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犬致病性真菌及检测技术分析

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犬致病性真菌及检测技术分析

摘要:随着饲养宠物的数量不断增多,真菌性皮肤病成为宠物主要的皮肤病。在犬真菌性皮肤病中以丝状菌病感染居多。约有70%的犬真菌性皮肤病是由犬小孢子菌引发的,约20%是由石膏样小孢子菌引发,约10%是由须发毛癣菌引发。真菌性皮肤病属于常见的人畜共患病,犬、猫的致病性真菌和螨虫均可感染人,因此真菌性皮肤病逐渐受到人们重视。

关键词:犬;致病性真菌;致病机理;检测技术

1临床常见的致病性真菌

1.1犬小孢子菌

犬小孢子菌属于亲动物性真菌,可分泌出角蛋白酶,较易侵害皮肤的角质层。该菌感染具体表现为皮肤产生红色的丘疹,随着病程的发展皮肤表面出现一层灰白色的薄屑并逐渐向四周扩展,呈圆形或椭圆形癣癍。该菌感染的典型病理变化为皮肤轻度的局限性角化不全、棘皮层发生轻微的增厚和出现中度水肿。

1.2石膏样小孢子菌

石膏样小孢子菌属于亲土性和亲动物性皮肤真菌,主要生存在阴暗处的土壤中,易引起人的体癣、脓癣和白癣,也可引起动物的黄癣痂样损伤。该菌引发的病例表现与小孢子菌类似,除形成圆形的“钱癣”外,也可引起较大面积的皮肤损伤。一般情况下发病较急,皮肤损伤较重,表现为发病部位被毛脱落,形成皮屑和结痂,如发生细菌继发感染,局部多形成化脓性感染。转为慢性时皮肤病变可持续数月甚至数年之久。

1.3须毛癣菌

须毛癣菌属于亲动物性皮肤真菌,引起犬真菌性皮肤病时炎性反应较为明显。该菌的菌落呈白色或浅黄色,表面呈现粉末状。菌丝排列整齐,呈现出不同颜色,中央略微隆起。皮肤感染该菌时,发病部位常位于口、鼻部,皮肤损伤的位置常对称,病理表现为被毛脱落,脱毛区域多为圆形、椭圆形或不规则形状。

1.4马拉色菌

目前该菌主要被划分为厚皮马拉色菌、糠秕马拉色菌、限制性马色拉菌、球形马拉色菌、钝形马拉色菌、斯洛菲马拉色菌和合轴马拉色菌七个种。多因犬生长过快、免疫力低下及机体出现过敏反应而发生皮肤病。由厚皮马拉色菌引发皮肤真菌感染,常造成瘙痒性皮肤病。厚皮马拉色菌可破坏皮脂腺,使皮脂过量的溢出,由于该菌属于嗜脂性酵母菌,所以富含脂类的物质可促进其生长繁殖。该病多发于爪部皮褶、指(趾)间、唇部皮褶、耳、颈、腹部皮褶、腋下等部位。发病处表现出程度不同的瘙痒,并发生脱毛、皮肤红斑以及脂溢性皮炎等临床症状。随着病程进展,发病部位的皮肤发生色素沉积和过度的角质化、苔藓化病变,并在皮肤多呈现油脂样的分泌物,也常引发真菌性外耳炎,有时也伴发有黑棕色分泌物的甲沟炎。

2真菌相关致病机理

致病性真菌与动物体表上常在的菌群相互竞争,战胜常在菌群后,附着于皮肤上定植,之后角质层的细胞被穿透,从而发生真菌性皮肤病。真菌菌丝是发病主要的因素,大量菌丝侵入动物毛囊后,吸取动物的营养并快速进行繁殖,致使毛囊、毛根及毛球上部的角质受到损害,造成炎性反应,并可在毛周或毛内形成分节菌丝或孢子。另外,致病性真菌细胞表面还可分泌多种细胞因子,通过其抑制体表的免疫功能,从而使机体发生感染。真菌的致病过程一般情况下较为复杂,是多种因素共同作用的结果。首先,致病真菌的孢子对环境有很强的抵抗力,可长期存活在环境中,如包藏在皮屑中真菌孢子可以存活2年以上。其次,动物体表的角质细胞或黏膜细胞与真菌细胞壁的受体之间存在着相互作用,使得致病性真菌可在皮肤或黏膜表面上附着。另外,部分致病性真菌可产生某些酶类物质,如角蛋白酶,用于破坏体表的角化细胞。在机体出现异常时,某些能引起甲板感染的真菌,利用自身分泌的酶类物质侵害甲板,引发感染。马拉色菌分泌脂酶,可消化皮脂中的脂类物质,为自身的繁殖和生长提供营养物质,引起动物发生感染。即使是动物体表的防御功能发生微小改变,但对于致病性真菌而言,都可作为真菌侵害皮肤和黏膜的良好机会。在多种致病因素综合的作用下,可致使真菌感染的发生率大为提高。另外研究发现真菌引起的感染具有一定的时间依赖性,即动物的易感性是致病性真菌感染机体一定的时间后才发挥作用。

3真菌主要检测技术

由于多种皮肤病的临床表现及病理变化与致病性真菌引起的皮肤病相似,如螨虫感染、葡萄球菌性毛囊炎以及其他病原微生物感染皮肤等引发的脱毛、红斑、丘疹等,因此必须应用特异性诊断技术才能进行确诊。

3.1伍德氏灯检测

用伍德氏灯在暗室中照射患部、皮屑和被毛,绝大部分真菌感染的区域的被毛和皮屑可发出绿苹果色的荧光,而须毛癣菌和石膏样小孢子菌引起的感染区域被毛不发出荧光或者荧光的颜色不同。该检测手段操作简便快捷,而且属于无损伤的检测技术,是目前检测犬真菌性皮肤病的主要检测方法。

3.2直接检查毛发

从病变区域拔取被毛,最好选取断裂、被擦损的被毛或在伍德氏灯下发出荧光的被毛,放置在载玻片上,滴加少许的10%~20%氢氧化钾,加盖盖玻片,作用0.5h或加热10~15s,先使用低倍镜找出胀大、淡色、擦损的毛发,之后使用高倍镜查找菌丝和真菌孢子。若发现呈现圆形或者卵圆形的绿色并有一定透明度串珠状的孢子、菌丝,即可诊断为真菌性皮肤病。

3.3病理学检测

病理学检测方法是一种较为准确的检测手段。对病料先进行过碘酸雪夫氏染色(PAS染色),菌丝染色及孢子表面会呈现红色,使被毛角质层内菌丝和发鞘的孢子易被观察到,便于实施诊断。在犬的被毛、毛囊、表皮角质层等部位易出现PAS染色阳性反应。对体表出现红斑、丘疹的犬进行病理学检查,通过PAS染色发现其感染了犬小孢子菌,通过治疗后动物康复。

3.4真菌培养

培养致病性真菌的培养基为DTM培养基或沙氏培养基。将被毛等病料组织接种在专用培养基上,在25℃条件下培养,致病性真菌在生长过程中可使DTM培养基变为红色,或根据沙氏培养基上菌落颜色和具体形态及镜检等进行鉴定。

作者:张春艳 单位:黑龙江省绥化市兰西县农业农村局