金威消石汤治疗结石小鼠泌尿系统

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泌尿系统结石是临床的常见病及多发病，目前在临床上主要依靠手术及药物进行治疗，部分患者或选择保守治疗及体外碎石进行治疗。随着医学研究的迅猛发展，越来越多的先进医疗设备及手术方法被应用于临床。需要注意的是，先进医疗设备及手术治疗方法在应用于临床取得良好治疗效果的同时，存在着一定的局限性，如手术适应证、治疗后残余结石等，尤其是在降低泌尿系统结石复发方面。在祖国医学传统理论中，结石属于“石淋”范畴，是由于体内湿热酿火，灼烧津液所致，需化湿降火，滋阴排石。利用传统中药治疗结石，具有安全性能好、针对性强、患者痛苦少、治疗效果好、副作用少等优点，受到临床医护工作者及患者的欢迎。在泌尿系统疾病的医学研究中，通过泌尿系统结石动物模型进行试验是普遍而有效的做法。通过动物试验，不仅能够更加深入地了解中药治疗泌尿系统结石的应用价值，还能明确其中药理，印证关于泌尿系统结石病因及病程的理论。本次研究选择健康昆明种小鼠90只，均为6周龄，雌雄各半，通过三氯氰胺建立泌尿系统结石造模成功后，选用金威排石汤(JWT)进行治疗，取得了不错的治疗效果，现报告如下。

1实验动物与研究方法

1.1实验动物

本次研究选择健康昆明种小鼠90只，雌雄各半，体重18～25g，均为6周龄，将其随机分为4组，分别为空白对照组、结石模型对照组、结石模型+PSHC(枸橼酸氢钾钠颗粒)组、结石模型+JWT组，其中后两组再分成低剂量及高剂量2个亚组。空白对照组10只，给予蒸馏水灌胃，0.2mL/10g/次，1次/d，持续30d;结石模型对照组16只，给予三聚氰胺溶液灌胃，0.2mL/10g/次，1次/d，持续30d;结石模型+PSHC组中高剂量及低剂量亚组均为16只，在结石模型组基础上加入PSHC灌胃，PSHC含量分别为1.25g/mL及0.5g/mL，0.2mL/10g/次，1次/d，持续30d;结石模型+JWT组在结石模型组基础上加入金威消石汤粉剂及汤剂进行小白鼠灌胃，高剂量亚组及低剂量亚组均为16只，JWT浓度分别为0.625g/10g与2.50g/mL，0.3125g/10g与1.23g/mL，灌胃量均为0.2mL/10g/次，1次/d，持续30d。其中，先期进行预试验，使用三聚氰胺溶液含量分别为每kg溶液含三聚氰胺500mg、1000mg、1500mg及2000mg，同时设立空白对照组，每组均为5只小鼠，连续灌胃30d后，将小鼠常规处死，并将其双侧肾脏制成病理切片观察以确定三聚氰胺建立泌尿系统结石小鼠模型应用剂量。本次研究中应用三聚氰胺剂量为2000mg/kg，泌尿系统结石为草酸钙晶体结石。

1.2研究方法

本次试验研究方法主要包括采集样本与观察指标。其中，本次试验采集样本及观察指标包括以下几点:

(1)试验期间观察各组小鼠每日活动状态，以及毛色变化情况，小鼠在试验期间每周均需称重1次;

(2)观察泌尿系统组织成石情况，灌胃30d对所有小鼠进行称重后处死，并立即进行解剖，采集膀胱内尿液，通过pH试纸检测pH值，并应用尿液常规镜检查找结晶体，同时对解剖后的小鼠泌尿系统组织内成石情况通过肉眼进行观察，确定结晶体颗粒形成情况;

(3)肾功能检测，试验开始15d及30d后，分别采集试验小白鼠尾部静脉血标本各1mL，送实验室，检测血液中血清肌酐、尿素氮及尿酸水平;

(4)观察试验小鼠体内肾脏形态学变化，并对其肾脏进行称重，沿肾门区输尿管将肾脏剪断后，对半切开，通过福尔马林缓冲固定、脱水机石蜡包埋后，常规进行切片及HE染色，在显微镜下对肾脏内病理方面变化、结晶体形成情况进行观察及记录，按照肾脏损害程度及炎症反应表现将其分成三级，并通过免疫组化法检测小白鼠肾脏组织内TNF－Ar表达相关情况。

