以具体问题具体解决，而不致产生浮躁的情绪。
第6篇：一周学习计划范文
有的同学在制定学习计划时，只是写上什么时间做什么，比如：6：00，起床；7：00，早读；7：30-11：30，上课；12：00-1：30，午睡；1：30-4：30，上课；7：00-9：00，晚自习；10:00,熄灯。这样得一份计划太空洞，太无个性，任何人都可以适用。我们在制定计划时，要从自己的实际情况出发，于自己的学习目标相配合。自己各科学习的基础不同，因而制定的各科学习目标也不尽相同，那可比较薄弱，就应该作为重点攻克的目标，那么，在做计划时就应该分配较多的学习时间。因此，在制定计划时，不能平均使用力量，要重点突出。
学习目标一般可分为长期目标、中期目标和近期目标，相应地，学习计划也应分为学期计划、月计划和周计划及每天学习计划。学期计划于学期目标相对应，订出一个学期学习的重点及各自的计划要点；月计划要与单元目标相对应，订出一周的学习重点及每天的计划要点。
2、学习计划要与教师的教学计划相配合
在制定每天具体的学习计划时，要与老师的教学计划紧密配合。具体说就是要与每天课程表上计划要上的课相配合，与每门课老师讲授进度相一致。例如，早晚自习时间学习计划的安排，不但要于当天课堂上老师讲课的内容相配合，而且还要与前一天和第二天老师的教学内容挂钩，不要抛开教师的教学进度计划，另搞一套。
3、学习计划要有一定的灵活性
有的同学将每天除吃饭、睡觉以外的全部时间都安排了学习的内容，排得满满的，连周六、周日都不安排一定休息的时间。这样的计划要执行起来就相当困难了。比如，星期天，同学一来玩，必然要陪同学一起玩，计划就打乱了。因此，计划要有一定的灵活性，不要把时间排的太满、太死，要留出必要的休息和娱乐的时间，还应留出一点激动时间应付可能出现的紧急情况。
第7篇：一周学习计划范文
在整个小学阶段,每个学期都要开设几门课程,每周、每日学习的内容都不同,各主要学科都要布置课外练习,如果没有学习计划,就会手忙脚乱,杂乱无章,影响学习效果。教师要让小学生明白制定学习计划的重要性,明确学习计划的内容,掌握制定学习计划的方法。
学习计划包括长期计划和短期计划两种。长期计划以一学期为宜,从总体上对各学科的学习作出全面的安排。短期计划以一周为宜,对本周内每天的学习内容、学习目的、保障措施和作息时间作出详细具体的安排。
学习计划要具体、明确、切实可行,同时又要留有充分的余地,以保证计划的灵活性和适应性。在执行中既要坚定不移,又要根据实际适当调整,目的在于使学习计划更加切合实际,更为有效地提高学习效果。
二、预习方法的辅导
预习也叫超前学习,是指在教师上课之前,对所要学习的内容提前进行学习和理解的过程。预习既是有效的学习方法,也是良好的学习习惯。预习的方法是对第二天要讲授的内容认真阅读,仔细思考,把新的知识和以往学过的知识联系起来,看看哪些懂了会了,哪些不懂不会,从而明确听课的重点、难点和疑点,克服课堂学习过程中的被动性和盲目性,提高主动性和自觉性,以利于提高学习效果。
三、听课方法的辅导
课堂是学校教育的中心环节,是学生获得科学文化知识的主要途径。如果小学生不会听课,听不懂,学不会,就会增加课后复习的困难和压力,造成不良循环。同时由于长期积累,可能导致厌学心理,既不利于提高学习效果,也不利于心理健康。为此,在课堂教学中,要引导小学生注意以下几点。
(1)认真听。要求小学生聚精会神地听讲,充分理解教师讲课的内容及其表达方式的含义,如节奏的快慢、声音的高低等。
(2)注意看。要求小学生全神贯注地注视教师板书的内容,对教师用彩色粉笔标记的部分、用电化教具突出演示的部分尤其要仔细观察,认真领会和重点记忆。
(3)多动脑。要引导小学生积极思考,要边听、边看、边思考,要与教师讲课的进程保持同步,要多问几个为什么,要把新旧知识联系起来思考,做到融会贯通,举一反三。
(4)主动练。在课堂上要鼓励小学生大胆发言,勤学多练,从而加深理解,提高听课效果。
(5)做笔记。对教师讲课中的要点、难点都要简明扼要地写在笔记上,以备课后复习。
(6)善归纳。对教师课堂讲授的内容,要抓住纲目,归纳要点,力求当堂理解。
四、复习方法的辅导
复习是指对学过的知识重新学习的过程。复习包括课后复习和系统复习两种。课后复习的主要目的在于理解和巩固当天学到的知识。系统复习的主要目的是对周、月、学期或学年学过的知识进行全面深入的复习,目的在于融会贯通,理解和掌握学科知识的体系。系统复习本质上是对前段学习的知识进行相对集中的再加工的过程。
