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1材料与方法
1.1试验材料
采用马铃薯试管苗为试材,品种为荷兰十五。
1.2马铃薯配方优化
马铃薯配方在原有MS基础上进行优化组合,提高大量元素中K+含量,去除MS中有机成分,配制培养基用水采用当地地下水,地下水pH6.5~6.8,电导率80~92mc/mol。琼脂采用福建石狮市食品厂生产的食品级琼脂,凝固力400,碳源采用市售白糖。激素加入NAA和CCC,NAA控制生根,CCC控制生长势,形成壮苗。CCC的加入使马铃薯的苗子茎节缩短,长势好,苗壮,叶色深绿,茎秆增加1~2mm粗度;NAA主要是使根系发达,根多根长。CCC浓度以50mg/kg,NAA以0.01mg/L为宜。以MS为对照设定几种配方,接种后调查生根,茎叶生长情况。
1.3马铃薯生产成本构成研究
以马铃薯工厂化繁殖为中心,从原料采购到出苗过程的全部费用和用途,支出渠道,采用分类记录的方式详细记录在案,以便分析。
1.4马铃薯生产关键措施
在马铃薯生产中,关键措施包括配方优化和配制,无菌室接种,污染控制,繁殖节奏控制,质量控制等环节,要严格按照工厂化流水线管理,制定方案,控制实验误差在5%范围内。
1.5马铃薯细菌污染防治
在马铃薯繁殖过程中,正值高温季节,病害较多,污染较重。因此,繁育中心要在严格管理下,以防为主,重点抓好几点工作:一是搞好环境卫生工作,无菌室消毒,培养基灭菌时间延长,培养室定期消毒;二是接种室间隔使用,工作台净化定期检修;三是接种人员定期培训,操作建立标准化规程。
2结果与分析
2.1马铃薯培养基的优化和简化
培养基以MS培养基较好,附加NAA0.01mg/L和CCC50mg/kg壮苗生根,可以省略MS中有机成分,同时无机盐离子适当变化,提高钾盐的浓度水平。采用食用糖代替蔗糖来繁殖,糖浓度以20g/L为宜,琼脂浓度夏季7.0g/L,冬季6.5g/L.采用自来水代替蒸馏水时,可以普遍采用6.5g/L琼脂浓度。同时在调解pH值时在没有加入母液时调解pH到6.5左右,待药品全部加入后,再调解pH到5.8左右即可调好。
2.2马铃薯工艺流程优化
马铃薯繁殖工艺按照如下工艺流程:脱毒试管苗基数准备→培养基制作→灭菌→无菌室接种→培养室培养→瓶苗分类管理→达到标准者进入繁殖循环→达到出苗标准→出苗→炼苗→微型薯繁育→微型薯收获→出售→余苗试管保存
2.3马铃薯生产繁殖管理
2.3.1切段繁殖茎段大小控制切段繁殖时的茎节以1节即可,即一叶一节。上端要平其叶片,下端1~2cm长度,斜插或者平放于培养基表面即可,3~4d生根,5~7d根系发育完全,8~10d茎叶生长达到高峰,15d即可剪切下一代,16~18d苗龄的小苗可以出瓶交货。在繁殖中光照要求较高,2000lx以上方可生长良好,否则茎节弯曲,向光性生长,同时叶片较小,叶色较淡。
2.3.2温度、光照控制培养温度以低温为好,高温时问题较多,如枯梢、断头、梢细、徒长等,温度以20℃较好光照,在生根后即可控制低温生长,有条件的,可以在自然温度下生长,这样的苗子较壮实。马铃薯试管苗在扩繁过程中会出现生长势衰弱的现象,这与试管苗培养过程中的光照、温度有很大的关系,本身马铃薯就生长在冷凉的地区,如果昼夜温差一样,不利于马铃薯的生长及营养成分碳水化合物的积累。大多数马铃薯白天需要24~25℃,夜间则以15~20℃为好。另外,光照对马铃薯生长也有很大影响,弱光下试管苗生长不良造成细弱苗,苗上高节位生长出细毛根,无端消耗营养。马铃薯培养光照强度必须在200lx以上,最后在前期生长阶段提高到3000~4000lx,光照时间在14~16h/d均可。
2.3.3繁殖控制繁殖尤其是规模化繁殖的控制特别重要,往往一批还没有剪切完毕,另一批就长出来了。通常采用集中繁殖法,限制繁殖的因素在无菌室剪切苗,而不在培养基制作,培养基制好后,接下来就是采用接种工人的熟练程度和工人的个数所决定的,如果每个人的繁殖效率为200瓶/d的话,6个工人每天就是1200瓶,去除正常污染率范围的60瓶,净胜1140瓶,这样5d基本就可剪切5700瓶,就可达到10万株的繁苗量,因此必须在无菌室接种上下一番功夫。
2.3.4种苗质量控制种苗的质量关系到其交易能否最后完成,通常在合同中规定好种苗的标准,以防后来产生分歧,但是最终要靠技术上进行适当控制,以达到国家或者地方标准,没有标准的,应该严格要求达到行业标准或者达到企业标准。
作者:李素梅 单位:阜阳市农业科学院