1.3试验药物

本次试验应用金威消石汤配方包括:

(1)汤剂，金钱草(80g)、黄芪(60g)、王不留行(30g)、牛膝(30g)、益母草(30g)及鸡内金(20g)，按照常规方法将其制成浓缩液(生药质量浓度设定为2.50g/mL及1.23g/mL);

(2)粉剂，包括元明粉(10g)、琥珀(5g)及黑木耳粉(10g)，按照常规方法将药材研磨成粉末，制成粉剂。本次试验选用PSHC，即枸橼酸氢钾钠颗粒，将其加入蒸馏水中，制成高、低剂量溶液，含量分别为1.25g/mL及0.5g/mL。

1.4统计学处理

采用SPSS18.0软件对本次试验数据进行统计学处理，分别采用χ2检验及t检验，当P＜0.05，数据差异比较明显，具有统计学意义。

2结果

2.1结石小鼠体重及毛色变化

30d内，4组试验小鼠体重变化均不明显。其中，空白对照组小鼠毛色无变化，其余小鼠毛色逐渐黯淡无光，但组间比较差异不显著，P均＞0.05。

2.2结石小鼠泌尿系统成石情况比较

4组小鼠体内泌尿系统成石情况按照肾脏损伤程度及炎症反应分成3个等级进行比较，差异比较明显，P＜0.05。

2.3结石小鼠中血清肌酐、尿素氮及尿酸水平比较

4组小鼠在试验开始后15d及30d，分别抽取尾静脉血进行静脉检测血清肌酐、尿素氮及尿酸。其中，结石模型药物治疗组共两组，血清中尿素水平治疗后同结石模型组小鼠相比较，下降均比较明显，以结石模型+JWT组中高剂量亚组下降幅度最明显，P＜0.05，

2.4小鼠肾脏重量及TNF－Ar表达情况

由于金威消石汤及PSHC均对小鼠具有一定的利尿作用，故试验结束后将小鼠肾脏称重，结石模型组小鼠肾脏重量相对较高，而结石模型+JWT组高剂量亚组小鼠TNF－Ar表达情况相对最好。

3讨论

泌尿系统结石，在临床又称为尿石症，或石淋，是指在肾或膀胱等泌尿系统组织中形成的晶体物质，在某种或某几种原因作用下逐渐下移，引起机体出现的一系列临床表现，在泌尿系统疾病发病率中位居第三位，是急诊泌尿科中的常见病，多发于30～50岁年龄人群。临床常见的几种治疗方法中，手术或体外冲击波碎石属于西医治疗措施，具有创伤大、后遗症多等缺点，但保守治疗措施临床疗效不佳。而应用中药治疗泌尿系统结石则可得到较好的临床效果，广泛应用于结石直径不足1cm的尿石症治疗中，临床上常联合如体外碎石等措施治疗泌尿系统结石。据临床研究显示，中药治疗尿石症方剂较多，如八珍汤等，治疗尿石症，有效率最高可达73%～98%。而且结石中主要成分多为草酸钙或磷酸钙，在所有结石中约占82%左右，其中，肾结石中草酸钙发病率多于磷酸钙。本研究所用金威消石汤为我院校合作自制排石中药验方，具有化坚消石、活血补肾止痛的作用，在所有受试小鼠分组中，排石效果最好，对草酸钙晶体关于其生长及聚集方面的抑制作用最强。此外，还可通过在中药方剂中加入猪苓等药材抑制肾脏中的肾小管向外扩张，降低肾小管上皮细胞出现的变形、肿胀等异常，而且能够明显降低尿液和肾脏组织内钙离子含量，同样对尿草酸钙结石的排除也具有一定的作用及经验，已经证实与猪苓麦角甾醇关系比较密切。由此可推测，金威消石汤能够减缓草酸钙晶体聚集速度，促进小鼠排尿，增加排尿量，本次研究中以用药后3h内最为明显。综上所述，金威消石汤能够有效治疗小鼠泌尿系统结石，促进小鼠提高尿量，若联合其他药物可得到更好疗效。

作者：赵燕芬 邵少慰 肖剑 单位：肇庆医学高等专科学校 肇庆市第二人民医院