课后复习的方法包括:
(1)回顾教师课堂讲授的内容及其过程,目的在于弄清哪些完全理解了,哪些没有理解,使进一步的复习具有鲜明的针对性和目的性;
(2)复习课本,目的在于深化;
(3)整理笔记,对课堂记得不完整或不准确的地方加以补充和修正,使之更加系统、完整,便于复习;
(4)对课本中不懂、不会的难点问题,查阅工具书或参考书,力求弄懂弄通,实在弄不明白的,问教师或与同学研究解决。
系统复习的方法也是多样的。比如循环复习法,是指学过一个单元之后即及时复习,然后再学下一单元,学完第二单元之后,再把这两个单元综合起来系统复习,以此类推,循环至终。分配复习法,指学过的内容及时复习之后在时间上每隔一定时期回过头来再复习,只是在时间间隔上逐渐拉长。比如上一单元讲过的内容及时复习,一周后再复习,两周后再回头简略地复习,一个月或一季度后再复习。事实表明,分配复习的效果优于集中复习。当然集中复习也有其优势,比如在期末总复习时,相对集中一段时间,对学习内容中的重点、难点问题,重点突破,进行系统化的复习,也是十分重要的。
五、写作业方法的辅导
写作业是学生经过独立思考,自觉、有目的地分析问题、解决问题,将学得的知识运用于实际的智力活动过程。通过写作业可以检查学生学习的结果,加深对知识的理解和记忆,充分发挥学生的智慧和潜力,同时也有助于培养学生的思维能力,养成良好的学习态度和学习习惯,因而教师要引导小学生掌握写作业的正确方法。
(1)先复习后写作业,即在认真复习、充分理解的基础上完成作业。
(2)仔细审题,即了解题意,明确习题的目的要求,弄清已知条件和未知条件及解决问题的关键所在,做到心中有数。
(3)认真表述,即思路清晰,表述确切,书写规范,答案准确,干净利落。
第8篇：一周学习计划范文
1.提高自己在语文、数学等方面的学习潜力。
2.加强运动，提高身体素质。
3.学会做简单的家常菜。
二、暑假学习计划具体方案：
1.针对自己的薄弱学科的学习态度、学习方法、学习目标进行反思，调整。
2.在家长的指导下，写好自己切实可行的暑假生活、学习计划。(安排好每一天复习进度的明细资料)
3.把练习卷上做正确的题目进行整理，确认自己已经掌握了哪些知识，具备了哪些运用潜力，树立自己对本学科的信心。
4.把练习卷上做错的题目进行整理、抄录，打开教科书，逐题进行分析，找到错误的关键之处，进行认真的订正后，再到教材上找到相关类型的题目，进行练习、强化。(尽可能用自己的力量解决问题)
5.遇到无法解决的困难，按教科书的学习顺序进行梳理罗列。了解自己学习问题的共性薄弱点，然后能够请老师一齐帮忙解决。
6.每周二次带着学科的不懂之处和老师一齐分析、解决问题。回家后运用老师解决问题的方法进行自我强化练习，填补自己的学习漏洞。(这一点务必按照教材由浅入深的学习顺序，切不可东一榔头西一棒的无序)
7.每次完成习题的订正，将错题订正的全过程，牢牢地记在脑海里(背出)，渐渐地构成解题方法的量的积累。
8.看名著，中高考时，会出现名著中的经典片段，看几本必看的小说是中学生必需要做的事情之一，即可增长见识，又可陶冶情绪。
9.一星期打两次球，游三次泳，增加运动，提高体能。(也能够听音乐等，做自己有兴趣的事)
9.一星期跟着父母学做两次家常菜，如炒茄子，蒸鱼之类，再做一些力所能及的家务。
三、暑假计划具体安排：
1.一星期学习五天，上午2.5小时，下午2.5小时。按一小时一节课安排好课表。
2.每一天的3点以后是运动或做家务的时间。(也能够安排一些适宜的娱乐活动)
四、家长一齐参与孩子计划：
1.设计好每一天的生活、学习评价表，对自己每一天的生活、学习作好评价。最新中学生暑假学习计划最新中学生暑假学习计划。
2.家长一周三次检查学生的暑期生活、学习计划执行的状况和进度，及时帮忙解决执行中的困难。
3.家长在帮忙学生执行计划时，也要尊重学生的要求，切不可急躁。要重视学生学习态度的调整和学习兴趣的提高。
4.双休日去看一些有益的展览会，或参加一些有益的社会活动。
第9篇：一周学习计划范文
20xx高一学生寒假学习计划范文1末考试成绩可以作为同学们制定学习计划重难点复习安排的学习依据。学习的好坏最关键也最终取决于你的学习效率!”能学会有效率地做事，对你一生都有极大的帮助和提高。面对于中国的应试教育，你在当学生时，你必须学会两样：1.有效率地做事。2学会如何学习。
1、早晨合理安排30分钟学习英语，听网校的英语听力，历史和地理背诵。
2、利用2节课的时间分别完成2份寒假作业，要记住，独立完成。
3、网校现已上传一部分新卷子，集中一块时间做一套。
4、下午和早晨一样，利用2节课时间做2份寒假作业，但不可一下子贪多。要均衡、科学安排。
5、完成当天寒假作业可以安排自由活动，(如果玩电脑游戏不可超过一小时)。
6、晚上是你自由活动的时间，但要看看新闻。积累实时材料，尤其是准备学文科的学生。
7、在寒假期间有可能的话，每天读一读文学作品，写一写自己读后的感想，字数可多可少，但不能不写。
8、写寒假作业的过程中，发现自己本学期知识点学习不透彻的情况下可以通过网校来查漏补缺。
提高学习效率并非一朝一夕之事，需要长期的探索和积累，同学们必须充分结合自己的特点。影响学习效率的因素，有学习之内的，但更多的因素在学习之外。高中生都有很好的自制力。首先要养成良好的学习习惯，合理利用时间，另外还要注意"专心、用心、恒心"等基本素质的培养，对于自身的优势、缺陷等更要有深刻的认识。
20xx高一学生寒假学习计划范文2高一上学期期末考试已经结束了，高一年级学生就要面临高二的文理分科。高一寒假学习计划对自身做个清晰、理性的分析，确定自身优势，为学文、学理寻找理由就显得颇为重要。大概方向确定后，就要明确自己所选择的方向中，哪些学科要参加高考，哪些只需通过会考，从现在起就可以相应地制定出针对不同科目的不同“用力”方法，将自己高中的时间、精力做到合理分配。 依常规来看，多数学生会选择学理——未来的升学、就业面相对更宽。学习理科，数、理、化就全部是考试科目，而数理化的难点都在高一。因此，高一寒假必须做的就是把上学期没有学会的内容学明白。有一些知识的掌握是为了以后更好应对相关知识点，如果高一就出现漏洞，未来所有相关知识也都会关联出现问题。
值得注意的是，高一的学习量很重，很多学生往往在第一学期还不太会调控。因此，高一学生第一学期的功课或多或少都会有落下的地方，这就需要利用寒假进行调整、提高、填补工作，甚至可以说，寒假能否利用好，对未来三年的状态会产生重要的影响。
高一寒假学习计划时间安排：
7：00 起床
7：20 洗涑完毕 之后跑步：绕楼2楼(7：20----8：00)
8：05 吃饭
8：20---8：50 背单词
8：55---9：25 背课文
9：35---10：35 数学
10：45---11：45 英语
11：45---12：00 课外书
12：00---13：00 午休
13：10---14：10 化学
14：20---15：10 物理
15：20—16：20 语文
16：20---吃晚饭前 free
吃完饭后—21：00 六科任选
21;00—22：00 电视，电脑，课外书
20xx高一学生寒假学习计划范文3周一至周四 ：
1、每天在小笔记本上记下10~15个单词(包括新旧单词)，利用自己的课余时间将其背熟，一定要掌握，而且经常拿出来复习。
2、晚饭前，先打开平台，在“知识强化”栏目中找到当天课堂所上过的内容，认真复习，该记住的要记住。
3、晚饭后，稍作休息，完成老师布置的作业。(注意：把回家作业当考试做)
4、某一学科的一单元内容结束，应及时进行总复习，然后完成 “在线测试”里的题目。完成的不够好的，复习一遍后重做，有做错的题目及时掌握。
5、预习第二天要上课的内容，认真做好记录，把不懂的问题带到课堂上认真听老师讲解。
6、听“同步听力”和“在线听力”10~15分钟，培养一种语感。
周五：
1、同做“周一至周四”中的1、2、3点。
2、将学习过程中留下的问题在“名师答疑”中提问。
3、有空时可以先放松一下自己，听点轻音乐、看些课外的书(通过平台或自己买的都可以)。
周六：
1、早上起来先做些运动，锻炼身体，然后朗读英语或语文的文章，把一些该记的内容记住。
2、继续完成老师布置的作业。
3、下午可打开“名师面授”，选择一些自己薄弱的知识点听几遍，适当地多做一些在线测试。
4、把一周所学的复习一遍，通过“在线测试”栏目来检查自己是否掌握。如果基础不好的科目，学习“知识强化”。
5、针对自己的学科状况针对性地选择“名师答疑”的“精华区”中的问题，把它当作自己的问题，先做一遍，再看老师的解答。
周日：
除做周六的内容外，早晨或下午到分校进行学习方法交流、测试、巩固，晚上预习下周一的课程内容。
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